MCM7、Rb、c-MYC在肝细胞癌中的表达及其在基因通路中的作用

目的 探讨MCM7、Rb、c-MYC等基因在肝细胞癌中的表达及其在基因通路中的意义.方法 选取2013年1月至2015年8月邯郸市中心医院手术切除的60例原发性肝细胞癌组织进行免疫组化染色,分析MCM7、Rb、c-MYC等基因在肝细胞癌中的表达情况.结果 MCM7蛋白仅在肝细胞癌组织(73.3%)中表达,显著高于正常肝组织和肝硬化组织(P<0.05);Rb蛋白在肝硬化组织(53.3%)和肝细胞癌组织(58.3%)中表达,两者阳性率之间无统计学差异(P>0.05);肝细胞癌组织(70.0%)中c-MYC蛋白阳性率显著高于肝硬化组织(35.0%)(P<0.05).MCM7蛋白的表达与肿瘤直径、AFP、组织分化程度和临床分期有关(P<0.05),而与病灶数、是否转移及HBsAg是否阳性无关(P>0.05);Rb蛋白的表达仅与肿瘤组织分化程度有关(P<0.05);c-MYC蛋白表达与肿瘤组织分化程度和是否转移有关(P<0.05).MCM7蛋白和Rb阳性率呈显著负相关(γ=-0.712,P=0.038;γ=-0.664,P=0.018).结论 肝细胞癌的发生是多基因多通路相互作用的结果,多种调控蛋白的异常共同导致肿瘤的发生.     

生长激素受体mRNA在肝细胞癌和癌旁肝硬化组织中的表达

背景与目的:正常肝组织富含生长激素受体mRNA,但在肝细胞癌、癌旁肝硬化组织中生长激素受体mRNA的表达情况不详,因此,本文旨在探讨肝癌组织、癌旁肝硬化组织中生长激素受体mRNA的表达情况。方法:采用逆转录-聚合酶链反应方法检测37例肝癌患者肝癌组织、癌旁肝硬化组织中生长激素受体mRNA的表达。结果:肝癌组织生长激素受体mRNA表达率(30/37,81.0%)较癌旁肝硬化组织的表达率(32/32,100%)低(P<0.05),未分化肝癌的表达率(1/4,20.0%)更低(P<0.5);癌旁肝硬化组织的生长激素受体mRNA的表达量犤积分光密度比值(riOD)为(30.77±8.24)%,n=32犦较正常对照肝组织的表达量犤riOD为(44.93±6.25)%,n=5犦少(P<0.05),重度肝硬化的表达量犤riOD为(21.90±4.72)%,n=8犦更少(P<0.05)。结论:生长激素受体mRNA的表达下调与肝癌的分化程度、癌旁肝硬化的严重程度有关。     

凋亡抑制基因 Survivin在肝癌细胞中的表达及其与PTEN、cyclin D1蛋白表达的关系

目的:探讨Survivin基因的表达在肝癌发生、发展中的作用及其与PTEN、cyclin D1蛋白表达的相互关系.方法:采用流式细胞术对肝细胞癌(48例)、癌旁肝硬化(32例)、肝硬化(6例)、正常肝组织(6例)Survivin、PTEN、cyclin D1基因蛋白的表达进行定量检测.结果:Survivin和cyclin D1蛋白表达的FI值明显高于癌旁组织、肝硬化和正常肝组织,而肝细胞癌的PTEN蛋白的FI值明显低于癌旁组织、肝硬化和正常肝组织.Survivin和PTEN蛋白的表达量与分化程度、预后有关,与肿瘤大小、门静脉癌栓、肝内转移无关.随着肿瘤恶性程度加重,Survivin与PTEN蛋白表达呈显著负相关;Survivin蛋白与cyclin D1蛋白表达之间呈显著正相关.结论:Survivin、PTEN及cyclin D1基因在肝细胞癌的发生、发展中起着不同的作用,联合检测Survivin和PTEN对判定肝细胞癌预后可提供一定的依据.     

肝细胞癌中Lumican和Parkin的表达及意义

目的探讨肝细胞癌组织中Lumican蛋白及Parkin蛋白的表达及意义,并分析两者的相关性。方法应用免疫组织化学S-P法检测62例肝癌患者癌组织及62例癌旁组织中Lumican及Parkin蛋白的表达并分析其与临床病理因素之间的关系。结果 (1)肝癌组织中Lumican、Parkin的阳性表达率分别为35.5%、32.3%,与癌旁组织的阳性表达率比较(66.1%、72.6%),差异具有统计学意义(P<0.05);(2)Lumican蛋白的表达与Edmondson分级及是否伴有门静脉癌栓相关(P<0.05),而与性别、肿瘤大小、HBsAg、肝硬化和AFP无关(P>0.05);(3)Parkin蛋白的表达与患者肝癌Edmondson分级、AFP水平、是否伴有门静脉癌栓相关(P<0.05),而与性别、肿瘤大小、HBsAg和肝硬化无关(P>0.05);(4)Lumican与Parkin呈正相关(r=0.450;P<0.05)。结论 Lumican与Parkin蛋白在肝细胞癌组织中表达率均较低,可能与肝癌的发生、发展有关,联合检测两者对肝癌的诊断和预后有着重要意义,有望成为肝癌治疗的新靶点。     

人醛氧化酶蛋白在肝癌中的表达及其临床意义

目的:探讨人醛氧化酶(human aldehyde oxidase, hAOX)蛋白在肝癌细胞系、肝癌组织、癌旁肝组织、肝硬化及正常肝组织中的表达及其临床意义.方法:采用Western印迹法和免疫组织化学法检测hAOX蛋白在7个肝癌细胞系、2个永生化肝细胞系、10例正常肝、12例肝硬化、57例肝癌及癌旁肝组织中的表达差异,分析其表达差异的临床意义.结果:Western印迹法检测结果表明,hAOX蛋白在MHCC-LM3、Hep3B、Huh-7和BEL-7402肝癌细胞系以及人永生化肝细胞系L-02和Chang's liver等6个细胞系中均有较高表达,在MHCC- 97L、 HepG2和SMMC-7721细胞中则为低表达.免疫组织化学检测发现,hAOX在正常肝、肝硬化组织和癌旁肝组织中高表达,在癌旁肝组织中的表达较匹配肝癌组织的高(P<0.001).Western印迹法检测结果提示癌旁肝组织中hAOX表达明显高于肝癌组织.hAOX表达与肝癌患者性别、年龄、血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)水平、乙肝表面抗原、肿瘤大小、病理学分级以及是否伴有肝硬化均无相关性(P>0.05),而与肿瘤血管侵犯和肿瘤生长方式有一定的相关性(P=0.053, P=0.011).结论:hAOX在正常肝、肝硬化、癌旁肝组织中高表达,而在肝癌组织中表达明显降低,其表达可能会影响肝癌的血管侵犯和肿瘤生长方式.     

环氧合酶-2 在肝细胞癌中的表达及其对肿瘤血管生成的影响

 目的 本研究通过检测肝细胞癌组织COX-2的表达,探讨COX-2与VEGF和MVD表达之间的关系,初步探讨COX-2在肝细胞癌血管生成的作用. 方法 应用免疫组化方法检测了45例肝细胞癌组织中COX-2和 VEGF、MVD的表达. 结果 肝癌、癌旁组织和正常肝组织中COX-2表达阳性率分别为73.3%、81.3%和100%.高分化癌组织中COX-2蛋白的表达显著高于中分化和低分化癌组织中的表达(P<0.05);癌组织中COX-2蛋白表达与年龄、性别、肿瘤大小、包膜、门静脉癌栓、AFP均无显著性差异(P>0.05).COX-2与VEGF表达和MVD有显著相关性(P<0.01,P<0.05). 结论 COX-2可通过增加VEGF的表达而促进肿瘤血管的生成.     

TUM2-PK在肝癌中的表达及临床意义

目的:研究肿瘤M2型丙酮酸激酶(TUM2-PK)在肝癌中的表达及其与肿瘤临床病理特征的关系。方法:RT-PCR法检测42例肝细胞肝癌组织及相应癌旁组织中TUM2-PK mRNA的表达并研究其与临床病理特征间的联系。结果:TUM2-PK mRNA在肝癌组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为83.33%(35/42)和57.14%(24/42),表达量为0.7230±0.6744和0.2594±0.2835,肝癌组织中TUM2-PK mRNA的阳性表达率及表达量显著高于癌旁组织(P<0.05)。TUM2-PK mRNA的表达与肝癌分化程度有关(P<0.05),而与肝癌的大小、门脉癌栓、淋巴转移、肝内转移、AFP水平及患者5年生存率无关(P>0.05)。结论:TUM2-PK mRNA的高表达提示肝癌的分化差。可作为评估肝癌恶性程度的生物学指标。     

肝癌组织中Raf激酶抑制蛋白和磷酸化Raf 激酶抑制蛋白的表达及其意义

 目的探讨Raf激酶抑制蛋白（Raf kinase inhibitor protein,RKIP）和磷酸化Raf激酶抑制蛋白（Phosphorylated raf kinase inhibitor protein,P-RKIP）在肝细胞癌中的表达及其临床意义。方法应用组织芯片和免疫组织化学方法检测RKIP蛋白和磷酸化的RKIP蛋白在72例肝细胞癌组织、50例癌旁肝组织及16例正常肝组织中的表达,并分析RKIP的表达与肝细胞癌临床病理学特征的关系。采用Western blot方法检测36例肝细胞癌、36例癌旁组织及12例正常肝组织中RKIP蛋白和磷酸化的RKIP蛋白的表达。结果免疫组化结果显示肝细胞癌、癌旁及正常肝组织中RKIP的阳性率分别为22.2％、86％、93.8％,P-RKIP为29.2％、84％、93.8％;肝癌组织中RKIP和P-RKIP的表达显著低于癌旁及正常肝组织,差异有统计学意义（P<0.05）,而且肝癌组织和癌旁肝组织中两者蛋白的表达均呈显著正相关（P=0.000,P=0.005）;RKIP和P-RKIP的表达均与肝癌有无肝内或淋巴结转移及分化程度有关（P<0.05）。Western blot结果显示肝癌组织中RKIP和P-RKIP的表达显著低于癌旁及正常肝组织。结论RKIP和 P-RKIP表达的减少或缺失与肝癌的发生发展、侵袭转移密切相关。     

肝细胞肝癌组织SATB1表达及其临床意义的研究

目的:探讨肝细胞肝癌(HCC)组织中SATB1的表达及其临床意义。方法:用RT-PCR方法和蛋白质印迹法检测40例HCC组织及对应的癌旁组织中SATB1的表达,并分析SATB1蛋白的表达程度与患者临床病理参数、术后复发与转移的关系。结果:HCC组织中SATB1蛋白的表达明显高于癌旁组织,P<0.001。癌组织中SATB1蛋白表达的高低与AFP、肿瘤大小、癌栓、病理分化、TNM分级、术后复发转移有关系,P<0.05;与性别、年龄、乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎抗体、肿瘤的数目、肝硬化和包膜无关,P>0.05。结论:SATB1蛋白的表达与HCC的复发转移有关,SATB1有望成为HCC复发与转移的一个新的预后指标。     

FAP-α和VEGF在卵巢癌组织中的表达及意义

目的 探讨纤维母细胞活化蛋白-α(FAP-α)、血管内皮生长因子(VEGF)在卵巢癌组织中的表达及意义。方法 回顾性分析83例卵巢癌患者临床资料。所有患者均开展手术治疗，采集肿瘤标本及癌旁标本，免疫组织化学检测标本中FAP-α、VEGF表达，比较肿瘤标本及癌旁标本中FAP-α、VEGF阳性表达水平，并分析FAP-α、VEGF表达与临床病理特征间的关系。结果 肿瘤标本FAP-α阳性率、VEGF阳性率高于癌旁标本，差异有统计学意义(P<0.05)。83例患者FAP-α低表达43例(+),高表达40例(++);FAP-α高表达患者低分化、Figo分期Ⅲ～Ⅳ期、浸润深度达浆膜、淋巴结转移占比高于FAP-α低表达患者，差异有统计学意义(P<0.05);VEGF阳性患者低分化、Figo分期Ⅲ～Ⅳ期、浸润深度达浆膜、淋巴结转移占比高于VEGF阴性患者，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 FAP-α、VEGF在卵巢癌组织中表达水平较高，且表达水平与分化程度、Figo分期、浸润深度及淋巴结转移关系密切，或可作为临床治疗新的靶点。     

MCM7蛋白在人大鼠树鼩肝癌组织中的表达和意义

  目的  应用跨种属策略研究MCM7蛋白在人、大鼠、树鼩3个不同种属肝癌、癌旁组织及正常肝组织中的表达,探讨MCM7与肝癌发生发展的关系及临床意义。  方法  应用Western blot及免疫组织化学技术检测MCM7蛋白在人、大鼠、树鼩的肝癌、癌旁组织及正常肝组织中的表达并进行临床病理因素分析。  结果  Western blot结果显示,MCM7蛋白在人和大鼠肝癌组织中的表达水平显著高于对应癌旁及正常肝组织（P均 < 0.05）,在树鼩肝癌组织中MCM7蛋白的表达水平亦高于其癌旁组织及正常肝组织,但差异无统计学意义（P均>0.05）。免疫组织化学结果显示,MCM7蛋白主要在细胞核中表达,其在人、大鼠、树鼩肝癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁及正常肝组织（P均 < 0.05）;MCM7蛋白的表达水平与患者肝癌分期、肝外转移及术后复发相关（P均 < 0.05）。而3种属的癌旁组织与正常肝组织相比,两种技术检测结果显示差异均无统计学意义（P均>0.05）。  结论  MCM7蛋白在肝癌发生发展中可能起着关键分子的作用,并与人肝癌的临床分期,肝外转移及术后复发密切相关,有可能成为肝癌治疗的新靶点。      

肝细胞癌组织中PTEN和p27Kip1及cyclinD1蛋白表达及临床意义

目的:研究肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中PTEN、p27Kip1和cyclinD1蛋白的表达及相互关系,初步探讨它们在肝细胞癌的发生发展中的生物学意义。方法:应用Elivision免疫纽化方法检测53例肝细胞癌组织及癌旁肝组织中PTEN、p27Kip1和cyclinD1蛋白表达。结果: 53例肝细胞癌组织中p27Kip1和cyclinD1蛋白表达的阳性率分别为65％和53％,均高于癌旁肝组织(x2=34．11,x2=29．05,P值均为0．000),肝细胞癌组织中PTEN蛋白表达的阳性率(57％)明显低于癌旁肝组织中的阳性率(96．2％)(x2=20．94, P=0．000),PTEN和cyclinD1蛋白表达与肿瘤大小、TNM分期和是否伴肝硬化无关;与组织分化程度、有无侵袭性呈显著相关(P值分别为0．014、0．003、0．026和0．042)。p27Kip1蛋白表达与肿瘤大小和是否伴肝硬化无关,与肝细胞癌组织分化程度、TNM分期和有无侵袭性呈显著相关(P值分别为0．000、0．008和0．001)。PTEN蛋白表达与p27Kip1和cyclinD1蛋白表达无相关性。结论: PTEN、p27Kip1和cyclinD蛋白在肝细胞癌的发生发展中发挥重要作用。PTEN、p27Kip1和cyclinD蛋白的联合检测对评估肝细胞癌的恶性程度有参考价值。     

FAP-1和Fas在子宫内膜癌中的表达及其临床意义

目的：研究Fas相关磷酸酯酶-1（FAP-1）和Fas在子宫内膜癌中的表达及其与临床病理特征间的关系。方法：采用S-P免疫组化法检测63例子宫内膜癌中FAP-1、Fas的表达,同时检测13例子宫内膜非典型增生及20例正常子宫内膜组织作为对照。结果：FAP-1在子宫内膜癌中表达率为71.4%,明显高于正常子宫内膜中的表达率25%（P〈0.05）。Fas在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中表达率分别为52.4%和85%（P〈0.05）。Fas蛋白表达阳性、阴性的子宫内膜癌组织中,FAP-1表达阳性率分别为51.5%、93.3%,两者间呈明显负相关（P〈0.05）。FAP-1的阳性表达与子宫内膜癌临床分期、组织分级有关（P〈0.05）,与年龄、肌层浸润及淋巴结转移无关（P〉0.05）;Fas的阳性表达与子宫内膜癌组织分级、淋巴结转移有关（P〈0.05）,与年龄、临床分期及肌层浸润无关（P〉0.05）。结论：FAP-1抵抗Fas介导的细胞凋亡在子宫内膜癌的发生、发展中起一定作用,FAP-1与Fas可作为判断子宫内膜癌生物学行为的参考指标,为子宫内膜癌的基因治疗提供参考依据。     

肝细胞癌中Bag-1、血管内皮生长因子的表达及其与预后的关系

 目的　检测Bag-1、血管内皮生长因子（VEGF）分别在肝细胞癌（简称：肝癌）组织、癌旁肝组织及正常肝组织中的表达,探讨它们与肝癌及其预后的关系。方法　采用免疫组织化学SP法检测Bag-1和VEGF在60例肝癌患者癌标本、30例癌旁肝组织、14例正常肝组织标本中的表达,并对其临床病理特点进行分析。结果　Bag-1、VEGF的表达率在肝癌组织中最高,分别为80.0 %（48／60）及73.3 %（44／60）,并且与癌旁肝组织[46.7 %（14／30）、43.3 %（13／30）]、正常肝组织[28.6 %（4／14）、21.4 %（3／14）]比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。Bag-1、VEGF的表达与肝癌的分期、有无淋巴结转移、有无癌栓形成、有无包膜形成有相关性（P＜0.05）,而与患者性别、年龄、肿瘤分级、肿瘤大小及甲胎蛋白（AFP）水平等因素无相关性（P＞0.05）。Bag-1和VEGF在肝癌标本中同时阳性40例,同时阴性8例,二者在肝癌组织中的表达呈正相关（P＜0.05）。Bag-1、VEGF阳性表达组患者1、2年生存率低于阴性组患者,阳性组患者的生存时间明显低于阴性组患者（P＜0.05）。结论　Bag-1、VEGF与肝癌生物学特性密切相关,和肝癌患者预后密切相关。     

Sema4C在喉鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的:探讨脑信号蛋白4C(Sema4C)在喉鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法:采用免疫组化EnVision 二步法检测82例喉鳞状细胞癌及癌旁正常喉黏膜组织中Sema4C和微小染色体维持蛋白2(MCM2)蛋白的表达水平,用D2-40标记淋巴管,计数微淋巴管密度(LMVD),分析三者的表达水平变化与临床病理指标的关系。结果:Sema4C、MCM2蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的阳性率分别为60%(49/82)及98%(80/82),均显著高于癌旁正常喉黏膜组织(P<0.01),LMVD在癌及癌旁喉黏膜中的差别无统计学意义(P=0.077); Sema4C、MCM2的表达水平与颈部淋巴结转移有关,与年龄及肿瘤T分级无显著相关。Sema4C、MCM2 蛋白表达水平和LMVD,两两间均呈正相关关系(P<均0.05)。结论:Sema4C的异常高表达与喉鳞状细胞癌的发生发展、转移及预后有关,提示Sema4C有可能成为判断喉鳞状细胞癌生物学行为及预后指标。     

NRP-1在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的 明确神经纤毛蛋白质1(NRP-1)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达情况及其临床意义.方法 收集151例HCC组织和89例正常肝组织标本,应用免疫组织化学染色法检测其中NRP-1蛋白的表达情况.单因素及多因素统计分析NRP-1表达与HCC患者临床病理指标的关系,并以生存分析比较不同NRP-1表达水平患者的生存情况.结果 失访或随访期间因非HCC疾病死亡的病例共11例,最终进入研究的有效病例为140例.NRP-1在HCC组织和正常肝组织中的阳性表达率分别为65.00％、35.96％,差异有统计学意义(x2=18.843,P＜0.001).按照NRP-1的表达水平,将140例HCC患者分为阴性表达组49例,阳性表达组91例.单因素分析结果显示,NRP-1在HCC中的表达与肿瘤数目(x22=8.025,P=0.005)、TNM分期(x2=26.467,P ＜0.001)、分化程度(x2=15.296,P ＜0.001)、门脉侵袭(x2=9.054,P=0.003)以及肝静脉侵袭(x2=5.928,P=0.015)有关.多因素分析结果显示,TNM分期(OR=1.392,95％ CI为1.121 ～1.730,x2=8.950,P=0.003)、分化程度(OR=1.469,95％ CI为1.102 ～1.958,x2 =6.862,P =0.009)、门脉侵袭(OR=1.829,95％ CI为1.157 ～ 2.893,x2=6.665,P=0.010)及肝静脉侵袭(OR =2.161,95％ CI为1.172 ～3.987,x2=6.084,P=0.014)是NRP-1表达的影响因素.NRP-1阴性组HCC患者的中位生存时间显著长于阳性组患者(44个月∶23个月),差异有统计学意义(x2=21.922,P＜0.001).结论 NRP-1在HCC组织中呈过表达趋势,与HCC的恶性程度密切相关,其表达增高提示患者预后不良.     

Ang-1和Ang-2在肝细胞癌组织中的表达及其与血管生成的关系

目的 探讨Ang-1和Ang-2在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系.方法 使用免疫组化法检测36例HCC组织和5例正常肝组织中,Ang-1和Ang-2的表达,检测HCC组织的微血管密度(MVD).结果 5例正常肝组织中,Ang-1阳性者3例,Ang-2均为阴性.HCC组织中Ang-2阳性率为83.33％,明显高于癌旁组织的33.33％ (P ＜0.05).Ang-2表达与MVD有关,Ang-2阳性者MVD为28.48±10.36,阴性者为14.22±11.02,差异有统计学意义(P＜0.05).Ang-2表达与血管侵犯、侵袭转移程度有关(P＜0.05).结论 HCC组织中Ang-2高表达,且与肿瘤血管生成有关,检测Ang-2有助于判断肿瘤侵袭转移能力,但不能反映恶性程度.     

肝癌组织中人白细胞共同抗原和凋亡相关基因Fas、bcl-2及bax的表达及意义

目的:探讨人白细胞抗原(HLADR抗原)和凋亡相关基因Fas、bcl2及bax在肝癌中表达的意义。方法:应用免疫组化方法研究40例肝癌组织中HLADR、Fas、bcl2及bax的表达。结果:40例肝细胞癌中18例HLADR阳性,阳性率45%,癌旁肝细胞阴性。6例癌细胞Fas阳性,阳性率为15%,癌旁细胞20例阳性,阳性率500%。癌细胞bcl2阳性6例,阳性率为15%,8例癌旁细胞阳性,阳性率为20%。癌细胞bax阳性8例,阳性率为20%,癌旁细胞25例阳性,阳性率为625%。结论:提示HLADR异常表达与肝细胞癌变有关;Fas可能不是引起肝癌细胞凋亡的主要途径;bcl2和bax的变化可能影响肝细胞的凋亡状态,在肝癌发生中可能起一定作用。     

肝细胞癌组织中抑癌基因PTEN与pAkt的表达及其相关性研究

目的:研究第10号染色体上缺失的抑癌基因与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(phosphataseandtensinhomlogdeletedonchromosometenprotein,PTEN)与磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(phosphoserine/threonineproteinkinaseB,pAkt)在肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)中蛋白的表达、意义及两者相关性。方法:采用免疫组织化学法检测71例HCC及癌旁组织中PTEN和pAkt的表达。结果:1)HCC中PTEN蛋白阳性率(36.6%,26/71)明显低于癌旁肝组织(93.0%,66/71),P=0.000,且随HCC恶性程度升高而显著下降;2)pAkt在HCC中表达率(80.3%,57/71)明显高于癌旁肝组织(29.6%,21/71),P=0.000,且其表达率随HCC恶性程度升高而增加;3)HCC中PTEN与pAkt表达呈负相关,r=-0.307,P=0.009。结论:PTEN蛋白低表达不能有效抑制pAkt异常激活,从而对HCC发生、发展起重要作用。