壳聚糖-明胶-磷酸三钙多孔复合体负载骨形成蛋白-2用于兔颅骨修复的实验研究

目的探索壳聚糖-明胶-磷酸三钙(CS-Gel/TCP)多孔复合体作为骨形成蛋白(BMP-2)缓释载体,用于兔颅骨修复的可行性。方法取细胞供体新西兰兔12只,随机分为两组,将兔骨髓基质细胞(MSC)进行体外培养、扩增、诱导为骨髓基质成骨细胞(MSO),同时采用相分离法制备CS-Gel/TCP支架负载BMP-2复合体材料,实验组与颅骨缺损处植入直径15mm,厚3mm的圆盘状的细胞-支架-BMP复合体,对照组植入同样大小形态细胞-支架,分别4、8周取材,观察骨形成情况。结果实验组骨修复的速度快且新生骨小梁数目多。结论CS-Gel/TCP多孔支架可以作为BMP-2缓释的载体,可以更好的促进骨的修复。     

壳聚糖-明胶-磷酸三钙多孔复合体作为骨组织工程支架的实验研究

目的探索壳聚糖-明胶-磷酸三钙(CS-Gel/TCP)多孔复合体作为骨组织工程支架材料的可行性。方法采用二次冻干技术制备CS-Gel/TCP复合体,为三维立体孔径200～400μm的海绵状支架材料。将兔骨髓基质细胞(MSC)进行体外培养、扩增,并植入该支架,检测支架的细胞相容性。皮下植入观察支架材料的体内降解及组织相容性。结果MSC植入支架后,其噻唑蓝(MTT)活性与碱性磷酸酶(ALP)活性与对照组比较差异无统计学意义。在植入早期可观察到一过性免疫排斥反应,支架在体内12周基本降解吸收。结论壳聚糖-明胶-磷酸三钙海绵状复合体是一种具有潜在价值的骨组织工程的支架材料     

壳聚糖-丝素蛋白-磷酸三钙复合体用于牙周组织工程支架初探

目的构建壳聚糖-丝素蛋白-磷酸三钙多孔复合体,观察其微观结构与体内外降解情况,探讨其作为牙周组织工程软骨支架的可行性。方法采用二次冻干技术制备壳聚糖-丝素蛋白-磷酸三钙复合体,冰冻切片和扫描电镜观察微观形态;将壳聚糖-丝素蛋白-磷酸三钙复合体支架置于人工降解液及植入大鼠背部肌肉,观察体内外降解情况及生物相容性。结果壳聚糖-丝素蛋白-磷酸三钙复合体呈海绵状,孔隙较均匀,孔形态不规则,孔隙之间彼此联通,孔隙率约80%,孔径200μm左右。4周体外降解率60%,在植入早期可见一过性炎性反应,随后逐渐降解,12周时基本降解吸收。结论壳聚糖-丝素蛋白-磷酸三钙多孔复合体具有良好的三维立体结构及可降解性,是一种可行的牙周组织工程支架。     

α-磷酸三钙骨水泥修复兔颅骨缺损实验研究

目的：研究α-磷酸三钙骨水泥的成骨原因及修复成骨特点。方法：在兔颅骨上制造贯通缺损,植入α-磷酸三钙骨水泥。于术后4周、8周、12周作组织学和X线照片观察。结果：4周时见新生骨长入人工骨内,形成钉突。8周时见新生骨与人工骨形成嵌合。12周时见人工骨内成骨。结论：α-磷酸三钙具有良好的生物相容性、骨引导性和可降解性,是骨重建的理想材料之一。     

β-磷酸三钙壳聚糖复合支架在促进成骨细胞生长相关效果的研究

目的:研究分析β-磷酸三钙壳聚糖复合支架在促进成骨细胞生长的临床应用效果。方法:选取20只家兔共40块骨缺损作为研究对象,随机分为观察组和对照组,每组各20块。对照组不植入任何材料,观察组植入β-磷酸三钙壳聚糖复合支架,分别于术后1个月处死所有参与研究的动物,测量两组新骨形成的情况,并应用骨密度诊断仪检测两组家兔的骨密度情况。结果:观察组新生骨面积百分比高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组骨密度检测值显著优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:β-磷酸三钙壳聚糖复合支架具有良好的骨生物降解、引导和相容性,能够有利改善骨细胞的生长,促进新生骨面积以及骨密度的提升,应用效果显著,值得临床应用推广。     

壳聚糖-明胶-磷酸三钙多孔复合体负载骨形成蛋白2用于组织工程骨的构建

目的探索壳聚糖-明胶-磷酸三钙(CS-Gel/TCP)多孔复合体作为骨形成蛋白(BMP)-2缓释载体的可行性。方法采用相分离法制备CS-Gel/TCP支架负载BMP-2复合体材料;将兔骨髓基质细胞(MSC)进行体外培养、扩增、诱导为骨髓基质成骨细胞(MSO),检测CS-Gel/TCP支架负载BMP-2复合体对细胞增殖与分化的影响。结果MSC可在CS-Gel/TCP支架上良好生长,其增殖能力不受影响,碱性磷酸酶(ALP)活性提高。结论CS-Gel/TCP多孔支架可以作为BMP-2有效的载体。     

神经生长因子结合骨基质明胶修复兔颅骨缺损的实验研究

目的运用引导性骨再生技术,将结合神经生长因子的骨基质明胶与海藻酸钙膜联合使用,促进兔颅骨缺损的修复。方法将神经生长因子（NGF）与骨基质明胶（BMG）制成神经生长因子-骨基质明胶复合体（NGF-BMG）。48只新西兰兔的颅骨上制成双侧顶骨缺损,直径10mm,骨缺损区内外均覆盖海藻酸钙膜。随机分成A（NGF-BMG）组、B（BMG）组、C（NGF）组和D（空白）组4组。术后第4、8、12周作形态学观察、X线片图像分析、组织学观察及图像分析、生物力学检测及统计分析。结果术后4、8、12周,A组在新骨生成、X线片新生骨的灰度值、组织切片新生骨所占比例和三点抗弯强度方面,均优于B、C、D组,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 （1）NGF-BMG复合体具有良好的生物相容性,既能持续释放NGF,又具有良好的修复骨缺损的能力;（2）NGF具有促进骨再生的作用,但单独使用无法在骨折部位达到有效浓度。     

壳聚糖-丝素蛋白-磷酸三钙支架的力学性能及异位成骨能力的研究

目的对壳聚糖-丝素蛋白支架(CS-SF)与壳聚糖-丝素蛋白-磷酸三钙支架(CS-SF-TCP)的力学性能及早期体内成骨能力进行实验研究,以寻求更适合牙周组织工程的支架材料。方法采用二次冻干技术制备2种支架,用Instron5544拉伸实验机对该2种支架的压缩模量进行测试,并将2种支架与矿化诱导后的骨髓基质细胞(BMSCs)复合培养3d后无菌条件下移植入裸鼠背部皮下,4周时取出标本行大体观察、苏木精-伊红染色、Ⅰ型胶原免疫组织化学染色,观察2种支架的体内成骨能力。结果力学性能检测结果显示:CS-SF组与CS-SF-TCP组的抗压强度分别为(0.44±0.15)MPa、(1.44±0.96)MPa。CS-SF-TCP组高于CS-SF组(P<0.05)。早期体内成骨能力结果:肉眼观察取出的植入物均有薄膜包绕。HE染色可见CS-SF+BMSCs与CS-SF-TCP+BMSCs组可见支架中心长入大量的细胞并有胶原样物质生成。免疫组织化学见2组均有不同程度的Ⅰ型胶原阳性表达,CS-SF-TCP+BMSCs组表达要高于CS-SF+BMSCs组(P<0.05)。结论与CS-SF支架相比,CS-SF-TCP支架有更好的力学性能及诱导BMSCs形成新生的骨组织的能力,更适合于牙周组织工程的支架。     

PGA/β-磷酸三钙骨组织工程支架的制备与性能

摘要 目的：制备PGA/β-磷酸三钙(β-TCP)支架并研究其物理性能。方法：以PGA与β-TCP为材料,六氟异丙醇（HFIP）为溶剂,以氯化钠颗粒（颗粒尺寸：425-500μm）为制孔剂,按PGA与β-TCP质量比1：1与1：3,采用改良溶液浇铸-离子沥滤的方法制备PGA/β-TCP骨组织工程复合支架材料。借助扫描电镜对其微结构进行观察,并测试PGA/β-TCP骨组织工程支架复合材料的物理、力学性能。结果： 0.13gPGA/0.39gβ-TCP（B）组支架材料的抗压缩强度大于0.13gPGA/0.13gβ-TCP（A）组,0.13gPGA/0.39gβ-TCP (B)组抗压缩强度值为731.283±55.2140KPa,0.13gPGA/0.13gβ-TCP （A）组抗压缩强度为173.833±36.1397KPa,差异有显著的统计学意义。A、B组支架材料孔隙率均大于85%,A组孔隙率（93.1±0.7%）大于B组（89.3±0.6%）,差异有显著的统计学意义。SEM照片可见两组支架材料均为多孔三维架构,孔径均为300-400μm,孔隙的连通性好。β-TCP均匀的分散于聚合物中, B组支架材料中β-TCP颗粒明显多于A组。结论：质量比1：3PGA/β-TCP复合支架材料更满足组织工程对其支架材料的要求。     

改进沉淀法合成β-磷酸三钙

以Ca(NO3)2和Ca(NO3)2·4H2O为原料,加入分散剂聚苯乙烯,采用液相沉淀法制备β-磷酸三钙前体,经过800℃高温煅烧制得结晶度较高的β-磷酸三钙粉体,采用XRD、TEM、FTIR等手段对粉体进行测试分析。结果表明,液相沉淀法制备的β-磷酸三钙为纳米级,经800℃煅烧2h后,可获得晶粒细小、结晶状态良好、分散性好的β-TCP粉体。     

开孔明胶固定酵母细胞生产三磷酸腺苷

用开孔明胶包埋啤酒酵母制成固定化细胞，在含15g／L单磷酸腺苷、150mmol／L葡萄糖、16mmol／L硫酸镁的250mmol／L磷酸二氢钠缓冲液（pH7．0）中35℃振荡反应2h，生产三磷酸腺苷（ATP）的转化率可达95％。在前一批底物溶液灭菌和添加烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的条件下，固定化酵母细胞可反复使用10次，ATP转化率稳定维持在90％以上。     

壳聚糖-丝素-磷酸三钙复合支架的细胞毒性研究

目的对壳聚糖-丝素-磷酸三钙复合支架体外进行细胞毒性实验,为该材料在牙周组织工程中的应用提供依据。方法制备壳聚糖-丝素-磷酸三钙复合支架,并制备该支架材料的浸提液,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测25%、50%、100%浓度的壳聚糖-丝素-磷酸三钙浸提液对小鼠皮肤成纤维细胞系L-929细胞的毒性作用,以第1、3、5天为检测时间点,观察细胞生长状况,计算细胞相对增殖率,并对材料的细胞毒性进行分级。以正常培养基为阴性对照组,含0.64%苯酚的培养液为阳性对照组。结果 L-929在不同浓度实验组及阴性对照组中生长均好,细胞呈长梭形等形态,细胞形态饱满有光泽,MTT法结果表明同一时间点各浓度实验组与阴性对照组间之间差异均无统计学意义(P>0.05),各时间点各浓度浸提液对L-929的相对增殖率均在75%以上,毒性分级为0级或1级。结论壳聚糖-丝素-磷酸三钙复合支架符合生物材料细胞毒性试验的安全标准,是一种有潜力的牙周组织工程支架。     

羟基磷灰石/壳聚糖-明胶网络复合材料在模拟体内环境中的特性及对兔桡骨缺损的修复

目的：考察羟基磷灰石／壳聚糖-明胶网络复合材料在模拟体液中对微环境的影响及植入兔体内后对骨修复情况。方法：观察材料在模拟体液中的表面矿化及体系pH、Ca^2 浓度的变化；将材料植入兔桡骨节段性缺损部位，考察其生物相容性及对骨折愈合的作用。结果：羟基磷灰石／壳聚糖-明胶网络复合材料对机体微环境pH影响微小、表面矿化效果好，有良好的生物相容性和骨传导性。结论：羟基磷灰石／壳聚糖-明胶网络复合材料有望成为治疗长骨缺损的承力替代物。     

壳聚糖—明胶止血膜的制备

目的　制备止血模,研究壳聚糖、明胶、PEG4 0 0间的用量比及己二醛溶液的使用对止血膜机械性能的影响。方法　以壳聚糖、明胶为原料,PEG4 0 0为保湿剂,己二醛为交联剂。结果与结论　制备的止血膜经测定其含水量为 6 4.7%,抗拉强度为 33.4MPa,且膜的外观性能较好     

壳聚糖-明胶海绵伤口敷料的毒理学评价

壳聚糖具有生物相溶性、生物降解性,加之良好的的成膜性、抗凝血性、促进伤口愈合和防腐抗菌等功能,作为医用材料备受关注;明胶中的主要成份胶原因弱的抗原性和好的生物相容性,在烧伤、创伤、眼角膜疾病、美容、矫形、硬组织修复和创面止血等医药卫生领域用途也广泛[1,4]。本文     

超氧阴离子对兔肺动脉平滑肌细胞内钙的影响

AIM: To study the effect of superoxide anion on the Ca2+ homeostasis in smooth muscle cells isolated from the rabbit pulmonary artery. METHODS: Intracellular Ca2+ concentration ([Ca2+]i) was investigated using cell suspension of freshly isolated smooth muscle cells from rabbit pulmonary artery (PASMC). Fura-2 fluorescent ratio obtained at 340 nm and 380 nm wave lengths was measured as an indicator of [Ca2+]i. RESULTS: ATP 30 mumol.L-1 induced a transient increase in the ratio (Ca2+ transient). Thapsigargin, an inhibitor of sarcoplasmic Ca2+ ATPase, induced a phasic increase in the ratio due to Ca2+ leak from intracellular store sites, but not the sustained increase, thereby suggesting the absence of Ca2+ release-activated Ca2+ entry (CRAC) mechanism in PASMC. When PASMC were exposed to superoxide anion by the pretreatment with xanthine and xanthine oxidase (X/XO) for 30 min, sustained component of ATP-induced Ca2+ transient was elevated. The ratios at 5 and 10 min after ATP application (delta ratio5 min and delta ratio10 min) were increased from 0.091 +/- 0.022 to 0.149 +/- 0.048 (P < 0.05) and from 0.021 +/- 0.020 to 0.117 +/- 0.047 (P < 0.01), respectively. But, thapsigargin-induced [Ca2+]i transient was not affected by X/XO. CONCLUSION: Superoxide anion makes ATP-induced Ca2+ transient sluggish, and does not affect Ca2+ leak pathway in PASMC.     

3D打印技术下磷酸三钙人工骨研究进展

3D打印技术的出现为疾病或者事故导致的骨缺损修复带来了新的解决思路。生物陶瓷材料如磷酸三钙由于其良好的生物相容性,可降解性,良好的骨诱导及成骨特性,已经成为骨组织工程的研究热点。但是由于磷酸三钙的力学性能较差、降解速率难以控制的缺点,在一定程度上限制了磷酸三钙在骨修复陶瓷材料上的发展。本文综述国内外磷酸三钙人工骨的发展状况及对磷酸三钙理化性能改进研究进展。     

壳聚糖-纳米羟基磷灰石复合材料修复兔胫骨缺损的成骨效果

目的探讨壳聚糖-纳米羟基磷灰石复合材料(CTS-nHA)植入动物体内修复骨缺损时,观察成骨效果和材料吸收速度。方法新西兰大白兔18只,随机分为3组,实验组(A组):复合材料;实验对照组(B组):纳米羟基磷灰石(N-HA);空白对照组(C组):不植入任何材料,于兔双侧后肢胫骨制造约直径0.5 cm大小的骨缺损,分别植入相应的材料或不植入任何材料,于术后2、4、6、10周取骨缺损标本,进行大体和组织学观察。结果在各时间段CTS-nHA组新的骨基质生成量均明显高于n-HA组和空白组,其中n-HA组又高于空白组,只有在2周时n-HA组和空白组相似。同时复合材料在体内吸收速度比n-HA组快,复合材料的吸收与新骨生成速度协调性似乎欠佳。结论复合材料植入的缺损区具有较强的成骨活性,但在体内吸收速度比较快。     

骨髓间充质干细胞与β-磷酸三钙多孔陶瓷体外复合培养实验研究

目的:研究犬骨髓间质干细胞(BMSCs)与β-磷酸三钙多孔陶瓷(β-TCP)的体外复合培养。方法:体外培养BMSCs作为种子细胞,β-TCP作为组织工程支架,制备β-TCP-BMSCs复合物,倒置显微镜下观察骨髓间充质干细胞培养传代过程中细胞形态变化及细胞在材料孔隙区的贴附及生长情况,流式细胞仪鉴定骨髓间充质干细胞表面抗原CD44、CD45表达情况。结果:相差倒置显微镜下观察:原代、第2代、第3代及第4代培养的细胞形态,贴壁细胞逐渐由成纤维细胞样向多形化方向转化(三角形、菱形等),最终重叠生长形成结节状;将细胞接种于材料上进行培养,见孔隙间有大量交叠细胞生长增殖。扫描电镜下观察:在材料表面细胞呈梭形,并融合成片状,表面见丝状突起,在孔隙边缘的细胞有大量胶原和细胞外基质分泌。流式细胞仪测定骨髓间充质干细胞表面抗原CD44阳性表达率(89.12±1.57)%,CD45阳性表达率为(2.32±0.45)%。结论:β-TCP与细胞有较好的亲和力,能够为基质细胞增殖、分化和成骨提供自然的三维空间,可作为组织工程的支架材料应用于骨和软骨缺损的修复。     

钙调磷酸酶抑制剂致疼痛综合征的研究进展

钙调磷酸酶抑制剂(CNI)是实体器官移植和造血干细胞移植术后的主要免疫抑制药物。尽管CNI极大的改善了移植患者预后,但该类药物引起的不良反应也经常发生。CNI所致的疼痛综合征(CIPS)是一种罕见的、严重的不良反应,其发生与钙调磷酸酶生理功能的中断有关。患者常表现为双下肢疼痛,严重影响患者运动能力和生活质量,因此,主要对CIPS的流行病学、临床表现、实验室检查、影像学表现、诊断、发病机制及治疗选择进行综述,以期为临床提供参考。