巨噬细胞移动抑制因子在肿瘤发生中的作用

巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是一种炎性因子,参与了肿瘤发生发展的多个方面,包括肿瘤的增殖、扩散和肿瘤血管的生成。文中对MIF与肿瘤关系的最新研究进展进行综述。     

肺癌肿瘤抑制因子-1在肿瘤中的研究进展

肺癌肿瘤抑制因子-1（tumor suppressor in lung cancer 1,TSLC1）是2001年Pletcher等[1]通过物理和测序绘图方法,在大量的DNA序列中从人工酵母染色体上分离出1.6 Mb片段,转染到非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）细胞株A549中,导入裸鼠体内后能完全抑制肿瘤生长及转移作用,推测其抑癌作用是通过细胞-细胞或细胞-亚细胞间的相互作用。Murakami等[2]于2002年通过功能性互补方法,     

肿瘤自分泌生长抑制因子的抗肿瘤作用研究

采用^3H-TdR掺入法，检测人肺腺癌细胞（A549）无血清萃取培养上清液（ATI）。结果发现ATI在体外能明显抑制部分肿瘤细胞株DNA合成，尤以A549细胞及小鼠黑色素瘤细胞（B16）明显（P＜0．01和0．05）。且这一作用较为稳定，耐热，无种属特异性，提示ATI中含调节A549细胞生长的物质，对A549细胞的生长起重要的调节作用。     

FoxO转录因子在代谢调节及肿瘤抑制中的作用

转录因子是控制基因表达的一类蛋白质分子,通过调节靶基因的表达对机体的发育、分化、代谢等起重要的调控作用。Forkhead转录因子是2000年才正式统一命名的一个新的转录因子家族[1],从1989年在果蝇中发现第一个Forkhead基因以来,目前这个家族已超过100个成员。该家族的共同特征     

金属蛋白酶及其抑制因子与肿瘤侵袭转移

<正>侵袭和转移是恶性肿瘤的重要特征,是肿瘤细胞、宿主细胞及细胞外基质之间一系列复杂、多步骤相互作用的结果。首先,具有转移潜能的肿瘤细胞从肿瘤母体脱离,通过释放蛋白水解酶降解细胞外基质和基底膜,侵犯到周围组织中。进入血管或淋巴管,并随循环到达远处。然后,穿出管壁再次进入组织中,继续增殖形成转移灶。在这一过程中,包含着多次细胞外基质及基底膜的降解。已经证明,肿瘤细胞侵袭转移的能力与其产生或诱导产生降解细胞外基质的蛋白酶的能力密切相关。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是     

肿瘤坏死因子在刀豆蛋白A诱导的肝损伤中的作用

利用刀豆蛋白A（ConA）诱导小鼠建立肝损伤模型,通过检测血浆肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平、观察光镜和电镜下肝组织病理学变化评价肝损伤,研究了抗鼠TNF－α单克隆抗体对该肝损伤模型的影响。结果发现,模型组血浆TNF－α含量（0．19±0．06ng／ml）,明显高于正常对照组（0．00±0．00ng／ml,P＜0．01）,且血浆TNF－α含量与肝损伤程度一致。肝损伤早期病理变化突出表现为肝细胞凋亡,抗鼠TNF－α单抗组血浆TNF－α含量（0．00±ml）明显低于模型组（P＜0．01）,肝组织学检查无肝损伤表现,显示抗鼠TNF－α单抗对该模型具有保护作用,表明ConA可诱导小鼠发生肝损伤,TNF－α起重要的介导作用,细胞调亡可能为ConA造成肝细胞死亡的一种重要机制。     

髓系来源抑制细胞及其在肿瘤免疫耐受中的作用

由于晚期肿瘤患者的免疫功能处于抑制状态,许多在动物实验中建立的肿瘤免疫疗法(如肿瘤疫苗等)应用于临床后疗效甚微。肿瘤衍生的细胞因子能诱导多种抑制性细胞,抵抗机体抗肿瘤的天然     

胎儿血淋巴细胞释放物对成人淋巴细胞活化的抑制

本文用二步分段盐析法,制备了胎儿淋巴细胞抑制因子(FLIF)。该因子具有相对热稳定性、无细胞毒性;它能非特异地显著地抑制成人淋巴细胞转化。FLIF作用于静止淋巴胞胞的激活阶段,对已活化的淋巴细胞无影响。     

内源性血管生成抑制因子与肿瘤

实体肿瘤的生长需要血管生成来输送营养,血管也是肿瘤转移的主要途径。血管生成抑制因子可能主要通过抑制血管生成,阻断肿瘤生长的营养供应,而抑制肿瘤的生长和转移,同时诱导肿瘤细胞的凋亡使肿瘤原发性或转移性癌灶减小、消退。血管生成抑制已成为抗肿瘤治疗的又一重要靶点,血管生成抑制性物质可能将为肿瘤治疗提供又一条新的有效途径。     

从猪脾联合制备转移因子与淋巴细胞抑制因子

用透析及分级沉淀等技术从猪脾同时制得了转移因子(TF)和淋巴细胞抑制因子(LIF)。在实验浓度5μg/ml,50μg/ml,100μg/ml下,LIF对植物血凝素(PHA)诱导的人外周血淋巴细胞(PBL)转化具有抑制作用。其主要组成为多肽及微量核酸类物质,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电聚焦电泳证明它是不均一的。     

人A20基因ORF的克隆

目的克隆人A20 ORF,为人A20的体外合成、抗体制备奠定基础.方法从LPS诱导的人外周血白细胞炎症模型中提取总RNA,用特异性引物介导的逆转录反应合成cDNA第一链,经巢式梯度RT-PCR的两次扩增,最终得到2 36l bp长的人A20 ORF并插入pCRR4-TOPOR载体测序验证.结果采用巢式梯度RT-PCR我们成功收获了人A20 ORF,测序结果与GenBank公布结果完全一致.结论采用巢式梯度RT-PCR克隆人A20 ORF,在技术路线上可以为某些难克隆基因提供参考.     

mCD99L2基因沉默对小鼠B淋巴瘤细胞A20生物学特性的影响

目的探究mCD99L2基因沉默对小鼠B淋巴瘤细胞系A20细胞生物学特性的影响。方法采用MTT法和流式细胞仪检测mCD99L2基因沉默前后干扰组A20-LV-mCD99L2和未干扰组A20细胞的增殖率和细胞周期;Transwell法测定两组细胞的体外侵袭能力;采用裸鼠与BALB/c鼠皮下成瘤实验观察比较两组细胞在体内的成瘤时间和成瘤率。结果MTT法显示干扰组A20-LV-mCD99L2增殖率为(0.61±0.12),低于未干扰组增殖率(0.75±0.20),差异有统计学意义(P=0.000);干扰组A20-LV-mCD99L2处于G2期的细胞比例为(10.58±4.97),高于未干扰组(3.33±1.31),差异有统计学意义(P=0.009);Transwell法显示干扰组A20-LV-mCD99L2运动能力较未干扰组下降。裸鼠皮下成瘤时间干扰组(13.33±4.63)d长于未干扰组(9.50±2.90)d,成瘤率均为100%;BALB/c鼠皮下成瘤时间干扰组(10d)长于未干扰组(7.0±0.82)d,成瘤率干扰组为14.3%,显著低于未干扰组(100%),差异有统计学意义(P=0.000)。结论mCD99L...     

牛磺酸抗细胞因子诱导的原代培养胰岛细胞凋亡与抗凋亡蛋白A20的变化

目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF)和γ-干扰素(IFN-γ)引起的原代培养胰岛细胞凋亡与A20蛋白表达变化以及牛磺酸对其影响.方法用体外单层培养的方法,培养Wistar大鼠胰岛细胞,采用流式细胞仪、DNA电泳、放射免疫法及其RT-PCR等分别观察IL-1β、TNF和 IFN-γ对胰岛细胞凋亡细胞百分率、DNA片段、培养液中胰岛素分泌以及A20蛋白表达的影响,并进一步观察牛磺酸的作用.结果流式细胞仪分析显示IL-1β、TNF和 IFN-γ联合可诱导胰岛细胞凋亡率增加(从3.5%增加到30.2%),DNA明显片段化,同时胰岛素分泌明显降低(P<0.01), 而A20蛋白无表达;牛磺酸能阻断上述细胞因子的作用(P<0.01).结论牛磺酸能够改善细胞因子诱导的原代培养胰岛细胞凋亡,其机制可能与促进A20蛋白表达有关.     

甲状腺素对胰岛β细胞A20 mRNA表达作用的研究

目的 研究甲状腺素对胰岛β细胞A20 mRNA表达作用的影响,观察大鼠胰岛β细胞形态学变化.方法 采用氧化酶法及放射免疫法测定大鼠血清葡萄糖和血清胰岛素的含量.大鼠胰岛β细胞总DNA琼脂糖凝胶电泳,检测凋亡条带的形成.RT-PCR检测胰岛细胞抗凋亡蛋白A20(TNF-induced protein 3)mRNA的表达.结果 给予T4(600μg·kg-1·d-1)灌胃14d后,可使大鼠血清胰岛素水平明显降低(P＜0.05),血糖水平则明显升高(P＜0.01),并且大鼠胰岛β细胞总DNA琼脂糖凝胶电泳呈现典型凋亡梯状条带.而给予T4灌胃7d时,不发生上述改变.A20 mRNA在给予T4(600μg·kg-1·d-1)灌胃7d和14d组有表达,而且后者明显低于前者(P＜0.01),但在对照组和给予T4灌胃21d组无表达.结论 T4引起胰岛细胞的凋亡可能与抗凋亡蛋白A20在胰岛β细胞的非持续性表达有关.     

锌指蛋白A20对抑制ox-LDL诱导的平滑肌细胞LOX-1、TLR-4表达的作用

目的 探讨锌指蛋白A20对氧化性低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的血管平滑肌细胞血凝素样氧化低密度脂蛋白受体（LOX-1）和toll样受体-4（TLR-4）表达的作用.方法 体外培养SD大鼠主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）,简单随机化分成4组：A组（对照组）;B组（OX-LDL组）;C组（A20组）;D组（ox-LDL＋A20组）.收集以上各组细胞,用RT-PCR检测LOX-1mRNA和TLR-4 mRNA的表达;提取核蛋白,并用western blot的方法检测NF-κ B核易位的量.结果 ox-LDL刺激大鼠主动脉平滑肌细胞后LOX-1mRNA和TLR-4 mRNA的表达明显增加及核因子κ B（NF-κ B）的活化均明显增加.转染含A20基因质粒的平滑肌细胞TLR-4 mRNA的表达达到正常水平,LOX-1 mRNA的表达及NF-κ B的核移位的量甚至降低到正常水平以下.结论 ox-LDL诱导的平滑肌细胞LOX-1mRNA和TLR-4 mRNA表达增加,可能由此激活TLR-4/NF-κB信号系统,启动动脉壁的炎症反应,触发动脉粥样硬化发生.A20明显抑制了ox-LDL对平滑肌细胞的上述诱导作用,可能由此阻断了ox-LDL引发的不断级联扩大的正反馈效应.阻止了动脉粥样硬化的发展.     

基于流体动力学的mA20质粒及其突变体转染对实验性小鼠内毒素血症的治疗作用

目的 研究mA20及其突变体mA20-ZnF4-7质粒对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)攻击所致实验性内毒素血症小鼠的治疗作用.方法 用LPS攻击小白鼠制备内毒血症动物模型.按10 μg质粒/1.6 ml生理盐水比例溶于生理盐水中,采用基于流体动力学基因转染方法对实验组小鼠进行质粒注射.以ELISA检测各组血浆和组织TNF-α、IL-1β表达.12 h观察组织病理变化.结果 ①mA20质粒治疗组、mA20-ZnF4-7质粒治疗组的TNF-α在各时间点的表达分别为:6 h:(201.797±4.789)、(235.710±6.108) pg/ml,12 h:(236.580±7.497)、(255.130±7.827) pg/ml,24 h:(154.551±16.460)、(223.246±11.316) pg/ml;两组间无显著性差异(P＞0.05);与单纯内毒素组、空质粒组的TNF-α表达比较有显著性降低(P＜0.05).②mA20质粒治疗组、mA20-ZnF4-7质粒治疗组的IL-1β在各时间点的表达分别为:6 h:(87.103±3.840)、(101.586±2.486) pg/ml,12 h:(83.655±4.973)、(94.460±3.110) pg/ml,24 h:(77.678±6.555),(87.103±4.826) pg/ml;该两组间无显著性差异(P＞0.05);与单纯内毒素组、空质粒组的IL-1β表达比较有显著性降低(P＜0.05);各时间点之间比较无明显差别(P＞0.05).③病理学观察结果显示:mA20治疗组、mA20-ZnF4-7治疗组的肝、肺损伤均较单纯内毒素组、空质粒组轻;与生理盐水对照组相比,肝、肺损伤无明显差别(P＞0.05).结论 "基于血流动力学的基因转染方法"能有效地把目的质粒DNA转入肝、肺;对实验性类毒素血症小鼠体外转染mA20-ZnF4-7和mA20有相似的治疗作用,这为临床应用提供一定的实验基础.     

Goldeneye~(TM) DNA ID System 20A试剂盒确证实验

目的:测试GoldeneyeTMDNA ID System20A试剂盒的技术性能指标,评估其法医学应用价值。方法:参照美国DNA分析方法专家组(TWGDAM)制定的确证指南,利用9947A、007标准品,100个拐卖儿童建库血样,日常案件各类检材制定测试方案,从方法学验证、灵敏度测试、混合样本测试、批量样本测试、DNA提取方法适应性测试、各类常见检材的测试、稳定性测试等7个方面进行测试。结果:Gold-eneyeTMDNA ID System 20A试剂盒灵敏度较高,对各类案件检材和DNA提取方法具有较好的适应性,具有直接扩增能力和检测混合DNA样本检测能力。结论:GoldeneyeTMDNAID System 20A试剂盒可用于法庭科学的检案与建库。     

PHF20相互作用蛋白质组学分析及其在肿瘤中的作用研究

目的:探究PHF20相互作用蛋白,初步揭示PHF20促进肿瘤发生发展的分子机制。方法:通过免疫亲和纯化联合银染质谱的方法检测PHF20的相互作用蛋白。免疫共沉淀方法对质谱的结果进行验证。在干扰PHF20及对照乳腺癌细胞系中,用EdU和转移小室的实验检测PHF20在乳腺癌发生发展中的作用。结果:质谱结果显示,PHF20可以结合KDM4A和PRC2等复合物,免疫共沉淀验证了PHF20与各个复合物之间相互作用的可信性。EdU和转移小室实验表明,干扰PHF20后与对照细胞相比,其增殖和侵袭能力显著降低。结论:PHF20在体内与多种表观遗传调控相关的复合物相互作用,并促进肿瘤细胞增殖和侵袭的能力。     

Ck20在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的检测Ck20在大肠癌组织中的表达,探讨其与大肠癌发生、发展的关系。方法采用免疫组织化学法检测在大肠癌组织癌中的表达,研究它的表达与大肠癌恶性程度的关系。结果在大肠癌中,Ck20的阳性表达率以及染色强度均随分化程度的降低而呈现出上升的趋势（P〈0.05）。结论在大肠癌组织中Ck20的高表达,对大肠癌的发生发展起一定促进作用。     

锌指蛋白A20对刀豆蛋白A诱导肝损伤的保护作用

【目的】探讨锌指蛋白A20对刀豆蛋白A(Concanavalin A,ConA)引起的肝损伤的保护作用。【方法】以刀豆蛋白A诱发小鼠肝损伤,制造肝损伤动物模型,采用尾静脉注射A20表达质粒的方法,观察A20转基因处理组和试验对照组肝组织内TNF-α(tumor necrosis factorα)、IFN-γ(interferon-γ)、IL-2(interleukin 2)细胞因子的表达水平以及肝病理损伤的程度。【结果】A20组ConA处理后肝组织TNF-α、IFN-γ、IL-2等细胞因子的mRNA表达水平及蛋白表达水平均显著低于A20对照组。病理学检查结果提示,A20处理组16 h后小鼠肝病理损伤较对照组有减轻(P<0.05)。【结论】A20能够有效抑制ConA引起的小鼠肝组织炎症反应,并减轻肝组织炎症损伤。