银杏内酯B对神经细胞活性影响的实验研究

目的 研究不同剂量银杏内酯B对低血清培养体系中神经细胞活性的影响。方法 将新生Wister大鼠大脑皮层神经细胞分别培养在含10％小牛血清(对照组)、5％小牛血清(低血清组)、5％小牛血清 0．1mg／L银杏内酯B(0．1mg／L银杏内酯组)、5％小牛血清 1mg／L银杏内酯B(1mg／L银杏内酯组)、5％小牛血清 10mg／L银杏内酯B(10mg／L银杏内酯组)、5％小牛血清 40mg／L银杏内酯B(40mg／L银杏内酯组)、5％小牛血清 100mg／L银杏内酯B(100mg／L银杏内酯组)的DMEM培养液中，通过MTT比色法，分别检测各组神经细胞的活性。结果 培养第2、5、8天与对照组比较，低血清组、0.1mg／L和1mg／L银杏内酯组神经细胞活性均明显下降；与低血清组比较，0．1mg／L和1mg／L银杏内酯组细胞活性均无明显改变；而10mg／L、40mg／L和100mg／L银杏内酯组细胞的活性均明显升高。结论 银杏内酯B在10～100mg／L浓度范围内，能增强5％小牛血清体系中的神经细胞活性。     

银杏内酯降低内毒素引起的小肠平滑肌电紊乱

银杏内酯Ａ(ＧｉｎｋｇｏｌｉｄｅＡ)是从中药银杏叶中提取的主要活性成分之一 ,具有广泛的生物学效应。近年来的研究表明 ,银杏内酯可影响肾上腺皮质激素的代谢和对抗由血小板活性因子 (ｐｌａｔｅｌｅｔａｃｔｉｖａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＰＡＦ)引起的胃损伤和肠局部缺血引起的黏膜损伤 ,并可逆转内毒素诱导的支气管对组胺的高反应性 ,抑制多种过敏反应[1 2 ] 。为了解银杏内酯对内毒素介导的多种器官损害过程的影响 ,我们以大鼠小肠平滑肌电活动为指标 ,观察银杏内酯Ａ对内毒素所致小肠运动功能损害的抑制作用。材料和方法一、实验动物…     

银杏内酯A对海马神经细胞凋亡保护作用的研究

目的探讨银杏内酯A(GKA)对凋亡海马神经细胞的影响及机制。方法用MTT法分析GKA对原代培养海马神经细胞的毒性作用,用浓度分别为0.1、1、10μmol/L的GKA预处理神经细胞6h,再用50μmol/LSNP孵育神经细胞24h;用流式细胞仪分析各组凋亡情况,用RT-PCR和Westernblot分析bcl-2、bax和cpp32 mRNA和蛋白表达水平,用试剂盒测定各组Cpp32活性。结果流式细胞术结果显示GKA实验组凋亡率均显著低于SNP组(P<0.01);RT-PCR结果和WesternBlot结果表明,GKA可以对抗SNP,上调bcl-2表达,下调bax表达,不影响Cpp32表达,但能显著降低Cpp32的活性(P<0.01)。结论GKA可以对抗SNP,对海马神经细胞有保护作用。     

银杏苦内酯B对重症急性胰腺炎大鼠血浆细胞因子的影响

目的:观察重症急性胰腺炎(SAP)大鼠血浆中TNF-α,血小板活化因子(PAF),IL-10, IL-12,sTNFR的水平变化及其银杏苦内酯B(BN52021)的影响.方法:实验选用Wistar♂大鼠45只,随机分成SAP模型组(SAP,n=15),BN52021治疗组(BN,n=15)和阴性对照组(NC,n=15)．前两组以50 g／L牛磺胆酸钠逆行注入主胰管制成SAP模型,NC组开腹后仅翻动十二指肠并触摸胰腺数次关腹．制模15 min后,SAP组经股静脉以5 mL／mg注射生理盐水;BN组以BN52021(5 mg／kg)代替生理盐水静注．制模后分别于1,6,12 h采血,应用ELISA技术测定血浆TNF-α,PAF,IL-10,IL-12和sTNFR水平．结果:SAP组,NC组和BN组大鼠血浆TNF-α和PAF水平相比,具有显著性差异,SAP组(746．2±374．1,82．5±35．4 ng／L)显著高于NC组(385．1±86．3．1．1±1．9 ng／L),BN组(503．7±177．9,39．9±29．9 ng／L)显著低于SAP组(P<0．05)．血浆sTNFR水平三组相比存在明显差异,SAP组(488．7±363．8 ng／L)显著高于NC组(50．0±21．0 ng／L),BN组(883．4±552．5 ng／L)显著高于SAP组(488．7±363．8 ng／L)(P<0．05)．血浆IL-12三组相比存在明显差异,SAP组(97．1±55．9 ng／L)显著高于NC组(20．4±19．4 ng／L),BN组在1 h时相点(133．5±33．4 ng／L)显著高于SAP组(55．9±14．7 ng／L)(P<0．05)．血浆IL-10三组相比不存在明显差异(P>0．05)．结论:SAP大鼠促炎细胞因子和抗炎细胞因子均显著升高．BN52021能降低血浆促炎因子含量,提高IL-12和细胞因子拮抗剂sTNFR含量．     

不同浓度的金属硫蛋白对离体豚鼠乳头肌缺氧、复氧电生理特性的影响

为探讨金属硫蛋白（MT）对豚鼠乳头肌缺血再灌注损伤所致心律失常的影响，利用标准玻璃微电极技术，采用缺氧及复氧豚鼠乳头肌模型，模拟体内缺血再灌注损伤，观察不同浓度MT对豚鼠乳头肌电生理特性的影响。结果显示低浓度的MT（0．002mmol／L）对正常及缺氧和复氧豚鼠乳头肌的动作电位（AP）有关参数及自律性均无影响；中等浓度的MT（0．02mmol／L）仅使正常乳头肌的AP复极达50％时程（APD50）缩短24％（P＜0．05），但使缺氧乳头肌的AP复极达20％时程（APD20）、APD50和AP复极达90％时程（APD90）分别缩短68％、56％和43％（P均＜0．01），并使静息电位（RP）、AP幅值（APA）和0相最大上升速率（Vmax）分别增加30％、30％和45％（P均＜0．01）；高浓度的MT（0．1mmol／L）使正常豚鼠乳头肌的APD20、APD50和APD90分别缩短57％、54％和50％（P均＜0．01），并且RP、APA及Vmax分别下降22％（P＜0．05）、28％（P＜0．01）和29％（P＜0．05），而使缺氧豚鼠乳头肌的APD20、APD50和APD90分别延长92％、78％和50％（P均＜0．01），对RP、APA及Vmax无明显影响。在复氧期间，0．02mmol／L的MT可使自律性的发生率从77．8％降至55．6％（P＜0．05）；而0．1mmol／L的MT则使自律性的发生率从77.8％降至22．2％（P     

传统抗疟疾中药对豚鼠心肌细胞电生理影响的研究

过早搏动是人群中常见病之一,其发病率不断上升,现已成为影响人类生活质量甚至导致死亡的重要因素之一.中医药在治疗心律失常上因其毒副作用小、安全系数大、重视整体调节而显示出优势.我们在既往研究中发现传统抗疟疾中药黄花蒿、常山有防治快速性心律失常,尤其是抗过早搏动的作用[1],因而希望通过对豚鼠心肌细胞电生理影响的研究从微观来探讨其作用机制.     

银杏内酯B对心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的观察银杏内酯B对心肌缺血再灌注(MI/R)损伤的保护作用,探讨其作用机制。方法采用冠状动脉结扎使心肌缺血30min再灌注2h的方法建立MI/R损伤大鼠模型,按随机数字表法分为模型组、银杏内酯B三个剂量组(2、4、8mg/kg)、假手术组(n=10),于术前1h和再灌注即刻分别进行尾静脉注射给药。取血清,测定CK、LDH、SOD活性及MDA含量;取心脏,测定心肌梗死面积。结果银杏内酯B高剂量可明显缩小MI/R损伤大鼠的心肌梗死面积,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05);银杏内酯B高、中剂量可显著降低血清CK和LDH活性(P0.05或P0.01),低剂量可明显降低血清CK活力(P0.05);银杏内酯B各剂量组的血清SOD活性显著升高(P0.05或P0.01),血清MDA含量则明显降低(P0.01)。结论银杏内酯B预处理对MI/R损伤的保护作用与其减少自由基的产生、抑制脂质过氧化反应等有关。     

银杏苦内酯B对大鼠常压低氧性肺动脉高压的影响

银杏苦内酯Ｂ对大鼠常压低氧性肺动脉高压的影响程德云，陈文彬低氧血症可引起血小板激活因子（ＰＡＦ）合成明显增多，长期给动物应用ＰＡＦ可导致肺动脉高压和肺血管重建。应用特异性ＰＡＦ受体拮抗剂有助于深入了解ＰＡＦ在肺动脉高压中的作用，并探讨了ＰＡＦ受体拮抗...     

普罗帕酮、维拉帕米对豚鼠乳头肌延迟后除极和触发电活动的影响

应用标准玻璃微电极技术，研究哇巴因诱发豚鼠心室乳头肌的延迟后除极（ＤＡＤ）和触发电活动（ＴＡ）的变化规律及特点；探讨普罗帕酮和维拉帕米对ＤＡＤ和ＴＡ的影响。结果表明：①心室肌细胞在高浓度Ｃａ２＋条件下加哇巴因灌流时可以出现ＤＡＤ及ＴＡ，ＴＡ的诱发率为７７．８％（７／９）。②心室肌细胞诱发的ＤＡＤ幅度（ＤＡＤ－Ａｍｐ）、ＤＡＤ偶联间期（ＤＡＤ－Ｃ）和ＤＡＤ升支上升速率（ＤＡＤ－ｄｖ／ｄｔ）呈明显的频率依赖性，即刺激频率愈快，ＤＡＤ－Ａｍｐ愈高、ＤＡＤ－ｄｖ／ｄｔ愈快，ＤＡＤ－Ｃ则愈短。③上述两种抗心律失常药物均通过降低ＤＡＤ－Ａｍｐ、减慢ＤＡＤ－ｄｖ／ｄｔ和延长ＤＡＤ－Ｃ而发挥其抗触发性心律失常作用；两者对哇巴因诱发的ＤＡＤ和ＴＡ的抑制作用无显著性差异，在普罗帕酮或维拉帕米的作用下，哇巴因对ＴＡ的诱发率分别为３３．３％（３／９）和２２．２％（２／９），与哇巴因的诱发率（高钙条件下，７７．８％）比较Ｐ＜０．０１。     

银杏内酯B对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的评价银杏内酯B对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响。方法选用8周龄雄性ApoE-/-小鼠,给予高脂饮食喂养。将动物分为模型组、银杏内酯B(GB)组和阿司匹林(ASA)组。8周后处死小鼠,进行血脂测定和血浆炎症蛋白ELISA测定,免疫组织化学法分析主动脉斑块。用健康人血小板分析血小板聚集,使用检测血小板聚集仪检测血小板聚集。Western Blotting法分析Akt磷酸化。结果银杏内酯B组小鼠血浆趋化因子RANTES水平下降了47%,阿司匹林组下降了69%,与模型组比较差异有显著性。与模型组比较,血小板第4因子(PF4)水平银杏内酯B组下降了45%(P<0.05),阿司匹林组下降了11%(P>0.05)。主动脉油红O染色显示与模型组比,银杏内酯B组脂质沉积减少40%,阿司匹林组减少31%,差异有统计学意义。巨噬细胞染色表明银杏内酯B组和阿司匹林组主动脉斑块处巨噬细胞浸润比模型组分别减少51%和11%,差异均有统计学意义。斑块局部炎症蛋白分析表明,与模型组比较,血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达在银杏内酯B组减少69%,阿司匹林组减少32%,差异有统计学意义。银杏内酯B组RANT...     

严重烧伤早期心功能抑制的体液机制Ⅱ烧伤血浆毒性物质对离体豚鼠乳头肌电活动的影响

作者观察了严重早期烧伤及假伤（正常）血浆提取物（分别以ＢＰＴ及ＮＰＥ表示）对离体灌流正常豚鼠乳头肌细胞电活动的影响。结果发现:高、中、低３种浓度的ＢＰＴ，①均可使静息电位减小，其时程曲线略呈“Ｓ”形，其潜伏期有明显的浓度依赖性；②均可引起乳头肌节律不整的自发兴奋；③高浓度ＢＰＴ明显使动作电位幅度（ＡＰＡ）降低，中、低浓度的ＢＰＴ对ＡＰＡ及最大除极速度均无明显影响；④ＢＰＴ对复极化时程ＡＰＤ１０的影响不大，但使ＡＰＤ５０及ＡＰＤ９０显著延长，使动作电位波形在复极化初期出现明显的凹陷和平台期延长；⑤高浓度ＮＰＥ有相当于低浓度ＢＰＴ的生物效应。提示ＢＰＴ可能直接影响心肌细胞Ｋ＋、Ｃａ２＋的转运，对Ｎａ＋的离子转运影响较小     

直流电击对豚鼠心室肌电生理特性的影响

直流电击(DCS)是目前除颤的唯一有效手段,但其机理未明。有认为电击使颤动心室中除处于绝对不应期心肌外的所有其它可兴奋心肌同时除极,从而使全部心室肌均处于绝对不应期而除颤。但该论点至今尚缺乏实验依据。本实验采用临床应用的不同DCS强度,观察DCS落于心室肌的不同时相对跨膜电位各参数及兴奋性的影响。     

严重烧伤早期心功能抑制的体液机制Ⅱ烧伤血浆毒性物质对离体豚鼠乳头肌电活动的影响

作者观察了严重早期烧伤及假伤（正常）血浆提取物（分别以ＢＰＴ及ＮＰＥ表示）对离体灌流正常豚鼠乳头肌细胞电活动的影响。结果发现：高、中、低３种浓度的ＢＰＴ，①均可使静息电位减小，其时程曲线略呈“Ｓ”形，其潜伏期有明显的浓度依赖性；②均可引起乳头肌节律不整的自发兴奋；③高浓度ＢＰＴ明显使动作电位幅度（ＡＰＡ）降低，中、低浓度的ＢＰＴ对ＡＰＡ及最大除极速度均无明显影响；④ＢＰＴ对复极化时程ＡＰＤ１０的影响不大，但使ＡＰＤ５０及ＡＰＤ９０显著延长，使动作电位波形在复极化初期出现明显的凹陷和平台期延长；⑤高浓度ＮＰＥ有相当于低浓度ＢＰＴ的生物效应。提示ＢＰＴ可能直接影响心肌细胞Ｋ＋、Ｃａ２＋的转运，对Ｎａ＋的离子转运影响较小     

香烟对气道上皮细胞表达4-羟基壬烯醛的影响以及银杏内酯B的干预作用

目的探讨香烟烟雾浓缩物(CSC)对人类支气管上皮细胞系(16-HBE)表达4-羟基壬烯醛(4-HNE)的影响以及银杏内酯 B 的干预作用;并观察4-HNE 对中性粒细胞的趋化作用。方法采用免疫细胞化学和 Western blot 方法。(1)不同浓度(1、10μg/ml CSC)CSC 刺激16-HBE 细胞4h后4-HNE 加成蛋白的表达水平,设正常对照组(无血清培养基代替 CSC);(2)10μg/ml CSC 刺激不同时间(1、4、8、12、24、30h)后,16-HBE 中4-HNE 加成蛋白的水平,设正常对照组(无血清培养基代替 CSC);(3)用100μmol/L 银杏内酯 B 孵育16-HBE 后,CSC 刺激1、4、8、12h,检测4-HNE 加成蛋白表达的变化,设正常对照组(无银杏内酯 B 孵育);(4)以趋化实验检测0.1、1、10μmol/L 4-HNE 对兔中性粒细胞的趋化作用。结果(1)1、10μg/ml CSC 刺激4h 后,16-HBE 细胞表达4-HNE 加成蛋白水平(免疫化学为2.12±0.38、2.69±0.42,Western blot 为100.2±6.3、72.3±6.1)均较正常对照组显著增加(免疫化学为1.25±0.37,Western blot 为122.4±4.2,P 均<0.01)。(2)10μg/ml CSC 刺激1、4、8、12、24、30h后,16-HBE 细胞表达4-HNE 加成蛋白(免疫化学为2.67±0.46、2.69±0.42、2.71±0.48、2.72±0.56、2.93±0.11、2.92±0.20,Western blot 为73.2±8.3,72.3±6.4,72.6±9.2,71.5±8.1,54.4±3.6,56.7±4.4)较正常对照组(免疫化学为1.25±0.35,Western blot 为122.4±4.1)显著增加(P 均<0.01),刺激24h 和30h,细胞内4-HNE 加成蛋白较其他时间点增加。(3)50、100μmol/L 银杏内酯 B 孵育后再以 CSC 刺激时,16-HBE 细胞内4-HNE 加成蛋白表达水平(Westernblot 为84.6±4.4、101.2±4.4)明显低于未以内酯 B 孵育组,但高于正常对照组(Western blot 为72.5±6.4,P 均<0.01)。(4)0.1、1、10μmol/L 4-HNE 对兔中性粒细胞趋化数目(92±12、104±16、131±12)较正常对照组(72±12)均显著增加,10 μmol/L 4-HNE 趋化数目显著高于0.1和1μmol/L4-HNE,差异均有统计学意义(P 均<0.01)。结论香烟所引起肺中性粒细胞趋化的结果可能与其促使4-HNE 产生增加有关,银杏内酯 B 可以抑制 CSC 对4-HNE 的诱生。     

心肌肥厚与心力衰竭的细胞电生理

心肌肥厚时，心肌细胞的膜电容增大；Ｌ型Ｃａ＾２＋流和Ｔ型Ｃａ＾２＋流等内向电流增大；延迟整流Ｋ＾＋流和瞬时外向电流等外向电流减小，使心肌细胞动作电位的持时延长。Ｌ型钙通道失活电压向正的方向移动，Ｃａ＾２＋窗流增大，使早期后除极化增强。Ｎａ＾＋－Ｃａ＾２＋交换电流加大，使迟发后除极化增强。     

心肌M细胞的电生理特性和临床意义

心肌Ｍ细胞的电生理特性和临床意义鲁端Ｍ细胞（ｍｉｄｍｙｏｃａｒｄｉａｌｃｅｌｓ）是指位于心室肌中层一组独特的细胞亚群，近年来被发现其与其他部位的心室肌细胞有着完全不同的电生理特性，因而受到众多学者的关注［１～４］。自从１９９１年Ｓｉｃｏｕｒｉ和Ａｎｔ...     

银杏内酯B对老龄大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤炎症反应的作用

目的 研究银杏内酯B对老龄大鼠局灶性脑缺血-再灌注脑损伤炎症反应的作用.方法 分别给予老龄SD大鼠生理盐水、尼莫地平(4 mg/kg)或银杏内酯B(2.5、5.0、10 mg/kg)处理3d后建立大脑中动脉局灶性缺血-再灌注模型,37 h后分别测量脑组织含水量、相关细胞黏附分子(ICAM)-1、E-selectin及炎症因子IL-6、IL-1 β、TNF-α 的表达水平.结果 银杏内酯B各剂量组可显著降低脑组织含水量,降低IL-6、IL-1β和TNF-α、ICAM-1和E-selectin的表达水平(P＜0.01或P＜0.05),且呈明显剂量-效应依赖关系.结论 银杏内酯B对老龄大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤具有修复性保护作用,可减轻脑水肿症状,降低炎症介质的含量,减缓炎症反应的发生发展过程,是临床治疗相关脑血管疾病的重要潜在药物.     

窦房结细胞电生理研究进展

窦房结(SAN)作为心脏的正常起搏点,其病变直接表现为心电生理功能的异常,尽管窦房结细胞本身氧耗低,代谢不活跃,但缺血缺氧仍可能是其主要的致病因素之一。窦房结疾病根据病因可分为功能性(外来性)和器质性(内在性)疾病[1]。前者主要由于药物、激素及自主神经因素引起SAN功能失