大肠癌相关抗原CA—Hb3的纯化及其在胃肠道肿瘤血清学诊断中…

用一株鼠抗人大肠癌单克隆抗体Ｈｂ３，纯化后与溴化氰活化Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ偶联制备免疫吸附柱。用免疫亲和层析法从大肠癌细胞株ＨＲＴ－１８细胞提取液中纯化相应抗原ＣＡ－Ｈｂ３。经多种实验证实ＣＡ－Ｈｂ３是一种新的大肠癌相关糖蛋白抗原，分子量约为６５Ｋｄ，以此纯化抗原作参考标准，用ＳａｎｄｗｉｃｈＥＬＩＳＡ方法检测大肠癌及消化道其他肿瘤患者血清ＣＡ－Ｈｂ３水平。结果表明，ＣＡ－Ｈｂ３对胃肠道肿瘤诊断     

肿瘤糖脂抗原在大肠癌、癌旁及胚胎大肠中的表达

用ＣＣ－１单克隆抗体的免疫组化方法检测正常和胚胎大肠、大肠癌及癌旁组织中延伸ＬｅｖｉｓＹ（ＥｘｔｅｎｄｅｄＬｅ￣ｙ）抗原的表达。正常大肠上皮与ＣＣ－１的反应仅为４％，癌旁粘膜为８％，而大肠癌的阳性率为５８％，高分化腺癌的阳性率较低分化腺癌高。对１１例病人测定延伸Ｌｅ￣ｙ的分泌状态，发现分泌者５例，均为阳性，非分泌者６例，２例阳性。作者认为大肠癌变时Ｌｅ￣ｙ的阳性反应可作为一种特异的肿瘤标志。     

肝癌肿瘤抗原研究及其应用分析

既往肿瘤免疫治疗虽经历临床长期尝试,但因肿瘤抗原不明确,疗效不稳定,而受到怀疑 . 20世纪90年代初,用细胞免疫学方法,鉴定并克隆出肿瘤抗原编码基因[1],无可置疑地证明了肿瘤特异抗原(tumor-specific antigens, TSA)的确实存在.继而以更简便的体液免疫方法,即应用病人的自身血清抗体筛选肿瘤细胞cDNA表达文库(serological an alysis of recombinant expression cDNA library , SEREX)[2],筛选并鉴定TSA 及其编码基因.     

抗人成骨肉瘤单克隆抗体的制备及其特性

目的：制备抗人成骨肉瘤单克隆抗体并探讨其特性。方法：用人骨肉瘤细胞系OS-732免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞系NS-1融合,经酶联免疫吸附试验及补体依赖细胞毒实验筛选,获3株分泌抗人成骨肉瘤单克隆抗体（McAb）的杂交瘤细胞。将手术切取经病理证实的骨肉瘤、软骨肉瘤、骨巨细胞瘤、滑膜肉瘤、平滑肌肉瘤、非骨化性纤维瘤、骨软骨瘤和正常肌、骨组织冰冻切片后,应用间接免疫荧光抗体实验检测。 结果：3株McAb均与骨肉瘤组织呈阳性反应,其中二株亦与软骨肉瘤呈阳性反应,与正常组织及其他肿瘤组织呈阴性反应。3株McAb分别与骨肉瘤相关抗原不同的抗原决定簇结合。 结论：抗人成骨肉瘤单克隆抗体具有较高的特异性。     

血清CA19—9检测在消化道肿瘤诊断中的临床意义

目的评价血清CA19-9检测对消化道肿瘤诊断的临床价值.方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法,检测194例消化道肿瘤患者和80例术后无瘤患者血清中的CA19-9含量.结果胰腺癌患者血清CA19-9含量和阳性率为165.94±90.34u/ml和88.89%,胆系癌为122.9±89.38u/ml和81.82%,肝癌为141.39±92.75u/ml和77.78%,胃癌为103.67±102.16u/ml和59.38%,肠癌为59.40±72.57u/ml和51.06%,食管癌为20.83±20.45u/ml和22.22%,术后无瘤患者为12.22±10.92u/ml和2.5%.胰腺癌、胆系癌、肝癌、胃癌和肠癌患者血清CA19-9含量和阳性率明显高于术后无瘤患者,经统计学处理有显著差异(P＜0.01).食管癌患者血清CA19-9含量和阳性率和术后无瘤患者比较无统计学差异(P＞0.05).若将血清CA19-9临界值提高到100u/ml,诊断消化道肿瘤的特异性达100%,但敏感度下降.结论血清CA19-9抗原是诊断胰腺癌、胆系癌、肝癌、胃癌和肠癌的一项特异性较高、敏感度较强的肿瘤标志物,有助于术后病情随访监测和判断预后,但对食管癌的诊断意义不大.     

7种肿瘤相关抗原联合检测宫颈癌的价值探讨

目的评价7种肿瘤相关抗原(TAAs)联合检测宫颈癌的诊断价值。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测45例宫颈癌,40例宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅱ和Ⅲ级患者和40例对照者血清中7种TAAs的抗体,利用流行病学方法对各抗原检测结果的真实性进行评价。结果单一抗原检测宫颈癌时,阳性率为22.2%～53.3%。联合7种TAAs检测时灵敏度达73.3%,特异度达82.5%,约登指数0.558,阳性预测值82.5%,阴性预测值73.3%,阳性似然比4.18。7种TAAs联合检测阳性率宫颈癌组高于CIN组,两者差异有统计学意义(P<0.05);上述两组与健康对照组差异均有统计学意义(P<0.05)。7种TA-As检测阳性率在宫颈癌不同组织学类型和临床分期间差异无统计学意义(P>0.05),CIN组与宫颈癌组不同临床分期间差异有统计学意义(P<0.05)。结论联合7种TAAs检测血清中自身抗体能够提高宫颈癌诊断的敏感性,对其早期诊断具有一定参考价值。     

结直肠癌病人手术前后血清CA－Hb_3的变化及其与手术种类和复发的关系

用单克隆抗体Ｈｂ３检测１３２例正常献血员，８４例消化道良性疾病患者及３８８例肿瘤病人血清中的肿瘤抗原ＣＡ－Ｈｂ３，发现其阳性率依次为：正常献血员３．Ｏ％，消化道良性疾病患者７．Ｏ％，结直肠癌病人５５．８％，胃癌及其他癌患者分别４３．Ｏ％和３１．４％。用根治手术切除的病人，其ＣＡ－Ｈｂ３以下降型为主，而呈下降趋势者术后复发率低；用姑息法和未切除的病人则结果相反。表明ＣＡ－Ｈｂ３的术后变化规律与手术种类和复发率有密切关系。     

不同抗原包被法测抗精子抗体的结果比较与分析

目的 :通过建立不同的精子抗原包被法 ,减少酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测抗精子抗体 (AsAb)的非特异性吸附。方法 :用化学试剂提取精子抗原并经凝胶过滤 ,将其包被于酶标板上 ,与整精子包被法比较检测患者AsAb。结果 :提纯抗原包被法检测AsAb降低了标本的非特异性吸附 ,且稳定性及重复性均好。结论 :提纯抗原包被法测AsAb是一种有价值的新方法     

G－CSF酶联免疫检测试剂盒在发热性疾病鉴别诊断中的应用

用两种抗粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）单克隆抗体，本院自制了Ｇ－ＣＳＦ酶联免疫检测试剂盒。经国内７家大医院试用，对临床标本测定的结果表明：细菌培养阳性发热患者（ｎ＝３１），Ｇ－ＣＳＦ阳性检出率为１００％。未做细菌培养临床诊断为细菌感染发热患者（ｎ＝２６９），Ｇ－ＣＳＦ阳性率为８９．２％；非细菌感染发热患者（ｎ＝１５３），Ｇ－ＣＳＦ阳性率只有６．５％；正常人（ｎ＝１５７），Ｇ－ＣＳＦ检测全部为阴性。证实本方法可用于发热性疾病的诊断、鉴别诊断，并可指导临床抗生素的合理使用。     

酶联免疫吸附试验法测定抗结核菌抗原的IgG抗体在诊断肺结核中的意义

本以酶联免疫吸附试验法对痰菌阳性肺结核、痰阴性肺结核、矽肺合并活动性肺结核患和正常健康组血中抗结核菌抗原的IgG抗体进行测定。阳性率分别为94．4％、90．8％、89．5％和6％。结果表明，该抗体的测定对肺结核的诊断具有一定的临床意义。对矽肺和合并结核具有鉴别和诊断性的意义。     

结核特异性抗原的纯化及应用研究

采用凝胶过滤及免疫印迹方法,从结核分枝杆菌超声破碎物中,纯化分离特异性结核抗原.并以此为包被抗原,用SPA-ELISA方法对临床1320例血清标本进了检测,结果显示对急性结核诊断的敏感性为82%;特异性为91%.同时还将纯化的结核抗原与常用的精制蛋白衍生物(PPD)和聚合菌素(OT)抗原对50例阳性血清作了平行对比研究,P<0.05差异有显著性.提示纯化的结核抗原对急性结核病的诊断,优于目前血清学诊断的其它常用抗原.     

SERPA技术及其在肿瘤相关抗原鉴定中的应用

血清蛋白质组分析方法是近年出现的一种鉴定肿瘤相关抗原和自身抗体的新方法,它的主要优点在于可以直接用肿瘤组织或细胞提取的蛋白作为抗原来源进行筛选。目前国内外有许多实验室运用该技术鉴定了重要的候选肿瘤相关抗原。随着该技术的不断改进,相信会有更多的肿瘤候选抗原被鉴定,为肿瘤的诊断、治疗效果评价和预后判断提供帮助。     

多种肿瘤相关抗原抗体在乳癌早期诊断中的应用

目的:评价多种肿瘤相关抗原(TAA)抗体的联合检测在乳癌早期诊断中的价值,探索一种真实可靠的乳癌早期诊断方法。方法:应用酶联免疫吸附试验对115例乳癌患者和153例正常对照血清中的14种TAA抗体进行检测,应用流行病学方法对检测结果进行综合评价。结果:单独应用14种TAA中的任何一种进行检测时,灵敏度普遍偏低(最高低于33%);对14种TAA进行不同的组合,逐渐增加抗原数目进行检测,随着检测抗体的增多,诊断的灵敏度随之增加,抗原数目增加到8种(CyclinE,Koc,Imp1,cIAP,p62,p16,CyclinB1和Calnuc)时,灵敏度达到最高;联合8种TAA检测的灵敏度提高到72.2%,特异度达到91.2%,阳性、阴性似然比分别为8.490、0.304,阳性、阴性预测值分别为86.5%、81.4%,Kappa值0.650。结论:该诊断实验结果与真实值中度一致,8种TAA联合检测乳癌的诊断价值较高。     

联合检测多种肿瘤相关抗原抗体在肺癌早期诊断中的作用

目的:探讨联合检测多种肿瘤相关抗原(TAAs)抗体在肺癌早期诊断中的作用.方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对98例肺癌患者和58例正常对照血清中的TAA抗体进行检测,应用真实性评价指标(灵敏度、特异度、约登指数)以及收益评价指标(阳性预测值、阴性预测值)对各种TAA抗体联合检测结果进行评价.结果:在15种肺癌患者血清TAA抗体中,除cyclin D,细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2),cIAP,RalA外,其余11种抗体(Koc,p62,cyclinE,cyclinB1,胰岛素样生长因子Ⅱ mRAN结合蛋白(IMPl),p16,Suil,survivin,Calnuc,c-mye,p53)阳性率都在9%以上(P<0.05).联合检测15种抗原抗体时的灵敏度为79.6%,特异度为75.9%,约登指数为0.555,阳性预测值为84.8%,阴性预测值为66.7%.剔除在单个抗体检测评价时没有统计学意义的抗体后,剩余11种抗原抗体联合检测的灵敏度为77.6%,特异度为81.0%,约登指数为0.586,阳性预测值为87.4%,阴性预测值为68.1%,阳性似然比为4.08,一致率比值为0.56.结论:联合检测多种TAA抗体在肺癌的早期诊断中具有一定的应用价值,为联合检测作为肺癌早期诊断方法的研究奠定基础.     

肿瘤相关抗原CA—125在卵巢癌诊断和监测中的应用

目的：探讨ＣＡ－１２５在卵巢癌诊断和治疗监测中的临床意义。方法：应用免疫放射分析法（ＩＲＭＡ）检测１３８例卵巢恶性肿瘤。６０例卵巢良性肿瘤和健康妇女血液中肿瘤相关抗原ＣＡ－１２５的水平。结果：（１）卵巢恶性肿瘤患者血液中ＣＡ－１２５水平明显高于良性肿瘤和健康妇女组（Ｐ〈０．００１）。（２）ＣＡ－１２５水平的高低及阳性率卵巢恶性肿瘤的临床分期无关（Ｐ〉０．０５）。结论：血液中ＣＡ－１２５的变化对卵巢     

HBsAg和抗-HBsIgG的分离纯化及其ELISA药盒的研制

HBsAg阳性血清经PEG分级、DEAE DE22离子交换柱层析、羊抗-NHS固相柱和抗-HBs IgG固相柱纯化,得高活性的HBsAg(CEP≥1∶128,(280mm)/(260mm)=1.15);而高活性的抗-HBs(ID=1∶1024,(280mm)/(260mm)=1.29)必须用高滴度的抗血清,经硫酸铵分级、NHS固相柱和HBsAg固相柱分离,它们是制备敏感性高、特异性强的ELISA药盒的关键,同时药盒还与包被抗体和指示抗体如何合理搭配相关,如指示抗体为山羊抗-HBs,则包被抗体最好是豚抗-HBs.搭配效应的发现将有利于提高ELISA检测水平和药盒的经济效益.     

血清脂联素与癌抗原15-3联合检测在乳腺癌早期诊断中的意义

目的研究血清脂联素和癌抗原15-3(CA15-3)联合检测在乳腺癌早期诊断中的意义。方法选取2009年4⁷月盘锦市中心医院乳腺科门诊患者72例。其中乳腺癌组36例,乳腺良性病变组36例,另选取同期进行体检的健康女性20例作为正常对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法 ,分别对三组入选者的外周血清脂联素和CA15-3进行检测,对检测结果进行分析。结果乳腺癌组、乳腺良性病变组和正常对照组的脂联素水平分别为(6.01±1.43)μg/L、(8.06±1.36)μg/L、(8.83±1.52)μg/L,CA15-3水平分别为(51.84±16.30)μg/L、(16.32±7.80)μg/L、(14.70±7.22)μg/L,三组比较差异有统计学意义(P<0.05)。脂联素与CA15-3联合检测、CA15-3及脂联素单独检测对乳腺癌的检出率分别为94.4%(34/36)、75.0%(27/36)、72.2%(26/36),三组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清脂联素和CA15-3联合检测有利于早期发现和诊断乳腺癌,提高对乳腺癌的检出率。     

人精子蛋白17抗原肽的合成及其在抗精子抗体检测中的应用研究

目的：合成人精子蛋白17的线性B细胞表位肽（118—127aa）,并以此为抗原建立抗精子抗体（AsAb）检测的ELISA方法。方法：用PS3全自动多肽合成仪合成人精子蛋白17抗原肽,并经反相高效液相色谱纯化和质谱鉴定。该合成肽作为ELISA法的包被抗原来检测血清中的AsAb（IgG）。结果：合成了实验所需要的抗原性肽段,高效液相色谱法（HPLC）结果显示其纯度为95．5％。以该合成肽为抗原建立的检测AsAb（IgG）的问接ELISA方法,与商品化试剂盒相比符合率为93．3％。结论：所合成的人SP17抗原肽具有较好的抗原活性,可作为间接ELISA法的包被抗原用于抗精子抗体的榆测。     

两种糖脂抗原在结核病血清诊断中的应用

以结核杆菌主要的酚糖酯ＰＧＬＴｂ１和２，３－二酰基海藻糖－２－硫酸酯ＳＬⅣ为抗原，用ＥＬＩＳＡ法检测１２０例肺结核患者、１１２例健康人血清中抗ＰＧＬＴｂ１和ＳＬⅣ的ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体，并与ＰＰＤ抗原进行比较。结果表明：ＳＬⅣ－ＩｇＧ－ＥＬＩＳＡ、ＳＬⅣ－ＩｇＭ－ＥＬＩＳＡ、ＰＧＬＴｂ１－ＩｇＧ－ＥＬＩＳＡ、ＰＧＬＴｂ１－ＩｇＭ－ＥＬＩＳＡ和ＰＰＤ－ＩｇＧ－ＥＬＩＳＡ的特异性分别为９６．４３、９６．４３、９６．４３、９６．４３和９５．５３％；敏感性分别为５１．６７、３２．５０、１４．１７、１８．３３和３３．３３％，符合率分别为７３．２８、６３．３６、５３．８８、５６．０３和６２．９３％，阳性预测值分别为９６．８７、８６．６７、８０．９５、８４．６２和８８．６４％。３种抗原中以ＳＬⅣ最好。