全层关节软骨缺损三种修复方法的比较实验研究

目的评价骨膜移植、软骨移植、软骨下骨钻孔三种方法修复全层关节软骨缺损的生物学特性和修复效果,为临床应用提供实验依据。方法采用重复拉丁方设计的实验分组及统计学分析方法,按手术方式、观察时间、创面大小三个因素分四个水平进行随机分组,将32只雄性新西兰大白兔的左右后肢制成全层软骨缺损模型,分别进行骨膜移植、软骨移植和软骨下骨钻孔修复,对照组不作任何修复。术后第2、4、8、12周处死动物取材,分别进行大体观察、光镜观察与电镜观察,并对观察指标进行量化,数据行统计学分析。结果大体观察及电镜观察显示三个实验组在第12周时均能以类透明软骨组织修复缺损,而对照组为纤维肉芽组织。形态学分析表明,三种方法均能以类透明软骨组织覆盖缺损,软骨移植组无明显免疫排斥现象。随着时间延长,修复高度逐渐增加。软骨移植组效果最优,而骨膜移植组优于钻孔组(P<0.01)。甲苯胺蓝染色的光密度分析表明,随着时间延长,软骨基质分泌逐渐增加;三种方法与对照组间比较差异均有显著性(P<0.01),软骨移植组优于其它各组(P<0.01),但骨膜移植组与钻孔组间差异无显著性。结论软骨移植、骨膜移植与软骨下骨钻孔三种方法均能以类透明软骨组织修复全层关节软骨缺损,软骨移植的近期效果最佳。软骨下骨钻孔法修复组织的     

自体骨软骨移植与含富集骨髓干细胞松质骨移植修复兔关节软骨缺损

目的:评价自体骨软骨移植与含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植两种方法修复全层关节软骨缺损的生物学特征和效果。方法:采用新西兰大白兔制作左右后肢全层软骨缺损模型,分别进行自体骨软骨镶嵌移植、含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植修复,对照组不作任何修复,每组12只。术后第4、8、12周处死动物取材,分别进行膝关节活动度测定、大体观察、光镜观察与电镜观察。结果:移植实验组在第12周时均能以类透明软骨组织修复缺损,对照组为纤维肉芽组织。形态学检查表明,两种方法均能以类透明软骨组织覆盖缺损,骨软骨移植组无明显免疫排斥现象,随着时间延长,修复高度逐渐增加。骨软骨移植组同含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植组效果无显著差别。结论:骨软骨移植、含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植两种方法均能以类透明软骨组织修复全层关节软骨缺损,含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植更适用于较大面积软骨缺损的修复。     

修复关节软骨大面积缺损的实验研究

目的 比较和评价筋膜软骨细胞和骨膜、关节软骨移植修复关节软骨大面积缺损的能力和生物特性。方法 用冻存和新鲜的异体筋膜上培养的软骨细胞、骨膜和关节软骨移植修复大面积关节软骨缺损,通过大体标本、光学显微镜、扫描和透射电镜、放射身显影、微量元素和柱层析氨基酸定量测定、一氧化氮含量测定等多种观察方法进行评价。结果 新鲜和冻存的筋膜软骨细胞移植在结构、形成新的软骨细胞能力、代谢活性方面均优于游离软骨细胞移植     

双相支架负载软骨细胞修复兔关节软骨缺损

目的研究自固化磷酸钙/纤维蛋白凝胶(CPC/FG)双相支架负载软骨细胞修复兔关节软骨缺损的可行性和有效性.方法将分离培养的第3代软骨细胞包埋在CPC/FG双相支架的FG中,体外培养1周后,将软骨细胞-支架复合体移植修复兔膝关节股骨髁的软骨缺损(φ4 mm,深3.5 mm,达软骨下骨质).然后对软骨缺损的修复情况进行大体、光镜和电镜观察.同时对移植后第12周的修复软骨进行胶原含量测定,并与正常的关节软骨细胞胶原含量进行比较.结果移植的软骨细胞能在双相支架上良好地生长,软骨缺损以透明软骨的形式被修复,而对照组为纤维组织修复.多孔自固化磷酸钙在软骨修复过程中能起软骨下骨的临时替代作用.胶原含量测定显示:移植术后12周的修复软骨胶原含量为(43.25±0.85)%;正常的关节软骨胶原含量为(55.69±0.76)%,两者差异有显著性(P<0.01).结论 CPC/FG双相支架负载软骨细胞能以透明软骨的形式修复兔关节软骨缺损.新环境中移植的软骨细胞生长的不适应和FG降解过快,可能是导致新生修复软骨与自身正常关节软骨胶原含量有差异的原因.     

组织细胞移植修复关节软骨缺损的研究现状

关节软骨组织的自身修复能力很差,临床治疗中要使修复或再生的软骨能恢复到滑膜关节正常的无痛运动,修复的新组织须在结构、组成、机械性能和持久耐用方面与正常关节软骨相似。目前关节软骨修复损伤的方法主要有两大类：一类为刺激关节软骨自身修复的方法,另一类为组织细胞移植方法。前者包括,清创术和灌洗法、软骨下骨钻孔术、微骨折、截骨术等,后者包括软骨移植、骨膜／软骨膜移植、软骨细胞及间充质细胞移植等［１］。本文就组织细胞移植修复关节软骨缺损的研究进展进行了综述。一、关节软骨移植关节软骨移植是用完整的正常关节软骨…     

培养软骨移植修复关节软骨缺损的实验研究

目的：为探讨一种新的关节软骨缺损修复方法。方法：将体外培养２周形成软骨样组织,移植修复兔关节软骨全层缺损。于移植术后２、４、８周分别行功能评价、大体形态及组织学检查。结果：全部实验兔于术后２周内恢复正常活动。２周时移植修复组织由非成熟透明软骨组成。４周时部分移植组出现成熟透明软骨。８周时移植组关节软骨缺损全部由成熟透明软骨充填修复,修复组织与邻近关节软骨融合。培养软骨移植修复关节软骨全层缺损明显优于自身修复（Ｐ＜００１）。结论：本实验提示使用具有高有丝分裂率的软骨细胞,经离心管培养形成骺软骨样组织,植入关节软骨全层缺损后,软骨细胞生长良好,逐渐成熟和转化,能发挥良好的修复作用。     

Pluronic F-127负载同种异体软骨细胞修复兔全厚关节软骨缺损的实验研究

目的:探讨Pluronic F-127作为软骨细胞移植载体的可行性。方法:将培养的软骨细胞与20％的Pluronic F-127的混合,移植到兔膝关节软骨缺损处。在移植后4、8、12周对缺损的修复情况进行大体、光镜组织学评估和电镜观察。结果:移植的软骨细胞在载体中生长良好,形成了透明软骨。扫描电镜下可见多数成熟的透明软骨细胞。Pluronic F-127平均降解时间为6～8周,与正常软骨的再生速度基本一致。根据Wakitani制定的评分标准,采用盲法对修复质量作出评价。Pluronic F-127组和对照组的组织学评分在各个时期无显著的差异(P>0.001),而软骨细胞-载体复合体组和对照组相比在各个时期均存在显著的差异(P<0.001)。结论:Pluronic F-127可作为工程化软骨细胞安全有效的载体。     

含自体富集骨髓干细胞松质骨移植与自体松质骨镶嵌移植修复关节软骨缺损的对比研究

目的：评价含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植与自体松质骨镶嵌移植两种方法修复兔膝关节骨软骨缺损的修复效果,为临床应用提供实验依据。方法：选健康3月龄新西兰兔16只,随机分成A、B两组,每组8只16膝。A组采用含富集自体骨髓干细胞的自体松质骨移植,B组采用自体松质骨移植。术后第12周处死动物取材,分别进行大体观察、光镜观察,并对观察指标采用Wakitani组织学评分法进行评分和秩和检验。结果：大体观察及光镜观察显示含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植组大体观察关节面大多呈乳白色,表面比较平整,与周围软骨融合较好,未发现裂隙;光镜检查见关节软骨的厚度为正常软骨的2/3左右,表面较光滑,与周围组织接合较好,大多为透明软骨细胞;组织学评分为（4.44±1.41）分。自体松质骨镶嵌移植组大体观察见关节面呈灰白色,表面稍有凹陷,欠光整;光镜检查见关节软骨的厚度较薄,为正常软骨的1/3～1/2,移植物中央区域厚度更薄,见成纤维细胞和极少量透明软骨细胞;组织学评分为（8.93±1.18）分。两组组织学评分比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：含富集骨髓干细胞松质骨镶嵌移植能以类透明软骨组织修复全层关节软骨缺损,可用于较大面积软骨缺损的修复。自体松质骨移植修复软骨缺损的能力较差。     

膝关节软骨损伤的外科治疗进展

关节软骨损伤后,软骨缺损通常缺乏自行修复能力,要求外科修复。传统外科治疗软骨损伤包括关节镜下冲洗清理术、微骨折术、自体骨软骨移植术、异体骨软骨移植术和自体软骨细胞移植等方法。关节冲洗清理术去除了关节内致痛因素,操作简单,应用广泛,早期疗效确切。微骨折术及自体骨软骨移植对小面积的软骨缺损修复较为理想,然而远期临床观察发现钻孔渗透修复的纤维软骨会降低微骨折术后疗效,相对于重建负重区关节面完整性自体骨软骨移植更具有优势。自体软骨细胞移植及异体骨软骨移植适用于更大面积的软骨缺损,异体骨软骨移植术后存活率受到局部排斥反应影响,从而降低了远期疗效。软骨组织工程技术可最大限度地提高自体软骨细胞移植的修复质量,实现修复组织接近透明软骨,但对于累及软骨下骨板、反应性骨水肿、严重骨量丢失或下肢轴线不良具有局限性。近年来许多新技术陆续应用于软骨损伤治疗领域,创伤小、操作简便、恢复快、疗效好、花费低、多技术联合应用的外科修复技术将会成为未来的治疗软骨损伤的重要手段。目前如何提高软骨修复质量,更具抗压、耐磨性,仍亟待解决。     

冷冻保存对关节软骨的影响

软骨损伤是常见的病变,若不及时治疗将导致骨性关节炎。许多修复软骨缺损的方法效果均欠佳。自体软骨移植是最理想的方法,但由于取材有限且造成新的软骨缺损而应用受到限制。异体软骨移植为修复方法之一,软骨保存却是问题。为了寻找一种更有效的提高关节软骨细胞存活率的方     

骨髓基质细胞修复兔关节软骨的实验研究

目的　研究骨髓基质细胞修复兔关节软骨的可行性。方法　取自体骨髓基质细胞体外培养扩增 ,聚乳酸吸附骨髓基质细胞植入兔膝关节软骨负重 (内髁 )和非负重区 (外髁 )缺损内 ,观察 4、 8、 12周后软骨缺损的修复情况 ,并对组织切片评分。结果　 8、 12周后 ,骨髓基质细胞在负重区缺损内可以形成透明软骨 ,组织评分接近正常软骨优于对照 ,非负重区内没有形成透明软骨。结论　骨髓基质细胞可以修复关节软骨缺损 ,摩擦和压应力是成软骨的重要条件。     

复合基质细胞衍生因子-1β、转化生长因子-β1的新型温敏性壳聚糖水凝胶修复兔关节软骨缺损

目的 探讨复合基质细胞衍生因子(SDF)-1β、转化生长因子(TGF)-β1的新型温敏性壳聚糖水凝胶结合软骨下骨钻孔修复兔关节软骨缺损的可行性.方法 依照软骨缺损处理方法的不同将48侧股骨髁随机均分为3组:(1)凝胶组:软骨下骨钻孔+复合SDF-1β、TGF-β1的新型温敏性壳聚糖水凝胶充填软骨缺损;(2)钻孔组:单纯软骨下骨钻孔;(3)对照组:不作处理.术后4、8、12周取材观察其大体、光镜、透射电镜、免疫组织化学情况.结果 除对照组仅有纤维组织修复外,其余2组均有不同程度的软骨修复,但结合组的修复在组织细胞形态、超微结构、Ⅱ型胶原含量等方面均明显优于钻孔组,组织学评分两组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 复合SDF-1β、TGF-β1的新型温敏性壳聚糖水凝胶结合软骨下骨钻孔能有效修复兔膝关节软骨的全层缺损.     

孔数不同的骨钻孔术对兔软骨缺损远期修复效果的实验比较

目的: 评价孔数不同的钻孔术对软骨缺损的远期修复效果。方法: 用中国白兔40只, 在股骨髁关节面制造6mm×8mm全层软骨缺损, 分别施行10孔及5孔钻孔术, 孔径1mm, 于术后13个月取材做组织学及电镜观察,并进行评估。结果: (1) 10孔、5孔和对照组中, 优势修复组织为透明软骨者分别占75%、70%、0%。(2) 修复组织厚度: 10孔与5孔无显著性差异, 已接近毗邻软骨厚度。(3) 修复组织覆盖缺损的面积: 10孔>5孔>对照组。结论: 软骨下骨钻孔对关节软骨缺损的远期修复效果良好, 能长期适应关节的运动和负重, 10孔比5孔的修复效果好。     

Cartilage resurfacing of the rabbit knee. The use of an allogeneic demineralized bone matrix-autogeneic perichondrium composite implant

A full-thickness articular-cartilage defect was created in the medial femoral condyles of 32 adult rabbits. The defects were filled with demineralized bone or a composite of demineralized bone and perichondrium. Results of cartilage repair were assessed after 12 weeks of implantation. We conclude that demineralized bone matrix used as a subchondral matrix in a cartilage repair model 1) stimulates and induces subchondral bone ingrowth, 2) provides a surface on which cartilage repair can proceed, and 3) can be utilized as a platform on which perichondrium can be fixed to provide a cellular source for cartilage repair. Repair tissue that developed from perichondrium was thicker, more closely resembled normal articular cartilage, and was of a less fibrous nature than the repair tissue that developed de novo on the demineralized bone matrix.     

Cartilage resurfacing of the rabbit knee: The use of an allogeneic demineralized bone matrix-autogeneic perichondrium composite implant

A full-thickness articular-cartilage defect was created in the medial femoral condyles of 32 adult rabbits. The defects were filled with demineralized bone or a composite of demineralized bone and perichondrium. Results of cartilage repair were assessed after 12 weeks of implantation. We conclude that demineralized bone matrix used as a subchondral matrix in a cartilage repair model 1) stimulates and induces subchondral bone ingrowth, 2) provides a surface on which cartilage repair can proceed, and 3) can be utilized as a platform on which perichondrium can be fixed to provide a cellular source for cartilage repair. Repair tissue that developed from perichondrium was thicker, more closely resembled normal articular cartilage, and was of a less fibrous nature than the repair tissue that developed de novo on the demineralized bone matrix.     

"双相"组织工程软骨修复兔关节骨软骨缺损

目的探讨“双相”异体骨基质明胶（bonematrixgelatin,BMG）作为组织工程软骨载体,与同体骨髓间充质干细胞（marrowmesenchymalstemcells,MSCs）结合,构建组织工程软骨修复兔关节骨软骨缺损的效果。方法4月龄新西兰兔32只,雌雄不限,体重2～3kg。①体外实验：取5只新西兰兔,处死后取髂骨和四肢骨,制备一侧松质骨,一侧皮质骨的“双相”异体BMG载体,扫描电镜观察。另取新西兰兔18只,抽取骨髓,分离MSCs并诱导成软骨分化;将诱导而来的软骨前体细胞与“双相”BMG载体复合构建组织工程软骨,分别于1、3和5周取材行Masson、PAS染色和扫描电镜观察。②体内实验：将抽取骨髓的18只及余下的9只新西兰兔制成双侧股骨内髁骨软骨缺损模型,将前期制备的组织工程软骨同体植入18只兔的右股骨内髁骨软骨缺损（A组）,左侧缺损移植异体BMG（B组）,其余9只双侧软骨缺损未予处理作为空白对照（C组）,分别于术后1、3和6个月取材,行大体、组织学和Ⅱ型胶原mRNA原位杂交观察,改良Wakitani法评分,比较各组修复效果差异。结果①体外实验：“双相”BMG松质骨面孔隙大小100-800μm,细胞于其中增生,形成富含细胞的软骨层;皮质骨面孔隙大小10～40pm,细胞层状覆盖于其表面,可作为起支撑作用的软骨下骨。②体内实验：A组术后1个月即可重建关节骨软骨缺损;修复软骨在观察期内逐渐变薄,但在6个月内始终保持关节面及软骨下骨结构完整。B、C组未能修复缺损,缺损周边软骨磨损加剧。改良Wakitani评分显示A组在3个时间点的各项评分结果,除6个月软骨厚度外,其它指标均优于B、C组,且差异有统计学意义（P〈0．01）。Ⅱ型胶原mRNA原位杂交显示,A组缺损区修复组织中细胞阳性染色率明显高于B、C组,且差异有统计学意义（P〈0．01）。结论“双相”异体BMG可作为组织工程软骨载体材料,其结合自体MSCs诱导的软骨前体细胞制备的组织工程软骨,可修复兔关节软骨和软骨下骨。     

治疗关节软骨缺损手术方法的比较

目的对比研究骨膜移植术,软骨细胞移植术和骨软骨钻孔术对关节软骨损伤的修复。方法 纯种青紫蓝兔４４只,随机分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ４组,在膝关节作全层软骨缺损模型,Ａ、Ｂ、Ｃ组分别选择行上述一种操作,Ｄ组不作处理。术后４、８、１２周取材作大体,光镜和电镜观察。结果 各组缺损均有不同程度修复,但修复优势组织性质有所差别。结论 自体游离骨膜移植术的钻孔术修复关节节软骨缺损效果明显优于未处理组,其中以钻孔术为简