土茯苓及其单体落新妇苷的免疫抑制作用

土茯苓性甘、淡,平和,归肝、胃经,有解毒、除湿、通利关节之功,在临床上应用广泛.近代药理研究表明土茯苓及单体落新妇苷具有选择性免疫抑制作用,这一特性对于细胞免疫依赖的自身免疫性疾病和变态反应性疾病的治疗具有重要意义.     

落新妇苷的稳定性及生物活性研究进展

落新妇苷是二氢黄酮醇苷类化合物,是土茯苓中最主要的活性物质,具有选择性免疫抑制、抗氧化、抗炎、降血脂等多种生物活性。对落新妇苷做了大量实验研究,为该新候选药物的研发提供了科学依据。通过查阅大量相关文献,对落新妇苷的稳定性研究和药理活性进行系统总结,为其进一步的深入研究和开发利用提供参考。     

姬松茸多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞抗肿瘤作用的影响

目的:研究姬松茸多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞抗肿瘤功能的影响,为临床应用提供理论依据。方法:体外培养小鼠骨髓来源DC,加入ABP溶液,流式细胞仪检测DC表面CD86和CD11a的表达,混合淋巴细胞反应检测ABP对DC抗原提呈能力的影响,MTT法检测ABP对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对H22肝癌细胞杀伤功能的影响。结果:中剂量ABP组(100μg/mL)DC表面CD86、CD11a表达上调;CTL对肿瘤细胞的杀伤率升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:适当浓度的ABP能促进DC分化成熟,增强DC的抗肿瘤作用。     

清肠化湿方对小鼠骨髓来源树突状细胞生物学特性的影响

目的:针对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)活动期病机组成“清肠化湿、调气和血、敛疡生肌”的清肠化湿方,通过体外实验,观察其对小鼠骨髓来源树突状细胞(dendritic cells,DC)抗原提呈功能的影响,探讨该方治疗UC的作用机制.方法:以核因子-κB基因圈套寡核苷酸(NF-κB decoy ODN)转染24 h后的DC生物学特性为对照,观察10 mg·L-1清肠化湿方孵育24h后DC(细胞密度1×106/mL)细胞的生物学特性的改变,确立清肠化湿方通过抑制NF-κB的表达影响DC的抗原提呈功能.实验分为空白组,ODN转染组,清肠化湿方组,脂多糖(LPS)组,ODN转染+LPS组,清肠化湿方+LPS组6组.流式细胞术检测各组DC表面标志抗原CD11c,共刺激分子CD40,MHCⅡ的表达,免疫荧光法检测各组NF-κB核转位情况.结果:清肠化湿方+ LPS组与LPS组CD40、MHCⅡ比较,P＜0.05;各组与LPS组NF-κB核转位情况相比较,P＜0.05.说明清肠化湿方有效降低了DC表面抗原CD40、MHCⅡ共刺激分子的表达,抑制了NF-κB的活化入核.结论:清肠化湿方通过抑制NF-κB的表达,影响DC成熟与分化,下调抗原提呈功能,从而降低炎症反应,是其治疗UC的主要机制.     

落新妇苷在小鼠体内的药代动力学研究

目的 研究赤土茯苓有效成分落新妇苷在小鼠体内的药代动力学特征.方法 尾静脉注射30 mg/kg落新妇苷,高效毛细管电泳之胶束电动模式测定血药浓度,3p97药动学软件分析药动学参数.结果 落新妇苷血药浓度在2.0 ～40.0μg/ml范围内呈良好线性,r=0.995 1,平均回收率为103.98％,日内、日间RSD均小于4％.落新妇苷在小鼠体内的药代动力学过程符合二室开放模型.结论 明确了落新妇苷在小鼠体内的药动学特征,为研究其在人体的药代动力学及制定给药方案提供了方法学基础.     

桂枝茯苓丸对脐血来源树突状细胞分化、成熟及免疫活性的影响

目的:探讨桂枝茯苓丸体外对人脐血单核细胞来源树突状细胞分化、成熟及免疫活性的影响,并揭示其作用机制。方法:获取单核细胞分为4组(空白对照组、细胞因子组、桂枝茯苓丸组和桂枝茯苓丸+细胞因子组)进行体外细胞培养,观察各组树突状细胞的形态变化、表面标志物蛋白的表达及刺激T细胞增殖的能力。结果:各组单核细胞体外培养均可诱导为树突状细胞;各组细胞表面标志物蛋白随树突状细胞成熟表达增强,尤以桂枝茯苓丸+细胞因子组诱导的树突状细胞多、表达强(P 0. 05),形态学特征更为明显,诱导T细胞的增殖能力强(P 0. 05)。结论:桂枝茯苓丸可促进人脐血单核细胞来源的树突状细胞分化、成熟,增强树突状细胞的免疫活性,并与细胞因子协同作用效果更佳。     

苦参对小鼠免疫功能的抑制作用

采用苦参水煎剂供小鼠灌胃，通过胃肠道吸收后观察它对全身免疫功能的作用。结果表明，苦参在小鼠体内对Ｔ细胞、Ｂ细胞和腹腔巨噬细胞的免疫功能活性有抑制作用，并提示苦参碱治疗乙型肝炎的疗效可能不是通过提高免疫功能来实现的。     

肿节风总黄酮及迷迭香酸、落新妇苷对大鼠骨髓巨核细胞增殖的影响

目的:探讨肿节风总黄酮部位及其成分迷迭香酸、落新妇苷对大鼠骨髓巨核细胞增殖及血小板生成素(TPO)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法:采用兔抗大鼠血小板相关抗体(稀释倍数为128倍)建立大鼠骨髓巨核细胞增殖障碍模型,研究肿节风总黄酮部位500、250、125、62.5μg/ml,迷迭香酸500、250、125、62.5μg/ml及落新妇苷500、250、125、62.5μg/ml对大鼠骨髓巨核细胞增殖及培养上清液中TPO及TGF-β1含量的影响。结果:(1)肿节风总黄酮部位500、250、125μg/ml,迷迭香酸250、125μg/ml及落新妇苷500、250μg/ml均可显著促进大鼠骨髓巨核细胞的增殖;(2)肿节风总黄酮部位500、250、125、62.5μg/ml,迷迭香酸500、250μg/ml及落新妇苷500、250、62.5μg/ml均可显著降低培养体系中TPO的含量;肿节风总黄酮部位250、125、62.5μg/ml及落新妇苷500、125μg/ml均可显著增加培养体系中TGF-β1的含量,迷迭香酸对培养体系中TGF-β1的含量无明显影响。结论:肿节风总黄酮部位、迷迭香酸及落新妇苷均可以促进大鼠骨髓巨核细胞的增殖,迷迭香酸及落新妇苷是肿节风总黄酮部位促骨髓巨核细胞增殖的物质基础。     

通关藤苷H对小鼠Lewis肺癌的抑制作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的研究通关藤苷H对小鼠Lewis肺癌的抑制作用,观察其对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法小鼠右腋皮下注射Lewis肺癌细胞,选取接种成功的荷瘤小鼠30只,随机分为模型组、环磷酰胺组、通关藤苷H组,每组10只。3组均从接种后第3日开始,每隔2 d,分别给予腹腔注射生理盐水、环磷酰胺、通关藤苷H,0.2 mL/只。第21日,摘眼球取血,取肿瘤组织、脾、胸腺并分别称重,计算抑瘤率、脾指数和胸腺指数;采用ELISA法检测血清中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-10(IL-10)的含量。结果环磷酰胺组、通关藤苷H组的瘤质量均低于模型组,差异有统计学意义(P0.05),抑瘤率分别为54.12%、25.68%;通关藤苷H组的胸腺指数与脾指数升高,环磷酰胺组则下降较为显著。ELISA法检测结果显示,与模型组比较,通关藤苷H组的IL-2水平明显升高,IL-10水平显著降低。结论通关藤苷H可以抑制Lewis肺癌细胞生长和转移,调节免疫细胞因子IL-2、IL-10的表达水平,提高荷瘤小鼠的免疫功能。     

猪苓多糖通过Toll样受体4对小鼠骨髓来源树突状细胞作用研究

目的研究猪苓多糖(Polyporus umbellatus polysaccharides,PPS)活化小鼠骨髓来源树突状细胞(bone marrow dendritic cells,BMDC)功能调节的作用机制,进一步阐明PPS的免疫学活性机制。方法以3H-TdR掺入法、ELISA及流式细胞术检测BMDC表型和功能的各项指标。结果 PPS刺激小鼠BMDC表达CD11c、CD86及白细胞介素-12、-10(IL-12、IL-10)产生,并且具有剂量依赖效应。另外,较阴性对照组,经PPS诱导成熟的BMDC其活化初始T细胞的能力显著提高而吞噬能力显著下降。抗小鼠Toll样受体4(TLR4)单抗可抑制PPS刺激BMDC产生IL-12 p40及阻断荧光标记猪苓多糖(fluorescence-labeled PPS,f-PPS)与BMDC的结合,而抗TLR2及补体受体3(CR3)单抗却无此效应。结论 PPS可经TLR4活化小鼠BMDC发挥免疫调节活性。     

枸杞多糖对树突状细胞的成熟及免疫学功能的影响

目的:研究枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)对小鼠骨髓来源的树突状细胞(dendritic cell,DC)的成熟和免疫学功能的影响。方法:运用体外大量扩增培养小鼠骨髓来源的DC的技术,在DC的分化,成熟、活化这一系列过程中加入枸杞多糖观察其影响。在BMDC体外培养时加入低、中、高3种浓度(5,10,20 mg/L)的LBP进行干预,同时设生理盐水对照组,培养至第6天,以流式细胞仪(flow cytometer,FCM)分析各组细胞的免疫表型及T细胞的增殖情况;用Western-Blot方法测定其分泌的白介素-12P40(interleukin-12P40,IL-12P40)水平;MTT法检测体外经冻融的H22肝癌细胞冲击后的DC刺激同种反应性T细胞的杀伤活性。结果:体外加入LBP培养后,DC表达高水平共刺激分子CD86和CD11a(加药组与NS组对比,差别有统计学意义,P0.05);其分泌的IL-12P40水平升高;DC刺激同种反应性T细胞的杀伤活性增加,其中以10 mg/L LBP培养时上述指标增加最为明显,与其他组对比,差别有统计学意义(P0.05);而以LBP 5 mg/L,20 mg/L培养时,共刺激分子CD86和CD11a以及IL-12P40并没有高表达(加药组与NS组对比,差别无统计学意义,P0.05)。DC刺激同种反应性T细胞的杀伤活性也没有变化(加药组与NS组对比,差别无统计学意义,P0.05)。结论:LBP能够促进体外培养的DC的分化、成熟,提高其表面表达CD86(B7-2)以及CD11a(LFA-1)的水平;能够促进DC分泌IL-12P40;提高CTL的特异性杀伤能力,并且这种作用有其最佳剂量。     

当归多糖对树突状细胞成熟和功能的影响

目的:探讨当归多糖对外周血单个核细胞(PBMC)来源的树突状细胞(DC)体外分化、成熟和功能的影响。方法:以外周血单个核细胞为来源,联合应用 GM-CSF、IL-4及 TNF-α,在体外诱导培养 DC。采用 MTT 法测定 DC 诱导的混合淋巴细胞反应分析 APS-3对 DC 刺激淋巴细胞增殖功能的影响;采用流式细胞术检测细胞表面标志 CD1a,HLA-DR,CD86的表达,来评价 APS-3对 DC 分化的作用;RT-PCR 技术研究 DC IL-12p40mRNA 的表达,探讨 APS-3对 DC 分泌 Th1型细胞因子 IL-12的影响。结果:人 PBMC 在体外可诱导培养出具有典型形态、表型及免疫活性的 DC。采用不同浓度APS-3(0.1、0.3、1.0μg/mL)处理培养的 DC 表面标志 CD1a、CD86、HLA-DR 及 IL-12mRNA 表达量均呈上升趋势。经不同浓度 APS-3处理的 DC 诱导的 MLR,在小剂量范围(0.01-1μg/mL)是剂量依赖性的增强作用,在高剂量范围(30-100μg/mL)表现为抑制效应;常规培养8天生成的 DC 与淋巴细胞共培养后,加入不同浓度 APS...     

异黄芪甲苷体外对淋巴细胞和树突状细胞免疫功能的影响

目的 研究异黄芪甲苷(6-O-β-D-葡萄糖基-环黄芪醇)对体外淋巴细胞和树突状细胞功能的影响.方法 培养巨噬细胞,观察异黄芪甲苷对细胞吞噬中性红能力和白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、IL-2、IL-6分泌功能的影响.MTT法检测异黄芪甲苷对原代培养脾淋巴细胞增殖的影响,并用流式细胞术通过检测C...     

落新妇苷固体分散体的制备及理化鉴别

目的:制备落新妇苷(从土茯苓中萃取)固体分散体,并对其进行物相鉴别。方法:以PVPK30-吐温80为联合载体,采用溶剂法制备落新妇苷固体分散体,利用体外溶出度、溶解度、油水分配系数、显微观察、X-射线衍射、差热分析研究固体分散体的性质。结果:固体分散体能显著增加落新妇苷的溶解度和溶出速率,显著改变油/水分配系数,显微观察、X-射线衍射、差热分析研究表明落新妇苷在固体分散体中以分子状态、微晶状态分散。结论:固体分散体均能显著提高落新妇苷的体外溶出度及亲脂性,提示将落新妇苷制备成固体分散体可以促进药物的体内吸收。     

卵蛋白对致敏及哮喘小鼠树突状细胞功能的影响

目的:研究树突状细胞(DC)在哮喘发病中的作用.方法:用卵蛋白(OVA)腹腔注射和雾化吸入复制致敏组和哮喘组小鼠模型,采用流式细胞技术测定脾脏DC的表达.结果:致敏组DC的百分率明显高于对照组,而哮喘组与对照组相比差别无统计意义.结论:致敏小鼠脾DC表达明显增加,但哮喘小鼠DC表达不明显.     

卵蛋白对致敏及哮喘小鼠树突状细胞功能的影响

目的：研究树突状细胞（DC）在哮喘发病中的作用。方法：用卵蛋白（OVA）腹腔注射和雾化吸入复制致敏组和哮喘组小鼠模型，采用流式细胞技术测定脾脏DC的表达。结果：致敏组DC的百分率明显高于对照组，而哮喘组与对照组相比差别无统计意义。结论：致敏小鼠脾DC表达明显增加，但哮喘小鼠DC表达不明显。     

黄芪甲苷对脑缺血小鼠外周免疫抑制作用的影响

目的 观察黄芪甲苷对脑缺血小鼠外周免疫抑制作用的影响,探讨其保护脑缺血损伤的作用机制.方法 实验小鼠随机分为假手术组、模型组和给药组,采用大脑中动脉栓塞法制备脑缺血模型,给药组腹腔注射黄芪甲苷溶液.TTC法检测脑梗死体积,神经功能缺损评分评价小鼠神经功能,观察小鼠脾脏质量变化,流式细胞术检测脾脏和外周血中自然杀伤(NK...     

鸢尾苷对小鼠免疫功能的影响研究

目的:研究鸢尾苷对小鼠免疫功能的影响。方法:在小鼠日常饮水中加入不同剂量的鸢尾苷(低、高剂量分别为1mg/(kg·d)、3mg/(kg·d),采用胸腺和脾脏生长指数测定、腹腔巨噬细胞吞噬功能检测和溶血空斑试验,观察鸢尾苷对小鼠外周免疫器官胸腺、脾脏和免疫功能的影响。结果:与空白对照组比较,低剂量鸢尾苷能提高小鼠胸腺、脾脏生长指数、抗体生成及巨噬细胞功能,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:一定剂量的鸢尾苷可明显提高小鼠的免疫功能,增强抗感染能力。     

益苷颗粒剂对小鼠免疫功能的影响

目的：研究益苷颗粒剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及血清溶血素含量的影响。方法：参照有关文献，计数巨噬细胞吞噬鸡红细胞的指数及检测对血清溶血素的含量的影响，评定益苷颗粒荆对小鼠免疫功能的影响。结果：益苷颗粒剂能明显提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数及血清溶血素的含量。结论：益苷颗粒剂可以提高小鼠的免疫功能。     

中药调节树突状细胞免疫功能研究进展

树突状细胞（DCs）是目前已知的功能最强且唯一能激活初始型T细胞、激发初次免疫应答的抗原呈递细胞,在许多免疫系统疾病的发生、发展过程中发挥极为重要的作用。近年来,关于中药对DCs免疫功能的影响越来越受重视,调节DCs免疫活性有望成为中药治疗免疫疾病的重要靶点。文章就近几年中药对DCs免疫功能的影响进行综述。