高表达P73基因抑制肺腺癌细胞VEGF、bFGF mRNA表达

目的　观察高表达的p73基因对肺腺癌细胞生长曲线以及血管内皮生长因子 (VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)mRNA表达水平的影响 ,探讨高表达 p73基因在肺腺癌血管生成中的作用。 方法　将 p73α、p73 β以脂质体法转染A5 49细胞、H12 99细胞 ,采用细胞计数法绘制转染前后两种细胞生长曲线 ,RT PCR法半定量分析转染前后两种细胞中VEGF、bFGFmRNA的表达水平的变化。结果　转染p73基因后 ,A5 49细胞、H12 99细胞生长受到抑制 ,VEGF、bFGFmRNA表达水平下降 ,较未转染 p73基因的细胞有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,其中 p73 β对VEGFmRNA表达的抑制作用更为显著 (P <0 .0 1)。 结论　高表达的 p73基因能够抑制肺腺癌细胞生长 ,降低肺腺癌细胞中VEGF、bFGFmRNA表达水平 ,提示高表达的 p73基因可能参与调控人肺腺癌VEGF和bFGF基因表达 ,从而起到一个抑癌基因的作用     

VEGF和 bFGF在浅表膀胱移行细胞癌中的表达及意义

背景与目的：血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factior,bFGF)都能促进血管内皮细胞分裂和诱导血管形成,是肿瘤的生长,浸润,和转移过程中非常重要的物质,但它们在单发性和多发性浅表膀胱移行细胞癌中表达的差异则未见报道,本研究主要是探讨VEGF和bFGF在浅表膀胱移行细胞癌中的表达及意义。方法：采用免疫组化法对60例浅表膀胱移行细胞癌组织及10例正常膀胱组织进行VEGF和bFGF的检测,观察单发性和多发性浅表膀胱移行细胞癌组织中VEGF和bFGF表达的关系。结果：多发性浅表膀胱移行细胞癌的VEGF阳性率为55.6%,bFGF阳性率为50.0%,以及VEGF和bFGF共同表达阳性率为50.0%。均明显高于单发者的水平,而高水平表达的多发性肿瘤患者的术后复发率61.1%也明显高于单发组的复发率（单发组的复发率16.7%)。结论：VEGF和bFGF表达水平的高低与浅表膀胱移行细胞癌的生物学行为有关。     

VEGF和bFGF共同表达与膀胱癌生物学行为的关系

目的 探讨血管生成因子在膀胱移行细胞癌发生、发展中的作用。方法 应用免疫组化方法，对62例原发性膀胱移行细胞癌及8例正常膀胱组织 血管内皮生长因子（VEGF）和碱性纤维细胞生长因子（bFGF）进行检测。结果 膀胱癌组织中VEGF和bFGF阳性表达率分别为56.5%和46.8%，共同表达率为33.9%。VEGF和bFGF表达与膀胱癌的病理分级、临床分期、复发及3年生存率密切相关。结论 VEGF和bFGF表达对膀胱癌生物学行为有重要影响，VEGF和bFGF共同表达对于判定膀胱癌复发、转移和预后更有价值。     

膀胱癌中VEGF和bFGF表达的意义

目的探讨膀胱移行细胞癌中血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达与临床病理指标和预后的关系.方法应用免疫组织化学方法,对62例原发性膀胱移行细胞癌组织中VEGF和bFGF进行检测.结果膀胱癌组织中VEGF和bFGF阳性表达率分别为56.5%和46.8%.VEGF和bFGF表达与膀胱癌的病理分级、临床分期、复发及3年生存率密切相关.结论VEGF和bFGF表达对膀胱癌生物学行为有重要影响,VEGF和bFGF表达有可能成为预测膀胱癌复发、转移和预后的指标.     

p73基因对人肺腺癌细胞H1299化疗敏感性的影响

背景与目的:实验证明野生型p53基因能增强大多数非小细胞肺癌的化疗敏感性。p53基因的同源体p73与其在结构和功能上都具有高度的相似性。本研究拟探讨p73基因对人肺腺癌细胞株H1299化疗敏感性的影响。方法:通过脂质体介导将p73α基因导入人肺腺癌细胞株H1299,G418筛选获得稳定表达P73α的阳性细胞克隆。Westernblot检测转染细胞中P73α蛋白的表达;MTT法检测细胞存活率,观察转染细胞对阿霉素、顺铂的敏感性变化;采用流式细胞仪和TUNEL法检测.p73646化疗药诱导前后转染细胞凋亡的变化;克隆形成实验观察细胞生物学性状的变化。结果:转染p73α基因的H1299细胞可以稳定高表达P73α蛋白。MTT实验提示顺铂和阿霉素的IC50值分别减少了86.2%和99.2%,转染细胞在原本没有明显抑制和杀伤作用的药物浓度(1.25μmol/L的顺铂或0.05μmol/L的阿霉素)作用下生长明显受到抑制。流式细胞术显示p73α基因转染后顺铂诱导的细胞凋亡率从10.1%升高到38.4%(P<0.01),阿霉素诱导的细胞凋亡率从12.1%升高到49.3%(P<0.01)。克隆形成实验显示p73α基因转染能明显降低化疗后H1299细胞的克隆形成数(P<0.01),对顺铂和阿霉素的化疗增效倍数分别为1.8和2.6倍。结论:转染p73基因可以提高H1299细胞对阿霉素、顺铂等化疗药的敏感性。该作用可     

青年和绝经女性乳腺癌VEGF、bFGF及其受体表达的差异

目的 探讨青年和绝经女性乳腺癌血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(FLK-1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体(HLG)的表达特征和差异。方法 以SABC免疫组化法检测40例年龄≤35岁的青年女性(青年组)和30例绝经女性(绝经组)乳腺癌组织中VEGF、FLK-1、bFGF和FLG的阳性系数值并进行比较,探讨其与腋窝淋巴结转移和临床病理特征之间的关系,同时比较两组之间各项临床指标的差异。结果 青年组腋窝淋巴结转移率和VEGF、bFGF阳性系数值明显高于绝经组,差异有显著性或极显著性(P＜0．05或P＜0．01);腋窝淋巴结转移组的VEGF、bFGF、FLK—1和FLG阳性系数值明显高于腋窝淋巴结未转移组,差异有显著性或极显著性(P＜0．05或P＜0．01);VEGF、FLK—1和FLG阳性系数值在两组的TNM临床分期0-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期组问差异有显著性或极显著性(P＜0．05或P＜0．01)。结论 青年乳腺癌侵袭性强与肿瘤血管生成相关,主要表现为VEGF和bFGF高表达。     

非小细胞肺癌血清VEGF、bFGF和TNF-α的临床意义

[目的]观察非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)与NSCLC临床特征的相关性,探讨三者在NSCLC疗效评价中的临床价值。[方法]采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测NSCLC患者化疗前1d、化疗结束1周后血清VEGF、bFGF和TNF-α的含量。[结果]NSCLC患者化疗前血清VEGF、bFGF和TNF-α与患者临床分期有关(P<0.05),与患者年龄、性别及病理类型无关;分析68例晚期NSCLC患者化疗前后血清VEGF、bFGF和TNF-α的变化,临床获益组与疾病进展组比较三者均有明显下降(P<0.05)。[结论]血清VEGF、bFGF和TNF-α与NSCLC肿瘤负荷有关;血清VEGF、bFGF和TNF-α水平可作为NSCLC患者化疗疗效预测的参考指标。     

血清VEGF、bFGF与乳腺癌生物学行为的关系

目的：探讨VEGF、bFGF与乳腺癌的生物学行为的关系,复发转移患者血清VEGF、bFGF的表达水平与化疗疗效的关系。方法：应用ABC—ELISA方法检测乳腺癌患者血清VEGF、bFGF的表达情况。结果：术前未作放化疗的乳腺癌患者术前血清VEGF、bFGF表达水平明显高于健康体检者、乳腺腺瘤患者（P〈0．05）,也明显高于同组患者术后血清VEGF、bFGF表达水平（P〈0．05）。术前未作放化疗的乳腺癌患者术前血清VEGF、bFGF的表达水平与原发肿瘤的大小、TNM分期、淋巴结转移有关。术前未作放化疗的乳腺癌患者术前血清VEGF与bFGF的表达水平呈正相关（r=0．210,P〈0．05）。乳腺癌复发转移组化疗前血清VEGF、bF—GF的表达水平比健康体检者及无病生存组明显增高（P〈0．05）。乳腺癌复发转移组化疗后CR＋PR组血清VEGF、bFGF表达水平比化疗前明显减低（P〈0．05）;化疗后NC＋PD组血清VEGF、bFGF表达水平比化疗前略高,但没有显著性差异（P〉0．05）。乳腺癌复发转移组化疗后CR＋PR组血清VEGF、bFGF表达水平比NC＋PD组明显降低（P〈0．05）。结论：乳腺癌患者血清VEGF、bFGF的表达水平与乳腺癌生物学行为有关,而且与化疗疗效有关,提示通过检测乳腺癌患者血清VEGF、bFGF的表达水平可能对乳腺癌的诊断、客观预测肿瘤的复发转移、选择合理有效的治疗方案有一定的参考价值。     

抗VEGF165核酶对人肺腺癌细胞生物学特性的影响

目的 探讨抗血管内皮生长冈子165(VEGF165)核酶对人肺腺癌细胞生物学特性的影响。方法设计合成针对VEGF165 212位点的锤头状核酶(vascular endothelial growth factor ribozyme，VRZ)及其突变体(mutant VRz，mVRz)，体外检测核酶的剪切活性。采用亚克隆技术，构建腺病毒介导的抗VEGF165核酶真核表达载体pAdVRz，用重组腺病毒感染人肺腺癌细胞A549，分别采用Northern blot印迹杂交、流式细胞仪、透射电镜和激光共聚焦等技术，观察感染前后A549细胞的生物学性状的改变。结果成功地合成了具有明显剪切活性的抗VEGF165核酶VRz及其重组腺病毒表达载体rpAdVRz，并在A549细胞中获得表达。重组腺病毒感染细胞的VEGF165表达减少了87％，而生物学性状不受外源基因表达的影响。结论抗VEGF165核酶能够显著抑制人肺腺癌细胞内VEGF165的表达，为进一步进行肺癌的抗血管治疗提供了实验基础。     

血清VEGF、bFGF与乳腺癌生物学行为的关系

目的:探讨VEGF、bFGF与乳腺癌的生物学行为的关系,复发转移患者血清VEGF、bFGF的表达水平与化疗疗效的关系.方法:应用ABC-ELISA方法检测乳腺癌患者血清VEGF、bFGF的表达情况.结果:术前未作放化疗的乳腺癌患者术前血清VEGF、bFGF表达水平明显高于健康体检者、乳腺腺瘤患者(P<0.05),也明显高于同组患者术后血清VEGF、bFGF表达水平(P<0.05).术前未作放化疗的乳腺癌患者术前血清VEGF、bFGF的表达水平与原发肿瘤的大小、TNM分期、淋巴结转移有关.术前未作放化疗的乳腺癌患者术前血清VEGF与bFGF的表达水平呈正相关(r=0.210,P<0.05).乳腺癌复发转移组化疗前血清VEGF、bF-GF的表达水平比健康体检者及无病生存组明显增高(P<0.05).乳腺癌复发转移组化疗后CR+PR组血清VEGF、bFGF表达水平比化疗前明显减低(P<0.05);化疗后NC+PD组血清VEGF、bFGF表达水平比化疗前略高,但没有显著性差异(P>0.05).乳腺癌复发转移组化疗后CR+PR组血清VEGF、bFGF表达水平比NC+PD组明显降低(P<0.05).结论:乳腺癌患者血清VEGF、bFGF的表达水平与乳腺癌生物学行为有关,而且与化疗疗效有关,提示通过检测乳腺癌患者血清VEGF、bFGF的表达水平可能对乳腺癌的诊断、客观预测肿瘤的复发转移、选择合理有效的治疗方案有一定的参考价值.     

p73基因在肺癌组织中的表达

目的：探讨ｐ７３基因在肺癌组织中的表达情况。方法：采用定量ＲＴ－ＰＣＲ技术检测４０例肺癌及其癌旁肺组织中ｐ７３基因的表达程度;采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测肺癌与癌旁组织中ｐ７３基因的突变情况。结果：①定量ＲＴ－ＰＣＲ检出ｐ７３基因在２４例肺癌中呈中高表达,在癌旁组织中未检出高表达。ｐ７３基因在肺癌与癌旁组织中的表达率之间存在显著性差异（Ｐ＜０．０１）;在１９例中高分化标本中检出９例呈中高表达,在２１例低分化标本中检出１５例呈中高表达,两者之间存在显著性差异（Ｐ＜ ０．０１）;ｐ７３基因表达程度在１５例肺癌Ⅰ～Ⅱ期标本检出 ９例呈中高表达,２５例Ⅲ～Ⅳ期标本中检出１５例呈中高表达,两者之间无显著差异（Ｐ＞ ０．０５）。②等位基因表达分析示ｐ７３基因在１２例杂合标本肺癌组织中１０例存在Ｇ／Ｃ：Ａ／Ｔ双等位基因表达,在癌旁组织中皆为Ｇ／Ｃ表达,未见Ａ／Ｔ表达。③ＰＣＲ－ＳＳＣＰ未检出ｐ７３基因突变。结论：ｐ７３基因ｍＲＮＡ的表达可能与肺癌分化程度有关,与临床分期无关。     

p16/CDKN2 Gene and p53 Gene Alterations in Japanese Non-smoking Female Lung Adenocarcinoma

Primary lung adenocarcinomas in non-smoking females are increasing in the USA and Japan. Environmental factors such as passive smoking, asbestos, domestic radon, and hormonal effects have been implicated, but the etiology is still uncertain. We therefore analyzed point mutations of p16 gene, a newly characterized tumor suppressor gene, and compared the results with alterations of p53 gene in 28 primary lung adenocarcinomas in non-smoking Japanese females. There were no cases with somatic point mutation of p16 gene, except for one case with two germline mutations (silent mutations). In contrast, six out of 16 informative cases showed loss of heterozygosity of p53 gene using a TP53 microsatellite marker and 19 out of 28 cases showed expression of oncoprotein using DO-7 immunohistochemistry. These findings suggest that p16 gene alteration is a rare event in primary lung adenocarcinomas in Japanese non-smoking females, compared with alterations of the p53 gene.     

Association between a p73 Gene Polymorphism and Genetic Susceptibility to Non-small Cell Lung Cancer in the South of China

Background: This study aimed to identify any association between the p73 gene G4C14-to-A4T14 polymorphismand risk of non-small cell lung cancer (NSCLC) in the south of China. Materials and Methods: We genotypedthe p73 gene polymorphism of peripheral blood DNA from 168 patients with NSCLC and 195 normal controlsusing HRM (high resolution melting) and PCR-CTPP (polymerase chain reaction with confronting two-pairprimers). Results: The results of genotyping by HRM and PCR-CTPP were consistent with direct sequencing,the p73 genotype distribution in 168 lung cancer patients being as follows: GC/GC 101 cases (60.1%), GC/AT 59 cases (35.1%), AT/AT 8 cases (4.8%). The carriers of AT/AT genotype had a significantly reduced riskof NSCLC (OR=0.370; 95%CI: 0.170-0.806; p=0.010) as compared with non-carriers. However, we found norelations between p73 genotypes and histological type (p=0.798, x2=0.452), tumor stage (p=0.806, x2=0.806), orlymph node metastasis (p=0.578, x2=1.098). Conclusions: Our findings suggest that the p73 G4C14-to-A4T14polymorphism may be a modifier of NSCLC susceptibility in the Chinese population.     

胃癌组织p73基因突变与p21waf2蛋白的检测分析

[目的]探讨胃癌组织中p73基因突变与p21waf2蛋白表达的相关性及其在胃癌发生、发展中的作用.[方法]采用PCR_SSCP及免疫组织化学法,检测60例胃癌新鲜手术标本中癌组织和相应的胃正常粘膜组织p73突变及p21waf2蛋白的表达.[结果]p73突变检出率,在60例胃癌组织中为53.33%(32/60),在相应的胃正常粘膜组织中为1.67%(1/60),差异有显著性(P<0.01);其中25例有淋巴结转移者,p73突变检出率为92.00%(23/25),无淋巴结转移者为25.71%(9/35),差异有非常显著性(P<0.005).p21waf2蛋白检测阳性率,在60例胃癌组织中为33.33%(20/60),在相应的胃正常粘膜组织中为86.67%(52/60),有显著性差异(P<0.01);其中25例有淋巴结转移者,p21waf2蛋白阳性率为4.00%(1/25),无淋巴结转移者为53.45%(19/35),差异有显著性(P<0.01).[结论]胃癌组织中,p73基因突变与p21waf2蛋白低表达有显著的相关性,并与胃癌的发生和胃周淋巴结转移相关,其临床意义值得进一步探讨.     

△Np73基因在人非小细胞肺癌中的转录表达及其临床意义

背景和目的 △Np73是p53基因家族新成员p73的异构体，研究表明△Np73因为N末端转录活化区缺失致转录活化功能完全丧失，对p53和全长型p73的转录活化和促凋亡活性有明显的负调节作用。本研究旨在探讨人非小细胞肺癌组织中△Np73转录表达及其与患者临床病理特征之间的关系，分析其对肺癌患者预后的意义。方法采用半定量逆转录多聚酶链反应技术（RT—PCR）检测40例非小细胞肺癌癌组织及癌旁肺组织△Np73mRNA的表达，结合其临床病理特征，统计分析△Np73在肺癌组织中表达的意义。结果 51例非小细胞肺癌癌组织中有32例（62．7％）呈△Np73mRNA高表达，而在癌旁肺组织中低表达。△Np73的表达与肺癌的临床TNM分期有密切关系（P=0．046），但与患者年龄、性别、分化程度和病理学类型无显著相关性。△Np73mRNA高表达的患者较低表达的患者术后生存期短，预后差（P〈0．001）。结论 △Np73基因在人非小细胞肺癌癌组织中的转录表达较对应癌旁肺组织明显升高，并与患者临床分期和预后相关。△Np73基因的转录表达情况可作为非小细胞肺癌预后判断的参考指标之一。     

鼻咽癌患者放射治疗前后血清VEGF和bFGF的变化

[目的]探讨鼻咽癌（NPC）患者放射治疗前后外周血清血管内皮细胞生长因子（VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的变化。[方法]42例NPC患者作为放疗组予以放射治疗。40例健康体检者作为正常对照组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测放疗前后NPC患者外周血清VEGF和bFGF的含量，并与对照组比较。[结果]放疗前NPC患者血清VEGF和bFGF显著升高，与对照组比较有统计学意义（P〈0．01）。放疗后3个月NPC患者血清VEGF和bFGF明显下降，接近对照组水平（P〉0．05），放疗后1年复发者血清VEGF和bFGF水平持续异常（P〈0．01），未复发者血清VEGF和bFGF水平恢复正常（P〉0．05）。放疗前后患者血清VEGF和bFGF的浓度变化呈正相关（P=0．0011，r=0．7981）。[结论]NPC患者血清中VEGF和bFGF高表达，测定NPC患者血清中VEGF和bFGF的变化对临床疗效观察和预后判断均有重要的临床意义。