大鼠浅度烫伤创面愈合与相关生长因子及受体的基因表达

目的 探讨浅Ⅱ度烧伤创面愈合过程中相关生长因子及其受体的作用。方法 采用大鼠浅Ⅱ度烫伤模型,观察了大鼠浅Ⅱ度烫伤后创面愈合过程中组织学、炎性细胞、表皮细胞周期的变化,检测了创面相关生长因子及受体的基因表达。结果 炎性细胞到达创面依次为中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞;表皮细胞周期变化为伤后3天细胞增殖活跃,伤后7天细胞分裂明显增多;伤后1,3天PDGF（血小板源性生长因子）、PDGFR（血小板源性生长因子受体）和EGFR（表皮生长因子受体）基因表达明显增强,伤后3,5天EGF（表皮生长因子）、TGFβ－R2（转化生长因子β受体α）基因表达增强,伤后5,7天TGFβ－R1（转化生长因子β受体1）基因表达增强,伤后7,10天TGFβ1（转化生长因子β）基因表达增强。结论烧伤诱导相关生长因子及受体的基因表达,并且具有时相性和可逆性;相关生长因子基因表达与表皮细胞周期间可能存在相互调控作用,生长因子是调控创面愈合的主要因素。     

大鼠浅度烫伤创面愈合与相关生长因子及受体的基因表达

目的探讨浅Ⅱ度烧伤创面愈合过程中相关生长因子及其受体的作用。方法采用大鼠浅Ⅱ度烫伤模型,观察了大鼠浅Ⅱ度烫伤后创面愈合过程中组织学、炎性细胞、表皮细胞周期的变化,检测了创面相关生长因子及受体的基因表达。结果炎性细胞到达创面依次为中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞;表皮细胞周期变化为伤后3天细胞增殖活跃,伤后7天细胞分裂明显增多;伤后1,3天 PDGF(血小板源性生长因子)、PDGFR(血小板源性生长因子受体)和 EGFR(表皮生长因子受休)基因表达明显增强,伤后3,5天 EGF(表皮生长因子)、TGFβ-R_2(转化生长因子β受体α)基因表达增强,伤后5,7天 TGFβ-R_1(转化生长因子β受体1)基因表达增强,伤后7,10天 TGFβ_1(转化生长因子β)基因表达增强。结论烧伤诱导相关生长因子及受体的基因表达,并且具有时相性和可逆性;相关生长因子基因表达与表皮细胞周期间可能存在相互调控作用,生长因子是调控创面愈合的主要因素。     

大鼠浅Ⅱ度烫伤创面表皮生长因子受体的表达

浅Ⅱ度烫伤创面愈合主要涉及表皮角质细胞迁移、增殖和分化。生长因子等多种因素调控着上皮细胞的生物学行为 ,从而完成创面修复 ,其中以表皮生长因子 (epidermalgrowthfactor ,EGF)尤为重要。EGF是表皮角质细胞的化学性趋化因子和特异性促有丝分裂原 ,必须通过与相应受体———表皮生长因子受体 (EGFR)结合 ,才能在愈合过程中发挥其生物学活性。目前关于创面愈合过程中内源性EGF表达水平及其促愈作用的报道较多 ,但关于内源性EGFR表达水平的研究却鲜见报道。本文采用免疫组化技术和图像分析技术 ,从蛋白质水平上动态观察了浅Ⅱ度烫…     

创面愈合过程中表皮生长因子及其受体变化的临床研究

创面愈合是一个极其复杂的病理过程,涉及了机体许多病理变化,如出血凝血、修复重建等。许多研究表明：生长因子可以促进创面愈合,加快组织的修复［1］。笔者曾研究过大鼠供皮区创面愈合过程中内源性表皮生长因子（epidermal growth factor, EGF）、表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFr）有明显的表达,其变化与创面修复有关［2,3］。本实验通过研究人供皮区创面愈合过程中EGF、EGFr变化,探讨其与组织修复的关系。资料与方法1.标本留取：选取烧伤或整形患者中厚断层供皮区创面共22例,男15例,女7例,年龄18…     

β内啡肽与μ型-阿片受体在深Ⅱ度烫伤大鼠创面愈合过程中的表达

目的观察β内啡肽和μ型-阿片受体（MOR）在深Ⅱ度烫伤大鼠创面愈合过程中的表达。方法将36只Wistar大鼠随机分为对照组（6只）、烫伤组（30只）。烫伤组大鼠被造成5％TBSA深Ⅱ度烫伤，对照组仅模拟烫伤。于伤后即刻及伤后3、7、14、21d取创面组织，采用免疫荧光标记法检测B内啡肽和MOR的表达情况。结果对照组大鼠皮肤组织内β内啡肽和MOR主要分布于表皮、真皮交界的周围神经纤维、表皮的角质形成细胞、真皮的成纤维细胞中，强度较弱。伤后3d，烫伤组B内啡肽表达达峰值（196±16，P＜0．01），在皮肤全层均有表达；MOR集中表达在基底层和基底上的角质形成细胞。伤后7、14d烫伤组B内啡肽仍大量表达。伤后7d，烫伤组MOR的表达进一步增强，胶原排列紊乱；14d时部分创面再上皮化，MOR表达达高峰（306±23，P＜0．01）。伤后21d，烫伤组创面完全再上皮化，周围神经末梢接近并抵达表皮、真皮交界，胶原排列较整齐，β内啡肽的表达（31±24）与对照组（30±18）接近；但MOR的表达（56±16）仍然高于对照组（28±15）。结论烫伤后β内啡肽和MOR的表达具有一定的时效性，这种变化可能影响了创面愈合。     

类肝素对大鼠深II度烫伤创面愈合的影响

目的 探讨深Ⅱ度烧伤创面早期加深而延迟愈合的机理。方法 采用大鼠深Ⅱ度烫伤模型，创面外用类肝素软膏，观察其对大鼠深Ⅱ度烫伤早期创面病理变化和创面愈合的影响，并测定了烧伤创面含水量，血浆和烧伤创面抗凝血酶Ⅲ（ＡＴ－Ⅲ）、纤维蛋白降解产物（ＦＤＰ）含量、烧伤创面羟脯氨酸含量、Ｉ／Ⅲ型胶原比例、真皮细胞增殖周期及创面愈合时间。结果 创面外用类肝素可以降低烧伤创面水肿程度，增加血浆ＡＴ－Ⅲ活性，增加烧伤创     

表皮生长因子对大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合的影响

目的　进一步观察重组人表皮生长因子 (rhEGF)对深Ⅱ度烧伤创面愈合的促进作用。方法　采用大鼠深Ⅱ度烫伤模型 (以下称烧伤 ) ,创面分别外用rhEGF、肝素加rhEGF及等渗盐水。比较不同方式处理创面后的愈合时间 ,测定创面愈合率、创面含水量、羟脯氨酸 (OHP)含量及Ⅰ /Ⅲ型胶原比例 ,进行细胞DNA周期分析和组织学检查。　结果　外用rhEGF可使烧伤创面愈合时间缩短 2d,增加创面OHP含量 (P <0.0 5),降低Ⅰ /Ⅲ型胶原比例 (P <0.0 5),促进肉芽组织形成 ,加速细胞DNA复制 (P <0.0 5 )。加用肝素后可使创面愈合时间进一步缩短 2d,促进肉芽组织生长。伤后第 7天用药各组间比较 ,差异无显著性意义 (P >0.0 5)。　结论　外用rhEGF能明显促进深Ⅱ度烧伤创面愈合 ,加用肝素后效果更加显著 ,但早期使用rhEGF效果不明显     

甲鱼油对大鼠浅Ⅱ度烫伤创面愈合过程中组织修复的影响

目的:探讨甲鱼油治疗大鼠浅Ⅱ度烫伤的效果及其对创面愈合过程中组织修复的影响。方法:108只Wistar大鼠随机分为单纯烫伤组、银锌霜治疗组和甲鱼油治疗组,每组36只。采用将脱毛区置于70℃恒温水浴中15s的方法制成10%体表面积浅Ⅱ度烫伤模型,伤情经病理切片证实。各组创面分别用生理盐水纱布(1ml/cm2)、银锌霜纱布(1ml/cm2)、甲鱼油(1ml/cm2)纱布覆盖包扎固定后放回笼中分笼饲养,换药1次/d。观察创面愈合率及愈合时间。各组动物分别于伤后1、3、5、10、14d取创面组织,常规苏木精-伊红染色,观察病理组织学变化;免疫组织化学链霉素-卵白素-生物素-过氧化物酶复合物法检测创面组织增殖细胞核抗原的表达。结果:①创面愈合时间:单纯烫伤组为(15.33±0.82)d、银锌霜治疗组(12.57±0.54)d,甲鱼油治疗组(11.33±0.67)d,甲鱼油治疗组比单纯烫伤组明显缩短(P<0.01)。②创面愈合率:3组大鼠伤后10和14d的创面愈合率与伤后7d相比差异均具有显著性(P<0.01),甲鱼油治疗组和银锌霜治疗组两组大鼠的创面愈合率比单纯烫伤组在伤后7、10及14d均明显升高(P<0.01)。③病理学观察:甲鱼油能减轻烫伤创面早期的炎症反应,组织学分析显示甲鱼油可促进创面的再上皮化和表皮各层的分化。④增殖细胞核抗原在创面组织标本中的表达量:甲鱼油治疗组比单纯烫伤组、银锌霜治疗组明显升高(P<0.01)。结论:甲鱼油能加速大鼠烫伤创面组织修复细胞的增殖,加快创面再上皮化,促进创面愈合。     

蛋白酶激活受体家族与创面愈合

蛋白酶激活受体 (protease activatedreceptors ,PAR)是 2 0世纪 90年代初发现的一种跨膜 7次的G蛋白偶联受体 ,主要通过血小板膜上的该类受体发挥其激活血小板和促凝血的作用 ,因此又称为凝血酶受体 (thrombinreceptor,TR) [1] 。国内黄跃生等[2 ] 提出凝血酶肽类对创面愈合及表皮细胞生长具有促进作用。国外研究证明 ,PAR在加快烧伤创面愈合速度、促进体外培养的表皮细胞分化及减少皮肤色素沉着等方面具有调节作用。一、PAR家族成员及结构目前已知的PAR成员共有 4个 ,分别为PAR1、PAR2、PAR3和PAR4 ,其中PAR1、PAR3和PAR4…     

伤后24小时内削痂对深Ⅱ度烧伤创面局部生长因子释放及愈合的影响

目的探讨伤后24h内削痂手术对深Ⅱ度烧伤创面局部释放表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)、血小板衍生生长因子(PDGF-AB)及其对组织修复的影响.方法选12例以深Ⅱ度烧伤为主的患者,每例患者均选择相对均匀的深Ⅱ度创面作为实验创面并分为3个研究区域,即手术前、手术后和未手术实验区.伤后24h内行削痂术.术前在实验创面切取创面组织,作为手术前实验区标本,行削痂后创面均以辐照猪皮覆盖.术中部分创面保留不予手术,该保留创面作为未手术实验区.于伤后5～7d行第2次手术,分别切取经削痂处理和未手术区的创面组织,作为手术后和未手术实验区标本.采用组织培养和ELISA技术测定创面组织释放EGF、FGF-2和PDGF-AB的水平,并对创面组织中新生肉芽形成进行形态学观察和半定量分析.结果伤后24h内削痂手术后,创面组织局部释放EGF、FGF-2和PDGF-AB的水平较手术前和未手术创面有显著升高(P＜0.05);创面局部组织形态学观察显示,手术后创面新鲜肉芽组织形成较手术前和未手术创面显著(P＜0.05).结论伤后24h内削痂手术可以促进局部组织释放EGF、FGF-2和PDGF-AB,促进新生肉芽形成,有利于深Ⅱ度烧伤创面愈合,从而提示了伤后24h内削痂优于常规手术.     

重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子对深Ⅱ度烧伤创面的治疗作用

目的 了解重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)凝胶剂治疗深Ⅱ度烧伤创面的有效性和安全性. 方法采用多中心、随机、双盲、安慰剂平行对照的研究方法,将深Ⅱ度烧伤创面作为目标创面,把321例烧伤患者(实际完成302例)分为用药组200例,创面涂rhGM-CSF凝胶;对照组102例,创面涂安慰剂.观察用药后两组患者的全身情况和不良反应,以及不同时相点创面愈合时间、愈合率、总有效率. 结果用药后两组患者生命体征,血、尿常规及肝、肾功能,创面分泌物、创缘反应比较,差异均无统计学意义(P>0.05),无不良反应.用药组创面愈合时间的中位数为17 d,低于对照组(20 d,P<0.01).用药第8、14、20、28天,用药组平均创面愈合率分别为24.5%、70.5%、95.3%、99.6%,均高于对照组(15.1%、51.4%、84.6%、97.1%,P<0.01).用药8、14、20 d用药组的总有效率显著高于对照组(P<0.01). 结论 rhGM-CSF凝胶剂能促进深Ⅱ度烧伤创面愈合,并且有一定的安全性.     

mRNA and protein expression of transcription factor c—fos in burned rats and their effects on wound healing

Objective:To explore the expression of mRNA and its protein in burned rats and their effects of burn wound healing.Methods:A partial-thickness burn of 30% total body surface area was created on the back of 40 Wistar rats.In situ hybridization and immunohistochemical methods were used to exaluate the location and the amount of the c-fos mRNA and its protein in normal skin and the burned skin,respectively,at 3h,6h,1d,3d,7d and 14d after burn.Results:Under a light microscope,both the expression of c-for mRNA and its protein could be found in the normal skin,but their induction levels were much higher in the burned skin.The level of for protein expression reached peak at 3h after burn while that of c-for mRNA reached peak at 6h after burn.Conclusions:The expression of c-fos can be induced by burns.And the peak level expression of c-for mRNA comes later than that of c-fos protein.It indicates that the action of fos protein is induced by post-translational modification of pre-existing fos molecules.     

烧伤创面愈合的信号转导机制

After 50 years of development in science of bums care in China, we have basically solved coverage of deep wounds of burn trauma, as well as role of multiple growth factors and stem cell in wound healing, making great contribution to improving the treatment of patients with large area of deep bums. Surgeons are paying close attention to problems of wound healing, especially in the fields of starless healing and rehabilitation. To solve these problems, we need to do further investigation on multiple growth factors as well as proliferation/differentiation of stem cells in regulation of cell growth and differentiation in wound healing. Therefore ,we are facing a even more serious challenge.     

Implications of chlorhexidine use in burn units for wound healing

Chlorhexidine is known to be a potent antiseptic with evidence of a beneficial role in burn care. Nevertheless, several in vitro studies have reported cytotoxicity on cultured cells, while in vivo and clinical data seem to show more controversial results. In the frame of this work, we aimed to evaluate the use of chlorhexidine in burn units worldwide be sending a survey to professionals of the field. We associated survey results to those perspectives reported in the literature to update recommendations for the use of chlorhexidine in specific protocols for burn management. The survey results showed that there is no clear consensus on the use of chlorhexidine regarding the concentrations, the type of excipient and the cleansing after application. Literature searches showed evidence that the skin of premature infants appears to be more sensitive to chlorhexidine that adult skin, with more reported cases of adverse effects. It was also determined that aqueous formulations of chlorhexidine do not appear to be necessarily less efficient than with alcohol as an excipient, and that lower concentrations are as efficient as higher concentrations. In view of this study, we have adjusted our protocols for the use of aqueous formulations at low concentrations and investigated further the role of washing after application in order to standardize the indication of chlorhexidine and minimize the probability of adverse effects.     

荷负电气溶胶治疗Ⅱ度烧伤创面的临床效果及病理学观察

目的观察荷负电气溶胶(下称气溶胶)治疗Ⅱ度烧伤创面的效果。方法选择单纯浅Ⅱ、深Ⅱ度烧伤患者,随机分为:(1)气溶胶组:浅Ⅱ度180例、深Ⅱ度100例,伤后6h~2d开始用气溶胶治疗创面,l~2次/d,1.5h/次。(2)对照组:浅Ⅱ、深Ⅱ度患者各30例,常规治疗。(3)自身对照组:浅Ⅱ、深Ⅱ度患者各10例,同上用气溶胶治疗,但同一患者部分创面覆盖无菌金属片屏蔽气溶胶(屏蔽组),部分创面不屏蔽(非屏蔽组)。观察气溶胶治疗过程中患者创面的大体变化,治疗前后进行创面细菌培养,并监测其肝、肾功能及血生化指标有无改变。记录各组患者创面愈合时间。另制作深Ⅱ度烫伤大鼠模型,同前分为气溶胶组和对照组并治疗。取两组大鼠治疗前及治疗后1、2、3周的创面组织标本,作病理学观察。结果气溶胶治疗后患者创面渗出少,治疗前后均无细菌生长。总体来讲,气溶胶治疗前后患者肝、肾功能及血生化指标无明显改变。气溶胶组患者浅Ⅱ度创面伤后(6.3±1.6)d愈合,深Ⅱ度创面(15.1±3.1)d愈合,明显短于对照组相同深度创面[(11.3±1.4)、(21.2±1.4)d,P<0.01]。自身对照组中,相同烧伤深度的非屏蔽组与屏蔽组比较,创面愈合时间也明显缩短(P<0.01)。病理学检查显示,气溶胶组大鼠治疗后第3周皮肤结构已基本恢复正常,而对照组此时恢复较差。结论气溶胶能有效促进Ⅱ度烧伤创面的愈合且使用安全。     

细胞免疫与烧伤创面愈合的实验研究

为探讨免疫低下对烧伤创面愈合的影响，设计了用低剂量钴源照射的方法建立的免疫抑制模型，并在该模型的基础上观察了免疫抑制大鼠Ⅱ度烧伤创面愈合的情况。结果表明：①大鼠接受２Ｇｙ６０Ｃｏ照射后２０天内，Ｔｈ／Ｔｓ比值和Ｔ细胞肿瘤花环率持续下降。照射后皮肤组织ＤＮＡ含量及细胞周期均无明显改变。②免疫抑制大鼠胶原修复能力下降，创面愈合百分率低于正常大鼠。由此证实了免疫功能低下对创面愈合的抑制作用。     

糖基化终末产物对糖尿病大鼠烧伤创面愈合的影响

目的 了解糖基化终末产物(AGE)蓄积对糖尿病大鼠烧伤创面愈合的影响. 方法 将75只SD大鼠按完全随机化方法 分为对照组、糖尿病组及氨基胍干预组,每组25只.将大鼠造成深Ⅱ度烫伤(以下称烧伤)后,后2组制作成糖尿病模型,氨基胍干预组给予管饲氨基胍100 mg·kg~(-1)·d~(-1).于伤后0(伤后当天)、3、7、14、21 d处死大鼠.描取创面形状,并取全层皮肤组织待测.同时取大鼠背部表皮行KC培养及鉴定.观察各组创面愈合率及皮肤组织糖含量,创面组织形态学变化,皮肤组织中AGE分布.观察不同浓度AGE对KC增殖,凋亡的影响,以仅加表皮细胞培养液的KC为对照组. 结果 伤后7、14、21 d糖尿病组创面愈合率显著低于对照组(P<0.01),而氨基胍干预组却明显高于前2组(P<0.01).糖尿病组皮肤组织含糖量为(2.62±0.19)mmol/g,氨基胍干预组为(2.58±0.07)mmol/g,均高于对照组(1.04±0.09)mmol/g(P<0.01).对照组大鼠创面炎性细胞浸润强烈而局限,坏死组织形成、脱落及时,创面愈合无明显延迟;糖尿病组大鼠炎性细胞浸润缓慢、弥散而持久,坏死组织形成、脱落较迟,创面愈合明显延迟;氨基胍干预组大鼠炎性细胞浸润及时、强烈,坏死组织形成、脱落以及创面愈合时间较糖尿病组早.对照组中有少量散在的AGE沉积,糖尿病组AGE蓄积显著增加,而氨基胍干预组AGE含量显著降低.AGE作用48 h后,KC的增殖显著降低,呈现浓度依赖性,各剂量AGE干预组的吸光度值均低于对照组(P<0.01).100μg/mLAGE干预组KC早期凋亡连接素V阳性细胞比例为(15.1±2.3)%,明显高于对照组[(11.2±1.2)%,P<0.05];终未期凋亡双阳性细胞比例为(14.3±3.5)%,与对照组(15.2±2.4)%比较,差异无统计学意义(P>0.05). 结论 高血糖可能是通过AGE蓄积,抑制KC等修复细胞增殖导致创面难愈;减少AGE蓄积,可改善糖尿病创面愈合延迟现象.     

烧伤创面应用生长因子后的DNA分析

将基因重组的人表皮细胞生长因子(rh-EGF)、酸性成纤维细胞生长因子(r-aFGF)、碱性成纤维细胞生长因子(r-bFGF)和牛脑提取液(bBE)外用于烧伤创面,旨在探讨皮肤组织和细胞 DNA 的含量及周期变化。实验结果显示:烧伤创面经应用 rh-EGF,r-aFGF,r-bFGF 和 bBE 后第5天与生理盐水组(NS)相比,创面愈合率、表皮细胞和全厚层皮肤组织的 DNA 含量均高于 NS 组(P<0.01);全厚层皮肤 DNA 的流式细胞仪分析表明,应用生长因子各组的 S 期细胞数百分比均高于 NS 组(P<0.01),细胞分裂增殖旺盛,G 期细胞不断进入 S 期,使 S 期细胞数增加,DNA 的合成和含量增加。提示:烧伤创面外用细胞生长因子可促进表皮细胞的增殖,加速创面的愈合。