一氧化氮、一氧化氮合酶对精索静脉曲张患者精子功能影响

目的：探讨一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）对精索静脉曲XT （VC）患者精子功能的影响。方法：测定15例VC不育患者外周静脉血清，精索静脉血清和精浆中NO含量及NOS活性，并与12例有生育能力者（对照组）进行对比研究。结果：VC组精索静脉血清和精浆中NO含量及NOS活性不仅高于其外周静脉血清（P＜0．01），而且高于对照组（P＜0．01），但外周静脉血清中两项指标两组比较无显著性差异（P＞0．05）。结论：VC时可能是由于曲张精索静脉血和精浆中NOS和NO的产生增加导致精子生成障碍或／和精子活力下降，从而导致不育症。     

一氧化氮合酶在不同年龄大鼠睾丸中的表达

目的研究一氧化氮合酶(NOS)在不同年龄大鼠睾丸中的表达情况，探讨NO在睾丸生殖功能中的作用。方法将健康雄性Wistar大鼠按月龄分为成年组和未成年组，4％多聚甲醛灌流固定，取大鼠睾丸，常规石蜡切片，免疫组化SABC法检测NOS在不同年龄大鼠睾丸中的表达。结果成年组大鼠睾丸间质细胞和间质血管中均有nNOS、iNOS和eNOS阳性物质表达，生精小管周围肌样细胞和腔面精子可见nNOS阳性物质；未成年组大鼠睾丸间质血管中偶见iNOS和eNOS阳性物质表达。结论3种NOS在睾丸中均有表达，但定位不同，且与年龄相关。     

精索静脉曲张大鼠环磷酸腺苷反应元件调控因子表达与睾丸生精功能损害的关系

目的　探索精索静脉曲张导致男性不育的机理。方法　选择 30只SD大鼠 ,2 0只作为手术组 ,建立精索静脉曲张模型 ;10只作为假手术对照组。 3个月后 ,取下睾丸常规染色切片 ,用Makler积分法分别测量手术组 2 0 0个 ,对照组 10 0个曲细精管内径、管周膜厚度、细胞层数及生精细胞成熟程度 ,并计算平均得分 ;原位杂交方法测定CREM的表达量 ,并比较二组之间的差异 ,分析环磷酸腺苷反应元件调控因子 (CREM)表达与生精功能损害的相关性。结果　与对照组比较精索静脉曲张组的曲细精管内径显著缩小 (10 1 2± 2 2与 146 0± 4 1) ,管周膜增厚 (3 5± 0 1与 1 9± 0 2 ) ,细胞层次减少 (3 0± 0 2与 5 5± 0 1) ,生殖细胞成熟障碍 (3 6± 0 3与 4 9± 0 1) ,Makler评分显著低于假手术组 (16 0± 1 2与 8 5± 0 6 ) ,二者有非常显著的差异。CREM在曲张组表达显著减少 (曲张组2 0± 0 32 ,假手术组 3 90± 0 32 ) (P <0 0 0 1) ,且表达定位于精原细胞至精母细胞阶段 ,其表达量与评分值正相关 (r=0 746 ,P <0 0 0 1)。结论　精索静脉曲张睾丸组织中CREM表达减少可导致生精功能损害 ,可能是导致不育的原因之一。     

一氧化氮合酶在大鼠睾丸及附睾中的表达和定位

目的：了解一氧化氮合酶（NOS）在睾丸及附睾中的分布。方法：运用免疫组织化学ABC法观察2种NOS（nNOS,iNOS,eNOS）在性成熟大鼠睾丸、附睾中的分布。结果：①nNOS免疫反应阳性见于睾丸间质细胞、睾丸间质血管壁平滑肌细胞、附睾脂肪垫细胞;②iNOS免疫反应阳性见于睾丸间质细胞、管周类肌细胞、精原细胞、精母细胞、支持细胞、输出小管上皮细胞、附睾输出小管上皮细胞、腔内精子;③eNOS免疫反应阳性见于睾丸间质细胞、附睾脂肪垫细胞。结论：NOS广泛表达于睾丸及附睾组织细胞中,推测其参与了包括精子发生和精子成熟的生殖活动多个过程。     

肝硬化大鼠睾丸一氧化氮合酶免疫组化研究

探讨肝硬化睾丸功能障碍的发生机制.将清洁级雄性SD大鼠分为假手术组(SO,n=10)、肝硬化组(CIR,n=10).采用胆管结扎(BDL)复制肝硬化模型,假手术组则仅分离出胆总管而不予结扎.应用免疫组织化学法对SO组和CIR组大鼠睾丸组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达进行比较性研究.结果术后4周,组织学检查显示胆汁性肝硬化特征性表现.CIR组和SO组大鼠睾丸组织eNOS表达均在间质细胞胞浆,二者平均吸光度和面密度相比较均无显著性差异(P＞0.05).而iNOS表达则存在较大差异,SO组仅在睾丸组织间质细胞胞浆表达;CIR组不仅在间质细胞胞浆,还在支持细胞、生精细胞以及脱落的生精上皮细胞胞浆表达,二者平均吸光度及面密度相比均存在非常显著性差异(P＜0.01).表明CIR组大鼠睾丸组织iNOS活性增高,参与了支持细胞、生精过程的调节,从而进一步证明了肝硬化睾丸功能障碍的发生机制中存在NO途径.     

当归川芎水蛭合剂对实验性精索静脉曲张大鼠生精功能的影响

目的:探讨当归川芎水蛭合剂对于实验性精索静脉曲张大鼠睾丸生精功能的影响。方法:采用HE染色、光镜观察当归川芎水蛭合剂对实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织、精索内静脉结构的影响;利用全自动精液分析系统分析大鼠附睾尾部精子数量及活力;测定大鼠睾丸组织中丙二醛(MDA)的含量与超氧化物歧化物酶(SOD)的活力。结果:治疗组大鼠睾丸和精索内静脉的结构损害明显低于对照组。左侧睾丸MDA含量低于对照组,SOD活性高于对照组(P<0.05)。治疗组附睾尾部精子活力与假手术组相比,精子的直线、曲线速度、路径速度明显提升(P<0.05)。结论:当归川芎水蛭合剂对实验性精索静脉曲张造成的左侧睾丸损伤具有保护作用,可以明显提升精子质量,这种作用可能与当归川芎蛭合剂可以增强抗氧化酶活性、对抗机体脂质过氧化有关。     

生精中药对精索静脉曲张大鼠生殖作用的影响

目的:观察生精中药对精索静脉曲张大鼠生殖作用的影响.方法:90只大鼠随机分为3组,假手术组只开腹不做肾静脉结扎,模型组和生精中药组均建立精索静脉曲张模型.造模完成后15 d,生精中药组给予灌喂生精中药4 g/(kg·d),其他2组给予正常饮食.30 d后测定各组大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(T),观察大鼠睾丸及附睾组织结构.结果:生精中药组血清T水平明显高于模型组,FSH与LH水平明显低于模型组(P均<0.05);光镜下大鼠睾丸及附睾组织结构优于模型组.结论:生精中药可以保护及修复功能受损的睾丸及附睾组织.     

实验性精索静脉曲张大鼠睾丸氧化应激水平的检测

目的 测定青春期精索静脉曲张(VC)大鼠睾丸组织中氧化应激水平,探讨VC致不育的机制.方法 将40只雄性青春期Wistar大鼠随机分为VC 8周组、VC 12周组(各12只)和相应的假手术对照组(各8只),通过部分结扎左肾静脉建立实验性大鼠VC模型,对照组只游离左肾静脉不结扎.分别于术后8、12周解剖动物,测左侧精索静脉最大直径;比色法测睾丸组织内过氧化氢(H2O2)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)水平.结果 成功建立了VC模型.VC 8周组和12周组大鼠左侧精索静脉均明显扩张(t=7.19、6.86,P<0.01),双侧睾丸组织内H2O2含量较对照组明显增加(t=2.31～4.78,P＜0.05、0.01),与右侧相比左侧增加更明显(t=2.56、3.15,P＜0.05), 并且左侧VC 12周组比VC 8周组增加更明显(t=2.16,P＜0.05).VC 8周组和VC 12周组左侧CAT活力与对照组比较显著降低(t=2.23、3.03,P＜0.05、0.01),右侧数值有下降趋势但差异无显著性(t=0.95、1.41,P＞0.05).VC 8周组和VC 12周组双侧SOD活力和T-AOC与对照组比较均明显降低(t=3.29～4.72,P＜0.01),并且VC 12周组比VC 8周组降低更明显(t=2.80、3.38,P＜0.05、0.01),T-AOC左侧睾丸比右侧下降更明显(t=11.66、7.54,P＜0.01).结论 VC可引起双侧睾丸H2O2增加,CAT活力、SOD活力以及T-AOC下降,导致睾丸组织内氧化应激系统失衡.     

实验性精索静脉曲张对大鼠睾丸结构和性激素影响

目的 观察实验性精索静脉曲张(EV)对大鼠睾丸结构及左精索静脉内促卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)水平的影响.方法 40只雄性青春期Wistar大鼠随机分为EV 8周组、EV 12周组(每组12只)和相应对照组(各8只),EV组部分结扎左肾静脉建立实验性大鼠EV模型,相应对照组接受假手术.分别于术后8周、12周处死动物,测量睾丸质量,光镜观察睾丸结构;放射免疫法测定曲张精索内静脉血和肾静脉血中FSH、LH、T的水平.结果 EV 12周、EV 8周组双侧睾丸质量与相应对照组比较明显下降(t=2.78～11.18,P<0.05、0.01),EV 12周组双侧睾丸质量较EV 8周组减轻(t=2.55、3.73,P<0.05、0.01).光镜下观察,EV 8周和EV 12周组大鼠双侧睾丸均有局灶性生精上皮退化,精子发生阻滞,生精细胞脱落和曲细精管萎缩等病理性改变.对照组、EV 8周组和EV 12周组大鼠左精索静脉血FSH和LH水平依次增加(t=3.53～9.51,P<0.01),后两者T水平较对照组降低(t=2.52、4.40,P<0.05、0.01).结论 EV可导致大鼠双侧睾丸质量下降,曲细精管病理性损害,性腺轴内分泌功能异常.     

生精冲剂对精索静脉曲张大鼠睾丸组织结构与超微结构的影响

目的　探讨生精冲剂对精索静脉曲张大鼠睾丸组织结构和超微结构的影响。方法　选择Wastar雄隆大鼠制成精索静脉曲张模型,随机分为治疗组、模型组和对照组。观察生精冲剂对实验大鼠睾丸组织结构和超微结构的影响。结果　治疗组大鼠睾丸组织结构和超微结构的损害明显低于模型组(P <0 0 1)。结论　生精冲剂对精索静脉曲张造成睾丸损害有保护作用,能够减轻睾丸组织结构和超微结构的损害。     

铁死亡在实验性左侧精索静脉曲张大鼠睾丸中的初步探讨

探讨实验性左侧精索静脉曲张（ELV）大鼠睾丸中是否存在铁死亡的细胞死亡方式。方法 24只SPF级SD大鼠,参照Turner法构建大鼠ELV模型,按随机数字表法分成分为假手术A组、假手术B组、手术A组和手术B组,每组6只。假手术A组和手术A组于造模2周后进行取材,假手术B组和手术B组于造模4周后进行取材,分别评估各组左侧精索静脉的曲张情况,同时取出各组左侧睾丸,HE染色观察形态学变化,ELISA法测定活性氧（ROS）、谷胱甘肽过氧化酶4（GPX4）浓度,分光光度法测定还原型谷胱甘肽（GSH）活性,比色法测定谷胱甘肽过氧化物酶（GSH=PX）活性,Western Blot检测左侧睾丸组织中核转录相关因子2（Nrf2）蛋白的表达。结果 手术A组和手术B组大鼠左侧精索静脉均较术前曲张2倍以上,ELV大鼠模型成功建立。手术A组和手术B组大鼠左侧睾丸组织内发生明显病理损伤,生精小管基膜损伤,各级生精细胞排列紊乱,细胞结构部分破坏,管腔生精细胞脱落,精子数量减少,管腔间隙增大,支持细胞形态欠佳。与相对应的假手术A组、假手术B组相比,手术A组和手术B组大鼠左侧睾丸组织中ROS浓度均明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。但GSH、GSH-PX活性与GPX4浓度均变化不明显,差异无统计学意义（P＞0.05）,Nrf2蛋白相对表达量也无明显变化,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 目前暂不能得出精索静脉曲张睾丸中存在铁死亡的细胞死亡方式,但是也不能否认其存在的可能。     

大剂量吡哆醇对大鼠睾丸一氧化氮合酶和细胞凋亡的影响

[目的]为探讨大剂量吡哆醇(PN)对睾丸结构和功能损害的分子机制,研究其对睾丸一氧化氮合酶 (NOS)和细胞凋亡的影响。[方法]实验采用吖啶橙荧光染色法显示睾丸细胞DNA和RNA,黄递酶(NADPH- d)组织化学法显示睾丸细胞NOS,采用原位缺口平移技术检测睾丸生精细胞凋亡的数目。[结果]与对照组相比,注射PN 3 d,大鼠睾丸间质细胞NOS反应活性明显增强,睾丸生精细胞凋亡数目(38．41±8．20)较相应对照组(11．39±4．86)明显增多,差异有显著性(P<0．01)。[结论]提示大剂量PN腹腔注射后,大鼠睾丸细胞NOS活性和凋亡细胞数目明显增加,这些变化可能是PN损害睾丸结构和功能的分子机制之一。     

去颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白5表达的影响

目的：观察切除颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白5（annexin 5）表达的影响.方法：切除大鼠颌下腺,分别于术后14、28和42d处死大鼠,Western blotting和免疫组织化学分析大鼠睾丸annexin 5表达及分布的改变.结果：Western blotting结果显示,与对照组相比,切除颌下腺14d和28d后,实验组大鼠睾丸annexin 5的表达分别升高了27.5%和35.2%,具有显著性差异（P＜0.05,P＜0.01）;切除颌下腺42d后,实验组大鼠睾丸annexin 5又恢复到与对照组几乎相同的水平.免疫组织化学显示,annexin 5在大鼠睾丸中的分布未见明显改变,但实验组annexin 5免疫组化显色较深,说明annexin 5的表达升高,这与Western blotting的结果基本一致.结论：颌下腺切除影响大鼠睾丸annexin 5的表达,颌下腺切除早期（14、28 d）颌下腺分泌的某些生物活性物质缺乏,而造成睾丸内annexin 5表达的升高.颌下腺切除后期（42 d）,机体内因颌下腺切除而缺乏的某些物质在体内又重新得到了补偿,对睾丸annexin 5的影响消除,睾丸annexin 5的表达也恢复到正常水平.其内在具体机制尚待进一步阐明.     

光照应激对SD大鼠睾丸促性腺激素释放激素受体表达的影响

目的多种应激方式均能抑制生殖功能,但其对调控机制仍缺少系统的研究。通过观察光照应激状态下SD大鼠睾丸内促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)受体蛋白和mRNA表达变化,为寻找应激状态下生殖系统调节机制提供依据。方法建立SD大鼠光照应激模型,将70只大鼠随机分为14组,其中7组(实验组)24 h持续光照,包括短期光照应激(2、3、4和7d)和长期光照应激(14、21和28d),另7组按正常昼夜节律并作为对照组;分别取实验组和相应对照组的睾丸组织,采用Western blot和RT-PCR分析GnRH受体在各时间段大鼠睾丸组织中的蛋白和mRNA表达变化,并用化学发光法检测血清中睾酮的含量。结果 Western blot结果显示:与对照组比较,持续光照2、3、4和7 d后,实验组大鼠睾丸GnRH受体表达无明显变化;持续光照14d和21d后,实验组大鼠睾丸GnRH受体的表达分别升高了27.8%±11.2%和40.6%±24.8%,差异具有统计学意义(P<0.05);持续光照28 d后,实验组大鼠睾丸GnRH受体的表达升高了26.1%±33.6%,但差异无统计学意义...     

大鼠睾丸组织中ALR的研究

目的:研究大鼠睾丸组织中肝再生增强因子(ALR)的表达情况,探讨睾丸ALR与生殖的关系.方法:取幼年、成年、老年大鼠睾丸组织以及部分肝切除(PH)术前、术后12h、24h、48h大鼠肝脏、睾丸组织进行免疫组化,了解大鼠睾丸组织中ALR的表达.结果:睾丸组织中ALR广泛存在于间质细胞、支持细胞和生精细胞,其中尤以精原细胞、精母细胞表达最强.不同年龄段ALR的表达不一样,幼年最强、成年次之、老年最弱.70%PH后肝脏ALR表达增强,24h达峰值,睾丸组织中ALR表达无明显变化.结论:睾丸组织有较强ALR表达,不同脏器的ALR作用具有脏器特异性,ALR与睾丸的发育以及精子生成及成熟密切相关.     

NOS抑制剂L-NNA对福尔马林致痛大鼠伤害性行为反应的影响

目的 检测和评价腹腔注射不同剂量一氧化氮合酶抑制剂L－NNA对福尔马林致痛大鼠伤害性行为反应的影响。方法 大鼠腹腔注射L－NNA 1h后，进行福尔马林实验诱导伤害性行为反应，观察L－NNA的镇痛效应。结果 腹腔注射不同剂量的L－NNA（10mg/kg,20mg/kg,40mg/kg,80mg/kg)产生明显的镇痛作用。结论 一氧化氮在伤害性痛觉调制中起重要作用，一氧化氮合酶抑制剂L－NNA有明显的镇痛作用。     

腹腔注射吡哆醇对雄性大鼠性腺作用的初步观察

目的了解大剂量吡哆醇（PN）对雄性大鼠王殖系统的作用。方法选用成年雄性SD大鼠40只，随机分为4组，分别经腹腔注射0，100，300，600mp．kg－1．d-1的盐酸吡哆醇。结果给药15d，300mp和600mg组的睾丸、附睾、精囊和前列腺减重，至给药30d，各实验组除上述改变外，600mp组的星丸体积缩小；光镜下，100mg组无明显异常改变，随着剂量和给药时间的增加，精曲小管由精子细胞脱落发展到精子细胞、精母细胞变性坏死，电镜下见精子释放延迟和异形精子，Sertoli细胞肿胀、微管稀少，内质网异位和扩张，结论PN可能通过破坏细胞骨架而损伤Sertoli细胞，抑制星酮作用及直接损伤生精细胞而引起雄性大鼠生殖毒性。     

睾丸“门”的定位及临床解剖意义

目的 解剖定位睾丸“门”,观察其进出结构的形态位置分布,为睾丸移植提供依据.方法 解剖、测量、记录睾丸动脉、睾丸静脉、输精管及其伴行血管在皮下环和睾丸上端的压径及皮下环至睾丸上端的垂直距离,观察其位置关系.结果 进出睾丸“门”的结构在深环上方1.5 cm容易辨认,而入深环后位置关系不恒定.结论 将睾丸“门”定位在深环上方1.5 cm比较合适.     

锌对睾丸生精细胞凋亡及其衰老变化的影响

目的：探讨补锌和高锌对衰老和幼年大鼠睾丸发育及其功能影响的分子机制。方法：选用Wistar雄性大鼠40只,分为5组,分别为对照组和高锌组（2月龄）、成年组（6月龄）、老年组和补锌组（24月龄）。对照组、成年组和老年组均给以正常锌饲料,含硫酸锌45mg／kg;高锌组给以1000mg／kg硫酸锌;老年补锌组给以100mg／kg硫酸锌。喂养4周后,采用原位缺口平移法检测生精细胞凋亡数目。结果：与对照组相比,衰老大鼠生精细胞凋亡数目明显增多（P＜0．05）;补锌4周后,衰老大鼠的上述变化明显改善;高锌大鼠生精细胞凋亡数目明显增加（P＜0．01）。结论：锌是睾丸发育必须的营养素,适量补锌可改善衰老睾丸生精细胞凋亡的衰老变化,过量补锌可诱发正常睾丸生精细胞凋亡．这种变化可能是不同锌状态对睾丸发育及其衰老变化影响的重要原因之一。