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1.
目的了解干眼患者结膜上皮细胞是否存在凋亡与炎症状态,进一步理解干眼的发病机制.方法印迹细胞法获得干眼6例22眼和正常人7例10眼的结膜上皮细胞.Annexin V-FrTC./PI流式细胞技术(flow cytometric,FCM)定量检测凋亡;免疫印迹细胞化学染色检测核转录因子-κB(NF-κ.B)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达.结果干眼患者结膜上皮细胞的凋亡指数较正常对照组明显增高(P<0.05),NF-κB和TGF-β1的表达较正常增强.凋亡指数与NF-κB和TGF-β1的表达呈正相关.结论干眼患者结膜上皮存在细胞凋亡及炎症,眼表上皮细胞的炎症可能是引起细胞凋亡的重要原因,抑制炎症是干眼的重要治疗方法. 相似文献
2.
Objective To apprehend the ocular surface condition of type 2 diabetes mellitus patients by detecting the apoptosis index and the inflammation condition of conjunctival epithelial cell. To analyze the reason of the type 2 DM' s dry eye. Methods Thirty-five type 2 DM patients and 25 healthy adults were se lected randomly to detect the break-up time (BUT ), Schirmer I test (SIt) and Fluorescein staining (FL). Con junctival epithelial cells were collected by impression cytology from the type 2 DM patients and healthy adults. Flow cytometry was taken to measure apoptosis. Immunohistochemical staining was performed to detect trans forming TGF-P ,and NF-K B. Results The value of SIt and BUT in type 2 DM patients obviously increased man those in control group (P <0.01). The FL in type 2 DM patients positively expressed than that in control group (P<0.01). The apoptotic index of conjunctival epithelium in type 2 DM patients was significantly higher than that in control group (P <0.01). The expression of TGF-β1 ,and NF-k B in DM patients was obviously stronger than those in control group (P <0.01). The apoptotic index showed positive correlation with the ex pression of TGF-* 1 (P<0.01). Conclusions The increase of apoptotic and inflammation of conjunctival ep ithelium may have close relationship with the type 2 DM' s dry eye. 相似文献
3.
Objective To apprehend the ocular surface condition of type 2 diabetes mellitus patients by detecting the apoptosis index and the inflammation condition of conjunctival epithelial cell. To analyze the reason of the type 2 DM' s dry eye. Methods Thirty-five type 2 DM patients and 25 healthy adults were se lected randomly to detect the break-up time (BUT ), Schirmer I test (SIt) and Fluorescein staining (FL). Con junctival epithelial cells were collected by impression cytology from the type 2 DM patients and healthy adults. Flow cytometry was taken to measure apoptosis. Immunohistochemical staining was performed to detect trans forming TGF-P ,and NF-K B. Results The value of SIt and BUT in type 2 DM patients obviously increased man those in control group (P <0.01). The FL in type 2 DM patients positively expressed than that in control group (P<0.01). The apoptotic index of conjunctival epithelium in type 2 DM patients was significantly higher than that in control group (P <0.01). The expression of TGF-β1 ,and NF-k B in DM patients was obviously stronger than those in control group (P <0.01). The apoptotic index showed positive correlation with the ex pression of TGF-* 1 (P<0.01). Conclusions The increase of apoptotic and inflammation of conjunctival ep ithelium may have close relationship with the type 2 DM' s dry eye. 相似文献
4.
目的:探究吡咯脘二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对转化生长因子-beta2(TGF-β2)诱导人晶状体上皮细胞(LECs)上皮-间充质转化(EMT)的逆转机制。 方法:TGF-β2诱导人晶状体上皮细胞EMT,并给予不同浓度PDTC处理TGF-β2诱导的LECs。CCK-8、划痕试验检测细胞增殖与迁移,Western Blot检测EMT标志物E-cadherin、α-SMA和NF-κB信号传导通路相关蛋白表达,以及凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、Caspase-3、细胞周期蛋白D1的表达。 结果:TGF-β2处理组细胞增殖和迁移活力明显高于未添加TGF-β2的实验组; E-cadherin表达下调,α-SMA表达上调。在TGF-β2的作用下NF-κB p65和磷酸化的NF-κB p65表达增加(P<0.05)且在TGF-β2 10 ng/mL刺激浓度时LECs表现出较强的增殖活力和迁移能力。PDTC逆转EMT和诱导细胞凋亡的机制研究表明,PDTC干预处理后细胞活力和迁移能力都显著降低,PDTC抑制IκB的磷酸化进而抑制NF-κB核移位,NF-κB信号通路中NF-κBp65/p-NF-κB p65、Iκκ-α/p-Iκκ-α表达下调(P<0.05),诱导促凋亡蛋白BAX/Caspase-3表达上调、抑凋亡蛋白BCL-2、细胞周期蛋白Cyclin D1表达下调,NF-κB/IκB mRNA表达下调,凋亡相关mRNA BAX表达上调BCL-2表达下调。 结论:PDTC可显著逆转由TGF-β2诱导的LECs细胞EMT过程,可能与抑制NF-κB信号通路活化使NF-κB p65/IκB/Iκκ-α表达降低以及激活凋亡相关蛋白表达有关,PDTC可通过抑制NF-κB信号通路达到逆转EMT的进程并使异常增殖的细胞发生凋亡,这将为后发性白内障的治疗提供新的潜在的治疗药物。 相似文献
5.
目的研究超声乳化术后结膜上皮细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)和核转录因子-κB(NF-κB)的表达变化,探讨影响超声乳化术后泪膜变化的机制.方法对老年性白内障患者26例(26只眼),分别于术前,术后14和30天采用印痕细胞学和免疫组织化学染色检测结膜上皮细胞中TGF-β1和NF-κB p65的表达,并行泪液分泌(Schirmer Ⅰ)试验和泪膜破裂时间(BUT)检查,荧光素染色和泪河高度测量.结果术后14天,Schirmer Ⅰ试验和泪河高度已与术前无明显差异,但BUT明显缩短(P<0.01),荧光素染色明显增多(P<0.01),NF-κB和TGF-β1的表达也明显增强.术后30天各指标均与术前无明显差异,但有6例泪膜未恢复的患者其NF-κB和TGF-β1的表达也未恢复到术前.NF-κB和TGF-β1的表达程度与角膜荧光素染色程度呈正相关.结论超声乳化白内障摘出术可影响泪膜的稳定性,这与术后眼表面上皮的炎症和增生,尤其是炎症水平的增强密切相关. 相似文献
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目的:探讨干眼患者结膜上皮细胞及泪液中干扰素调节因子4(IRF4)、可溶性致癌抑制因子2(sST2)表达情况及其临床意义。方法:选取本院2019-01/2021-12期间收治的94例干眼患者作为干眼组,同期选取97例行眼科检查的体检者作为对照组,收集研究对象结膜上皮细胞及泪液,记录临床指标泪膜破裂时间(BUT)、角膜荧光素染色(CFS)评分、基础泪液分泌试验(SⅠt)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测结膜上皮细胞IRF4、sST2水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测泪液IRF4、sST2水平,采用Pearson法分析干眼患者结膜上皮细胞及泪液中IRF4、sST2水平与临床指标的相关性。结果:干眼组治疗前结膜上皮细胞及泪液中IRF4、sST2水平均显著高于对照组(P<0.001)。干眼患者治疗4wk后结膜上皮细胞及泪液中IRF4、sST2水平均显著低于治疗前(P<0.001)。干眼患者治疗4wk后BUT、SⅠt显著增加,CFS评分显著降低(P<0.001)。干眼患者治疗前结膜上皮细胞及泪液中IRF4、sST2水平与治疗前CFS评分均呈正相关,与治疗前... 相似文献
7.
角膜损伤修复的分子调控机制错综复杂,作用具有广泛性和交叉性。在这调控网络中,某些因子如转化生长因子-β(TGF-β)及核转录因子-κB(NF-κB),可能起关键的调控作用。本文综述了角膜损伤修复的分子调控概况及其作用特点,着重阐释关键的调控分子及其作用机制。 相似文献
8.
目的:探讨房水中转化生长因子-β2(TGF-β2)、成纤维细胞生长因子(FGF)及单核细胞趋化因子1( MCP-1)水平与2型糖尿病患者白内障术后黄斑水肿的联系。方法选取在我院接受手术治疗的85例白内障合并2型糖尿病患者,将术后出现黄斑水肿的39例列为观察组,未出现黄斑水肿的46例作为对照组。对比两组研究对象视网膜厚度;分析两组研究对象房水中细胞因子( TGF-β2、FGF及MCP-1)水平;分析观察组患者TGF-β2、FGF及MCP-1与视网膜厚度的关系。结果观察组研究对象黄斑区全层视网膜各部位厚度中中心凹、鼻内侧、颞内侧及平均厚度水平显著高于对照组;观察组研究对象TGF-β2、FGF及MCP-1水平明显高于对照组;观察组患者房水中TGF-β2、FGF及MCP-1与视网膜平均厚度值呈正相关。结论房水中TGF-β2、FGF及MCP-1与2型糖尿病患者术后黄斑水肿关系紧密,可作为评价其相关的特异性指标,为临床上预防及减轻黄斑水肿的发生提供有关依据。 相似文献
9.
目的:探究叉头框蛋白O3(FOXO3)、白细胞介素-2(IL-2)在干眼(DE)患者结膜上皮细胞及泪液中的表达及意义。方法:前瞻性研究。选择2019-03/2021-03收治的DE患者106例,另选同期85位健康体检者为对照。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测结膜上皮细胞及泪液中FOXO3水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测样本中IL-2水平;分析DE患者治疗前后的泪膜破裂时间(BUT)、泪液分泌试验(SⅠt)、角膜荧光素染色(CFS)等眼表临床指标变化;Pearson相关性分析DE患者结膜上皮细胞、泪液中FOXO3和IL-2水平的相关性以及二者与临床指标的关系。结果:与对照组相比,DE组患者结膜上皮细胞及泪液中FOXO3水平均明显降低,IL-2水平均明显升高(均P<0.01)。与治疗前相比,DE患者治疗后结膜上皮细胞及泪液中FOXO3水平明显上调,IL-2水平明显下调(均P<0.01)。Pearson相关性分析结果显示,结膜上皮细胞、泪液中FOXO3和IL-2水平均呈显著负相关(r=-0.531、-0.469,均P<0.01)。DE患者治疗后BUT、S... 相似文献
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目的::调查2型糖尿病患者干眼与不同程度糖尿病视网膜病变( diabetic retinopathy,DR)及黄斑水肿之间的关系。方法:采用横断面研究。选取340例340眼2型糖尿病患者,收集临床资料,分别检测泪河高度、泪液分泌试验(Schirmer Ⅰ test)、泪膜破裂时间(break-up time,BUT)、角膜荧光素染色。所有患者散瞳检查视网膜,评估DR程度及有无临床意义的黄斑水肿。结果:所有患者中,干眼患病率为49.41%。干眼患者的糖尿病病程为11.15±7.07a,无干眼患者的病程为6.92±5.45a,两者之间的差异具有显著统计学意义(P<0.01)。干眼与DR各分期具有明显关系,轻度非增殖性糖尿病视网膜病变( nonproliferative diabetic retinopathy, NPDR )、中度 NPDR、重度 NPDR 和增殖性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)患者相对于无 DR患者的干眼发生可能性分别为1.097倍、1.724倍、2.86倍和5.43倍。黄斑水肿患者较无黄斑水肿患者的干眼发生可能性增加到3.697倍。结论:2型糖尿病患者常常伴发干眼。随着DR的发生及进展,罹患干眼的机会逐步增加。 相似文献
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目的 观察电针对糖尿病干眼大鼠角膜Toll样受体4(TLR4)介导的炎症信号通路的影响,探讨电针治疗糖尿病干眼的作用机制。方法 健康雄性SD大鼠32只采用高糖高脂饲料喂养4周后,腹腔注射链脲佐菌素(30 mg·kg -1)12周建立2型糖尿病大鼠模型。将造模成功的25只糖尿病干眼大鼠随机分为模型组(不做干预)、电针组(选取“睛明”“攒竹”“丝竹空”“太阳”“瞳子髎”针刺,电针接“攒竹”“瞳子髎”,每次15 min,每天1次)、假针刺组(穴位刺激处同电针组,但用钝头针点刺治疗,不刺入)、氟米龙组(双眼点滴1 g·L -1氟米龙滴眼液,分别在每天8点钟、13点钟、18点钟进行干预,每天3次,每次1滴),每组6只,共干预2周。另选取6只正常雄性SD大鼠作为空白组。检测各组大鼠造模前、造模后及干预后的随机血糖、泪膜破裂时间(BUT)、泪液分泌量、角膜荧光素染色(FL)评分及角膜机械知觉阈值(CTT);HE染色观察各组大鼠角膜形态变化;免疫荧光组织化学染色法检测各组大鼠角膜TLR4阳性表达;Western blot检测角膜中TLR4、磷酸化核因子-κB P... 相似文献
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目的探讨基质金属蛋白酶2(matrix
metalloproteinase-2, MMP-2)、金属蛋白酶2组织抑制因子(tissue inhibitor of
metalloproteinase 2,TIMP-2)及转化生长因子β1(transforming growth foctor beta,TGF-β1)在糖尿病性白内障患者的晶状体上皮细胞中的表达及意义.方法应用免疫组化技术检测23例糖尿病性白内障患者和7例正常人的晶状体上皮细胞中MMP-2、TIMP-2及TGF-β1的表达,并进行比较.结果糖尿病性白内障患者晶状体上皮细胞中MMP-2和TGF-β1的阳性表达率与正常人比较,差异均有非常显著意义(χ2=24.548,16.78;P<0.01),而糖尿病性白内障患者晶状体上皮细胞中TIMP-2的阳性表达率与正常人比较,差异无显著意义(χ2=0.621,P>0.05).经Spearman等级相关分析,晶状体上皮细胞中,MMP-2和TGF-β1的阳性表达率存在正相关(r=0.516,
P<0.01);MMP-2和TGF-β1与TIMP-2阳性表达率间均无相关(r=-0.045,0.042;P>0.05).结论TGF-β1介导的MMP-2和TIMP-2表达失衡在糖尿病性白内障患者晶状体前、后囊膜下纤维化的发生和发展过程中起重要作用. 相似文献
13.
背景长期全身或眼局部应用糖皮质激素可诱导皮质类固醇性白内障,但其作用机制尚不明确。目的研究地塞米松作用于人晶状体上皮细胞(LECs)后对LECs中核转录因子κB(NF—κB)/NF—κB抑制蛋白κ(IκBκ)表达的影响及LECs凋亡的发生情况,了解皮质类固醇性白内障的发病机制。方法取人LECs系(HLE283)在含质量分数20%胎牛血清的DMEM中进行培养和传代。将不同浓度的地塞米松(0.01、0.1、1、10、100μmol/L)分别加入DMSO无血清DMEM培养液中作为不同浓度地塞米松组,不含地塞米松的DMSO无血清DMEM培养液培养的LECs作为空白对照组。采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)、Western blot、流式细胞术等方法,分别在基因水平、蛋白水平检测LECs中NF—κB/IκB α浓度的改变及LECs凋亡率的变化。结果扩增的基因片段与所设计片段大小一致。地塞米松作用后NF—α核蛋白在LECs中的表达量随着地塞米松浓度的增加而下降,差异有统计学意义(F=36.077,P=0.004);IκBα蛋白的表达随着地塞米松浓度的增加而上升,差异有统计学意义(F=35.741,P=0.002)。在同浓度地塞米松组,NF—κB核蛋白在LECs中的表达量随作用时间的不同差异有统计学意义(F=16.606,P=0.01),与地塞米松作用24h时的表达量比较,36h和48h时的NF—κB核蛋白表达量明显下降,差异有统计学意义(P=0.002;P=0.01)。与地塞米松作用24h时的表达量比较,36h和48hIκBα蛋白在LECs中的表达量明显增加,差异均有统计学意义(P=0.014;P=0.002)。流式细胞仪检测显示LECs的凋亡率随着地塞米松浓度的增加明显上升,与空白对照组相比差异有统计学意义(P〈0.05)。结论地塞米松通过上调IκBα的表达而过度抑制了NF—κB的活性,并导致LECs凋亡,其作用呈浓度依赖性,这可能是皮质类固醇性白内障发生发展的细胞学和分子生物学机制之一。 相似文献
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角膜损伤修复的分子调控机制错综复杂,作用具有广泛性和交叉性。在这调控网络中,某些因子如转化生长因子-β(TGF-β)及核转录因子-κB(NF-κB),可能起关键的调控作用。本文综述了角膜损伤修复的分子调控概况及其作用特点,着重阐释关键的调控分子及其作用机制。 相似文献
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目的 探讨增生型糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)患者血清中转化生长因子-β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)水平的变化及其意义.方法 收集76例糖尿病视网膜病变患者血清标本,将其分为2组:40例为非增生型糖尿病性视网膜病变(non-proliferative diabetic retinopathy,NPDR)组;36例为PDR组.同时收集36例健康人血清为正常对照(normal control,NC)组.采用ELISA法检测各组患者血清中TGF-β1和CTGF的水平.结果 NC组、NPDR组、PDR组患者血清中TGF-β1含量分别为(0.39±0.05)μg· L-1、(0.43±0.05) μg·L-1、(0.80±0.08) μg·L-1,CTGF含量分别为(1.48±0.09) μμg·L-1、(1.57±0.12) μg·L-1、(2.01±0.13)μg·L-1.PDR组患者血清中TGF-β1、CTGF水平明显高于NPDR组和NC组(均为P<0.01),NPDR组与NC组相比差异均无统计学意义(均为P >0.05).结论 PDR患者血清中高表达TGF-β1、CTGF,TGF-β1、CTGF可能在PDR的发生和发展中起重要作用. 相似文献
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青光眼是一组具有特征性视神经损害和视野缺损的疾病,病理性眼压增高是其危险因素。青光眼是受多种基因的相互作用以及环境因素影响的疾病,近年来研究表明,炎症也可能参与青光眼的发病机制,大量研究已证实, 结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素(interleukins,ILs)、核转录因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)等多种细胞因子,在青光眼患者眼内房水中高表达,表明这些细胞因子与青光眼的发病机制有紧密的联系,本文就近年来有关炎症因子与青光眼关系的研究进展作一综述。 相似文献
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Objective As the expression of transfornfing growth factor β (TGF2 β) of tenon' s fibroblasts is important for filtering bleb scarring formation after glaucoma surgery, it is benefit for preventing filtering bleb scarring through inhibiting its expression. This paper was to screen the effects of different TGF2β siRNAs on the expression of TGF1β mRNA and to construct the specific TGF2β siRNAs plasmid vector of rat Tenon' s fibroblasts. Methods Four TGF1β siRNAs ( L1 , L2 , L3 , L4 ) were transcribed in vitro and then transferred to cultured Tenon' s capsule fibroblasts in 30 SD rats. RT-PCR was performed to evaluate the levels of TGF1β mRNA in both transferred cells, and untransferred cells were as the controls. The specific TGF2 β siRNAs plasmid vector was constructed according to the screened TGF1β siRNAs. Results The expression of TGF1β mRNA of fibroblasts transferred with only L4 (0. 163 ± 0. 009 ) was reduced significantly in comparison with the control group(0. 433 ± 0. 011 ), hut the interference function of others siRNAs seemed to be inactive. The plasmid vector of siRNA specific for TGFβ2 was proved to be constructed successfully by detecting its sequence. Conclusion Different siRNAs is designed to target the relevant TGFβ2 mRNA of rats Tenon' s fibroblast. The vector of siRNA specific for TGFβ2 is of potent interference ability for target tissue. 相似文献
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目的观察磷脂酶C(PLC)抑制剂U73122和腺苷酸环化酶(AC)抑制剂SQ22536对豚鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞增生及分泌转化生长因子-β2(TGF-β2)的影响。方法胰蛋白酶消化法培养原代豚鼠RPE细胞,角蛋白免疫组织化学染色鉴定为阳性后,传2代细胞用于实验。实验组加入含不同浓度U73122或SQ22536的培养液,设溶剂对照。24h后观察RPE细胞形态,噻唑蓝(MTT)法检测加入不同浓度U73122后RPE细胞的增生情况。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测1×10-5mol/LU73122及SQ22536作用2、4、6、8、16h后细胞培养液中TGF-β2的分泌量。结果培养的RPE细胞通过角蛋白染色后呈棕黄色阳性反应。MTT法检测显示,U73122实验组中除5×10-6mol/L浓度组外,其余各浓度组OD值与对照组比较均显著下降,且随着浓度的增加,OD值下降越明显(P〈0.05);SQ22536各浓度组与对照组OD值相比差异均无统计学意义(F=1.316,P〉0.05)。ELISA结果显示,加入1×10-5mol/LU73122后2h实验组TGF-β2的分泌量与对照组比较,差异无统计学意义(P〉0.05),4、6、8、16h后,实验组较对照组及2h组均明显增加(P〈0.05);而SQ22536组RPE细胞TGF-β2的分泌量在2、4、6、16h比较差异无统计学意义(P〉0.05),8h时分泌量降低。结论 PLC抑制剂U73122能抑制RPE细胞的增生,并可使RPE细胞分泌TGF-β2增加。AC抑制剂SQ22536对RPE细胞的生长和TGF-β2的分泌无明显影响。提示RPE细胞分泌TGF-β2的调控可能与PLC信号转导途径有关。 相似文献
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目的:探讨高迁移率蛋白1( high lobility group box 1, HMGB1)在糖尿病大鼠视网膜中的表达及其可能机制。 方法:将SD大鼠60只随机分为糖尿病组和对照组。采用STZ腹腔注射制作糖尿病大鼠模型,糖尿病组大鼠腹腔注射STZ 60lg/kg,对照组腹腔注射同等剂量的生理盐水。分别于1、2和4lo时处死大鼠,摘取视网膜,HE染色观察视网膜结构变化,荧光血管造影观察视网膜血管变化, TUNEL染色观察视网膜细胞凋亡情况, Western Blot检测视网膜中HMGB1和NF-κB的表达。 结果:与对照组相比,糖尿病组大鼠视网膜各层细胞排列紊乱,细胞密度减低,可见微血管病变,以及内、外核层变薄和神经节细胞的凋亡;荧光血管造影见周边毛细血管迂曲,可见血管闭塞及无灌注区;Western Blot 检测HMGB1和NF-κB表达呈时间依赖性增高,且两者表达呈正相关(P<0.05)。 结论:HMGB1在糖尿病大鼠视网膜中表达增加, HMGB1可能通过NF-κB信号通路参与了糖尿病视网膜病变的发生。 相似文献
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目的:研究细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在糖尿病性白内障发病机制中的作用及转化生长因子β-1(TGF-β1)对晶状体上皮细胞ICAM-1表达的影响。方法:SD大鼠120只随机分为对照组和糖尿病性白内障组。在糖尿病性白内障组中,建立糖尿病模型,免疫组织化学SP法观察两组晶状体上皮细胞中ICAM-1表达变化;RT-PCR法检测TGF-β1和TGF-β1中和抗体对体外培养的人晶状体上皮细胞ICAM-1mRNA表达的影响。结果:在糖尿病性白内障组大鼠晶状体上皮细胞ICAM-1的表达明显增高,且随着病程发展呈进行性增强,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。TGF-β1培养组的人晶状体上皮细胞的ICAM-1的表达则显著增强,与正常血清培养组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。在TGF-β1抗体培养组中,ICAM-1的表达明显受到抑制,与TGF-β1培养组比较,差别具有统计学意义(P<0.05)。结论:TGF-β1可以促进晶状体上皮细胞ICAM-1的表达;ICAM-1通过促进晶状体上皮细胞的黏附、增殖而在糖尿病性白内障的发生中发挥重要作用。 相似文献
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