辽宁地区血小板志愿捐献者HPA基因资料库的建立

目的对辽宁地区血小板志愿捐献者进行HPA基因分型,建立已知HPA基因型的血小板捐献者资料库。方法采用PCR-SSP方法对随机抽取的130名血小板捐献者进行HPA-1-6和HPA-15抗原系统共14个抗原的基因分型。结果辽宁地区血小板志愿捐献者HPA的基因频率分别是:HPA-1a0.9925、1b0.0075、2a0.9305、2b0.0695、3a0.5810、3b0.4190、4a1.0000、4b0.000、5a0.9810、5b0.0190、6a0.9885、6b0.0115、15a0.4615、15b0.5385。结论辽宁地区血小板志愿捐献者HPA-1—6和HPA-15抗原系统的基因频率符合Hardy-Wein-berg遗传定律,与其它地区和国家的同类资料相比显示出种族和地域性差异,由此建立起了辽宁地区已知HPA基因型的血小板捐献者资料库。     

献血者血小板1-16抗原基因遗传多态性分析及已知HPA型供者数据库的建立

本研究的目的是分析人类血小板抗原（human platelet antigen,HPA）基因多态性,根据分布频率来判断HPA抗原不配合比率以及抗体产生的机会,确定有临床意义的血小板抗原系统,并建立邯郸地区血小板基因频率数据库和供者库.采用SSP-PCR方法对邯郸地区148名随机献血者进行HPA1-16抗原32个等位基因的检测分析,并与不同人群的分布频率进行比较.结果表明：每个样本均检测到HPA-1a、2a、4a-14a、16a基因;HPA-4a、7a-14a、16a呈现单态性,未检测出相应的等位基因HPA-b;对于HPA-1、-2、-5、-6主要以a/a纯合子为多,a/a基因型频率分别是0.9595、0.8108、0.9865、0.9797,没有b/b纯合子出现.在HPA1-16中,具有最高杂合度的是HPA-15,基因型HPA15a/15a、HPA15a/15b、HPA15b/15b频率分别是0.2230、0.5270、0.2500;HPA-3在其次,基因型HPA3a/3a、HPA3a/3b、HPA3b/3b频率分别是0.3851、0.5135、0.1014.经x2检验,结果符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律.邯郸地区随机献血者HPA1-5系统基因频率与石家庄地区相似（P＞0.05）;与我国台湾人群进行HPA1-13、HPA-15的比较,HPA-1、-2、-6具有明显的不同（P＜0.05）,其它相似（P＞0.05）;与韩国人群进行HPA1-8的比较,除HPA-3具有明显不同外（P＜0.05）,其余均相似（P＞0.05）;与美国黑人进行HPA1-5的比较,HPA-1、-2、-5具有明显的差异（P＜0.05）;与英国人进行HPA1-11的比较,HPA-1、-5具有明显的不同（P＜0.05）.结论：北方地区中国人群HPA-2、-3、5、-15系统具有多态性,且HPA抗原分布不配合比率较高,这必然造成免疫暴露的机会增加,提示在临床上可能具有重要的免疫学意义.同时,在此次研究数据的基础上建立了邯郸地区血小板基因频率数据库和血小板已知型供者库.     

PCR-SSP检测血小板同种抗原2、3、5系统基因型

目的：建立血小板同种抗原2、3、5系统基因分型方法，以检测人群中HPA－2、3、5系统基因频率。方法：标本DNA的抽提采用快速盐析法，HPA－2、3、5系统基因分型采用PCR－SSP方法。结果：在本研究对象中HPA－2系统：a/a基因型频率为0.806,a/b基因型频率为0/194;a基因频率为0.903,b基因频率为0.097。HPA－3系统:a/a基因型频率为0.421,a/b基因型频率为0.509,b/b基因型频率为0.070,a基因频率为0676,b基因频率为0.324。HPA－5系统：a/a基因型频率为0.933,a/b基因型频率为0.067;a基因频率为0.967,b基因频率为0.033。结论：该方法可鉴定出HPA－2，3、5系统基因型。     

长沙地区固定血小板献血者血小板抗原1～5、15系统基因多态性及分析

目的了解长沙地区100名固定单采血小板献血者血小板抗原(HPA)1~5、15系统基因多态性。方法采用PCR-SSP法对样本进行HPA1~5、15系统的基因分型。结果HPA1~5、15系统基因在长沙地区血小板固定供者中的分布频率分别为1a:0.9900,1b:0.0100;2a:0.9600,2b:0.0400;3a:0.5050,3b:0.4950;4a:1.0000,4b:0.0000;5a:0.9900,5b:0.0100;15a:0.4750,15b:0.5250。结论HPA-3,15系统最具有多态性。     

乌鲁木齐地区哈萨克族献血人群HPA-15基因多态性分析

目的分析乌鲁木齐地区哈萨克族献血人群血小板特异性抗原HPA-15基因多态性,为临床血小板输注提供依据。方法采用聚合酶链-序列特异性引物技术(PCR-SSP)对乌鲁木齐地区100名无血缘关系的哈萨克族献血者的HPA-15系统进行基因分型,计算基因型频率和基因频率。结果哈萨克族献血人群HPA-15a/15a、HPA-15a/15b、HPA-15b/15b基因型频率分别为0.21、0.53、0.26。HPA-15a、HPA-15b的基因频率分别为0.475和0.525。HPA-15a、HPA-15b抗原不配合率分别为0.1997和0.1747。结论乌鲁木齐地区哈萨克族HPA-15抗原不配合概率高,可能导致产生同种免疫性血小板抗体的概率增加,在临床血小板输注中的作用值得重视。     

中国牡丹江地区献血人群HPA基因分布特征的研究及数据库的建立

本研究旨在探讨中国牡丹江地区献血人群HPA基因及其多态性分布特征,判断HPA抗原不配合比率,确定有临床意义的抗原系统,建立已知HPA基因型血小板献血者数据库。采用PCR-SSP方法对154名无血缘关系的献血者做HPA基因分型,计算基因频率与基因型频率,并与国内外不同人群进行比较。结果表明,154名健康、无血缘关系的献血者均表达出HPA-a基因中的1a-17a基因;仅表达HPA-b基因中的1b、2b、3b、5b、6b和15b,未表达HPA4b、7b-14b、16b和17b;在基因型中主要以aa纯合子表达为多,具有最高杂合度的为HPA15,其次为HPA3。HPA基因组合型有23种组合型,其中5种频率>10%,其余18种频率<8%,经χ2检验验证本地区HPA基因频率分布符合Hardy-Weinberg遗传定律。结论:本研究已确立牡丹江地区154人的HPA血型分布遗传特征,与其他地区和国家相比具有本地区人群特点,由此建立了牡丹江地区已知HPA基因型的血小板供者数据库,可为临床血小板输注无效者提供相匹配的供者,在临床上具有重要的免疫学意义。     

中国南京地区汉族人群血小板HPA-1-18遗传多态性研究

本研究旨在调查南京地区无关健康人群人类血小板抗原1-18(HPA-1-18)等位基因频率,为输血患者寻找相容性血小板提供可靠依据。使用PCR-SSP方法对300例南京地区非血缘健康志愿者血液样品进行人血小板抗原1-18(HPA-1-18)等位基因分型。结果表明,南京地区300例非血缘人群HPA等位基因频率分别为:HPA-2a 0.9183和-2b 0.0817;HPA-3a 0.6100和-3b 0.3900;HPA-5a 0.9733和-5b 0.0267;HPA-6a 0.9883和-6b 0.0117;HPA-15a 0.5250和-15b 0.4750。HPA-1a,-4a,-7a-14a和HPA-16a-18a均是纯合子。结论:HPA抗原等位基因频率存在种族和地域差异。南京地区HPA抗原等位基因频率显示具有自身特点。HPA-3和HPA-15是最常见的杂合子,因此必须关注HPA在血小板临床输血中的作用。     

河南汉族人群血小板抗原HPA1-16bw基因多态性研究

摘要：目的：研究河南地区汉族人群血小板抗原基因分布频率,建立地区性血小板抗原基因库,为血小板配合输注提供实验依据。 方法：用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）对160例无血缘关系的河南汉族体检健康者进行HPA1-16bw系统基因分型。 结果：HPA1-6和HPA-15基因频率分别为1a 0.987 5,1b 0.012 5; 2a 0.946 9,2b 0.053 1; 3a 0.590 6,3b 0.409 4; 4a 0.996 9,4b 0.003 1; 5a 0.990 6,5b 0.009 4; 6a 0.981 2,6b 0.018 8;15a 0.540 6,15b 0.459 4。 HPA7-14bw,16bw仅检测到a/a等位基因,基因频率均为1.000 0。经χ²检验各系统HPA符合Hardy-Weinberg平衡法则。HPA基因分布存在种族和地区差异。 结论:河南汉族人HPA-15 和HPA-3基因型杂合率最高。HPA基因分型有助于输注血小板时降低免疫性血小板减少症的发生概率。     

乌鲁木齐地区哈萨克族献血人群HPA-1-17基因多态性分析

目的分析乌鲁木齐地区哈萨克族献血人群HPA 1-17系统基因多态性分布特点。方法采用PCR-SSP对乌鲁木齐地区无血缘关系的哈萨克族献血人群100例血液标本进行HPA1-17系统基因分型,计算基因型频率和基因频率。结果哈萨克族献血人群HPA的基因频率分别为:HPA-1a 0.995、-1b 0.005、-2a 0.95、-2b 0.05、-3a 0.52、-3b 0.48、-4a 0.995、-4b 0.005、-5a 0.99、-5b 0.01、-6a 0.99、-6b 0.01、-15a 0.475、-15b 0.525;HPA-3和15系统表现出较高的杂合度,其中3a/3a、3a/3b、3b/3b基因型频率分别为0.3、0.44、0.26;15a/15a、15a/15b、15b/15b基因型频率分别为0.21、0.53、0.26;HPA-7-14、16、17系统只检出a基因,呈单特异性。结论乌鲁木齐地区哈萨克族HPA基因分布具有自身特点,数据分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律,其中HPA-3和HPA-15抗原不配合率较高。     

吉林地区汉族人群血小板抗原系统基因分型研究

目的研究吉林省汉族人群人血小板同种抗原系统(HPA)基因及其多态性分布特征,建立已知HPA基因型的血小板捐献者资料库。方法用DNA试剂盒提取外周血标本中DNA,通过特异性引物(PCR-SSP)扩增HPA等位基因。检测200名HPA1-6,15抗原系统共14个抗原的基因分型。结果 200名健康、无血缘关系的吉林省汉族人群HPA基因频率为:HPA-1a0.9900、-1b0.0100;-2a0.9300、-2b0.0700;-3a0.5575、-3b0.4425;-4a1.0000、-4b0;-5a0.9900、-5b0.0100;-6a0.9875、-6b0.0125;-15a0.5125、-15b0.4875。HPA-3与我国其它地区同类资料比较χ2=3.18,P>0.05;与亚洲印尼、泰国、英国及刚果相比χ2=5.98,P>0.05;HPA-5与HPA-15和刚果、喀麦隆比较χ2=55.06、χ2=15.63,P<0.01结论吉林地区血小板志愿捐献者HPA-1～6和HPA-15抗原系统的基因频率符合Hardy-Wein-berg遗传定律,与其它地区和国家的同类资料相比显示出种族和地域性差异,由此建立起了吉林地区已知HPA基因型的血小板捐献者资料库。     

Gene frequencies of human platelet antigens on glycoprotein IIIa in Japanese

BACKGROUND: Polymorphism of glycoprotein IIIa on human platelets is one of the factors in alloimmunization that causes neonatal alloimmune thrombocytopenia and refractoriness to platelet transfusion. STUDY DESIGN AND METHODS: DNA typing methods were originally developed to determine the genotypes of five human platelet antigen (HPA) systems located on glycoprotein IIIa: HPA-1, HPA-4, HPA-6W, HPA-7W and HPA-8W. The gene frequencies of these platelet antigens were determined by DNA typing of 331 unrelated Japanese donors. RESULTS: The gene frequencies of the low-frequency antigens were 0.002, 0.011, and 0.027 for HPA-1b, HPA-4b, and HPA-6W(b), respectively. All 331 Japanese donors tested were HPA-7W(a/a) and HPA-8W(a/a). Moreover, in the present study, none of the donors tested had two or more of these low-frequency antigens. CONCLUSION: The risk of neonatal alloimmune thrombocytopenia and refractoriness to platelet transfusion induced by the antigens of the HPA-1, HPA-7W, and HPA-8W systems was extremely rare in Japanese. However, attention must be paid to the involvement of the HPA-4 and HPA- 6W systems in these clinical disorders.     

使用Taqman PCR技术建立人类血小板抗原-1～5、15分型体系

目的了解上海地区单采血小板献血人群HPA-1～5、15多态性分布,分析评估新的分型技术。方法利用TaqMan PCR技术对500份上海地区单采血小板供者标本进行HPA-1～5、15抗原系统等位基因分型,并随机抽取100份标本使用PCR-SSP技术进行比对。结果 HPA各等位基因频率分别为HPA-1a:0.999,HPA-1b:0.001,HPA-2a:0.953,HPA-2b:0.047,HPA-3a:0.582,HPA-3b:0.418,HPA-4a:0.999,HPA-4b:0.001,HPA-5a:0.988,HPA-5b:0.012,HPA-15a:0.524,HPA-15b:0.476;有1份标本HPA-5等位基因与SSP检测结果产生差异。结论上海地区HPA各等位基因频率与国内各地区人群分布无明显差异,与中国汉族人群HPA分布情况基本吻合,实验数据经验证符合Hardy-Weinberg平衡定律,实验结果准确可靠;HPA-5差异经测序验证判断可能由PCR-SSP非特异扩增所致;TaqMan技术在HPA抗原系统分型应用中特异性高,反应时间短,具有良好的应用前景,是现有技术方法的一种重要补充。     

广州地区汉族人群人类血小板同种抗原及HLA-Ⅰ抗原基因分型库的建立

目的建立广州地区汉族人群人类血小板抗原(HPA)1—6、9及15系统和HLA-Ⅰ抗原基因分型库,探讨其基因多态性的分布,为有效避免血小板输注同种免疫的发生提供实验基础。方法随机抽取广州地区无血缘关系的健康机采血小板无偿献血者(均为汉族)的血样805份,采用PCR-SSP方法做HPA-1—6、9及15系统基因分型,利用Luminex-SSO方法做HLA-A、B、Cw抗原分型。结果HPA的基因频率分别为HPA-1a0.998、1b0.002,2a0.952、2b0.048,3a0.553、3b0.447,4a0.999、4b0.001,5a0.976、5b0.024,6a0.982、6b0.018,9a1.000、9b0.000,15a0.518、15b0.481;HPA-3、15a/b对偶抗原有aa、ab和bb 3种表型,HPA-1、2和4—6未发现bb表型,HPA-9未发现ab、bb表型;HPA-3a、3b,15a、15b的不配合率最高。经χ2检验,实验结果符合Hardy-Weinberg遗传定律。HLA-Ⅰ抗原基因频率较高的表达有A*02 0.286A*240.162A*11 0.323B*46 0.147B*75 0.100C*01 0.177C*03 0.289C*07 0.179。结论广州地区汉族HPA-1—6、9及15系统基因频率分布和HLA-Ⅰ类抗原分布存在明显的多态性,与其它资料相比显示出种族和地域性差异;建立HPA-1—6、9及15系统和HLA-Ⅰ抗原基因分型库对于临床输血有重要意义。     

应用PCR—SSP法分析中国人血小板抗原基因型频率

本研究建立了在同一PCR反应条件下同时检测人血小板抗原（human platelet antigen,HPA）系统HPA-1到HPA-5的PCR-SSP检测法。应用该方法分析了110例健康献血员的HPA-1到HPA-5的基因型,并以此为依据推算了中国人HPA-1到HPA-5各亚型的基因频率。结果表明HPA-1a和HPA-1b的基因频率分别为0.91和0.09,HPA-2a和HPA-2的基因频率分别为0.86和0.14,HPA-3a和HPA-3b的基因频率分别为0.60和0.40,HPA-4a和HPA-4b的基因频率分别为0.92和0.08,HPA-5a和HPA-5b的基因频率分别为0.85和0.15。结论：基因组DNA的血小板抗原PCR-SSP分型法切实可行,可广泛应用于临床血小板抗原的分型。     

深圳地区汉族人类血小板抗原1-6系统基因多态性分析

目的 研究人类血小板抗原基因多态性,为人类学研究及临床输血实践提供依据。方法 采用PCR-SSP方法对深圳地区222名汉族随机献血者HPA1-6系统进行基因分型研究,对其基因及基因型频率进行统计,并与HPA在不同人群中的分布进行对比分析。结果 在6个HPA系统中,HPA-3基因型的杂合程度最高,HPA-3a/3a、HPA-3a/3b、HPA-3b/3b的频率分别为0.265 8,0.518 0,0.216 2;其余5个HPA系统均以a/a纯合子为主,a基因的频率范围为0.997 7～0.955 0,且均未发现b/b纯合子。1b、4b的基因频率很低,分别为0.009 O和0.002 3。结论 深圳汉族人群HPA1-6系统的基因频率与中国台湾人及中国香港人均很相似(P>0.05)。HPA-1、HPA-5与美国黑人、白人及荷兰人差异显著(P<0.05);HPA-2、HPA-3与日本人、韩国人、美国黑人、白人差异显著(P<0.05);HPA-4与日本人差异显著(P<0.05)。在未来的临床实践中要警惕HPA-2,3,5,6系统同种抗体导致的同种免疫血小板减少综合征的可能。     

广州地区无偿献血者HPA-1—6,15基因分型及频率调查

目的研究人类血小板基因多态性,为人类群体遗传学研究及临床输血实践提供重要数据和依据。方法通过PCR-SSP方法对广州地区706名无偿献血者的HPA1—6,15系统进行基因分型,并统计其频率。结果706份样本中HPA-3和-15基因型的杂合程度最高,其a/a、a/b、b/b的频率分别为HPA-3:0.2918、0.4830、0.2252;HPA-15:0.2691、0.5170、0.2139,不配合率较高,均达到35%以上。HPA-1、-2、-4、-5系统均以a/a纯合子为主,a基因的频率范围为0.9583—0.9993,且均未发现b/b纯合子。1b、4b的基因频率很低,分别为0.0028和0.0007。本地区的HPA-1a与中国北方、英国白人、美国黑人有统计学差异(P<0.05)。HPA-2与中国南方、北方、美国黑人和日本人有统计学差异(P<0.05);HPA-5与英国白人和美国黑人存在统计学差异(P<0.05)。HPA-6频率分别为0.9575,0.0397,0.0028。结论本研究对广州地区HPA献血员的筛查可为建立HPA供者库和对探讨由HPA引起的免疫性疾病的预防和治疗提供相关数据和研究手段。     

Human platelet antigen polymorphisms (HPA‐1, ‐2, ‐3, ‐4, ‐5 and ‐15) in major ethnic groups of Pakistan

Objectives: Gene frequencies of human platelet antigens (HPA) determine the magnitude of platelet immunological disorders like neonatal alloimmune thrombocytopenia, platelet refractoriness and ease of availability of particular HPA‐typed platelet donors in a given community. Background: However, the pattern of HPA in Pakistani population is not known. Aim: The aim of present study was to determine the gene frequencies of HPA (HPA‐1 to ‐5 and ‐15) in individuals belonging to major ethnic groups and castes of Pakistani population. Materials and Methods: HPA genotyping was done in 593 individuals belonging to all ethnic groups of Pakistan, by polymerase chain reaction‐sequence specific primers with detection on polyacrylamide electrophoresis. Results: The gene frequencies of the ‘a’ and ‘b’ alleles of HPA‐1 to ‐5 and ‐15 in Pakistanis were as follows: HPA‐1a/b, 0·885/0·115; HPA‐2a/b, 0·92/0·08; HPA‐3a/b, 0·69/0·31; HPA‐4a/b, 1/0; HPA‐5a/b, 0·9/0·1; HPA‐15a/b, 0·59/0·41. Except for significant difference regarding gene frequency of HPA‐3 between Pathans and Sindhis, there was no significant difference of HPA‐1 to ‐5 and ‐15 between major ethnic groups of Pakistan. The estimated mismatch probability regarding platelet antigens 1–5 and 15 in Pakistanis, after transfusion of random donor platelets, is from 14 to 37%. The expected incidence of neonatal alloimmune thrombocytopenia due to anti‐HPA‐1a in Pakistani pregnant females is < 1 of 1000 pregnancies and 8–12 of 1000 in case of anti‐HPA‐5b. Homozygosity of HPA‐1b, ‐2b and ‐5b genotypes ranged from 1 to 2% in the Pakistani population, whereas homozygosity of HPA‐3b and ‐15b was 11 and 18%. Conclusions: There is a need to establish donor registries typed for HPA in the transfusion centres of the country.     

应用PCR—SSP方法进行人类血小板抗原1～6系统的基因分型

目的研究采用PCR—SSP技术，建立人类血小板抗原1．6系统（HPA—1，2，3，4，5，6）的基因分型方法。方法合成18条序列特异性引物，通过调节引物浓度、Mg^2＋离子浓度和探索最佳PCR扩增条件．建立HPA—1．6系统同步基因分型技术。对第10届及第11届国际输血协会（ISBT）血小板基因定型协作组送检的考核样本进行盲检来验证。并应用该技术对198名深圳地区健康的血小板志愿捐献者进行基因分型。结果应用本研究的方法，对第10届及第11届ISBT送检的考核样本进行基因分型，结果与ISBT公布的结果完全一致，符合率达100％。对198名随机的血小板志愿捐献者观察到的基因频率分别是：HPA—1a和1b为0．9924和0．0076，HPA-2a和2b为0．9545和0．0455，HPA-3a和3b为0．5556和0．4444，HPA-4a和4b为0．9975和0．0025，HPA-5a和5b为0．9848和0．0152，HPA-6a和6b为0．9798和0．0202。结论本研究建立的HPA基因分型技术具有简便、快速、准确的特点，适合于常规HPA基因分型，具有广泛的应用前景。