复方银黄微型灌肠剂对发热大鼠下丘脑中COX-1、COX-2 mRNA表达的影响

目的 研究复方银黄微型灌肠剂(YHCE)对发热大鼠下丘脑中环氧化酶-1(COX-1)、环氧化酶-2(COX-2)mRNA表达的影响,探讨其作用机制.方法 用酵母混悬液复制发热大鼠模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测大鼠下丘脑中COX-1、COX-2的mRNA表达的变化.结果 YHCE能明显抑制发热大鼠的体温上升,抑制下丘脑中COX-2的mRNA表达,而对下丘脑中COX-1的mRNA无明显影响.结论 YHCE有明显的解热作用,其机制可能与抑制发热大鼠下丘脑中COX-2的mRNA表达有关.     

鼻咽癌中环氧化酶-2的实验研究

目的 研究环氧化酶-2在鼻咽癌中的表达,探讨其与鼻咽癌的增生、浸润及转移的关系。方法 在26例鼻咽癌及相应癌旁组织和10例正常鼻咽部黏膜组织中,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测环氧化酶-2 mRNA的表达。结果 在鼻咽癌组织中环氧化酶-2 mRNA高表达,在正常鼻咽部黏膜环氧化酶-2 mRNA中低表达,差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论 环氧化酶-2与鼻咽癌的生长、浸润及转移有密切关系。     

塞来昔布对结肠癌HT-29细胞生长及骨桥蛋白表达的影响

目的 观察塞来昔布对结肠癌HT-29细胞的生长、凋亡和骨桥蛋白(OPN)表达的影响.方法 体外培养结肠癌HT-29细胞分为对照组和不同浓度塞来昔布干预组.MTT法检测细胞增殖抑制情况,流式细胞术分析细胞的凋亡,RT-PCR和免疫组化分析细胞中的OPN mRNA与OPN蛋白表达变化.结果 塞来昔布对HT-29细胞增殖有明显的时间与浓度依赖性抑制作用(P＜0.01).塞来昔布能诱导HT-29细胞凋亡,塞来昔布15、30和50μmol/L的细胞凋亡率分别为28.2％、32.8％和33.1％,均明显高于对照组的26.0％ (P＜0.05).药物干预组OPN mRNA及OPN蛋白表达明显低于对照组(P＜0.01).结论 塞来昔布可能通过抑制OPN表达而抑制结肠癌HT-29细胞的增殖,诱导其凋亡.     

初发急性非淋巴细胞白血病SSBP2 mRNA表达研究

目的:探讨SSBP2 mRNA在初发急性非淋巴细胞白血病中的表达。方法:利用半定量RT-PCR检测64例初发急性非淋巴细胞白血病患者及20例正常对照SSBP2 mRNA表达,以β-actin作为内参照。结果:64例初发ANLL患者及20例正常对照均表达SSBP2。与正常对照比较,初发ANLL患者SSBP2mRNA表达水平为(0.410±0.216)与对照组(0.383±0.172)差异无显著性(P>0.05)。结论:初发ANLL中SSBP2mRNA表达无异常改变,SSBP2表达可能并不参与急性非淋巴细胞白血病的发生。     

骨肉瘤中COX-2的表达及其意义

目的:检测37例骨肉瘤组织中COX-2的表达,分析其对骨肉瘤的临床诊断及预后的意义。方法:应用免疫组化方法对37例骨肉瘤组织中COX-2进行检测。结果:37例骨肉瘤组织中有32例COX-2表达阳性,其表达与骨肉瘤分期和有无转移相关(P＜0．05),与肿瘤组织学类型无相关性。结论:COX-2与骨肉瘤的发生及预后存在一定的相关性,可为骨肉瘤的临床诊断和预后判断提供帮助。     

环氧化酶-2和β-连环蛋白及 Survivin 在舌癌中的表达及相关性研究

目的研究人舌癌组织中环氧化酶-2(Cox-2)、β-连环蛋白(β-catenin)及Survivin在基因水平的表达及相互关系,为舌癌的诊断、治疗及预后提供参考依据。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)方法检测Cox-2 mRNA、β-catenin mRNA及Survivin mRNA在60例舌癌和30例正常口腔黏膜中的表达情况,分析它们在舌癌组织中表达的差异性和相关性。结果 Cox-2 mRNA和Survivin mRNA在舌癌组织中呈强阳性表达,而在正常口腔黏膜均为阴性表达,差异有统计学意义(P<0.01);β-catenin mRNA在舌癌和正常黏膜中均有表达,但表达量差异有统计学意义(P<0.05)。低分化舌癌中Cox-2 mRNA、β-catenin mRNA及Survivin mRNA的表达量高于高中分化舌癌中的表达量(P<0.05)。Cox-2、β-catenin及Survivin在舌癌中的表达相互呈正相关(P<0.01)。结论 Cox-2、β-catenin及Survivin在舌癌的发生发展过程中起重要作用,Cox-2、β-catenin及Survivin之间可能存在相互协同作用。     

非甾体消炎药对结肠癌细胞HT-29中瘦素作用的初步研究

非甾体消炎药（NSA慨）是一类以抗炎为主,兼有解热、镇痛作用的药物。近20年来,动物实验、临床研究、个案报道和流行病学资料均显示NSAIDs药物对腺瘤性息肉有治疗作用,并可以预防结肠癌的发生,但其机制尚未完全阐明。目前研究发现瘦素（Leptin）作为一种具有促生长作用的激素,在许多恶性肿瘤中都存在表达,推测其在刺激恶性肿瘤细胞的增殖、调节肿瘤血管的生成及肿瘤侵袭、转移等方面起重要作用。     

姜黄素类似物对人结肠癌HT-29细胞增殖与自噬的影响

目的 初步探究姜黄素类似物——WH-8对人结肠癌HT-29细胞增殖和自噬的影响。方法 选用不同浓度WH-8作用于人结肠癌HT-29细胞，应用四甲基偶氮唑盐还原法观察药物对细胞的生长抑制作用；通过荧光染色技术和细胞成像技术观察WH-8作用下细胞自噬囊泡的变化；四甲基偶氮唑盐还原法检测经自噬特异性抑制剂3-MA预处理后WH-8对细胞生长抑制率的影响；蛋白质印迹法观察WH-8作用下细胞自噬特征性蛋白酵母自噬相关基因1(Beclin 1)和微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达情况。结果 WH-8呈时间-剂量依赖性抑制人结肠癌HT-29细胞增殖，48 h平均半数抑制浓度为(12.5±1.3)μmol/L;一定浓度下WH-8可诱导细胞的自噬囊泡增多；3-MA可逆转WH-8对人结肠癌HT-29细胞的生长抑制作用，差异有统计学意义(P<0.05);WH-8可诱导Beclin-1表达上调，且在一定时间内促进LC3Ⅰ向LC3Ⅱ转化。结论 WH-8可抑制人结肠癌HT-29细胞增殖并诱导细胞自噬。     

尼美舒利对人食管癌细胞Eca-109 COX-2表达及生长的抑制作用

目的研究环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞株COX-2表达和细胞增殖及凋亡的影响。方法MTT法测定尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖的抑制率;RT-PCR法检测Eca-109细胞COX-2mRNA表达变化;流式细胞仪检测COX-2蛋白表达、细胞周期时相分布及凋亡率的变化;光镜和琼脂糖电泳法进一步观察细胞凋亡。结果尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞有较强的抑制作用,有明显的时间和浓度依赖性;呈浓度依赖性下调Eca-109细胞COX-2 mRNA及蛋白表达;可使Eca-109细胞G0/G1期比例增高,S期细胞减少,增殖指数降低,凋亡细胞增多。结论尼美舒利可能通过对COX-2表达的下调而诱导凋亡和细胞周期阻滞,从而抑制人食管癌Eca-109细胞生长。     

胃癌组织中COX-2和VEGF-C mRNA表达及意义

目的：研究环氧化酶-2（COX-2）与血管内皮生长因子-C（VEGF-C）在胃癌中的表达与胃癌临床病理参数间的关系。方法：采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（FQ-RT-PCR）检测87例胃癌组织COX-2与VEGF-C mRNA的表达。结果：所测87例胃癌组织中,COX-2及VEGF-C mRNA的表达阳性率分别为62.07%（54/87）和60.92%（53/87）。COX-2及VEGF-C mRNA表达与肿瘤浸润程度、TNM分期、淋巴结转移呈明显相关性（P〈0.05）,但与性别和肿瘤分化程度无明显相关（P〉0.05）。结论：COX-2及VEGF-C mRNA在胃癌组织中的表达与肿瘤的浸润程度、TNM分期、淋巴转移密切相关。     

p-JNK在结肠癌组织中的表达及抑制JNK通路后HT-29细胞增殖和凋亡变化

目的研究p-JNK在结肠癌组织中的表达以及抑制JNK信号通路后人结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的变化。方法使用免疫组织化学方法检测50例结肠癌组织标本和50例正常结肠组织标本中p-JNK的表达情况并和临床资料进行比较分析;在人结肠癌细胞株HT-29中使用SP600125抑制JNK信号通路后,MTT法检测细胞增殖,TUNEL法检测凋亡。结果 p-JNK在结肠癌组织中的表达水平明显高于正常对照组织(P<0.05);并和淋巴结转移、肿瘤分化程度、肿瘤的侵犯深度相关(P<0.05);而与肿瘤部位无关。抑制JNK信号通路后,HT-29细胞中的p-JNK表达降低(P<0.05);增殖减少,凋亡增加(P<0.05)。结论在结肠癌组织中存在p-JNK的高表达,抑制JNK信号通路能降低人结肠癌细胞株HT-29细胞的增殖,并促进凋亡;JNK信号通路和结肠癌的发生发展有关。     

丁酸钠诱导结肠癌HT-29细胞凋亡的信号通路及对AQP3基因表达影响的研究

目的：探讨丁酸钠诱导结肠癌HT-29细胞凋亡过程的分子机理及其对水通道蛋白AQP3基因表达的影响。方法：MTT法检测不同浓度的丁酸钠对结肠癌HT-29细胞生长的影响;RT-PCR检测不同浓度的丁酸钠对细胞周期蛋白Cyclin D1、CDK4、p16和AQP3的基因表达水平,同时使用流式细胞仪检测细胞周期。结果：加入浓度超过2.5mmol/L的丁酸钠后,结肠癌HT-29细胞生长受到抑制,Cyclin D1、CDK4和AQP3的表达水平下降,p16的表达水平上调,细胞阻滞于G1/S期。结论：浓度超过2.5mmol/L的丁酸钠可以诱导结肠癌HT-29细胞凋亡,使其细胞周期阻滞于G1/S期,且这种诱导作用是剂量依赖型的,其分子通路可能是通过p16-Cyclin D1/CDK4这条信号途径,在此过程中,伴随着AQP3的基因表达水平降低。     

鞘磷脂及神经酰胺对人结肠癌细胞(HT-29)的影响

目的　研究鞘磷脂及其代谢产物神经酰胺对人结肠癌细胞的影响。方法　采用噻唑蓝 (MTT)显色法、细胞核分裂指数和3H TdR掺入试验方法 ,所设剂量分别为鞘磷脂 5、10、2 0、40 μg ml和神经酰胺 6 2 5、12 5、2 5、5 0 μmol L ,分别以无水乙醇和二甲基亚砜 (DMSO)为溶剂对照。结果　鞘磷脂对HT 2 9细胞的生长无明显作用 ,神经酰胺对HT 2 9细胞的生长有明显抑制作用。在MTT试验中 ,不同浓度神经酰胺对HT 2 9细胞的 7d抑制率分别为 3 9%、85 %、98%和98% ;在核分裂指数试验中 ,随着神经酰胺剂量的增高 ,其核分裂指数明显降低 ;在3H TdR掺入试验中 ,可见随着神经酰胺剂量的增高 ,3H TdR掺入到HT 2 9细胞中明显的减少 ,与阴性对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论　鞘磷脂对HT 2 9细胞生长无明显作用 ,神经酰胺对HT 2 9细胞的生长增殖有明显抑制作用 ,这可能是鞘磷脂抑制结肠癌的机制之一。     

Anti-cancer effect and apoptosis induction of cordycepin through DR3 pathway in the human colonic cancer cell HT-29

Cordycepin is known to have many pharmacological effects such as anti-tumorigenic, anti-inflammatory and anti-angiogenic activity. However, cordycepin induced apoptosis through the DR3 pathway in human colon cancer cells has not been studied. The effect of cordycepin on anti-proliferation was investigated in this study. Cordycepin significantly inhibited cell viability in a dose and time-dependent manner. Cordycepin increased sub G1 and G2/M phase arrest on HT-29 cells at the concentration of 100 μM, whereas cordycepin at 200 μM and 400 μM increased G1 phase arrest. Cordycepin induced apoptosis in HT-29 cells in a dose-dependent manner as detected by Hoechst and Annexin V-FITC staining. Intracellular ROS levels were higher in cordycepin treated cells as compared to control cells. The protein related to apoptosis was determined by antibody array. p53 and Bax expression increased treatment with cordycepin for 18 h. DR3, caspase-8, caspase-1, cleaved caspase-3 and cleaved PARP expression increased. These finding suggest that the cordycepin induces apoptosis through the DR3 pathway in human colon cancer HT-29. These findings suggest that cordycepin should be evaluated further as a therapeutic agent in human colon cancer.     

大黄素对HT-29细胞IL-8分泌及NF-κB活化的影响

目的研究大黄素对IFN-γ和LPS刺激的人结肠癌细胞株HT-29细胞的IL-8分泌及NF-κB活化的作用,为其临床应用提供实验依据。方法用IFN-γ和LPS刺激的人结肠癌细胞株HT-29细胞来建立体外细胞炎症模型,采用ELISA检测HT-29细胞的IL-8分泌;以免疫荧光技术结合激光共聚焦显微镜观察HT-29细胞NF-κB核转位。结果大黄素在10～80mol.L-1能降低IFN-γ+LPS所引起的HT-29细胞IL-8的大量产生,并且呈明显的剂量依赖关系;大黄素不同浓度组可抑制IFN-γ+LPS刺激造成的NF-κB激活,;有剂量依赖关系。结论大黄素能有效抑制IFN-γ+LPS诱导的IL-8分泌和NF-κB激活。     

Targeted delivery of 5-fluorouracil to HT-29 cells using high efficient folic acid-conjugated nanoparticles

Abstract

The incorporation of a high percentage of targeting molecules into drug delivery system is one of the important methods for improving efficacy of targeting therapeutic drugs to cancer cells. PLGA-based drug delivery carriers with folic acid (FA) as targeting molecule have a low targeting efficiency due to a low FA conjugation ratio. In this work, we fabricated a FA-conjugated PLGA system using a crosslinker 1, 3-diaminopropane and have achieved a high conjugation ratio of 46.7% (mol/mol). The as-prepared PLGA-based biomaterial was used to encapsulate therapeutic drug 5-fluorouracil (5-FU) into nanoparticles. In the in vitro experiments, an IC₅₀ of 5.69?µg/mL has been achieved for 5-FU loaded PLGA-1, 3-diaminopropane-folic acid nanoparticles on HT-29 cancer cells and is significantly lower than that of 5-FU and 5-FU loaded PLGA nanoparticles which only have an IC₅₀ of 22.9 and 14.17?µg/mL, respectively. The fluorescent microscopy images showed that nanoparticles with FA are largely taken up by HT-29 cancer cells and the targeting nanoparticles have more affinity to cancer cells than the pure drugs and untreated nanoparticles. Therefore, the 1, 3-diaminopropane can facilitate the conjugation of FA to PLGA to form a novel polymer and 5-FU loaded PLGA-1, 3-diaminopropane-folic acid nanoparticles can be a highly efficient system for specific delivery of drugs to cancer cells.     

Evaluation of isoindole derivatives: Antioxidant potential and cytotoxicity in the HT-29 colon cancer cells

Norcantharimides have an isoindole skeleton structure, and some isoindoline derivatives have positive effects on inflammatory pathologies, including cancers. The present study aims to evaluate the antioxidant and cytotoxic potential of four synthesized isoindoline derivatives (NCTD1–4). HT-29 cells exposed to 10, 50, 100, and 200 µM doses of each derivative were incubated for 24 and 48 h, respectively. The cytotoxicity of the new derivatives was analyzed using the cell growth inhibition assay and the cell membrane damage test. In vitro antioxidant activity studies showed that the derivatives have free radical-scavenging effects in a dose-dependent manner. NCTD3 and NCTD4 apparently have antioxidant effects when compared with the control group treated with dimethyl sulfoxide. Furthermore, NCTD4 inhibited the growth of the HT-29 cells due to membrane damage and exhibited a dose-dependent cytotoxic effect on colon adenocarcinoma cells. The findings suggest that NDTD4 has the highest potential for colon cancer treatment and may be interpreted as a candidate anticancer agent.     

Mechanisms of thiosulfinates from Allium tuberosum L.-induced apoptosis in HT-29 human colon cancer cells

This study was performed to elucidate the apoptotic pathways by thiosulfinates, major biologically active components of Allium tuberosum L., in HT-29 human colon cancer cells. Thiosulfinates significantly induced cell death in dose- and time-dependent manners in HT-29 cells, which is associated with apoptosis. Thiosulfinates activated the initiator caspase-8, and -9, and the effector caspase-3. In the present study, thiosulfinates were found to stimulate Bid cleavage, indicating that the apoptotic action of caspase-8-mediated Bid cleavage leads to the activation of caspase-9. Thiosulfinates down-regulated the expression of the anti-apoptotic protein Bcl-2, and up-regulated the expression of the pro-apoptotic protein Bax. We also found that thiosulfinates increased the expression of AIF, a caspase-independent mitochondrial apoptosis factor, and induced DNA fragmentation and chromatin condensation in HT-29 cells. These results indicate that thiosulfinates from A. tuberosum L. inhibited cell proliferation and activated both the caspase-dependent and caspase-independent apoptotic pathways in HT-29 cells.     

化合物209对人结直肠癌细胞HT-29的体内和体外作用(英文)

化合物209是一个新合成的氨基二硫代甲酸酯类化合物,它在体外水平可以抑制肿瘤细胞的增殖,但是化合物209的体内抗肿瘤作用及其抗肿瘤机制并不明确。本文探究了化合物209对人结直肠癌细胞HT-29的作用并初步探讨了相关机制。体外研究表明,化合物209可以显著抑制HT-29细胞的增殖;体内研究结果表明,化合物209可以显著抑制裸鼠HT-29移植瘤的生长,但是对裸鼠体重和白细胞无影响。流式细胞分析实验结果表明,化合物209可将HT-29细胞阻滞于细胞周期的G1期。同时,化合物209能上调体外培养HT-29细胞中p27,cyclin E,CDK2,cyclin D1和CDK4的表达。在体内瘤组织中上述蛋白表达情况与体外实验结果一致。这些结果说明,化合物209具有较好的抗肿瘤活性,其抗肿瘤作用与细胞周期阻滞及其相关蛋白的表达变化有关。     

异叶败酱总苷片对人大肠癌HT-29细胞凋亡的影响

目的：研究异叶败酱总苷片对人大肠癌细胞凋亡的影响及作用机制。方法：建立人大肠癌HT-29裸鼠移植瘤模型，设立异叶败酱总苷片低、中、高剂量组和空白组、5-氟脲嘧啶（5-FU）＋甲酰四氢叶酸钙（CF）对照组，给药8周后处死裸鼠，瘤体称重,末端原位标记染色法（TUEL）检测凋亡指数，分别行半胱天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3），Bax和Bcl-2免疫组化染色，图象分析系统定量检测并比较该3种物质表达情况。结果：异叶败酱总苷片各组瘤重小于空白对照组，而凋亡指数均高于空白对照组和5-FU＋CF组，其中高剂量组与空白对照组和5-FU＋CF组比较差异有极显著性（P＜0．01）。异叶败酱总苷片各组移植瘤caspase-3表达及Bax、Bcl-2表达的相对比率（Bax／Bcl-2）均高于空白对照组。结论：异叶败酱总苷片具有诱导人大肠癌HT-29裸鼠移植瘤细胞凋亡的作用，其机制可能与促进移植瘤caspase-3表达及增大Bax／Bcl-2表达比率有关。