桔梗皂苷D通过介导PI3K/Akt/mTOR信号通路调节氧化应激改善糖尿病肾病模型大鼠肾损伤

目的 研究桔梗皂苷D改善糖尿病肾病(DN)大鼠肾损伤作用及机制.方法 采用高脂饮食联合腹腔注射链尿佐菌素60 mg·kg-1的方法制备DN大鼠模型,以大鼠血糖≥16.7 mmol·L-1、24 h尿蛋白含量>30 mg视为造模成功.模型动物分为模型组,模型+桔梗皂苷D 25,50和100 mg·kg-1(ig)及模型+...     

川芎嗪抗糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤的转录组学研究

目的 基于全长转录组测序技术探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine, TMP)对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)损伤的保护作用及其机制。方法 通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ, 50 mg·kg^-1)诱导大鼠DM模型,使用双血管闭塞法(2-VO, 10 min),再灌注16 h制备大鼠全脑I/R模型,TMP(40 mg·kg^-1)每日腹腔注射。通过脑含水量检测、HE染色、尼氏染色、TUNEL染色评价TMP对DM大鼠脑I/R损伤的神经保护作用。全长转录组测序筛选差异表达基因,通过功能注释、代谢通路富集分析筛选TMP对DM大鼠发挥脑缺血保护作用的可能候选基因与代谢通路,并使用RT-qPCR、Western blot进行验证。结果 TMP治疗可减轻DM大鼠脑I/R后的脑水肿程度,增加神经元、尼氏体数目,明显减少细胞坏死和凋亡。GO富集分析发现TMP治疗后差异表达基因主要富集在炎症反应、转录因子复合物、生长因子活性等生物学功能上。KEGG通路分析发现其...     

大黄素调节HIF-1α/VEGF通路对糖尿病大血管病变大鼠血管内皮细胞损伤的影响

目的 探讨大黄素(EM)调节缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路对糖尿病大血管病变大鼠血管内皮细胞损伤的影响。方法 将SD大鼠分为空白组和造模组,造模组用高脂高糖联合N-硝基-L-精氨酸甲酯喂养大鼠以构建糖尿病大血管病变模型,空白组给予普通饲料饲养。从空白组、造模组大鼠胸主动脉中成功分离出来的血管内皮细胞分别命名为对照组和造模组。造模组的血管内皮细胞分为模型组、二甲基草酰甘氨酸(DMOG)组(10μmol·L^-1 DMOG)、联合组(80 mg·L^-1 EM+10μmol·L^-1 DMOG)和低、中、高剂量实验组(20、40、80 mg·L^-1 EM)。用流式细胞术检测大鼠血管内皮细胞的凋亡情况,用蛋白质印迹法检测大鼠血管内皮细胞中HIF-1α和VEGF蛋白的表达水平。结果 中、高剂量实验组和DMOG组、联合组、模型组、对照组的血管内皮细胞凋亡率分别为(10.18±0.36)%、(6.28±0.20)%、(24.96±1.18)%、(12.36±0.49)%、(18...     

白芍总苷对糖尿病大鼠心肌纤维化的影响及机制研究

目的:研究白芍总苷(TGP)对糖尿病大鼠心肌纤维化的影响及其机制.方法:120只SD大鼠按随机数字表法分为6组:正常对照组、模型组、二甲双胍组(200 mg·kg-1)和TGP低、中、高剂量组(50,100,200 mg·kg-1),每组20只.采用一次性腹腔注射链尿佐菌素(65 mg·kg-1)制备糖尿病大鼠模型;造...     

穿心莲内酯抑制IKK/IκBα/NF-κB信号通路改善抑郁症大鼠的抑郁样行为

目的 探讨穿心莲内酯(Andro)通过抑制核转录因子-κB抑制蛋白激酶(IKK)/核因子κB抑制蛋白(IκBα)/核因子-κB(NF-κB)信号通路改善抑郁症(MDD)大鼠的抑郁样行为。方法 随机取12只SD大鼠作为空白对照组(NC组),其余大鼠采用慢性不可预知轻度应激(CUMS)结合孤养模式造模,将造模成功大鼠随机平分为模型组(Mod组)、Andro组(25 mg·kg^-1·d^-1)、Res组(30 mg·kg^-1·d^-1 IKK/IκBα/NF-κB信号通路激活剂Res)、Andro+Res组(25 mg·kg^-1·d^-1Andro+30mg·kg^-1·d^-1 Res),每组12只大鼠,Mod组和NC组灌胃等量0.9%氯化钠溶液。旷场实验、糖水偏好实验、强迫游泳实验、平衡木实验评估大鼠行为;ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平;免疫荧光染色检测小胶质细胞、星形胶质细胞活性;Western ...     

rAAV-PR39-ADM防治大鼠脑缺血/再灌注损伤的研究

目的探讨重组腺相关病毒协同表达双基因:抗菌肽(PR39)和肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM),即r AAVPR39-ADM对大鼠脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤的治疗作用。方法离体实验:人脐静脉内皮细胞培养,行血管成型实验。在体实验:建立大鼠脑I/R模型(脑缺血2 h后再灌注)。SD大鼠随机分为:Sham组、生理盐水组(I/R+NS)、空病毒组(I/R+AAV)及治疗组(I/R+r AAV-PR39-ADM组)。I/R组,再灌注24 h后股静脉分别给予等量生理盐水、空病毒及r AAV-PR39-ADM。术后1、2、3、4周,行头颅MRI、神经功能缺损评分、TTC染色及HE染色等方法评价r AAV-PR39-ADM对脑I/R损伤的疗效。结果离体实验中,r AAV-PR39-ADM同对照及空病毒组相比,有明显的促血管成型作用。在体实验中,头颅MRI检查证实模型制备成功。与Sham组相比,各时间点I/R组的神经功能缺损评分及脑组织梗塞的体积均明显增高(P<0.01),I/R组术后即刻神经功能缺损评分差异无统计学意义(P>0.05)。与生理盐水组及空病毒组相比,治疗组各时间点神经功能缺损评分及梗塞体积均明显减小(P<0.01),空病毒组与生理盐水组比较,梗塞面积及神经功能缺损评分差异无统计学意义(P>0.05)。HE染色显示,治疗组的神经元细胞数目与生理盐水组和空病毒组相比明显丰富,缺血区新生血管明显增多。结论 r AAV-PR39-ADM可能通过促进血管新生,改善脑I/R后局部供血及侧枝循环,保护神经元,促进血管再生,减轻I/R脑损伤。     

羟苯磺酸钙对糖尿病大鼠肾脏表达ICAM-1和VCAM-1的影响

目的:探讨羟苯磺酸钙对肾小球细胞间黏附分子(ICAM-1)和血管细胞黏附分子(VCAM-1)表达的影响和对糖尿病肾病的保护作用.方法:左肾切除后单次腹腔注射50mg·kg-1链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,糖尿病大鼠随机分成糖尿病组、羟苯磺酸钙治疗组(100 mg·kg-1·d-1)和正常对照组.用RT-PCR及Western印迹的方法检测12周后ICAM-1、VCAM-1表达的改变.结果:与正常对照组相比,糖尿病组及治疗组ICAM-1、VCAM-1表达增加(P＜0.01);而治疗组ICAM-1、VCAM-1表达显著低于糖尿病组(P＜0.01).结论:羟苯磺酸钙可抑制糖尿病大鼠ICAM-1和VCAM-1的表达,延缓糖尿病肾病的发生、发展.     

苦杏仁苷对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮细胞损伤的影响

目的 研究苦杏仁苷对糖尿病肾病(DKD)大鼠肾小管上皮细胞损伤及腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物西罗莫司靶蛋白(AMPK/mTOR)通路的影响。方法 将SD大鼠分为空白组、模型组、苦杏仁苷低剂量组(3 mg·kg^-1)、苦杏仁苷高剂量组(10 mg·kg^-1)、Compound C组(2.5 mg·kg^-1 AMPK抑制药Compound C)、苦杏仁苷高剂量+Compound C组(10 mg·kg^-1苦杏仁苷+2.5 mg·kg^-1 Compound C),每组10只。除空白组外,其余各组大鼠用连续喂养高脂高糖饲料+腹腔注射60 mg·kg^-1 1%链脲佐菌素(STZ)方法进行DKD造模,造模成功后第2天给予相应药物处理,每天1次,持续给予8周,空白组、模型组均给予等体积0.9%NaCl。用二喹啉甲酸(BCA)法检测大鼠24 h尿蛋白含量,用血糖仪检测大鼠空腹血糖,用全自动生化分析仪检测大鼠血肌酸酐和血尿素氮水平,用原位末端标记法(TUNEL)染色检测大鼠...     

芦荟多糖对糖尿病足溃疡大鼠创面愈合的影响

目的 研究芦荟多糖对糖尿病足溃疡大鼠创面愈合的影响及相关机制.方法 采用腹腔注射1％链脲佐菌素(STZ)60 mg·kg-1的方法构建糖尿病大鼠模型,另选取15只大鼠为空白组,腹腔注射等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液;糖尿病大鼠模型构建成功后制备糖尿病足溃疡创面模型.将糖尿病足溃疡大鼠随机分为模型组、实验组和对照组,各15只...     

咖啡酸类衍生物hit1对肾血管性高血压大鼠的降压作用研究

目的 对血管紧张素Ⅱ 1型受体(angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1R)的特异性拮抗剂hit 1(咖啡酸类衍生物)进行体内药效学评价。方法 制作双肾双夹高血压大鼠模型,设定假手术组、高血压模型组、缬沙坦组(8.3 mg·kg^–1)和hit 1低、中、高剂量组(5,15,30 mg·kg^–1),每日8:00灌胃给药1次,持续4周。从大鼠体质量、血压、心率、心重指数以及组织形态学五方面系统评价hit 1的体内药效学。Western blotting分析hit 1对大鼠股动脉AT1R表达量的影响。结果 大鼠双肾双夹手术后,平均收缩压和舒张压分别达到(153.87±7.03)mmHg和(116.50±8.68)mmHg,提示高血压大鼠造模成功。与模型组相比,hit 1中、高剂量组与缬沙坦组作用相当,能以剂量依赖性的方式显著降低肾性高血压大鼠的血压,且不影响其心率;而hit 1低剂量组血压无显著改善。组织形态学研究证明hit 1能够改善大鼠高血压所致的心肌细胞肥大,降低心重指数;且能够通过显著降低壁腔比的方式改善肾性高血压...     

基于高通量测序研究半夏泻心汤对3-脱氧葡萄糖醛酮致糖尿病前期大鼠肠道菌群的影响

目的 研究半夏泻心汤对3-脱氧葡萄糖醛酮(3 DG)致糖尿病前期大鼠肠道菌群的影响.方法 大鼠连续灌胃3DG(50 mg·kg-1·d-1)2周制得糖尿病前期大鼠模型.将雄性SD大鼠随机分为3组:正常组(7只)、模型组(7只)和实验组(3只).造模后,实验组灌胃半夏泻心汤水煎液(5 mL·kg-1),正常组和模型组灌胃...     

基于UPLC/QTOF-MS技术的丹蛭降糖胶囊防治2型糖尿病血管病变大鼠的血清代谢组学研究

目的: 本实验运用UPLC/QTOF-MS技术对丹蛭降糖胶囊防治2型糖尿病血管病变大鼠进行血清的代谢组学研究,探求该中药制剂防治糖尿病血管病变可能的物质基础。方法: SD大鼠随机分成正常组、模型组和丹蛭降糖胶囊组,高脂饲料喂养4周后,腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ35mg·kg^-1)复制2型糖尿病大鼠模型。造模成功后,灌胃给予丹蛭降糖胶囊(1.26g·kg^-1·d^-1)连续4周。给药4周后,处死大鼠,腹主动脉取血,去胸主动脉HE染色做病理切片。采用UPLC/QTOF-MS技术结合主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)分析其代谢谱变化,鉴定差异化合物,分析相关代谢通路。结果: 病理切片发现模型组大鼠血管内皮细胞较正常组大鼠的有明显损坏,丹蛭降糖胶囊组大鼠的血管内皮细胞受损较轻。PCA和PLS-DA分析表明各组大鼠之间代谢谱存在明显差异,可实现分离。研究在正、负离子模式下分别筛选出11个和4个差异性标志物。代谢通路分析结果表明,差异性标志物分别于氨基酸代谢、胆汁酸和脂代谢以及氧化应激状态相关。结论: 丹蛭降糖胶囊可以保护血管内皮细胞,防治2型糖尿病血管病变,其作用机制可能在于调节氨基酸代谢、胆汁酸和脂代谢以及氧化应激状态相关。     

汉防己乙素抑制P38 MAPK和ERK1/2的磷酸化缓解心肌缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡和线粒体氧化损伤

目的探讨汉防己乙素(Fan)对心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌细胞凋亡和线粒体损伤的影响。方法雄性SD大鼠分为假手术组、模型(I/R)组、I/R+Fan 1,3和10 mg·kg-1组,I/R+盐酸维拉帕米(VH)20 mg·kg-1组,每组9只。模型大鼠结扎左前降支冠状动脉30 min后,松开结扎线再灌注90 min。给药大鼠分别在造模前20 min ip给予Fan 1,3,10 mg·kg-1及VH 20 mg·kg-1。记录平均动脉血压(MAP),左心室收缩压(LVSP);ELISA法测定血清中肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)的含量;HE染色观察心肌组织病理损伤;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;试剂盒检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量;Western印迹法检测心肌组织Bcl-2、Bax、原癌基因(c-Myc)、活化胱天蛋白酶3蛋白表达水平和P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)及细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)磷酸化水平。结果与假手术组比较,I/R组LVSP和MAP、GSH含量、SOD活性及c-Myc蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);Mb,CK-MB和MDA含量、心肌细胞凋亡率、活化胱天蛋白酶3和Bax蛋白表达水平及P38MAPK和ERK1/2的磷酸化水平均显著升高(P<0.05)。与I/R组比较,I/R+Fan 3和10 mg·kg-1组LVSP和MAP、GSH含量、SOD活性及Bcl-2和c-Myc蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),Mb,CK-MB和MDA含量显著降低(P<0.05),心肌细胞凋亡率显著降低(P<0.05),胱天蛋白酶3和Bax/Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),P38 MAPK和ERK1/2磷酸化水平显著降低(P<0.05)。结论 Fan能够抑制P38 MAPK和ERK1/2的磷酸化,缓解心肌I/R大鼠心肌细胞凋亡和线粒体损伤。     

新型氮氧自由基对心脑缺血/再灌注损伤模型大鼠的保护作用研究

目的:研究新型氮氧自由基(N1)对心脑缺血/再灌注(I/R)损伤模型大鼠的保护作用。方法:取大鼠分别建立脑I/R模型和心肌I/R(MI/R)模型,将两种模型大鼠分别分为假手术(0.9%氯化钠注射液)组、模型(0.9%氯化钠注射液)组、阳性对照(传统的氧自由基清除剂Tempol,100 mg/kg)组和高、中、低剂量(N1,100、50、10 mg/kg)组,每组6只,均在建模前腹腔注射相应药物。就脑I/R模型,通过神经功能评分和脑梗死容积百分率评价N1的脑保护功能;就MI/R模型,通过左室收缩压(LVSP)、左室等容收缩/舒张期压力上升或下降最大速率(±dp/dtmax)和血清中肌酸激酶(CK)活性、丙二醛(MDA)的水平评价N1的心脏保护功能。结果:脑I/R模型中,与模型组比较,阳性对照组和各剂量组大鼠神经功能评分均明显增加,脑梗死容积百分率明显减小(P<0.05或P<0.01);与阳性对照组比较,中、高剂量组大鼠脑梗死容积百分率明显减小(P<0.05)。MI/R模型中,与模型组比较,阳性对照组和各剂量组大鼠的LVSP、±dp/dtmax均明显升高(P<0.05或P<0.01),各剂量组大鼠血清中CK活性、MDA水平均明显降低(P<0.05或P<0.01);与阳性对照组比较,高、中剂量组大鼠的LVSP、±dp/dtmax均明显升高(P<0.05或P<0.01),血清中CK活性、MDA水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:N1对大鼠的心脑I/R损伤均具有明显的保护作用,且保护作用强于Tempol。     

双氢青蒿素通过抑制蛋白激酶B和NF-κB P65磷酸化减轻缺血再灌注导致的小鼠心肌损伤

目的 探讨双氢青蒿素(DHA)对心肌缺血再灌注(I/R)小鼠心肌氧化应激损伤作用及其机制.方法 采用左冠状动脉前降支结扎法制备心肌I/R小鼠模型.结扎前20 min,模型+DHA 12.5,25.0和50.0 mg·kg-1组小鼠分别ig给予相应剂量DHA,假手术组和I/R模型组ig给予等量生理盐水,每天1次,连续7 ...     

丹参水提物对心肌缺血-再灌注损伤大鼠血流动力学的影响

目的观察丹参水提物(SME)对心肌缺血-再灌注损伤(I/R)大鼠血流动力学的影响,探讨其对I/R大鼠心肌梗死的保护作用。方法采用SD♂大鼠左冠状动脉前降支结扎法制备I/R大鼠模型,同时给予不同剂量的SME(29.76、59.52 mg·kg-1)和复方丹参片(FDT,1.21 g·kg-1),3 d后测定心电图,记录再灌注2 h后的心率(HR)、动脉血压(MABP)、左室舒张末期内压(LVEDP)、左室收缩内压(LVSP)、左室内压最大上升/下降速率(LVdp/dtmax);计算心脏组织的梗死范围。结果29.76、59.52 mg·kg-1SME和1.21 g·kg-1FDT可使LVEDP降低,MABP、LVdp/dtmax和LVSP升高,心肌组织的梗死面积缩小;59.52 mg·kg-1SME较1.21 mg·kg-1FDT可明显改善各项指标。结论 SME对大鼠I/R具有保护作用。     

金丝桃苷对颅内动脉瘤大鼠血管内皮组织Hippo信号通路影响

目的:探究金丝桃苷(HYP)对颅内动脉瘤(IA)大鼠血管内皮损伤的影响及其可能的分子机制.方法:SD大鼠随机选取12只为假手术组(Sham组),其余大鼠采用结扎双侧肾动脉后支和左颈总动脉方法建立IA模型.建模成功后将大鼠分为模型组(IA组)、HYP低(HYP-L组,50mg· kg-1 HYP)、高(HYP-H组,10...     

黄芩苷对全脑缺血/再灌注大鼠认知功能的影响及其机制研究

目的探讨中药单体黄芩苷对全脑缺血/再灌注损伤大鼠认知功能的影响及其作用机制。方法将60只♂SD大鼠,随机分为假手术组(S组)、全脑缺血/再灌注组(I/R组)、全脑缺血/再灌注+黄芩苷组(I/RB组),每组20只。全脑缺血/再灌注模型采用双侧颈总动脉夹闭合并低血压。I/RB组大鼠造模后12 h行黄芩苷(100 mg·kg-1)灌胃,每天两次,连续7 d。S组及I/R组大鼠在相同时间点给予相应体积的生理盐水灌胃。造模7 d后,采用Morris水迷宫检测空间学习记忆能力,Brd U免疫组化标记脑内神经前体细胞的增殖,Western blot检测脑组织COX-2蛋白的表达。结果与I/R组比较,I/RB组大鼠的学习记忆功能明显改善(P<0.05),海马齿状回(DG)和侧脑室室管膜下区(SVZ)Brd U阳性细胞数目明显增加(P<0.01),脑组织COX-2蛋白的表达明显下降(P<0.01)。结论黄芩苷能明显改善全脑缺血/再灌注大鼠的认知功能,机制可能与抑制脑组织COX-2蛋白的表达,促进脑内神经前体细胞增殖有关。     

大鼠急性心肌缺血再灌注模型的改进

目的通过改进大鼠心肌缺血/再灌注模型制备方法,提高造模成功率。方法雌雄各半Wist-ar大鼠40只,随机分为伪手术(S)组20只和心肌缺血再灌注(I/R)组20只。整个实验过程在人工机械通气下完成,所有操作尽量不破坏动物组织结构。结果I/R组结扎心肌左冠状动脉前室间支后心电图ST段弓背向上抬高0.4 mV以上,S组手术前后无变化;I/R组造模成功率为90%。结论本方法制备大鼠心肌缺血/再灌注模型简便易行、心脏暴露好、结扎可靠、结果稳定。     

椒苯酮胺对全脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的探讨新型钙增敏剂盐酸椒苯酮胺(PPTA)对脑缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用。方法采用四血管阻断(4-VO)建立全脑I/R损伤模型。造模成功后随机分为假手术组、模型组(I/R)、PPTA 2.5,5和10 mg·kg-1组。Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力;Nissl染色观察海马神经元细胞丢失情况;实时RT-PCR检测海马bax,caspase-3,bcl-2以及iNOS基因表达情况。同时采用PC12细胞建立氧糖剥夺(OGD)损伤模型,进一步探讨PPTA对神经元细胞的保护作用。结果 PPTA 5和10 mg·kg-1组可显著缩短大鼠的逃避潜伏期(P<0.05);以及显著减少术后大鼠海马CA1区神经元细胞丢失情况;PCR检测结果表明,术后给予PPTA,胱天蛋白酶3,bcl-2和bax以及iNOS的表达与I/R组比较均有显著性差异。PPTA对PC12细胞OGD损伤具有明显的保护作用,能够维持受损细胞的活力并减少LDH以及NO的释放;同时能够调节相关凋亡基因的表达,以及降低iNOS的基因表达,呈现出一定的浓度依赖性。结论 PPTA能显著改善术后大鼠的学习记忆能力,减轻海马神经元丢失情况,保护OGD对神经元细胞的损伤,提示可能是通过抗凋亡途径以及抑制iNOS-NO通路的表达来实现。