β细胞凋亡的主要分子机制

β细胞凋亡是1型和2型糖尿病发病机制中的关键环节,但1型和2型糖尿病β细胞凋亡的分子机制有所不同.Fas配体、穿孔素和颗粒酶、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、γ-干扰素和NO在1型糖尿病的β细胞凋亡中起着重要的作用.炎症应激、氧化应激和内质网应激在2型糖尿病的β细胞凋亡中发挥着关键作用.     

胰岛β细胞凋亡的分子机制

胰岛β细胞凋亡在糖尿病的发病中扮演重要角色,1、2型糖尿病β细胞凋亡的分子机制有所不同。在1型糖尿病中,胰岛β细胞主要通过死亡受体介导的信号转导途径及颗粒酶B途径发生凋亡,而在2型糖尿病中,线粒体途径是胰岛β细胞凋亡的主要信号转导途径。多种细胞因子通过激活核转录因子调节相应基因表达,进而调控胰岛β细胞的凋亡。     

白藜芦醇诱导胃癌细胞凋亡的分子机制

白藜芦醇是从多种葡萄属植物中提取的多酚类化合物[1] 。近年来发现白藜芦醇具有抗癌作用[2 ,3 ] 。通过透射电镜和ＴＵＮＥＬ法 ,在体外定性、定量地研究白藜芦醇与胃癌细胞凋亡的关系 ;通过免疫组化法和ＲＴ ＰＣＲ检测凋亡相关基因ｂｃｌ 2和ｂａｘ的表达 ,研究白藜芦醇诱导胃癌细胞凋亡发生的可能机制。　　一、材料与方法1.细胞系 :胃癌细胞株ＳＧＣ 790 1,由山东省立医院中心实验室传代培养。2 .白藜芦醇对胃癌细胞的生长抑制率测定 :将细胞以10 5/ｍｌ浓度接种于 96孔板 ,每孔 10 0 μｌ,2 4ｈ后分别加入不同浓度的白藜芦醇 ,分别培…     

细胞凋亡的形态特征与分子机制研究进展

细胞凋亡是细胞的主动死亡过程,此过程涉及一系列基因的激活表达和调控.凋亡是为了适应生存环境的主动死亡过程,并不是病理条件下的损伤.核酸内切酶反应是凋亡分子(APO)的重要步骤.目前,人们对细胞凋亡的发生机制及其与疾病的关系有了比较全面清晰的认识,这对重新认识疾病的发生机制具有划时代的意义.     

NDGA诱导胃癌细胞凋亡的分子机制的研究

目的 探讨NDGA诱导胃癌细胞凋亡的分子机制。方法 分光光度法检测caspase-3的细胞活性,同时用Western blot分析caspase-3及其底物PARP。用Western blot分析P53、caspase-3、PARP、P21^wafl、P27^kipl、Bcl-2和Bax的浓度,免疫法检测细胞色素C。结果 NDGA通过活化caspase-3诱导细胞凋亡,caspase-3的活化是由于细胞色素C从线粒体释放入细胞质而引起的。NDGA处理也可导致P27^kipl、Bax蛋白水平升高,同时伴有细胞积聚于G1期。z-DEVD-fmk,一种caspase-3抑制剂,可逆转caspase-3的活化及其引起的凋亡。结论 NDGA诱导的细胞凋亡是通过上调P27^kipl、Bak的水平,释放细胞色素C,最终活化caspase-3而引起的。     

热休克蛋白27抗细胞凋亡的分子机制

热休克蛋白(heat shock proteins，HSPs)是存在于细胞内的一种主要分子伴侣，在生理和应激条件下均能表达。它们是在结构上拥有高度保守晶体蛋白序列的一组多肽，按分子量可以分为HSP100、HSP90、HsP70、HSP60和分子量为20000～30000的小分子量HSPs(small HSPs，sHSPs)、泛肽等几个亚家族。HSP25／27(啮齿动物25000，     

吲哚美辛诱导结肠癌细胞凋亡的分子机制

许多凋亡相关基因在细胞凋亡的调节中起重要作用[1] ,如ｂｃｌ 2基因家族是重要的凋亡调控基因。结肠癌的发生发展常伴有凋亡机制障碍 ,许多化疗药物正是通过诱导细胞凋亡起作用的。研究表明 :包括吲哚美辛 (ｉｎｄｏｍｅｔｈａｃｉｎ ,ＩＮ)在内的非甾体抗炎药 (ｎｏｎ ｓｔｅｒｏｉｄａｌａｎｔｉ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｄｒｕｇｓ,ＮＳＡＩＤ)能显著改变肿瘤细胞周期 ,抑制细胞增殖 ,诱导肿瘤细胞凋亡[2 ,3] ,但该类药物诱导细胞凋亡的机制尚未阐明。本研究 ,利用反转录ＰＣＲ检测吲哚美辛诱导ＨＣＴ116细胞凋亡过程中ｂｃｌ 2ｂａｘ…     

伊立替康诱导结肠癌细胞凋亡的分子机制

目的探讨伊立替康诱导结肠癌细胞凋亡的分子机制。方法利用MTT染色法、流式细胞术检测不同浓度伊立替康对人类结肠癌细胞系SW620的增殖抑制和凋亡作用,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)测定伊立替康对SW620细胞中p38活性的影响,利用p38抑制剂以及siRNA干扰技术,分析p38 MAPK信号通路在伊立替康诱导SW620细胞凋亡过程中的变化。结果伊立替康抑制SW620细胞的生长和增殖,呈剂量和时间依赖性,进一步的实验显示伊立替康激活了细胞中的P38 MAPK信号通路,不同浓度产生的效应不同。高浓度的伊立替康快速剧烈地激活p38,进而引起明显的细胞凋亡,但持续时间相对较短。通过抑制剂或siRNA抑制p38活性后可见伊立替康诱导的细胞凋亡显著减少。相反,较低浓度的伊立替康激活p38缓慢,但持久,只有一小部分的细胞发生凋亡,抑制p38活性后,导致细胞对伊立替康的敏感度增加,细胞凋亡增加。结论 p38 MAPK信号通路参与了伊立替康诱导结肠癌细胞凋亡的过程,同时表现出不同的生物学作用。     

阿司匹林诱导人宫颈癌Caski细胞凋亡及其分子机制

目的探讨阿司匹林对人宫颈癌Caski细胞体外增殖抑制作用及机制,为其用于宫颈癌的临床治疗提供依据。方法体外培养Caski细胞,分别以1．0、2．5、5．0、7．5、10．0mmol／L阿司匹林干预。采用噻唑蓝（MTT）法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪测定细胞周期时相改变及细胞凋亡率;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNA Ladder现象;Western blot法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3等凋亡相关基因表达。结果阿司匹林干预后Caski细胞增殖明显受抑,且呈时间和剂量依赖性;Caski细胞G0／G1期和G2／M期比例明显下降,S期比例升高;细胞凋亡率明显升高;Bcl-2表达量减少,Bax表达增加,Caspase-3活化。结论阿司匹林在体外可抑制人宫颈癌Caski细胞增殖,其机制可能为抑制肿瘤细胞DNA合成,改变其细胞周期时相分布,诱导其凋亡。     

人参皂苷单体Rh2诱导小鼠前胃癌细胞系凋亡的分子机制

目的:观察人参皂苷Rh2(G-Rh2)诱导小鼠前胃癌MFC细胞的凋亡,探讨Ca2 在G-Rh2诱导细胞凋亡中的作用,揭示G-Rh2诱导MFC细胞凋亡的分子机制.方法:分别对无血清培养24h后的MFC正常细胞组、G-Rh2(3、10、30mg/L)给药组、Ca2 螯合剂BAPTA(20μmol) G-Rh2(10mg/L)给药组及BAPTA(20μmol)组,荧光显微镜(Hoechst33258)观察细胞形态学改变;流式细胞仪Annexin V-FITC双染法检测细胞早期凋亡率;琼脂糖凝胶电泳法观察细胞晚期凋亡;共聚焦显微镜分析G-Rh2给药后细胞内钙和细胞线粒体膜电位,Western blot分析caspase3的表达.结果:10mg/L的G-Rh2能显著抑制无血清培养的MFC细胞增殖和诱导MFC细胞凋亡,可剂量和时间依赖性的提高细胞内钙浓度,降低细胞线粒体膜电位,增加caspase3的表达,但这些作用均可被BAPTA(20μmol)抑制.结论:G-Rh2可激活细胞内Ca2 信号转导途径,从而最终通过线粒体凋亡途径诱导胃癌细胞凋亡.     

神经酰胺诱导内皮细胞凋亡机制的研究

目的 探讨p53、Fas在外源性神经酰胺（C2-ceramide）诱导内皮细胞凋亡中的作用。方法 体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,以不同浓度的C2-ceramide处理后,用TUNEL染色法检测细胞的凋亡。用p53 的抑制剂PFT-α和Fas的抑制剂Fas相关磷酸酶-1（FAP-1）预处理细胞后,加入C2-ceramide,与对照组比较观察Fas的表达和细胞凋亡指数的变化。结果 C2-ceramide可剂量依赖性地诱导内皮细胞凋亡。FAP-1可抑制C2-ceramide诱导的内皮细胞凋亡;PFT-α不能抑制C2-ceramide诱导的内皮细胞凋亡。结论 神经酰胺能够诱导内皮细胞凋亡,其作用机制可能是通过Fas途径而非通过p53途径。     

中药抑制结肠癌细胞增殖、促进凋亡的分子机制

结肠癌(colon cancer)已为常见的恶性肿瘤之一,有转移者5年生存率仅有8%。我国传统的中医在治疗结肠癌中,彰显了增效减毒的优势,具有抗肿瘤作用。近年来,中药对结肠癌细胞系体外培养生长的抑制作用、增强机体免疫功能以及对细胞周期、细胞凋亡的影响等进行了有益的探索。本文就中药抑制结肠癌细胞增殖、促进凋亡的分子机制与研究进展作一综述。     

Molecular mechanism of juxtaglomerular cell hyperplasia: a unifying hypothesis

Renin is the first enzymatic step of the renin angiotensin cascade and plays an important role in cardiovascular homeostasis. Renin is mainly expressed in and released from specialized juxtaglomerular (JG) cells in kidney. JG cells develop hyperplasia in response to various chronic stimuli while maintaining the ability to express high levels of renin. However, the molecular and cellular mechanisms of JG cell hyperplasia are unknown. Based on the authors’ previous observation that a nuclear hormone receptor, liver X receptor α, regulates renin expression as well as growth and differentiation genes such as c-myc, the authors propose the hypothesis that liver X receptor α can contribute to JG cell hyperplasia under conditions of chronic and intense induction of these genes. This hypothesis may provide a potential explanation for the observation that the JG cells can maintain a highly specialized renin-producing phenotype while undergoing hyperplasia.     

阿尔茨海默病的分子机制与神经干细胞治疗研究现状

阿尔茨海默病(AD)是以进行性记忆减退、认知障碍和人格改变为特征的脑退行性疾病,是导致老年前期和老年期痴呆的主要原因。AD主要病理学特征是在大脑皮层和海马区域形成大量的老年斑     

Molecular mechanism of acetylcholine receptor-controlled ion translocation across cell membranes

Two molecular processes, the binding of acetylcholine to the membrane-bound acetylcholine receptor protein and the receptor-controlled flux rates of specific inorganic ions, are essential in determining the electrical membrane potential of nerve and muscle cells. The measurements reported establish the relationship between the two processes: the acetylcholine receptor-controlled transmembrane ion flux of ⁸⁶Rb⁺ and the concentration of carbamoylcholine, a stable analog of acetylcholine. A 200-fold concentration range of carbamoylcholine was used. The flux was measured in the millisecond-to-minute time region by using a quench flow technique with membrane vesicles prepared from the electric organ of Electrophorus electricus in eel Ringer's solution at pH 7.0 and 1°C. The technique makes possible the study of the transmembrane transport of specific ions, with variable known internal and external ion concentrations, in a system in which a determinable number of receptors is exposed to a known concentration of ligand. The response curve of ion flux to ligand was sigmoidal with an average maximum rate of 84 sec^-1. Carbamoylcholine induced inactivation of the receptor with a maximum rate of 2.7 sec^-1 and a different ligand dependence so that it was fast relative to ion flux at low ligand concentration but slow relative to ion flux at high ligand concentration. The simplest model that fits the data consists of receptor in the active and inactive states in ligand-controlled equilibria. Receptor inactivation occurs with one or two ligand molecules bound. For channel opening, two ligand molecules bound to the active state are required, and cooperativity results from the channel opening process itself. With carbamoylcholine, apparently, the equilibrium position for the channel opening step is only one-fourth open. The integrated rate equation, based on the model, predicts the time dependence of receptor-controlled ion flux over the concentration range of carbamoylcholine investigated. The values of the constants in the rate equation form the basis for predicting receptor-controlled changes in the transmembrane potential of cells and the conditions leading to transmission of signals between cells.     

LncRNA NEAT1靶向miR-520b调控口腔鳞癌细胞增殖、凋亡及自噬的分子机制

目的研究长链非编码RNA(LncRNA)核富集的转录物(NEAT)1对人口腔鳞癌细胞Tca8113增殖、凋亡和自噬的影响,并探讨其机制。方法运用qRT-PCR检测人口腔鳞癌细胞Tca8113、人正常口腔上皮细胞HOEC中NEAT1、短链非编码RNA(miR)-520b的表达;将si-NC组(转染si-NC)、si-NEAT1组(转染si-NEAT1)、miR-520b组(转染miR-520b mimics)、miR-NC组(转染miR-NC)、si-NEAT1+anti-miR-NC组(si-NEAT1和anti-miR-NC共转染)、si-NEAT1+anti-miR-520b组(si-NEAT1和anti-miR-520b共转染),用脂质体法转染至Tca8113细胞;MTT法检测各组细胞的增殖;流式细胞术检测各组细胞的凋亡;Western印迹检测各组细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ的蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光活性。结果与HOEC相比,Tca8113中NEAT1表达显著升高,miR-520b表达显著降低(P0.05);抑制NEAT1、过表达miR-520b均可抑制Tca8113细胞增殖,促进凋亡和自噬。抑制miR-520b可逆转抑制NEAT1对Tca8113细胞的增殖抑制和凋亡、自噬促进作用。结论抑制NEAT1可抑制口腔鳞癌细胞增殖、促进凋亡和自噬,其机制可能与靶向miR-520b有关,将可为口腔鳞癌的靶向治疗提供依据。     

放射治疗支架内再狭窄诱导平滑肌细胞凋亡的分子机制

目的 研究支架内再狭窄部位平滑肌细胞（rVSMC）凋亡水平改变的机制,并探讨放疗诱导细胞凋亡的调控途径.方法 50例支架术后再狭窄患者,取其斑块标本,检测p53、p21和Cyclin D1的表达水平,并与正常冠脉血管平滑肌细胞（nVSMC）进行比较.结果 rVSMC中,p53和p21的表达略低于正常细胞,分别为80%和75%左右（P＜0.05）;Cyclin D1则达到了正常细胞的2倍以上（P＜0.01）.照射后,rVSMC和nVSMC的细胞凋亡均有上升（P＜0.01）,且rVSMC的上升幅度大于nVSMC（P＜0.05）;而两组细胞中p53、p21和Cyclin D1的表达水平基本相同.结论 rVSMC中p53、p21和Cyclin D1的表达水平发生改变,导致细胞凋亡减少,是发生支架内再狭窄的重要原因.放疗可改变rVSMC中各凋亡相关分子的表达,诱导细胞凋亡.