染料木素对2型糖尿病心肌病大鼠心肌细胞纤维化的影响

目的:探讨染料木素(Gen)对2型糖尿病心肌细胞纤维化的抑制或修复作用。方法:取8只SD大鼠作为正常对照组;取以高脂饲料且注射链脲佐菌素后造模成功的32只糖尿病大鼠并随机均分成糖尿病心肌病模型组、二甲双胍对照组、染料木素低剂量干预组、染料木素高剂量干预组等4组;从第7周起每组大鼠均以普通块料喂养,同时,在第11周测定血糖水平等指标后,将各组大鼠处死后迅速取出心脏,经脱水、浸蜡、切片后进行HE染色,光镜观察心肌组织学变化,免疫组化染色观察TGF-β1表达。结果:Gen可明显降低模型大鼠血糖,改善心肌病理学变化,降低TGF-β1阳性表达。结论:高剂量Gen对2型糖尿病导致的心肌纤维化具有显著的修复作用。     

染料木素对油酸诱导HepG2细胞脂质蓄积的影响

目的:探讨染料木素改善油酸诱导的HepG2细胞脂质蓄积的作用及机制。方法:采用不同浓度的油酸处理HepG2细胞24 h诱导建立脂质蓄积模型,12. 5,25,50μmol·L~(-1)的染料木素和油酸共同作用于细胞24 h,采用噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞存活率,尼罗红和DAPI双染观察细胞内脂滴蓄积情况,并采用试剂盒测定细胞内甘油三酯(TG)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定染料木素对脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL),激素敏感性脂肪酶(HSL),磷酸化HSL(p-HSL),沉默信息调节因子1(SIRT1),过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα),肉毒碱棕榈酰转移酶-1(CPT-1)蛋白表达的影响。结果:0. 5 mmol·L~(-1)油酸及12. 5,25,50μmol·L~(-1)染料木素作用细胞24 h对细胞存活率无明显影响;与正常组比较,模型组细胞中TG含量显著升高(P 0. 01),细胞内脂滴显著增多(P 0. 01),细胞中HSL的磷酸化水平明显下调(P 0. 05);与模型组比较,染料木素可明显降低细胞中TG含量(P 0. 05,P 0. 01),明显减少细胞内脂滴(P 0. 05),上调细胞中ATGL,p-HSL/HSL,SIRT1,PPARα,CPT-1蛋白表达水平(P 0. 05,P 0. 01)。结论:染料木素对HepG2细胞脂质蓄积模型有明显的改善作用,其机制可能通过上调ATGL,p-HSL/HSL,SIRT1,PPARα,CPT-1蛋白表达水平,进而促进脂质的水解和氧化代谢。     

染料木素对大鼠成骨细胞骨钙素表达的影响

目的:探讨染料木素体外对大鼠成骨细胞骨钙素表达的影响.方法:用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,染料木素以不同浓度加入细胞培养体系,作用不同时间后,用放免法测定细胞骨钙素(BGP)的水平.结果:染料木素在1×10-9mol/L 范围内48h和72h,1×10-8mol/L及1×10-7mol/L 72h提高成骨细胞骨钙素的水平.结论:染料木素体外能提高成骨细胞骨钙素的表达.     

染料木素对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响

目的:探讨染料木素体外对大鼠成骨细胞增殖与分化的影响。方法:用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,染料木素以不同浓度加入细胞培养体系,作用不同时间后,用MTT法检测成骨细胞的增殖情况;用对硝基苯二钠基质动力学法测定细胞内碱性磷酸酶的活性,用改良的Lowry法测蛋白含量。结果:染料木素在1×10~(-5)～1×10~(-9)mol/L浓度范围内作用24h、48h均能促进成骨细胞增殖,在1×10~(-7)～1×10~(-5)mol/L范围内作用72 h可提高成骨细胞内碱性磷酸酶的活性。结论:染料木素体外能促进成骨细胞的增殖与分化。     

黄豆苷元、染料木素对葛根素小肠吸收影响

目的 通过黄豆苷元、染料木素对葛根素小肠吸收影响,研究中药葛根成分间的相互作用.方法 利用雄性SD大鼠小肠作为透析膜,采用扩散池法研究观察葛根素小肠吸收行为以及表观渗透系数.以及黄豆苷元和染料木素存在时对吸收的影响.结果 黄豆苷元、染料木素均能促进葛根素吸收、抑制外排,随着黄豆苷元、染料木素浓度增加效果增强.结论 黄豆苷元、染料木素能够影响葛根素小肠吸收.     

汉防己甲素对肝纤维化胶原合成的影响

汉防己甲素(tetrandrine,Tet)为中药防己的生物碱,具有抗钙作用,有人报道 Tet 可抑制肺纤维化的进展。我们曾发现 Tet 可改善实验性大鼠肝纤维化的组织损害并减少胶原面积。为进一步探讨 Tet 对肝纤维化的作用,本研究将从离体和在体两方面检测 Tet 对肝纤维化胶原合成的影响,以阐明 Tet抗肝纤维化的机理。材料与方法1 细胞培养和药物处理以及动物造模和分组 3T6小鼠成纤维细胞(中国科学院上海细胞所提供)以8×10~4个/ml 接种于25ml 培养瓶,培养基为 RPMI 1640(GIBCO 产品)含10%小牛血清。细胞贴壁后培养24h,换新鲜培养基并添加不同浓度的     

垂盆草总黄酮对APAP诱导小鼠肝损伤的保护作用

目的 研究垂盆草总黄酮对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)所致小鼠肝损伤的保护作用及其可能的作用机制.方法 将48只ICR雄性小鼠随机分为6组(n= 8),正常对照组,模型组,阳性药物组(联苯双酯,300 mg/kg),垂盆草总黄酮低(150 mg/kg)、中(300 mg/kg)、高剂量组(600 ...     

染料木素对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖及脂质过氧化的影响

目的:探讨染料木素对主动脉平滑肌细胞(SMC)增殖及抗脂质过氧化作用.方法:培养大鼠主动脉平滑肌细胞,同时加入不同浓度染料木素,观察其对平滑肌细胞增殖和培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、3',5'-环磷酸腺苷(cAMP)、6-酮-前列环素(6-Keto-PGF1α)的影响,细胞增殖测定采用MTT法.结果:与对照组比较,染料木素在0.1～100 μmol/L范围内能明显抑制平滑肌细胞增殖(P＜0.05,P＜0.01),且呈计量依赖性;一定浓度染料木素能提高培养液SOD活性,降低MDA含量,升高cAMP和6-Keto-PGF1α水平.结论:染料木素可能通过提高SOD活性,降低MDA含量,升高cAMP和6-Keto-PGF1α水平抑制平滑肌细胞增殖.     

欧前胡素和异欧前胡素对小鼠肝CYP450的影响

目的探究欧前胡素和异欧前胡素对小鼠肝细胞色素P450表达的影响以及对小鼠肝毒性作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为对照组和给药组,分别灌胃给予相应药物2周。荧光定量PCR技术考察药物对P450主要亚型mRNA表达的影响;蛋白质印迹法检测P450表达。试剂盒检测血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)和总胆红素(TBIL)水平,HE染色法观察肝组织变化。结果与对照组相比,40 mg/kg欧前胡素对P450亚型1a2(Cyp1a2)的mRNA表达有显著上调作用,异欧前胡素对P450酶亚型2c37(Cyp2c37)的mRNA的表达有显著上调作用。蛋白质印迹结果显示,欧前胡素对CYP1A2表达有显著上调作用,异欧前胡素对P450亚型2C(CYP2C)和P450酶亚型2E1(CYP2E1)表达有显著上调作用。血液生化指标显示,40 mg/kg异欧前胡素能够导致GOT和TBIL水平显著升高。病理分析发现,两种化合物20 mg/kg和40 mg/kg下均能导致肝脏出现一定程度水肿。结论欧前胡素是CYP1A2的诱导剂,而异欧前胡素是CYP2C和CYP2E1的诱导剂。两种化合物在20 mg/kg和40 mg/kg剂量下对小鼠肝脏有损伤作用,而且异欧前胡素的毒性比欧前胡素强。     

大黄素对CCl_4诱导小鼠肝纤维化的作用机制

目的:观察大黄素对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_4)腹腔注射引起小鼠肝纤维化的作用及其机制。方法:雄性C57BL/6小鼠24只,按数字随机法随机分成空白组、模型组和大黄素组。每组8只。模型组和大黄素组通过腹腔注射CCl_4制备小鼠肝纤维化模型,大黄素组并给予大黄素40 mg·kg~(-1)·d~(-1)悬液灌胃。HE染色观察小鼠肝脏的炎症和组织形态,Masson染色和a平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)免疫组化观察小鼠肝纤维化的程度,细胞膜表面分子CD45、CD11B和F4/80免疫组化观察小鼠肝组织中白细胞、单核细胞和巨噬细胞的数量,实时定量PCR检测了小鼠肝组织中转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)和单核细胞受趋化因子-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的表达。结果:模型组组小鼠注射CCl_4四周后,光镜下观察到明显的肝细胞损伤和组织纤维化,提示肝纤维化模型建立成功。大黄素组小鼠肝组织炎症和肝纤维化程度较模型组明显减轻;CCl_4腹腔注射引起小鼠肝组织中CD45~+、CD11B~+、F4/80~+细胞浸润明显增加(P0.01,P0.01,P0.01),而大黄素减少了CD45~+、CD11B~+、F4/80~+细胞在肝纤维化期肝脏中的浸润(P0.01,P0.01,P0.05);除此之外,与空白组比较,模型组中TGF-β1和MCP-1表达明显增加(P0.01,P0.01),而大黄素组TGF-β1和MCP-1显著降低(P0.05,P0.05)。结论:大黄素可减轻CCl_4引起的小鼠肝脏炎症和纤维化,其机制可能与通过减少单核巨噬细胞浸润、减少促纤维化因子TGF-β1的释放有关。     

双去甲氧基姜黄素对硫代乙酰胺诱导小鼠肝纤维化的影响及机制

目的:研究双去甲氧基姜黄素对硫代乙酰胺诱导的小鼠肝纤维化的保护作用及其机制。方法:将ICR小鼠随机分为正常对照组、模型组、水飞蓟素阳性对照组及双去甲氧基姜黄素高、中、低剂量组。除正常对照组外,其余各组均隔天1次连续7 w腹腔注射硫代乙酰胺溶液(200 mg/kg)诱导小鼠肝纤维化模型。双去甲氧基姜黄素高(200 mg/kg)、中(100 mg/kg)、低(50 mg/kg)剂量组1次/d,连续7 w分别灌胃给予,正常对照组、模型组给予等体积相应溶剂。治疗结束后,采用生化分析法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(IBI)及肝组织中羟脯氨酸(HYP)含量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)水平;HE、Masson染色方法观察小鼠肝组织病理变化及肝纤维化的形成程度;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化的磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、Bad蛋白的表达。结果:与模型组比较,双去甲氧基姜黄素各剂量组血清AST、ALT、IBI、HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C和肝组织中HYP的水平显著降低(P<0.05或P<0.01),肝细胞变性坏死和纤维组织增生明显减轻,肝组织中p-PI3K、p-Akt、Caspase-3、Bad蛋白表达显著下调(P<0.05或P<0.01)。结论:双去甲氧基姜黄素具有抗肝纤维化作用,其作用机制可能与PI3K/Akt信号通路有关。     

金丝桃素对病毒性心肌炎小鼠慢性期心肌纤维化的影响及其机制

目的 观察金丝桃素对病毒性心肌炎小鼠慢性期心肌纤维化形成的影响及JAK/STAT传导通路在其中作用.方法 60只雄性Balb/c小鼠采用间断、多次ip柯萨奇病毒B3的方法制备病毒性心肌炎心肌纤维化模型.另选10只雄性小鼠作为对照组.模型制备成功后,存活的小鼠随机分为4组,即模型组,金丝桃素高和低剂量(50、15 mg/kg)组,卡托普利(50mg/kg)组,每日ig给药1次,连续给药30d.ELISA法检测血清中Ⅰ型、Ⅲ型胶原水平;半定量RT-PCR法和免疫组化法检测JAK1/STAT3表达;左心室行Masson染色,进行心肌组织学观察.结果 模型组小鼠血清中Ⅰ型、Ⅲ型胶原水平明显升高;JAK1与STAT3基因表达上调,与对照组相比差异显著(P＜0.05).金丝桃素及卡托普利组均能够明显降低小鼠血清中Ⅰ型、Ⅲ型胶原水平,下调JAK1/STAT3表达;心肌组织病理学观察可见小鼠心肌纤维化程度得到改善,与模型组比较差异显著(P＜0.05).结论 在病毒性心肌炎慢性期心肌纤维化过程中,JAK1/STAT3传导通路的激活可能是心肌组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原表达增强进而形成心肌纤维化的机制之一;而金丝桃素可通过阻断JAK1/STAT3传导通路,抑制病毒性心肌炎慢性期心肌纤维化.     

染料木素对运动疲劳大鼠脏器指数及NO/NOS的影响

目的:探讨染料木素(Genistein,Gen)对运动疲劳大鼠脏器指数及NO/ NOS的影响。方法:雄性SD大鼠,随机分为对照组、运动疲劳模型组、低剂量(0.1μmol/kg)Gen组和高剂量(0.3μmol/kg)Gen组。运用强迫游泳法制备运动疲劳模型,皮下注射不同剂量Gen或溶剂处理,连续14 d。末次运动后取脾、胸腺、肾和脑进行脏器指数检测;于腹腔静脉取血,检测各组动血NO及NOS合成酶的含量。结果:与模型组相比,染料木素可显著上调大鼠脾、胸腺、肾和脑的脏器指数,同时染料木素可明显提高运动疲劳大鼠血清中的NO、tNOS和cNos含量,但对iNOS无明显影响。结论:Gen具有抑制运动疲劳导致的脏器损伤及提高NO含量和NOS活性的作用。     

佛甲草对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的影响

目的:观察佛甲草提取液(SLT)对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化形成的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱(Col,0.1mg/kg)、SLT低剂量组(SLT,4g/kg)、SLT高剂量组(8g/kg)。采用50%的CCl4花生油溶液灌服制备大鼠肝纤维化模型,期间灌服SLT(4,8g/kg)、Col(0.1mg/kg)进行干预,正常组和模型组灌服等体积生理盐水,连续9周。检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性,透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、一氧化氮(NO)含量以及抗超氧阴离子自由基(O2.-)活力;取固定部位肝组织做病理组织学检查,光镜下观察肝细胞结构和肝纤维化程度。结果:SLT预防给药能明显降低CCl4诱导肝纤维化大鼠血清ALT、AST活性和HA、LN、PCⅢ、CⅣ含量,升高NO含量及增强抗O2.-活力;病理组织学检查结果显示SLT组肝细胞结构明显改善,肝纤维化程度减轻。结论:SLT预防给药可抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化形成。     

楮实子通过抑制内质网应激途径保护APAP诱导的小鼠肝损伤

目的 探讨楮实子基于内质网应激途径防治对乙酰氨基酚（APAP）致药物性肝损伤（DILI）的作用机制。方法 将60只C57BL/6N小鼠随机分为6组：正常组、模型组、水飞蓟宾组（3.4 g·kg^-1）和楮实子高、中、低剂量组（3.0、1.5、0.75 g·kg^-1）,每组10只。采用APAP（800 mg·kg^-1）灌胃的方法造模,同时给药治疗,连续10 d。检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）的含量或活性;苏木素-伊红（HE）染色观察肝组织病理形态变化;透射电镜观察肝细胞线粒体形态变化;比色法检测血清和肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽（GSH）、氧化型谷胱甘肽（GSSG）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、三磷酸腺苷（ATP）的活性或含量;免疫荧光法检测肝组织中活性氧（ROS）的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肝组织葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）的mRNA表达水平。结果 与正常组比较,模型组小鼠血清中ALT、AST、TBIL、DBIL活性或含量显著升高（P<0.01）;MDA和GSSG含量显著升高（P<0.01）,SOD、T-AOC、GSH、GSH-Px、ATP含量或活性显著降低（P<0.01）;肝细胞出现肿胀、炎性浸润及片状坏死;肝细胞线粒体肿胀破裂;GRP78、CHOP和JNK mRNA表达均显著增强（P<0.01）。与模型组比较,各给药组小鼠血清中ALT、AST、TBIL、DBIL含量或活性明显降低（P<0.05,P<0.01）;MDA和GSSG含量明显降低（P<0.05,P<0.01）,SOD、T-AOC、GSH、GSH-Px、ATP含量或活性明显升高（P<0.05,P<0.01）;肝细胞肿胀、炎性浸润及片状坏死减少;肝细胞线粒体恢复双层膜结构;GRP78、CHOP和JNK mRNA表达均明显减弱（P<0.05,P<0.01）。结论 楮实子对APAP肝损伤小鼠具有防治作用,可能与减轻内质网应激、降低体内氧化应激水平有关。     

复肝丸对小鼠和大鼠肝纤维化模型的影响

目的:观察复肝丸对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化和二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化的防治作用。方法:小鼠随机分为正常组、模型组、复肝丸组和培哚普利,除正常组外,其余组腹腔注射四氯化碳复制肝纤维化模型;自造模之日起各组灌胃4周。大鼠随机分为正常组、模型组、复肝丸组和培哚普利,除正常组外,其余各组腹腔注射二甲基亚硝胺4周复制肝纤维化模型;造模结束后各组灌胃4周。称重测量肝体比、脾体比,比色法测定血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性,溴甲酚绿法测定血清白蛋白水平,碱消化法测定肝组织羟脯氨酸含量,HE染色观察肝组织炎性变化、天狼猩红胶原染色观察肝组织病理性胶原沉积变化。结果:与模型组相比,复肝丸10g生药/kg小鼠体重预防用药或6g/kg大鼠体重治疗用药均能降低大鼠和小鼠血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性,减轻肝脏炎性病理,降低肝组织羟脯氨酸水平,改善肝组织病理性胶原沉积增生。结论:复肝丸对大鼠和小鼠肝纤维化具有防治作用。     

染料木素对雌激素缺乏诱发的大鼠骨质疏松症的作用研究

 目的观察染料木素对实验性去卵巢大鼠诱发的骨质疏松症模型的治疗作用。方法SD雌性大鼠行去卵巢术后,随机分为正常对照组,模型组,骨疏康(GSK)组,尼尔雌醇组,染料木素大、中和小剂量组,每组10只。各组动物给予盐酸四环素25mg·kg^-1连续3d,同时给予治疗用药,剂量为GSK 5g·kg^-1,尼尔雌醇为1.5mg·kg^-1,染料木素分别为18,9,4.5mg·kg^-1,以上给药除尼尔雌醇每周1次外其他各组均为每日1次。给药后12周后进行相关指标的测定。结果①染料木素4.5,9mg·kg^-1连续给药12周可使其股骨干重、灰重、骨钙及股骨和腰椎骨密度显著增加,与模型组比较具有显著差异(P<0.05或P<0.01);②染料木素4.5,9mg·kg^-1连续给药12周可显著改善模型大鼠的股骨及椎骨最大载荷、最大桡度、弹性载荷、弹性桡度(P<0.05或P<0.01);③染料木素低、中剂量用药12周后可明显增加模型大鼠骨小梁面积百分比(BV/TV%)、骨小梁厚度(Tb.Th)和骨小梁数目(Tb.N),减小骨小梁间隔(Tb.Sp)(P<0.05或P<0.01);④染料木素低、中剂量给药12周后,可使模型大鼠的血清ALP水平下降,尿Ca/Cr、Pyd/Cr水平降低(P<0.05或P<0.01)。结论染料木素对模型动物的骨密度、骨生物力学及相关生化指标都具有改善作用,具有较好的抗骨质疏松作用。