大鼠海马内注射β淀粉样蛋白促进神经细胞增殖

目的观察脑内β淀粉样蛋白(β-amyloid,AB)沉积对神经细胞增殖的影响。方法将Aβ_(1-42)定位注射至大鼠双侧海马,对照组注射反序列Aβ_(42-1)或PBS。腹腔注射Brdu标记增殖细胞。用免疫组化和免疫荧光检测溴脱氧尿苷(Bromodeoxyuridine,Brdu)标记细胞和doublecortin(DCX)阳性细胞。结果海马内注射Aβ_(1- 42)后引起海马齿状回颗粒下层(subgranular zone,SGZ)和侧脑室下层(subventricular zone,SVZ)Brdu标记细胞及DCX阳性细胞显著增加(P<0.01)。双免疫荧光分析表明许多Brdu标记细胞表达DCX。结论Aβ沉积可以促进脑内的神经细胞增殖,提示这种现象可能为阿尔茨海默病的一种代偿性应答。促进神经细胞增殖的措施对于治疗阿尔茨海默病具有重要的价值。     

小胶质细胞在阿尔茨海默病中的作用及潜在的应用价值

<正>阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是神经退行性疾病的一种。全世界的痴呆症患者数约为5 000万，每年新增的痴呆症人数约为1 000万，AD是痴呆症中患病率最高的疾病，AD患者占痴呆症患者的60%～80%^[1]。AD的发病机制目前尚不明确，其病理特征主要为脑内β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)聚集成的淀粉样斑块沉积和τ蛋白(tau protein)过度磷酸化产生的神经纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs)，     

阿尔茨海默病中药治疗研究进展

目前阿尔茨海默病(AD)病因不明确,发病机制复杂,西药治疗效果不甚理想.而中药在治疗老年疾病这一方面具有较丰富的经验.中药具有多靶点、多环节、多方式且不良不应少的特点,现已成为治疗阿尔茨海默病的研究热点.中药主要通过改善胆碱能神经功能、抑制Aβ聚集、抗氧化和清除自由基、降低Tau蛋白的过度磷酸化等多种机制来治疗阿尔茨海默病.     

Alzheimer病患者和大鼠脑内早老蛋白-1的分布

用免疫组化方法和原位杂交观察散发性阿尔茨海默病 (Sporadic Alzheimer' s disease)病人和老年对照 ,以及成年大鼠脑组织内的早老蛋白 -1(Presenilin-1,PS1)分布。结果观察到 PS1在脑内广泛分布 ,其中小脑的 Purkinje细胞、皮层的第 、 层细胞、内嗅皮层的第 层、海马的锥体细胞层和颗粒细胞层、黑质等结构 PS1表达较高。在大鼠和正常对照人脑内大多数 PS1阳性神经元染色呈点状分布于胞浆内 ;而阿尔茨海默病人脑内有许多 PS1阳性神经元为均质染色并且其中有些呈神经原纤维缠结状 ,其次有大量各型 PS1阳性老年斑 ,和少量 PS1阳性胶质细胞。结果提示 PS1可能参与散发性阿尔茨海默病脑病理改变     

小胶质细胞吞噬在阿尔茨海默病不同阶段的作用及其机制

阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)作为一种以进行性认知功能障碍和行为损害为主要临床表现的进行性中枢神经系统(central nervous system, CNS)变性疾病,在老龄化加速的现代社会越来越受到重视[1-2].AD的主要病理表现为β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)...     

抗阿尔茨海默病Aβ人-鼠嵌合抗体基因的真核载体构建和表达

目的 通过基因工程抗体技术构建和表达抗β-淀粉样多肽(Aβ)人-鼠嵌合抗体,减低鼠源单克隆抗体在临床应用中引起的人体免疫排斥反应.方法从分泌抗Aβ1-42鼠单克隆抗体杂交瘤细胞株中提取总RNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增鼠源性抗体全长基因,并通过Blast对其序列进行分析;利用重组PCR技术拼接重轻链可变区及人IgG1的恒定区基因,并对重链Fc段进行定点突变以降低排斥反应;分别构建人-鼠嵌合基因重轻链表达载体,用脂质体法将其同时导入COS-7细胞中表达,并利用ELISA和免疫组织化学(SP法)对分泌的抗体功能和性质进行初步鉴定.结果 Blast比对分析结果显示克隆的基因序列符合小鼠抗体基因序列,将可变区基因与人IgG1的恒定区基因拼接以及Fc定点突变后,成功构建了嵌合抗体的真核表达载体,并实现真核表达;ELISA和免疫组织化学方法证实了所分泌抗体的人源性和与Aβ的结合特异性.结论成功地构建和表达了抗阿尔茨海默病Aβ人-鼠嵌合抗体,为其在阿尔茨海默病的临床诊治中应用和进一步改造奠定了基础.     

5-脂氧化酶与阿尔茨海默病

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种发生于老年人群的以进行性痴呆为主要特征的神经系统退行性疾病,其主要临床特征是进行性记忆和认知缺陷、人格丧失以及严重的精神障碍。5-脂氧化酶(5-lipoxygenase,5-LO)在中枢神经系统中有广泛的表达,它能通过增加γ分泌酶的表达促进脑内淀粉样斑块的沉积,通过增加CDK5蛋白激酶的活性导致脑内神经元纤维的缠结,最终使患者的记忆能力减退。对5-脂氧化酶在阿尔茨海默病中的具体作用机制的阐述,为预防与治疗AD提供了新的机遇。     

微管相关蛋白Tau磷酸化及其靶向抑制作用研究进展

进行性遗忘是阿尔茨海默病(AD)的主要临床表现,微管相关蛋白Tau(MAPT)高度磷酸化在AD和其它神经退变性疾病中扮演着关键性角色。本文拟从参与Tau蛋白磷酸化的激酶和磷酸酶以及基于靶向Tau激酶抑制和磷酸酶激活的治疗策略方面展开综述。     

抗阿尔茨海默病Aβ人源单链抗体基因的筛选和表达

目的 从人源噬菌体单链抗体库中筛选与阿尔茨海默病发病中起关键作用的β淀粉样多肽(Aβ)1-42特异性结合的单链可变区抗体(scFv)基因,利用原核生物大肠杆菌进行可溶性表达,以获得抗AB1-42人源抗体.方法 利用噬菌体展示技术对人源噬菌体单链抗体库进行多轮富集,以Aβ1-42为抗原经酶联免疫吸附(ELISA)检测,筛选与Aβ1-42特异性结合的阳性噬菌体克隆,再用阳性噬菌体感染E.coli HB2151进行可溶性表达,经SDS-PAGE、Western blot及ELISA法检测scFv单抗的可溶性表达水平及抗原结合活性.并对阳性scFv抗体基因进行基因测序鉴定.结果 获得了7个特异性的抗Aβ1-42 scFv阳性噬菌体克隆,其中4个克隆ELISA检测吸光度值(A值)高于阴性对照5倍以上;其中1株(A 10)获得可溶性单链抗体的成功表达,表达产物主要位于菌体中,ELISA效价显示在全菌蛋白中A值高于对照5倍以上.其相对分子质量约为33 000.DNA测序表明所获抗体的可变区基因属于scFv抗体基因,推导得到的氨基酸序列具有典型的抗体可变区结构.结论 用人源噬菌体单链抗体库筛选出抗Aβ1-42的人源抗体单链可变区基因,并成功表达了具有抗原结合活性的可溶性单链抗体,为进一步研究阿尔茨海默病的发病机制和治疗奠定了基础.     

早老素1基因多态性与阿尔茨海默病关系研究的进展

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种进行性的中枢神经退行性疾病,其发病率高,预后差,越来越受到人们的重视.其发生机制一直是人们研究的主要方向,随着分子生物学的发展,越来越多的研究从分子方向对其发生机制作以诠释.目前的研究已经证明早老素1(presenilin 1,PS1)基因的突变与早发性家族性阿尔茨海默病有关.笔者就此领域的研究进展做一综述,以期为AD相关研究提供基础信息.     

大鼠海马内注射β淀粉样蛋白1-40抑制铜蓝蛋白表达

目的:通过检测阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)模型大鼠海马铜蓝蛋白(glycan-phosphatidyli-nositol ceruloplasmin,GPI-Cp)的变化,探讨AD时脑铁增高的机制。方法:取雄性(290±10)g SD大鼠,经海马内注射(amyloid beta-peptide 1-40,Aβ1-40)建立AD模型,于1、2、3和4周取各组大鼠脑组织,分离海马,用RT-PCR检测GPI-Cp mRNA表达情况,免疫组织化学染色检测GPI-Cp蛋白表达情况。结果:海马的星形胶质细胞、血管内皮细胞、室管膜细胞均有GPI-Cp的mRNA和蛋白表达;而海马的锥体细胞仅轻度表达,颗粒细胞不表达。注射Aβ1-40后,模型组海马GPI-Cp mRNA和蛋白表达均随着时间延长逐渐降低,具有统计学意义(P<0.01)。结论:海马内注射Aβ1-40可引起大鼠海马GPI-Cp表达减少,GPI-Cp表达减少可能是AD时脑铁增高的原因。     

β淀粉样蛋白1～42与D-半乳糖联合作用建立复合阿尔茨海默病样模型

目的 探讨β淀粉样蛋白1～42(Aβ1-42)及D-半乳糖(D-gal)联合应用构建复合阿尔茨海默病(AD)样模型的可行性.方法 采用44只2月龄雄性SD大鼠,共分4组,即腹腔及侧脑室注射生理盐水的假手术组,腹腔注射D-gal或侧脑室注射Aβ1-42分别建立的D-gal组和Aβ1-42组,腹腔注射D-gal联合侧脑室注...     

以Tau蛋白为靶点治疗阿尔茨海默病的药物发展

阿尔茨海默病(Alzheimer’disease，AD)是老年人中痴呆最主要的原因。以不可逆进行性记忆和认知功能障碍为主要临床症状。目前AD的病因和发病机制尚未完全阐明，其主要神经病理特征包括：神经细胞外以β-淀粉样蛋白(A8)沉积为核心形成的老年斑(senile plaques，SP)；神经细胞内以过磷酸化的tau蛋白为核心形成的神经元纤维缠结(neurofibrillary tangle．NFT)和神经细胞丢失。     

阿尔茨海默病与β-淀粉样蛋白相关性研究现状

阿尔茨海默病(AD)是一种中枢神经系统变性病,常伴随有认知障碍、记忆力减退、人格改变等。AD的病因和发病机制尚不明确,由β淀粉样蛋白沉积(amyloid-β,Aβ)所积聚的细胞外老年斑(SP),tau蛋白过度磷酸化产生的神经细胞内神经原纤维缠结(NFT)和神经元丢失伴胶质细胞增生是AD发生的病理学基础。本文综述归纳了AD与Aβ相关性的最新进展情况。     

阿尔茨海默病女性占多数

正据美国国家科学院院报(PNAS)网站(2015-07-02)报道,最近美国阿尔茨海默病协会发现,年龄在65岁以上的人当中,每6位女性就会有1位罹患阿尔茨海默病,比例高于男性的11位中会有1位罹患阿尔茨海默病。造成这种性别差异的解释分歧,包括基因变异、女性更年期以及女性较男性长寿之故。为深究原因,美国阿尔茨海默病协会邀请15位举足轻重的科学家讨论女性有哪些阿尔茨海默病的危险因子。美国南加州大学Roberta Diaz Brinton教授认为,年龄确实是罹患阿尔茨海默病最大的风险因子,但平均而言女性较男性     

胆固醇在阿尔茨海默病病理机制中的作用

阿尔茨海默病(AD)是现代老年人常见的疾病,其发病机制尚不清楚。但是载脂蛋白E(apoE)是现阶段已知的迟发性AD最确定的危险因素,而且大量的实验研究表明胆固醇和AD之间存在着重要的联系。本文重点论述胆固醇以及与胆固醇代谢相关的物质和AD之间的关系。     

硫氧还蛋白还原酶在大鼠阿尔茨海默病模型海马结构中的表达

目的 :探讨硫氧还蛋白还原酶 (thioredoxinreductase,TR)在阿尔茨海默病 (Alzheimer′sDisease,AD)大鼠模型发生中的作用。方法 :注射海人藻酸 (Kainicacid ,KA)毁损Meynert基底核建立AD大鼠模型 ,通过Y形迷宫判断动物模型成功与否 ,采用原位杂交方法检测AD大鼠模型中TRmRNA的表达。结果 :AD模型组大鼠短期学习记忆能力与对照组相比明显下降 (P <0 0 0 1 ) ,说明AD动物模型建立成功 ;TRmRNA原位杂交检测显示模型组大鼠海马各区TRmRNA杂交信号显著增强 ,与对照组相比有显著差异 (P <0 0 0 1 )。结论 :TR在AD发生发展中可能起神经元保护作用     

脂联素通过Akt/GSK-3β途径降低tau的过度磷酸化水平

<正>目的:阿尔茨海默病(AD)是一种常见的神经退行性疾病,随着老年化社会的到来,其发病率逐年升高。由异常过度磷酸化的微管相关蛋白tau组成的神经原纤维缠结是AD的特征性病理学改变之一。tau蛋白的过度磷酸化与细胞内蛋白激酶和蛋白磷酸酶的调节系统失衡有关。脂联素(Adiponectin)是脂肪组织分泌的一种细胞因子,参与细胞内多种信号的调节。本文分析脂联素对tau蛋白磷酸化程度的影响,并探讨其可能的作用机制。     

McAb-ELISA双夹心法分型检测单纯疱疹病毒抗原(简报)

单纯疱疹病毒(HSV)分为两型,HSV-1和HSV-2,可引起龈口炎 口唇疱疹 皮肤疱疹 疱疹性角膜炎 生殖器疱疹 疱疹性脑炎 宫颈炎等,并认为与宫颈癌的发生有关。近年来,在性传播性疾病(STD) 妇幼保健和优生优育方面,HSV的危害愈来愈受到高度重视,为了更有效控制HSV感染的流行,本文建立了一种可快速 特异检测HSV抗原的双McAb-ELISA夹心法。     

胱硫醚β合成酶通过ATG5巯基化促进自噬缓解阿尔茨海默病

目的探究胱硫醚β合成酶(CBS)对阿尔茨海默病的影响及其作用机制。方法用Western blot检测CBS的过表达效果及其对淀粉样蛋白前体蛋白(APP)的影响,检测CBS对自噬标志物LC3的影响;用ELISA检测CBS对细胞上清中Aβ1-42的影响;用亚甲基蓝法检测H_2S的生成;用生物素转换及Western blot实验验证H_2S对自噬相关蛋白5(ATG5)的巯基化作用。用侧脑室注射质粒的方法在小鼠体内过表达CBS;用Y迷宫实验验证CBS对小鼠学习记忆能力的影响。结果 CBS降低了细胞上清中Aβ1-42的水平(P0.05);抑制了APP的表达(P0.05);CBS促进了H_2S的生成(P0.01),CBS促进了ATG5的巯基化;CBS促进了自噬标志物LC3的表达,抑制了P62的表达,促进了自噬水平;CBS促进阿尔茨海默病模型小鼠的学习记忆能力(P0.05)。结论 CBS通过促进硫化氢生成促进了ATG5第19位半胱氨酸发生巯基化,进而促进自噬,缓解了阿尔茨海默病的病理进程。