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1.
目的研究慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMCs)与血清中HBV DNA载量之间的相关性及PBMCs超微结构的变化。方法应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测60例慢性乙型肝炎患者PBMCs与血清中HBV DNA的载量;并采用透射电镜分析观察其中20例PBMCs的超微结构所见。结果血清中HBV DNA载量为(5.25±2.11)log10copies/ml,PBMCs中HBV DNA载量为(3.74±1.08)log10copies/ml,两者的HBV DNA表达呈正相关(r=0.84,P<0.0001)。电镜观察到血清HBVDNA载量高(≥105copies/ml)的患者PBMCs胞浆中易见到HBV颗粒,线粒体膨胀、嵴消失,内质网也可见膨胀。病程5年以上或血清HBV DNA载量<103copies/ml的患者,虽然PBMCs中病毒颗粒不多见,但细胞器多有改变。结论慢性乙型肝炎患者PBMCs与血清中HBV DNA载量呈正相关,可作为疗效观察指标。随着病程延长,尽管血清HBV DNA载量明显减少,但PBMCs细胞器损伤明显,提示机体免疫功能受损。  相似文献   

2.
目的探讨再生障碍性贫血(aplastic anemia, AA)患者外周血穿孔素及颗粒酶B的表达及其临床意义。方法 AA患者60例,其中重型AA(severe AA, SAA)患者22例为SAA组,非SAA患者38例为非SAA组,选取60例体检健康者为正常对照组;采用流式细胞仪检测3组外周血T淋巴细胞亚群及穿孔素和颗粒酶B表达情况,采用ELISA法检测3组血清穿孔素和颗粒酶B水平,并进行比较。结果 SAA组及非SAA组外周血CD4~+细胞比率、CD4~+/CD8~+和自然杀伤(natural killing, NK)细胞比率均低于正常对照组(P0.05),CD8~+细胞比率高于正常对照组(P0.05)。SAA组和非SAA组CD8~+T淋巴细胞中穿孔素[(17.72±5.53)%、(15.95±6.11)%]和颗粒酶B[(76.91±17.44)%、(69.89±16.69)%]阳性表达率均高于正常对照组[(8.83±4.76)%、(32.57±15.22)%](P0.05),SAA组NK细胞穿孔素[(78.82±9.41)%]和颗粒酶B[(87.66±10.53)%]阳性表达率高于正常对照组[(62.33±5.76)%、(73.15±8.94)%](P0.05);SAA组血清穿孔素[(6 195.26±1 168.35)ng/L]和颗粒酶B[(7.726±2.611)ng/L]水平高于非SAA组[(3 875.77±1 094.68)ng/L、(3.152±1.787)ng/L]和正常对照组[(3 324.92±1 283.51)ng/L、(2.878±0.997)ng/L](P0.05),非SAA组与正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 CD8~+T细胞参与了AA的免疫应答,CD8~+T淋巴细胞、NK细胞中穿孔素和颗粒酶B在AA发病中可能起一定作用。  相似文献   

3.
目的了解慢性乙型肝炎病毒携带者肝组织病理改变特征,并分析血清HBeAg及HBV-DNA定量与肝组织病理改变的关系。方法选取临床诊断为慢性乙型肝炎病毒携带者228例,行肝穿刺病理检查、肝功能、血清HBV-DNA及乙肝血清学标志物检测。结果 228例患者中病理符合病毒携带者49例(21.5%),肝硬化7例(3.1%),慢性乙型肝炎轻度136例(59.6%),中度28例(12.3%),重度7例(3.1%),重型1例(0.4%)。炎症分级G≥2者43例(18.8%);纤维化分期S≥2者49例(21.5%)。HBeAg阴性组病理炎症分级及纤维化分期均明显重于阳性组(P值均小于0.05)。HBV-DNA低载量组纤维化分期重于高载量组,而两组间肝组织炎症分级无统计学意义。结论多数慢性乙型肝炎病毒携带者有不同程度病理变化,血清HBeAg、HBV-DNA均不能准确反映肝脏损伤情况,对此类患者制定治疗方案时应考虑肝组织病理检查结果。  相似文献   

4.
目的研究外周血中乙型肝炎病毒基因(HBV-DNA)载量与乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)定量的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HBV-DNA载量,双抗体夹心时间分辨免疫荧光法(IFMA法)测HBeAg,然后作统计分析。结果经统计分析,160例患者中有113例HBV-DNA阳性,阳性率为70.6%;其中A组HBV-DNA阳性率为97.7%,B组为38.3%(χ2=96.4,P<0.05),HBV-DNA定量均值A组与B组(A组:6.59±1.34,B组:4.08±0.86),差异有统计学意义。结论乙肝患者血清中HBV-DNA水平是评定HBV复制状态的一个重要指标,乙型肝炎患者HBV-DNA载量与HBeAg定量水平呈明显正相关。  相似文献   

5.
目的研究慢性重型肝炎患者乙型肝炎病毒C基因启动子(HBV BCP)变异与病毒载量(HBV DNA)及细胞因子关系。方法采用聚合酶链反应(PCR)微板核酸杂交结合酶联免疫吸附测定(ELISA)检测显示技术,对156例HBV慢性感染者(慢性乙型病毒性肝炎轻、中、重度,肝炎肝硬化和慢性重型肝炎)血清进行检测HBV BCP区核苷酸(nt)1 762碱基A~T和1 764G~A联合突变的检测。采用PCR结合荧光探针检测技术,检测患者血清HBV DNA含量;采用双抗体夹心ELISA检测技术,检测患者血清细胞因子[白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素12(IL-12)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)]水平。结果HBV BCP变异在慢性重型肝炎组的阳性率为60.0%(15/25)显著高于非重型肝炎组的33.6%(44/131)(P=0.023);慢性重型肝炎组HBV DNA含量(107.3731±1.4381copies/ml)与非慢性重型肝炎组HBV DNA含量(106.6516±1.8046copies/ml)比较差异无统计学意义(P>0.05);慢性重型肝炎组与非慢性重型肝炎组血清IL-10和IFN-γ比较差异无统计学意义[(82.80±28.19)ng/L vs(74.60±26.87)ng/L,(22.00±16.41)ng/L vs(16.85±9.41)ng/L](均P>0.05),慢性重型肝炎组的血清IL-12和TNF-α水平明显高于非慢性重型肝炎组[(49.04±15.10)ng/L vs(36.81±14.41)ng/L,(60.68±30.83)ng/L vs(38.89±13.52)ng/L](均P<0.01)。结论HBV BCP变异与慢性重型肝炎关系密切,HBV DNA复制水平在慢性重型肝炎的发生中可能只起到启动的作用;细胞因子IL-12和TNF-α在慢性重型肝炎的发生中可能起主要的作用。  相似文献   

6.
目的:探讨慢性乙型重型肝炎患者血清可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)的变化及其临床意义.方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附法对50例慢性乙型重型肝炎患者和30例正常人血清sTRAIL水平进行测定.对50例慢性乙型重型肝炎患者用荧光定量PCR法检测HBV DNA载量、全自动生化分析仪检测肝功能.结果:慢性乙型重型肝炎患者血清sTRAIL水平明显高于健康对照组(P<0.01).存活组血清sTRAIL水平明显高于死亡组(P<0.01);慢性乙型重型肝炎患者血清sTRAIL水平与血清总胆红素呈显著正相关(r=0.32.P<0.01),与丙氨酸氨基转移酶正相关性r=0.78,P<0.05):29例HBV DNA<1×105 copies/mL者与21例HBVDNA≥1×105 eopies/mL者血清sTRAIL水平差异无显著性(P>0.05).结论:sTRAIL参与了慢性乙型重型肝炎的肝损伤过程,并与患者病情程度有一定的相关性,但与乙型肝炎病毒的复制水平无相关.  相似文献   

7.
李云  瞿良  夏正武 《中国误诊学杂志》2010,10(10):2285-2286
目的:了解HBeAg阴性乙型肝炎患者的HBV复制情况。方法:应用荧光定量PCR方法检测HBV-DNA,ELISA法检测乙肝病毒血清标志物(HBV-M)。结果:HBeAg阴性乙肝患者HBV-DNA阳性率为49.6%。结论:HBeAg阴性乙肝患者中仍有部分患者存在乙肝病毒颗粒。  相似文献   

8.
目的观察慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血Th17细胞表达频率和白细胞介素(IL)17浓度并探讨其临床意义。方法细胞内因子染色法结合流式细胞术检测20例CHB患者、6例慢加急性肝衰竭(ACLF)患者和19例健康对照(HC)组外周血Th17细胞表达频率,酶联免疫吸附法检测血浆IL-17浓度,分析Th17细胞表达频率和IL-17浓度与HBV DNA载量以及谷丙转氨酶(ALT)、凝血酶原活动度(PTA)、总胆红素(TB)水平之间的相关性。结果 CHB和ACLF患者Th17细胞表达频率为(3.34±1.79)%和(3.89±1.67)%,均高于健康对照组(2.01±0.78)%,CHB患者Th17细胞表达频率与ALT呈正相关(r=0.6188,P=0.0062)。CHB和ACLF患者血浆IL-17浓度[(168.8±53.86)pg/ml和(185.5±63.66)pg/ml]均低于健康对照[(260.8±100.30)pg/ml],CHB患者IL-17浓度与PTA负相关(r=-0.5803,P=0.0073),ACLF患者IL-17浓度与HBV DNA水平负相关(r=-0.8605,P=0.0278)。结论 CHB患...  相似文献   

9.
目的:建立肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)mRNA的实时荧光定量PCR检测方法,探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中TRAIL mRNA与HBV载量的关系及TRAIL在HBV感染后肝损伤中的作用。方法:自行建立检测TRAIL mRNA的TaqMan实时荧光定量RT-PCR法,对58例慢乙肝患者PBMCs中TRAILmRNA进行测定,采用夹心酶联免疫吸附法(ELISA)分析其血清可溶性TRAIL(sTRAIL)水平,实时荧光定量法检测PBMCs中HBV DNA含量,与肝功能相关指标进行相关性分析。结果:各型慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞TRAILmRNA表达水平高于健康者(t=28.311,P<0.001),但各组间差异显著性,与PBMCs中HBV载量无相关性。CHB轻度、CHB中度、重度~慢性重型肝炎、LC患者血清sTRAIL水平比健康者sTRAIL水平降低(t=0.801,P=0.430;t=2.315,P=0.027;t=2.672,P=0.013;t=5.085,P=0.000),各型慢性乙型肝炎之间差异无统计学意义,与白蛋白(Alb)呈正相关(r=0.426,P=0.002),与TBil、ALT及PBMCs中HBV载量无相关性。结论:慢性乙肝患者PBMCs中TRAILmRNA表达水平增加,血清sTRAIL水平降低,血清sTRAIL与Alb呈正相关,提示外周血单个核细胞膜结合型TRAIL增加,经TRAIL参与的肝细胞损害增加。  相似文献   

10.
目的探讨乙型肝炎感染者血清胆碱脂酶(CHE)、外周血T细胞亚群的特征及病程不同阶段的变化及意义。方法采用流式细胞技术对160例慢性HBV感染者和50例健康对照者的外周血T细胞亚群进行检测,同时采用全自动生化分析仪检测CHE。结果各型肝病患者CHE活性均有不同程度的降低,尤以肝硬化、重型肝炎降低最为明显;与健康对照组比较,慢性乙型肝炎、肝硬化患者的外周血CD3~+T细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞计数减少,并且随病情的进展逐渐降低。结论血清CHE和外周血T淋巴细胞亚群联合检测对观察慢性乙型肝炎病毒患者的肝细胞受损程度及病情分析具有一定的临床价值。  相似文献   

11.
目的 探讨不同病理分型的慢性乙型肝炎(乙肝)患者肝组织中a-干扰素受体(IFN-aR)的表达及其临床意义.方法 选择80例不同临床分型的慢性乙肝患者进行肝穿刺病理活检,从中筛选出60例患者不同病理分型的肝组织,采用免疫组化染色技术对IFN-aR的表达进行检测和半定量分析,并与血生化指标、肝组织病理学变化及血清乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝病毒(HBV)-DNA定量等进行相关分析.结果 按病理分型,IFN-aR表达强度在慢性无症状携带者(12例)为7.608±2.944,慢性轻度者(20例)为8.013±4.722,慢性中度者(19例)为15.424±8.187,慢性重度者(9例)为18.829±9.696;按照炎症程度分级,IFN-aR表达强度在GO-1级(14例)为5.096±0.437,G1-2级(18例)为9.345±0.988,G3级(17例)为13.903±1.409,G4级(11例)为23.530±1.965;慢性轻、中、重度及不同炎症程度的慢性乙肝患者间IFN.aR表达强度差异有统计学意义(F1=32.526,P1=0.002;F1=35.482,P2=0.001),不同纤维化分级间差异无统计学意义(F=3.549,P=0.121)IFN-aR表达强度与血清丙氨酸转氨酶(ALT)水平呈显著正相关(r=0.546,P<0.05),而与HBsAg、HBeAg、HBV-DNA定量无相关性(P均>0.05).结论 慢性乙肝患者肝组织IFN-aR的表达强度与肝组织的炎症程度及ALT水平有关,肝组织受体的高表达可能是其对IFN应答率高的原因之一,可作为IFN疗效的预测指标之一.  相似文献   

12.
目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清α1微球蛋白(α1-MG)与乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)载量的相关性。方法收集233例CHB患者血清。将CHB患者根据乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)分为HBsAg阳性患者(190例)和HBeAg阳性患者(43例)。分别测定其α1-MG和HBV-DNA载量,采用免疫比浊法检测血清α1-MG;采用荧光定量PCR法检测血清HBV-DNA载量,分析血清α1-MG水平与血清HBV-DNA载量的相关性。结果HBsAg阳性患者中HBV-DNA高载量患者88例(高载量A组),HBV-DNA低载量患者102例(低载量A组)。高载量A组α1-MG水平为(26.5±8.5)mg/L,低载量A组α1-MG水平为(20.5±5.5)mg/L,两组比较,差异无统计学意义(t=1.1057,P>0.05)。HBeAg阳性患者HBV-DNA载量分析结果显示,HBV-DNA高载量患者15例(高载量B组),HBV-DNA低载量患者28例(低载量B组)。高载量B组α1-MG水平为(19.2±7.2)mg/L,低载量B组α1-MG水平为(18.5±6.3)mg/L,差异无统计学意义(t=1.3251,P>0.05)。结论血清α1-MG水平与HBV-DNA载量无明显的相关性,不能用于判断CHB患者病毒复制情况,对病变的严重程度、观察疗效及评估预后无指导作用。  相似文献   

13.
目的探讨阿德福韦酯抗病毒治疗对慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞各亚群的影响。方法对41例慢性乙型肝炎患者采用流式细胞术检测阿德福韦酯(ADV-dpv)治疗前、治疗12周和24周后与11例对照者外周血T淋巴细胞亚群进行比较,并结合血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和总胆红素(TbiL)水平及乙肝病毒DNA(HBV-DNA)载量水平进行统计学分析。结果治疗前各组患者外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+绝对计数值明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。各组患者血清中ALT、TBiL水平及HBV-DNA载量水平与T淋巴细胞亚群失衡存在一致性,表现为慢性乙型肝炎(CHB)组和慢性重型肝炎(SH)组的ALT高于肝炎肝硬化(LC)组,差异有统计学意义(P<0.05),LC组和SH组患者外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+绝对计数值明显低于CHB组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。ADV-dpv治疗12周和24周患者外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+绝对计数值明显高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);各组患者ALT和TBiL水平及HBV-DNA载量较治疗前明显好转。结论慢性乙型肝炎在发展为重度和肝硬化的过程中外周血T淋巴细胞随病情的进展显著减少,经ADV-dpv抗病毒治疗后,肝功能明显改善,HBV-DNA复制明显减少,外周血淋巴细胞亚群绝对细胞数CD3+、CD4+、和CD8+进行性升高,T细胞亚群的状态呈逐渐改善的趋势。  相似文献   

14.
目的研究慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)内乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)与肝组织损伤程度的相关性。方法采用聚合酶链反应方法测定119例慢性乙型肝炎患者PBMC内HBV-DNA定量,并对肝组织进行病理学诊断。结果119例乙型肝炎患者PBMC内HBV-DNA检出率为71.4%,轻度、中度、重度慢性乙型肝炎患者PBMC内HBV-DNA阳性率分别为58.1%、69.4%、84.6%;慢性乙型肝炎患者PBMC内HBV-DNA检出率与肝组织损伤程度呈正相关(rs=0.912,P<0.05)。结论PBMC中HBV-DNA阳性率随肝损害加重而升高。  相似文献   

15.
The administration of concanavalin A (Con A) induces a rapid severe injury of hepatocytes in mice. Although the Con A-induced hepatitis is considered to be an experimental model of human autoimmune hepatitis, the precise cellular and molecular mechanisms that induce hepatocyte injury remain unclear. Here, we demonstrate that Valpha14 NKT cells are required and sufficient for induction of this hepatitis. Moreover, interleukin (IL)-4 produced by Con A-activated Valpha14 NKT cells is found to play a crucial role in disease development by augmenting the cytotoxic activity of Valpha14 NKT cells in an autocrine fashion. Indeed, short-term treatment with IL-4 induces an increase in the expression of granzyme B and Fas ligand (L) in Valpha14 NKT cells. Moreover, Valpha14 NKT cells from either perforin knock-out mice or FasL-mutant gld/gld mice fail to induce hepatitis, and hence perforin-granzyme B and FasL appear to be effector molecules in Con A-induced Valpha14 NKT cell-mediated hepatocyte injury.  相似文献   

16.
目的探讨白血病患者造血干细胞移植后体内 Fas 配体(FasL)、穿孔素(Perforin)及颗粒酶 B(Granzyme B)基因转录水平的动态变化与急性移植物抗宿主病(aGVHD)发生及发展的关系。方法应用竞争性定量 RT-PCR 方法检测17例白血病患者造血干细胞移植后 Granzyme B、Perforin 及FasL 的基因表达水平。结合临床,分析 FasL、Perforin 及 Granzyme B 基因表达动态变化与 aGVHD 的相关关系。结果 14例发生 aGVHD 的患者,诊断前与诊断时 Granzyme B、Perforin 和 FasL 基因表达水平分别为4.6±0.2,4.5±0.1,1.4±0.1和98.7±2.5,91.8±3.4,61.5±2.2,诊断时均比诊断前明显升高(P<0.05);Granzyme B、Perforin 和 FasL 基因表达水平先于 aGVHD 临床症状出现升高的例数分别为13例、14例和12例,并可根据变化趋势提示 aGVHD 预后。结论 aGVHD 发生时 Perforin、FasL、Granzyme B 基因表达水平明显升高。Perforin、FasL、Gralnzyme B 基因表达水平在一定程度上能够预示 aGVHD 的发生,并可提示 aGVHD 严重程度及预后。  相似文献   

17.
目的研究慢性乙型肝炎患者中趋化因子Mig的表达水平。方法分别采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western-blotting分析88例慢性乙型肝炎患者和53例健康人群血清、外周单个核细胞及肝脏组织中Mig的表达水平,同时以免疫组化技术分析Mig在肝脏组织中的分布情况。结果乙型肝炎e抗原(HBeAg)阴性乙肝患者血清、外周单个核细胞和肝组织中Mig表达量分别为(247.03±63.14)pg/mL、(0.95±0.21)、(0.79±0.23),乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性乙肝患者血清、外周单个核细胞和肝组织中Mig表达量分别为(243.05±53.00)pg/mL、(0.98±0.35)、(0.74±0.18),与健康人群血清、外周单个核细胞和肝组织中Mig表达量比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论慢性乙型肝炎患者体内Mig呈现较高的表达水平可能与患者机体状态相关。  相似文献   

18.
研究α干扰素对白细胞介素激活的淋巴细胞中穿孔素和颗粒酶表达的影响。方法4小时标准^51Cr释放实验检测NK和LAK活性,ABC酶活标法测颗粒酶B的表达,溶血法测定穿孔素活性,BLT法测定颗粒酶A的表达。结论:IFN-α增加IL-2激活性巴细胞的细胞作用可能与其增加淋巴细胞穿孔素表达相关。  相似文献   

19.
慢性乙型肝炎病毒感染者辅助性T淋巴细胞亚群的变化   总被引:1,自引:1,他引:1  
目的 了解慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者体内辅助性T淋巴细胞(Th细胞)亚群的变化,探讨HBV感染慢性化与Th细胞亚群变化的关系。方法 通过细胞内染色技术,采用流式细胞术检测HBV感染者外周血中Th1细胞和Th2细胞的水平。结果 慢性HBV感染者中,乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性感染组和HBV-DNA复制组Th1数量明显低于健康对照组(9.46±2.06,9.52±2.41与11.18±3.12相比,P〈0.05);HBeAg阳性组、丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高组、HBV-DNA复制组Th2细胞数量明显高于健康对照组(3.05±1.12,3.12±1.12,2.97±1.12与2.38±0.96相比,P〈0.05);HBeAg阳性感染组、ALT升高组和HBV-DNA复制组Th1/Th2比值都明显低于健康对照组差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 慢性HBV感染者Th1/Th2比例失衡,表现为Th1/Th2比值下降,Th2细胞数量优势,Th1/Th2比例失衡可能与肝脏损伤程度和病毒复制水平有关,Th1/Th2比值可以作为监测HBV慢性感染者免疫状态的重要指标。  相似文献   

20.
目的:探讨抗病毒治疗对乙型肝炎e抗原(HBeAg)阴性慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血 T淋巴细胞亚群状态的影响。方法选择重庆市垫江县人民医院就诊的70例 HBeAg阴性CHB患者为试验组,采用流式细胞技术检测研究对象外周血CD4+、CD8+ T 淋巴细胞的表达情况,并在抗病毒治疗24周后,再次检测CD4+、CD8+ T淋巴细胞、HBV-DNA的表达及肝功能变化情况。并与同期门诊正常体检健康者35例(对照组)检测结果作对照研究。结果实验组CD4+ T淋巴细胞较对照组降低,而CD8+则相对较高,差异有统计学意义( P<0.05);拉米夫定抗病毒治疗24周后,丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、HBV-DNA等指标均有明显降低,临床症状改善,同时CD4+ T淋巴细胞表达较前明显提高(P<0.05)。结论 T淋巴细胞亚群在 HBeAg阴性C HB患者发病及转归中起重要作用,抗病毒治疗能够提高外周血 T 淋巴细胞亚群的水平,增强患者的抗病毒能力。  相似文献   

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