“克疣灵”对人包皮表皮细胞和尖锐湿疣疣体组织细胞增殖影响的实验研究

目的 :探讨中药“克疣灵”治疗尖锐湿疣 (CA)的作用机制。　方法 :采用细胞原代与传代培养技术、MTT比色法测定人包皮表皮细胞、CA细胞的增殖程度 ,不同浓度“克疣灵”对人包皮表皮细胞、CA细胞增殖的影响。　结果 :吸光度值 (A值 )与人包皮表皮细胞、CA细胞数量呈正相关 (人包皮细胞组r=0 .985 0 ,CA细胞组r =0 .9892 ,P均 <0 .0 0 1) ,“克疣灵”对人包皮表皮细胞增殖生长无影响 ,而对CA细胞增殖具有显著的抑制作用 ,“克疣灵”浓度与CA细胞增殖率呈显著负相关 (r =- 0 .4 12 4 ,P <0 .0 1)。　结论 :“克疣灵”能显著抑制CA细胞的增殖生长 ,而不影响机体正常表皮细胞生长。提示“克疣灵”可能具有抗人乳头瘤病毒作用。     

慢性前列腺炎患者前列腺液IL-1β和TNF-α的检测及意义

目的 :了解IL 1β和TNF α在慢性前列腺炎患者前列腺按摩液 (EPS)中的变化及临床意义。 　方法 :应用ELISA法对 34例慢性前列腺炎 [EPS中白细胞 (WBC)计数≥ 10 /HP为A组 16例 ,WBC <10 /HP为B组 18例 ]、10例无症状性前列腺炎、12例良性前列腺增生 (BPH)及 8例健康对照EPS中的IL 1β和TNF α进行检测。 　结果 :IL 1β和TNF α在EPS中WBC≥ 10 /HP的慢性前列腺炎和无症状性前列腺炎两组检测值明显高于WBC <10 /HP的慢性前列腺炎、BPH和健康对照 3组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 2 )。IL 1β与TNF α有显著的数列等级相关性 (P <0 .0 0 3) ,而WBC计数和IL 1β、TNF α之间的数列等级相关性无显著性意义。 　结论 :IL 1β与TNF α在伴有WBC计数增高的慢性前列腺炎患者EPS中明显增高 ,IL 1β与TNF α对传统以WBC计数为慢性前列腺炎进行分类的方法可以提供一个更准确的新分类方法。     

原发性肝癌患者sIL-2R,IL-6和TNF-α测定及其临床意义

笔者采用双抗体夹心ELISA法测定 3 3例原发性肝癌 (PHC )患者血清sIL 2R ,IL 6和TNF α水平 ,并对术前、术后 2周的测定值进行对比。结果示PHC患者手术前sIL 2R ,IL 6和TNF α明显高于正常人 (P <0 .0 5 ) ;手术后 2周 ,上述三指标明显下降 (P <0 .0 5 )。AFP水平与sIL 2R ,IL 6和TNF α水平无关 ( r=0 .3 82 6,0 .5 3 0 1,0 .3 72 5 ,均 P >0 .0 5 ) ;病理类型与sIL 2R ,IL 6和TNF α水平无关 (P >0 .0 5 )。提示sIL 2R ,IL 6和TNF α可作为原发性肝癌诊断、疗效及预后评价的辅助性指标。     

糖尿病大鼠椎间盘中白介素-1α和肿瘤坏死因子-α的含量变化

目的 :测定糖尿病大鼠椎间盘组织中白介素 1α (IL 1α)和肿瘤坏死因子 α (TNF α)的含量变化 ,并对其意义进行探讨。方法 :3 6只SD大鼠随机分为 2组 ,每组 18只 ,处理组用腹腔单次注射链脲佐菌素溶液 (strep tozotocin ,STZ)造成糖尿病。分别在第 1、 3、 4个月时 ,采用免疫酶联法 (ELISA法 )测定椎间盘组织中IL 1α和TNF α。结果 :在 3个不同时期 ,糖尿病组中IL 1α和TNF α的含量均明显高于正常对照组 (P <0 0 1)。糖尿病组中IL 1α和TNF α的含量在 3个不同时期差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :糖尿病时 ,椎间盘组织中IL 1α和TNF α的含量明显增加 ,并维持在较高水平 ,这可能与造成糖尿病患者椎间盘突出术后效果相对差有关     

益肾灵颗粒对维持性血液透析患者的免疫功能及脂质过氧化作用的影响及疗效观察

目的 :为了探讨益肾灵颗粒对维持性血液透析 (MHD)患者的临床疗效及作用机理。方法 :我们对 38例慢性肾衰竭 (CRF)维持性血液透析 (MHD)患者加用益肾灵颗粒治疗后 ,与实验对照组 30例比较 ,观察其外周血NK细胞活性、IL - 2、SOD及临床疗效。结果 :实验治疗组患者外周血NK细胞活性以及IL - 2和SOD含量升高明显 ,优于实验对照组 (P <0 .0 1) ,临床疗效亦明显优于实验对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :益肾灵颗粒具有显著改善MHD患者细胞免疫功能、对抗脂质过氧化、提高氧自由基清除率和临床疗效     

大肠癌患者手术前后外周血NK细胞和TNF的变化及意义

目的　通过检测外周血自然杀伤细胞 (naturalkillercell,NKcell)数和肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor ,TNF)水平来探讨其在大肠癌中的表达机制及临床意义。方法　应用碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶 (APAAP)法和放射免疫法 (RIA)分别检测 4 2例大肠癌患者血清NK细胞数和TNF水平 ,并与大肠良性疾病患者及正常人作对比分析。结果　 (1)大肠癌肿组外周血NK细胞数较良性疾病组及正常对照组显著降低 (P <0 .0 1) ,TNF水平显著升高 (P <0 .0 1) ,良性疾病组与正常对照组相比 ,差异无意义 ;(2 )根治性肿瘤切除术后两周 ,外周血NK细胞升高 ,TNF水平下降 ,与术前相比 ,有显著性差异 ;非根治性肿瘤切除术者与术前相比无差异 ;(3)有淋巴结或远处转移者外周血NK细胞数较非转移者显著降低 (P <0 .0 1) ,而TNF水平显著升高 (P <0 .0 1) ;(4)外周血NK细胞数与TNF水平在大肠癌患者中呈显著负相关 (P <0 .0 5 )。结论　检测外周血NK细胞数和TNF水平可评估大肠癌患者细胞免疫功能 ,对判断术后疗效及预后有较大价值。     

早期血滤对重症急性胰腺炎家猪血浆细胞因子水平的影响

目的　探讨早期血液滤过对重症急性胰腺炎 (SAP)家猪促抗炎细胞因子血浆水平的影响。方法　采用胰管逆行灌注人工胆汁的方法复制家猪SAP模型 ,随机分为胰腺炎血滤治疗组(HF组 ,n =8)和胰腺炎非血滤治疗组 (NHF组 ,n =8)。HF组使用高容量、零平衡血滤。用酶联免疫吸附试验检测两组动物建模前后血浆肿瘤坏死因子 (TNF) α、白细胞介素 (IL) 1β、IL 10的水平。结果　与NHF组相比 ,血滤治疗后HF组家猪TNF α、IL 1β的血浆水平较低 [血滤停止前( 618± 2 76)ng/L较 ( 13 75± 3 3 4)ng/L ;( 4 45± 14 1)ng/L较 ( 965± 2 65 )ng/L ,P <0 .0 1] ,IL 10与TNF α的比值较高 [血滤停止前 ( 0 .3 5 4± 0 .114 )较 ( 0 .12 5± 0 .0 3 2 ) ,P <0 .0 1]。结论　早期血滤能降低SAP家猪促炎细胞因子TNF α,IL 1β的血浆水平 ,升高IL 10 /TNF α的比值 ,使促抗炎细胞因子失衡得到部分纠正。     

断流分流联合手术前后血浆IL-6,IL-8和TNF-α水平的变化及其意义

目的　探讨门静脉高压症行贲门周围血管离断并脾 -肾静脉分流联合手术前后血浆白细胞介素 -6(IL 6) ,白细胞介素 -8(IL 8)和肿瘤坏死因子 -α(TNF α)水平变化的意义。方法　检测联合手术组患者术前 1d和术后 7d血浆IL 6,IL 8和TNF α含量 ,并与对照组比较。结果　联合手术组术前IL 6,IL 8和TNF α水平分别为 ( 2 3 0 .4± 10 .3 )ng/L ,( 2 0 1.5± 7.8)ng/L及 ( 2 61.5± 2 8.3 )ng/L ,明显高于对照组 (P <0 .0 1) ;联合手术后 7d ,IL 6,IL 8和TNF α水平分别为 ( 13 5 .8± 11.4)ng/L ,( 10 8.2± 8.7)ng/L及 ( 2 11.8± 3 6.5 )ng/L ,与术前比均有明显降低 ,但仍高于对照组 ( P <0 .0 1)。结论　IL 6,IL 8和TNF α的活性在肝硬化门静脉高压症的形成过程中起着重要作用 ;联合手术降低门静脉压力 ,血浆IL 6,IL 8和TNF α水平显著下降 ,表明有利于肝功能的恢复     

前列腺按摩液中IL-8和TNF-α测定在慢性前列腺炎诊断、分型中的临床意义

目的 :探讨检测前列腺按摩液 (EPS)中细胞因子白细胞介素 8(IL 8)和肿瘤坏死因子α(TNF α)在慢性前列腺炎诊断、分型中的意义。　方法 :ELISA法检测 78例临床诊断的慢性前列腺炎患者 [其中慢性前列腺炎(CBP)组 12例 ,慢性非细菌性前列腺炎 /慢性骨盆疼痛综合征 (CPPS)ⅢA组 38例 ,CPPSⅢB组 2 8例 ]和 12例正常对照者EPS中IL 8和TNF α浓度。分析各组EPS中IL 8和TNF α浓度差异。　结果 :CBP组和CPPSⅢA组EPS中IL 8水平 [(10 96 7.5± 3477.7) pg/ml;(92 6 8.4± 2 0 34.6 ) pg/ml]和TNF α水平 [(84 .1± 5 4 .7) pg/ml;(32 .6± 18.6 ) pg/ml]显著高于CPPSⅢB组和正常对照组EPS中的IL 8水平 [(2 72 6 .1± 2 77.5 ) pg/ml;(2 80 0 .0± 32 0 .2 )pg/ml]和TNF α水平 [(12 .6± 7.1)pg/ml;(12 .9± 10 .1)pg/ml](P均 <0 .0 1)。　结论 :检测EPS中IL 8、TNF α水平可能有助于CBP、慢性非细菌性前列腺炎 /慢性骨盆疼痛综合征的分型诊断。     

肿瘤坏死因子-α对大鼠坏死性胰腺炎肺损伤的影响

目的　探讨肺内肿瘤坏死因子 α(TNF α)在大鼠急性坏死性胰腺炎 (ANP)所致肺损伤中的作用。方法　将大鼠分为正常对照、ANP和TNF α抗体预处理 3组 ,后两组又分为 1、3、6、12h 4组 ,每组 6只。胰胆管注入 3 %牛磺酸钠诱发ANP。肺灌洗获得巨噬细胞 ,培养后检测TNF α水平、肺泡灌洗液 (BALF)中蛋白含量 ,取肺组织测髓过氧化物酶 (MPO)水平。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测巨噬细胞TNF αmRNA表达。结果　ANP和TNF α抗体预处理组各指标均较正常对照升高 (P <0 .0 5 )。TNF α水平与MPO及BALF蛋白含量呈正相关 (P <0 .0 1) ,TNF αmRNA的表达及TNF α水平与肺损害程度呈正相关 (P <0 .0 1)。结论　肺泡巨噬细胞TNF α的过表达与ANP大鼠所致肺损伤有密切关系。     

细胞因子对异种脱细胞真皮基质免疫调节作用的临床研究

目的　探讨烧伤患者接受异种 /异体脱细胞真皮基质 (xeno /allo ADM )移植后全身和局部多种细胞因子与移植物近期转归的关系。　方法　在大面积烧伤患者的四肢切痂创面上 ,移植xeno ADM (12例 ,19块 )或allo ADM(15例 ,18块 ) ,其上覆盖自体超薄断层皮片 ,并以 6例单纯移植自体中厚断层皮片 (auto TTS)的烧伤患者为对照。移植物成活后 4～ 8周 ,收集局部组织标本、血清和xeno ADM排斥后的创面渗出液 ,采用免疫组织化学染色与酶联免疫吸附法 (ELISA) ,检测白细胞介素 (IL) 1β、IL 4、IL 6、肿瘤坏死因子α(TNF α)和γ型干扰素 (IFN γ)的含量。　结果　免疫组织化学染色结果显示 ,移植物内IL 1β、IL 4、IL 6、TNF α和IFN γ的阳性细胞密度或着色强度相比较 ,xeno ADM >allo ADM >auto TTS (P <0 .0 5 )。ELISA检测结果显示 ,xeno ADM被排斥后创面渗出液中IL 4、IL 6、TNF α和IFN γ水平明显高于自体血清 ,但其血清IL 4与IFN γ水平分别低于和高于未排斥时。xeno ADM移植后血清中IL 4、IFN γ水平明显高于allo ADM和auto TTS(P <0 .0 5～ 0 .0 1)。　结论　xeno ADM移植后可在局部检测到高水平的IL 1β、IL 4、IL 6、IFN γ ,可能与细胞杀伤和细胞因子介导的免疫放大作用有关。这些细胞因子的动态变     

IL-1 8在内毒素诱导大鼠肝损伤中的变化及中药腑安的作用

目的：研究白细胞介素－18（IL－18）在内毒素诱导大鼠肝损伤中的变化及中药腑安颗粒防治肝损伤的作用机理。方法：通过向大鼠腹腔内注射O111B4标准大肠杆菌加硫酸钡混悬液,建立实验性腹膜炎内毒素血症的动物模型,诱发大鼠肝损伤。检测血中内毒素（ET）、IL－18、谷丙转氨酶（ALT）的水平及肝组织病理学变化,并与腑安治疗组相比较。结果：实验性腹膜炎内毒素血症诱发的肝损伤中,大鼠血浆中内毒素及血清中的ALT含量升高,腑安治疗组中,内毒素及ALT水平均低于肝损伤模型组（P＜0．01）。模型组大鼠血清中IL－18显著升高,与ALT水平呈正相关。经腑安颗粒治疗后,可降低血清中IL－18。结论：内毒素诱导肝损伤的程度与血清中IL－18的升高呈正相关,表明IL－18是内毒素诱导肝损伤中的重要诱导因子,中药腑安颗粒保护肝脏的作用机制之一可能是通过降低IL－18水平而实现。     

大鼠诱发肝癌模型中脾内转染IL-2和IL-12基因激活NK细胞

目的研究大鼠诱发肝癌模型中脾内直接注射携带白介素2（IL-2）和（或）白介素12（IL-12）基因的逆转录病毒包装细胞株对血IL-2和IL-12,以及NK细胞活性的影响.方法大鼠随即分为生理盐水对照组、空载体对照组、IL-12基因治疗组、IL-2基因治疗组及IL-2/IL-12联合基因治疗组.构建携带IL-2和（或）IL-12基因的逆转录病毒载体.口服二乙基亚硝胺诱癌后,含IL-2和（或）IL-12基因的包装细胞转染脾细胞.比较大鼠血IL-2和IL-12浓度、NK细胞活性、病理变化和毒性反应.结果IL基因治疗后血IL-2和IL-12明显增加.联合基因组同时表达IL-2和IL-12,总水平高于单基因治疗组.病理示治疗后肝癌组织中淋巴细胞浸润明显增多.IL治疗组NK细胞活性较对照组显著增高（P＜0.01）.联合基因组较IL单基因增高（P＜0.05）.治疗后3 d血清IL达高峰,以后逐步下降.结论脾内直接注射携带IL-2和（或）IL-12基因的逆转录包装细胞株可明显增强NK细胞活性,IL联合基因治疗优于IL单基因.     

极化液对严重烫伤伴多器官功能障碍综合征大鼠炎性细胞因子水平及预后的影响

目的观察早期极化液治疗对烫伤伴多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠炎性细胞因子水平及预后的影响,探讨其防治机制。方法将120只SD大鼠造成30%TBSAⅢ度烫伤,伤后2h腹腔注射内毒素,制作烫伤伴MODS大鼠模型,随机分为极化液组、葡萄糖组和盐水组,每组40只。观察3组大鼠伤后1~7d血浆中血糖、乳酸、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、一氧化氮(NO)以及白细胞介素6(IL-6)含量的变化;并计算伤后7d内各组大鼠的死亡率。结果极化液组大鼠伤后1~7d血糖、乳酸、TNF-α、IL-6和NO含量均明显低于其他组(P<0.01),伤后6~7d其TNF-α、IL-6和NO含量达到最低值,分别为(2.37±0.54)μg/L、(0.28±0.17)μg/L及(29±9)μmol/L;葡萄糖组血糖、乳酸含量明显高于盐水组(P<0.01),而两组TNF-α、IL-6和NO含量相近(P>0.05).极化液组伤后7d内死亡率为20.0%,明显低于葡萄糖组与盐水组(分别为37.5%、47.5%,P<0.05).结论极化液通过改善烫伤引起的糖代谢障碍,降低机体炎性细胞因子水平,可作为防治烫伤伴MODS的辅助措施。     

免疫治疗对肝癌患者术后细胞免疫功能的影响及临床疗效

目的 探讨肿瘤浸润性淋巴细胞（ＴＩＬ）、ｒＩＬ－２和环磷酰胺治疗对原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）患者术后细胞免疫功能的影响和临床疗效。方法 对８例ＨＣＣ术后患者进行了ＴＩＬ、ｒｈ－２和环磷酰胺治疗,６例从肝动脉插管输入,２例从门静脉插管输入。结果 ＴＩＬ治疗后８例患者外周血自然杀伤细胞（ＮＫ）、ＩＬ－２治疗、Ｔ亚群及比率均有不同程度上升,差异有显著意义。ＴＮＦ、ＩＬ－６多有不同程度下降（Ｐ〉０．０５,Ｐ     

慢性非细菌性前列腺炎患者血清和前列腺液4种细胞因子检测及意义

目的:探讨血清和前列腺按摩液(EPS)中细胞因子与慢性非细菌性前列腺炎(CAP)的关系。方法:用ELISA法对86例CAP患者(其中CAPⅠ组60例,WBC≥10个/HP;CAPⅡ组26例,WBC<10个/HP)血清和EPS进行白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)检测,同时,以20例健康男性作对照,并对所获得的数据进行统计学分析。结果:CAPⅠ组血清和EPS中的IL-2、IL-8、TNF-α,以及血清IL-4均有不同程度的升高,与对照组相比差异有显著性(P<0.05或P<0.01),EPS中的IL-4在CAPⅠ组、CAPⅡ组、对照组间比较差异无显著性(P>0.05),CAPⅡ组血清和EPS中的IL-2、IL-4、TNF-α与对照组相比无显著性差异(P>0.05);EPS中WBC数与IL-8水平存在相关性(r=0.62,P<0.05)。结论:IL-2、IL-8、TNF-α水平可能在CAP发生发展过程中起作用,对CAP的辅助性诊断和分型有一定应用价值。     

p38丝裂原活化蛋白激酶在烧伤大鼠急性肺损伤中的作用机制

目的　研究 p38丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)信号转导通路在严重烧伤大鼠肺部促炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF α)、白细胞介素 1β(IL 1β)产生及肺血管内皮细胞损伤中的作用和相关机制。　方法　健康成年雄性SD大鼠 4 8只 ,随机分为假烫 (A)组、烫伤对照 (B)组和烫伤 p38MAPK抑制剂SB2 0 35 80(C)组 ,每组各 16只。观察烫伤 (以下称烧伤 ) 2 4h后大鼠血清和支气管肺泡灌洗液 (BALF)中TNF α和IL 1β含量、血浆和肺脏微血管vonWillebrand因子 (vWF)含量、肺脏激活蛋白 1(AP 1)活性等指标的改变。　 结果　B组大鼠烧伤后 2 4h血清和BALF中TNF α和IL 1β含量明显增高 ,血浆vWF含量为 (194 .2± 2 8.3) % ,显著高于A组的 (93.2± 14 .3) % (P <0.0 1);肺脏微血管vWF含量的积分值为 1.1± 0 .3,显著低于A组的 3.3± 0 .4 (P <0.0 1);其肺脏AP 1活性上升。C组血清和BALF中TNF α和IL 1β含量、血浆及肺脏微血管vWF含量、肺脏AP 1的活性较B组变化幅度明显偏小。　结论　p38MAPK活化后 ,通过活化转录因子AP 1,介导了严重烧伤后肺脏促炎性细胞因子TNF α和IL 1β的产生和肺血管内皮细胞的损伤     

Phosphodiesterase inhibition decreases nuclear factor-kappaB activation and shifts the cytokine response toward anti-inflammatory activity in acute endotoxemia

BACKGROUND: In sepsis, activation of inflammatory cells and excessive production of proinflammatory cytokines leads to tissue injury, multiple organ failure, and death. We postulated that attenuation but not complete abrogation of hyperinflammation is of clinical benefit in sepsis. Because pentoxifylline (PTX) is known to decrease tumor necrosis factor (TNF)-alpha production and to increase anti-inflammatory cytokine synthesis, we tested the hypothesis that PTX treatment would change the pro- and anti-inflammatory balance and decrease mortality in a murine model of acute endotoxemia. In addition, we investigated the effects of PTX on nuclear factor (NK)-kappaB activation using lipopolysaccharide (LPS)-stimulated human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) as a model. METHODS: Sprague-Dawley rats were treated with intravenous saline (sham), LPS (lipopolysaccharide, Escherichia coli serotype 0111:B4, 5 mg/kg), and concomitant injection of LPS + PTX (25 mg/kg). Four- and 24-hour plasma TNF-alpha and interleukin (IL)-10 levels, 4-hour white cell count, and 24-hour mortality rates were assessed. The IL-10/TNF-alpha ratio was also calculated. Human PBMCs were stimulated with LPS (10 microg/mL) and exposed to PTX (20 mM) concomitantly or 15 minutes after LPS stimulation. I-kappaB phosphorylation by Western blot and NF-kappaB nuclear translocation by electrophoretic mobility shift assay were assessed. RESULTS: PTX markedly down-regulates TNF-alpha production. IL-10 levels at 4 hours were up-regulated in both LPS and PTX + LPS-treated animals; however, levels were higher in the LPS groups, which paralleled high TNF-alpha levels. In contrast, IL-10 levels at 4 and 24 hours in PTX + LPS-treated animals remained constant, whereas in LPS-treated animals, IL-10 levels at 24 hours were markedly decreased. A shift in the internal milieu balance toward anti-inflammatory activity was confirmed by the calculation of the IL-10/TNF-alpha ratio. These changes were not related to changes in the number of circulating leukocytes. The 24-hour mortality rate was 50% in the LPS group and nil in PTX-treated animals. In LPS-stimulated PBMCs, PTX markedly decreases I-kappaB phosphorylation and NF-kappaB nuclear translocation. CONCLUSION: PTX enhances anti-inflammatory activity and decreases mortality in acute endotoxemia. PTX may be an important adjunct to therapies aiming to modulate the inflammatory response in sepsis.