VEGF与MMP-9在结肠癌中的表达及临床病理意义

目的探讨VEGF和MMP-9在结肠癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化S-P法检测71例结肠癌组织和18例正常肠粘膜组织中VEGF与MMP-9的表达水平。结果 MMP-9和VEGF在结肠癌组织中的表达明显高于正常肠粘膜（P〈0.05）,在临床晚期组中表达明显高于早期组（P〈0.05）,在有淋巴结转移组中表达明显高于无淋巴结转移组（P〈0.05）。结论 MMP-9和VEGF在结肠癌组织中的表达和浸润深度、淋巴结转移有关。     

三氧化二砷对HL-60细胞MMP-2及MMP-9表达的影响

目的: 探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As₂O₃)对HL-60细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9表达的影响。方法: 以HL-60细胞为对象,加入0.0、2.5、5.0、7.5 μmol/L As₂O₃干预48 h。RT-PCR检测MMP-2和MMP-9 mRNA的表达,Western blot检测MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结果: HL-60细胞MMP-2、MMP-9 mRNA的表达随着As₂O₃浓度的增加而减少,5.0和7.5 μmol/L As₂O₃组与对照组差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01)。As₂O₃呈剂量依赖性抑制HL-60细胞MMP-2、MMP-9蛋白的表达,As₂O₃各组与对照组差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01)。结论: As₂O₃可抑制HL-60细胞MMP-2、MMP-9的表达,这一效应可能是As₂O₃治疗白血病的分子机制之一。     

MMP-2、MMP-9及VEGF在结肠癌中的表达及其与肿瘤转移的相关性

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及血管内皮生长因子（VEGF）在结肠癌中的表达,并分析其与肿瘤转移的相关性。方法 86例经病理证实的结肠癌患者,采用免疫组化SP法检测MMP-2、MMP-9及VEGF在结肠癌组织及正常结肠组织中的表达,分析三者间的相关性及其与肿瘤转移的相关性。结果结肠癌组织中MMP-2、MMP-9及VEGF表达水平及阳性率均显著高于正常结肠组织（P〈0.05、0.01）,其中有淋巴结转移的结肠癌组织中MMP-2、MMP-9及VEGF阳性表达率高于无淋巴结转移者（P〈0.05）;MMP-2、MMP-9与VEGF表达之间呈显著正相关（r=0.72,P〈0.05）。结论结肠癌组织中MMP-2、MMP-9及VEGF高表达与肿瘤转移密切相关,三者可作为反映结肠癌进展的重要指标,为判断患者的预后提供依据。     

结肠癌MMP-9的表达与其侵袭转移的相关性研究

目的：探讨基质金属蛋白酶-9在结肠癌中的表达及其与血管生成、侵袭转移之间的关系。方法：采用免疫组化SP法，用MMP-9抗体标记44例结肠癌组织，用第Ⅷ因子抗体标记组织内的血管，计数微血管密度，用IV型肢原抗体标记细胞外基质和基底膜。结果：MMP-9的表达与性别、肿瘤的位置、分化无相关性(P＞0．05)；MMP-9的表达与淋巴结转移、组织学分型、Dukes分期有明显差异(P＜0．01或0．05)；结肠癌组织MMP-9的表达及MVD值均明显高于正常结肠组织(P＜0．05或0．01)；结肠癌的MVD值与组织分型、分化、Dukes分期、淋巴结转移均有明显相关性(P＜0．01或0．05)；MMP-9表达阳性的结肠癌组织MVD值明显高于表达阴性(P＜0．01)。结论：MMP-9的表达和微血管生成与结肠癌侵袭转移密切相关，MMP-9与结肠癌血管生成密切相关，联合检测MMP-9和MVD对结肠癌的治疗、预后判定有一定的价值。     

MMP-9 过表达对骨肉瘤143B 细胞 侵袭与迁移能力的影响

目的 研究MMP-9 过表达对成骨肉瘤143B 细胞侵袭与迁移能力的影响。方法 通过慢病毒介导 MMP-9 过表达载体转染骨肉瘤143B 细胞,实验分为3 组：实验组（转染pLV-Puro MMP-9 过表达序列）、 对照组（转染pLV-Puro MMP-9-NC 序列）、空白组（PBS）;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检 测MMP-9 和VEGF mRNA 的表达;Western blot 法检测MMP-9 和VEGF 蛋白的表达;Transwell 小室侵袭 实验检测细胞侵袭能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果 实验组MMP-9 和VEGF 的mRNA 和蛋 白表达量较对照组和空白组上调（P < 0.05）;实验组穿过人工基底膜细胞数高于对照组和空白组（P < 0.05）; 实验组划痕愈合率高于对照组和空白组（P <0.05）。结论 慢病毒介导MMP-9 过表达通过作用于VEGF 靶 基因,抑制成骨肉瘤143B 细胞侵袭及迁移能力。     

基质金属蛋白酶-9及血管内皮生长因子在结肠癌组织中表达的意义

目的探讨基质金属蛋白酶（MMP-9）及血管内皮生长因子（VEGF）在结肠癌组织中表达的意义。方法选取我院2011年3月-2013年3月60例手术切除结肠癌组织标本作为结肠癌组;选择同期60例正常结肠组织标本作为对照组。采取免疫组化SP法检测两组MMP-9及VEGF的表达。结果结肠癌组在MMP-9、VEGF呈现的阳性率分别为75%、88.33%,对照组均呈现阴性,组间差异有统计学意义;Ⅰ期-Ⅱ期结肠癌组中MMP-9、VEG的阳性表达率明显低于Ⅲ期-Ⅳ期阳性表达率,差异有统计学意义（P〈0.05）;淋巴结转移结肠癌组织中MMP-9、VEG的阳性表达率明显高于无淋巴结转移阳性表达率,差异有统计学意义（P〈0.05）。结肠癌组织中MMP-9、VEG的表达呈正相关关系。结论 MMP-9及VEGF在结肠癌组织中明显升高,两者共同促进了结肠癌的进展。     

PCDGF、MMP-9与结肠癌远处转移的关系

目的 探讨畸胎瘤细胞源性生长因子(PC cell-derived growth factor,PCDGF)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)对结肠癌组织远处转移的评估价值.方法 应用免疫组化法检测35例结肠癌组织和20例癌旁组织中PCDGF及MMP-9的表达水平.结果 结肠癌组织中存在PCDGF、MMP-9蛋白的高表达,两者表达呈正相关.并且PCDGF,MMP-9的表述与结肠癌淋巴结转移、远处转移及Dukes分期有关,与组织分化程度,浸润深度无关.结论 结肠癌组织中PCDGF、MMP-9表达均增高并且呈正相关.两者对评估胃癌浸润转移、恶性程度及预后具有积极的价值.     

血管紧张素诱导MMP-2和MMP-9在人结肠癌细胞中的表达

目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人结肠癌细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法筛选出AT1受体(AT1R)高表达的结肠癌细胞株,采用不同浓度的AngⅡ进行处理,收集不同时点的细胞,提取细胞总RNA和总蛋白。采用实时PCR和Western blotting,分别检测AngⅡ处理前后结肠癌细胞MMP-2、MMP-9 mRNA以及相应编码蛋白的表达变化,研究AngⅡ对MMPs表达的诱导作用。结果AT1R在多数结肠癌细胞株中有表达,以LoVo细胞最为明显。AngⅡ能够刺激LoVo细胞MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白的表达,并呈剂量和时间依赖效应。Lovo细胞MMP-2、MMP-9蛋白表达水平的上调能被AT1R拮抗剂阻断。结论AngⅡ可以通过AT1R诱导人结肠癌细胞MMP-2和MMP-9的表达,在肿瘤的转移机制中可能具有一定的作用。     

血管紧张素诱导MMP-2和MMP-9在人结肠癌细胞中的表达

目的 研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人结肠癌细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响.方法 筛选出AT1受体(AT1R)高表达的结肠癌细胞株,采用不同浓度的AngⅡ进行处理,收集不同时点的细胞,提取细胞总RNA和总蛋白.采用实时PCR和Western blotting,分别检测AngⅡ处理前后结肠癌细胞MMP-2、MMP-9 mRNA以及相应编码蛋白的表达变化,研究AngⅡ对MMPs表达的诱导作用.结果 AT1R在多数结肠癌细胞株中有表达,以LoVo细胞最为明显.AngⅡ能够刺激LoVo细胞MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白的表达,并呈剂量和时间依赖效应.Lovo细胞MMP-2、MMP-9蛋白表达水平的上调能被AT1R拮抗剂阻断.结论 AngⅡ可以通过AT1R诱导人结肠癌细胞MMP-2和MMP-9的表达,在肿瘤的转移机制中可能具有一定的作用.     

去甲斑蝥素通过下调VE-Cadherin和MMP-2/9活性抑制结肠癌血管拟态形成的体外研究

目的:探讨去甲斑蝥素(NCTD)对结肠癌中血管生成拟态(VM)形成的作用及其可能的机制。方法:采用MTT法检测结肠癌细胞HCT116对NCTD的敏感性,筛选无毒剂量;在三维培养基础上观察NCTD作用后VM的形成情况;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测在NCTD干预后细胞内血管内皮钙黏蛋白(VE-Cadherin,VE-Cd)的mRNA表达水平;Western Blot检测NCTD作用后VE-Cd蛋白表达水平;采用明胶酶谱法检测NCTD对三维培养的HCT116细胞MMP-2和MMP-9活性的影响。结果:三维培养下无毒剂量的NCTD能有效地抑制VM形成;VE-Cd mRNA表达在药物作用后出现明显下调;而HCT116细胞的胞浆和胞膜中VE-Cd蛋白均呈下调趋势,胞膜中VE-Cd蛋白下调更明显;三维培养的HCT116细胞MMP-2和MMP-9活性随着NCTD药物浓度的增加而逐渐降低。结论:体外实验研究中,NCTD可以有效抑制结肠癌VM的形成,其机制可能与下调VE-Cd表达和降低MMP-2、MMP-9的活性有关。     

三氧化二砷诱导肠癌HT-29细胞周期阻滞及凋亡的研究

目的：探讨三氧化二砷（AsO3）对结肠癌细胞增殖的抑制作用及对细胞周期和凋亡的影响。方法：采用MTr法测定细胞增殖活力，通过细胞形态学观察细胞分裂及凋亡，应用流式细胞仪进行细胞周期解析、凋亡的检测。结果：As2O3呈剂量-时间依赖性抑制结肠癌HT-29细胞系的增殖，作用24、48及72h后抑制50％细胞生长的药物浓度（IC50）分别为40．03,13．76,4．53μmol/L，与对照组差异显著（P〈0．05）。2μmol/L与5μmol/L的As2O3作用24h后，细胞周期出现G2/M期阻滞及亚二倍体凋亡峰，随着作用时间的延长，凋亡细胞随岛，M期细胞减少而逐渐增多。细胞形态学观察分裂期细胞及凋亡细胞明显增加。结论：As12O3抑制结肠癌HT-29细胞的增殖，诱导G2/M期阻滞及细胞凋亡。     

三氧化二砷对人结肠癌细胞增殖及凋亡的影响

目的：观察三氧化二砷（As2O3）对人结肠腺癌LS－174T细胞增殖及凋亡的影响。方法：应用MTT法，细胞集落形成试验，流式细胞仪技术和TUNEL法观察不同浓度的As2O3（1．0、2．0、4．0、8．0、16．0μmol/L）对LS－174T细胞增殖和凋亡的影响，免疫组化技术观察As2O3对bcl-2基因表达的影响。结果：As2O3处理后，LS－174T细胞生长抑制率上升，集落形成率下降，细胞周期中G1期细胞比例上升，S期和G2／M期细胞比例下降，TUNEL法显示凋亡数增加，免疫组化结果显示bcl-2的表达明显减弱，结论：As2O3能抑制LS－174T细胞增殖并诱导该细胞株凋亡，其机理可能与下凋bcl-2的表达有关。     

苏拉明对小鼠肺腺癌的抑制作用及对血清VEGF和MMP-9表达的影响

目的:血管生成抑制剂靶向治疗肿瘤已成为目前研究热点之一,本研究旨在观察苏拉明(Suramin)对肺腺癌小鼠异体移植瘤生长和转移的抑制作用,并初步探讨苏拉明抑制肿瘤生长和转移的相关机制。方法:构建肺腺癌高转移小鼠移植瘤模型,将24只接种Lewis肺癌的C57BL/6J小鼠按随机数字表法随机分成三组:对照组、顺铂组、苏拉明组。给予相应药物干预,于接种后24日处死各组小鼠,经眼球静脉丛取各组小鼠血液样本1 ml,酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定VEGF及MMP-9的表达,剥离皮下肿瘤,称重,计算抑瘤率,剖胸取出双肺,计数肺表面转移结节,计算肺转移抑制率。结果:顺铂组、苏拉明组的抑瘤率分别为39.20、49.11,对照组、顺铂组、苏拉明组的肺表面转移结节数分别为(14.00±2.90)、(9.77±1.65)、(6.00±1.70),血清VEGF的浓度分别为(431.15±27.38)pg/ml、(401.96±25.51)pg/ml、(135.35±19.05)pg/ml,MMP-9的浓度分别为(223.47±21.50)ng/ml、(208.12±17.29)ng/ml、(89.02±7.51)ng/ml。结论:VEGF及MMP-9的高表达促进肺腺癌的生长和转移,苏拉明对肺腺癌移植瘤的生长和转移具有抑制作用,其机制与其抑制VEGF及MMP-9的表达,抑制微血管形成,促进肿瘤细胞侵袭相关。     

As2O3对小鼠S180肉瘤VEGF表达的影响

目的　研究As2 O3 对小鼠S180 肉瘤血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,初步探讨As2 O3 抑制小鼠S180肉瘤生长的作用机制。方法　建立S180 移植瘤动物模型,检测As2 O3 作用后肿瘤组织内诱导型一氧化氮合酶(iN OS)、一氧化氮(NO)的改变,同时通过免疫组织化学检测肿瘤组织内iNOS、VEGF蛋白表达情况。结果　As2 O3 作用后肿瘤组织内的iNOS、NO含量下降,iNOS、VEGF蛋白表达逐渐下降,在3.5mg·kg-1·d-1组出现统计学意义(P<0 .0 5 )。结论　As2 O3 作用后导致NO的降低,从而抑制肿瘤细胞VEGF的表达,进而抑制肿瘤血管生成,有效降低肿瘤细胞株的增殖和转移能力。     

不同浓度三氧化二砷对肝癌细胞生长及血管内皮生长因子表达的影响

目的:研究不同浓度三氧化二砷(As2O3)对人肝癌细胞株HepG2的影响及三氧化二砷(As2O3)对其表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法:体外培养HepG2细胞,噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度As2O3对HepG2生存的影响,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测As2O3对肝癌细胞VEGF基因表达的影响.结果:0.1～1.0 μmol/l三氧化二砷可以诱导HepG2细胞的分化,2.0～7.0 μmol/l三氧化二砷主要起细胞毒性作用,促进细胞凋亡;三氧化二砷可以诱导肝癌细胞VEGFmRNA表达,其中在5.0 μmol/l最明显.结论:低剂量三氧化二砷可以诱导细胞的分化,高剂量则主要起细胞毒性作用,促进细胞凋亡;三氧化二砷可诱导VEGFmRNA的表达,其机制可能与信号转导通路相关.     

As2O3对裸鼠移植肿瘤生长及血管生成的抑制作用

目的：研究三氧化二砷（As2O3）对人胃癌裸鼠皮下移植瘤微血管新生以及血管内皮生长因子受体-1（Fit-1）表达的抑制作用。方法：对30只裸鼠采用人胃腺癌SGC7901细胞建立皮下移植瘤模型,分为两个治疗组（2.5mg／kg组和5mg／kg组）和对照组,每组10只,2.5mg／kg组和5mg／kg组给予As2O3腹腔注射治疗,连续10d。对照组注射生理盐水测定肿瘤重量、抑瘤率,以判定As2O3抑制肿瘤生长的效果;荧光免疫测定CD31并计算微血管密度（MVD）;荧光免疫激光共聚焦测定Fit-1的表达。结果：2.5mg／kg组,5mg／kg组的抑瘤率按质量计算分别为29.08％和52.17％,As2O3治疗后瘤组织中MVD明显减少,与对照组比较差异有显著性意义（P〈0.01）;5mg／kg组瘤块中MVD明显少于2.5mg／kg组者（P〈0.01）。治疗组Flt-1表达显著低于对照组;5mg／kg组瘤块中Fit-1明显少于2.5mg／kg组者（P〈0.01）。结论：用As2O3单剂治疗能明显抑制人胃癌裸鼠皮下移植瘤的生长,As2O3治疗可显著减少肿瘤组织MVD,抑制肿瘤血管新生;抑制Flt-1的表达可能是As2O3抗肿瘤咀管新生的机制之一。     

三氧化二砷抗实体肿瘤的研究概况

三氧化二砷(As2O3)临床治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)有极好的疗效，在此基础上国内外开展了将其应用于实体瘤的研究。初步结果显示，As203对肝癌、食管癌、胃癌等消化系统肿瘤有明显的治疗作用；对宫颈癌、卵巢癌、膀肮癌等泌尿生殖系统肿瘤，以及肺癌、乳腺癌、前列腺癌等其他肿瘤，也显示了抑制细胞增殖并诱导凋亡的作用，本文对此进行了综述。     

砷剂诱导人胃癌细胞株凋亡及对C-myc基因作用的研究

目的研究砷剂（As2O3）对人胃癌细胞的诱导凋亡作用及对C-myc基因表达的影响。方法选用人胃癌BGC-823细胞株,运用体外细胞培养法、MTT法、流式细胞术检测As2O3对人胃癌的诱导凋亡作用;用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测C-mycmRNA的表达。结果As2O3对人胃癌BGC-823细胞具有抑制作用,其抑制率呈时间-剂量依赖关系。不同浓度的As2O3均可诱导凋亡。1．0μmol／L、3．0μmol／L的As2O3可下调C-myc的表达。结论As203具有抗肿瘤作用,主要是通过诱导细胞凋亡实现。其机制与下调C-myc表达有密切关系。     

三氧化二砷对大肠癌Ls174细胞致腹水生成的影响

目的研究三氧化二砷（As2O3）对人大肠癌裸鼠腹腔种植腹水生成的影响。方法将大肠癌Ls174细胞通过单独培养,与5-氟尿嘧啶（5-Fu）、As2O3分别共培养后行腹腔内注射构建裸鼠腹水模型,通过单独和联合注入化疗药物,观察腹水生成情况以及检测腹水细胞中耐药基因谷胱甘肽硫转移酶酸性同工酶（GST。百）mRNA表达,比较三氧化二砷对大肠癌致腹水生成的影响。结果5FU和As2O3组裸鼠腹水生成明显减少,且生存期延长,耐药基因GST-π TmRNA表达最低。结论三氧化二砷能够抑制或消除人大肠癌裸鼠腹腔种植及腹水的生成,不同程度地延长生存期并通过下调耐药基因GST-πmRNA表达提高对化疗药物的敏感性。     

三氧化二砷对人胃癌裸鼠皮下移植瘤的作用机制

目的:探讨不同剂量As203对人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠皮下移植瘤的体内抑瘤作用及作用机制.方法:建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为实验组即As203低(1.0 mg/kg)中(2.5 mg/kg)高(5.0 mg/kg)剂量组、空白对照生理盐水组及阳性对照5-FU组(20 mg/kg),腹腔连续给药10 d,计算抑瘤率,检测用药后裸鼠的肝肾功能及血常规,观察用药前后裸鼠体重改变,实时定量RT-PCR检测移植瘤内caspase-3基因相对表达量.结果:低剂量As203组及5-FU组抑瘤率分别为60.6%和78.2%,与生理盐水组比较有统计学差异(P＜0.05),中高剂量组及5-FU组差异无统计学意义(P＞0.05).用药后低剂量As203组caspase-3的基因表达显著增高,与生理盐水组比较有统计学意义(P＜0.05),中高剂量组在数值上caspase-3表达增高,但无统计学差异(P＞0.05).各剂量组均出现白细胞抑制,但较5-FU组轻,肝肾功能未见异常.结论:低剂量As203表现出抑制肿瘤生长的作用,其机制可能与上调caspase-3基因的表达有关;As203对肝肾无明显毒性.