人参皂甙Rb1对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

目的　探讨人参皂甙Rb1对体外培养小鼠胚胎的发育毒性及其毒作用机制。方法　采用植入后全胚胎培养模型 ,将 8 .5日龄的ICR小鼠胚胎在含有不同浓度人参皂甙Rb1的大鼠即刻离心血清中旋转培养 4 8小时 (Rb1终浓度分别为 0、5、15、30、4 0、5 0 μg ml) ,观察人参皂甙Rb1对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果　随着人参皂甙Rb1浓度的增加 ,反映胚胎生长发育的指标得分和总形态学得分均降低 ;浓度≥ 15 μg ml时 ,卵黄囊生长受抑制 ,血管分化不良 ;浓度较高时 ,可诱发胚胎畸形 ,包括脑部发育异常、体位未翻转、心包腔扩大等 ,严重者可见腹凸。结论　在较高浓度时 ,人参皂甙Rb1对体外培养的小鼠胚胎有一定的毒性作用 ,其中对卵黄囊胎盘结构和功能的影响可能是其发育毒作用的机制之一。     

人参总皂甙对小鼠胚胎发育的影响

目的探讨人参总皂甙对体外培养的小鼠胚胎发育的影响。方法采用植入后全胚胎培养模型,将8.5d龄的ICR小鼠胚胎在含有不同浓度人参总皂甙的大鼠即刻离心血清中旋转培养48h(人参总皂甙终浓度分别为0,5,15,30,40,50mg/L),观察人参总皂甙对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果随着人参总皂甙浓度的增加,反映胚胎生长发育的指标得分和胚胎总形态学得分无明显变化,各剂量组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论人参总皂甙浓度达到50mg/L时,未见对体外培养的小鼠胚胎有毒性作用。     

壬基酚对体外培养大鼠胚胎发育的毒性研究

目的 研究4-壬基酚(4-NP)在体外条件下对大鼠胚胎生长发育的影响，探讨其胚胎毒性作用机制。方法 采用植入后全胚胎培养模型，将9.5d Wistar大鼠胚胎与含4-NP的大鼠即刻离心血清共培养48h(4-NP终浓度为0，6.25，12.5，25，50，100mg/L)，观察4-NP对大鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响，并用光镜、电镜检测胚胎和卵黄囊的组织结构。结果 4-NP在25mg/L以上可诱发卵黄囊生长和血管分化不良、胚胎生长迟缓及器官形态分化异常，严重者出现神经系统、心脏、腮弓发育异常及小肢芽、体位异常等畸形；100mg/L的4-NP对体外培养胚胎主要呈致死效应。光镜可见实验组胚胎多个器官组织出现病理改变，光镜和电镜下可见卵黄囊3层结构受损，以上结果均呈明显的剂量-反应关系。结论 4-NP对体外培养的大鼠胚胎具有-定的胚胎毒性。其胚胎毒性机制可能与4-NP对卵黄囊胎盘的结构和功能的破坏及其直接的细胞毒性有关。     

双酚A对小鼠早期胚胎发育毒性的体外实验研究

目的 揭示双酚A的发育毒性及其毒作用机制。方法 采用植入后全胚胎培养模型，将8．5日龄BalB/C小鼠胚胎与含双酚A的大鼠即刻离心血清共培养48h(双酚A终浓度为0，40．0，60．0，80.0,100.0mg/L），观察双酚A对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果 随着双酚A剂量的增加，胚胎在体外的生长发育受影响越严重，呈现出明显的剂量－反应关系。≥60mg/L的双酚A可诱发卵黄囊（VYS）生长和究化不良，生长迟缓及形态分化异常，严重者出现体位异常及各种畸形，如心脏发育迟缓，心包积液等。结论 在较高剂量下，双酚A对体外培养的小鼠胚胎具有一定的毒性作用，其中对卵黄囊胎盘的结构和功能的影响可能是其发育毒作用的重要基础之一。     

氯化三丁基锡对体外培养小鼠胚胎毒性研究

目的观察氯化三丁基锡的体外培养小鼠胚胎毒性。方法采用全胚胎培养技术,将8.5 d龄昆明种小鼠胚胎置入含有不同浓度氯化三丁基锡的大鼠离心血清中旋转培养48 h,观察体外培养小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的变化。结果氯化三丁基锡在0.05 mg/L以上时能诱发卵黄囊生长和血管分化不良,胚胎发育异常率增高;高浓度组能诱发脑小、心脏畸形(心小和心包积液)、前肢芽小或无、无后肢芽。结论体外实验条件下,氯化三丁基锡对小鼠胚胎具有胚胎毒性和致畸性。     

双酚A对植入后大鼠、小鼠胚胎致畸性的体外实验研究

为揭示双酚A(BPA)的发育毒性及其可能的作用机制 ,采用植入后全胚胎培养模型 ,将 8 5日龄BalB C小鼠胚胎和 9 5日龄大鼠胚胎分别与含BPA的大鼠即刻离心血清共培养 48h(BPA终浓度为 0、40、60、80、10 0mg L) ,观察双酚A对小鼠和大鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果显示 ,随着BPA剂量的增加胚胎在体外的生长发育受影响越严重 ,呈现出明显的剂量 -效应及剂量 -反应关系。≥ 60mg L的BPA可诱发小鼠及大鼠胚胎的卵黄囊生长和血管分化不良、生长迟缓及形态分化异常 ,严重者出现体位异常、神经系统、鳃弓发育异常及小眼、小肢芽等畸形。提示在较高剂量下 ,BPA对体外培养的大鼠和小鼠胚胎具有一定的毒性作用 ,其中对卵黄囊胎盘的结构和功能的影响可能是其致畸作用的机制之一     

烹调油烟冷凝物对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

目的 观察烹调油烟冷凝物(Cooking Oil Fume Condensates，COFC)的体外发育毒性并探讨其可能的毒性作用机制。方法采用体外全胚胎培养模型，将植入后8．5d龄昆明种小鼠胚胎在大鼠即刻离心血清培养基中培养48h(COFC染毒浓度分别为0、20、40、80、160、320mg／L)，观察COFC对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果COFC在≥80ms／L以上剂量时能抑制胚胎生长发育和形态分化，诱发卵黄囊生长和血管分化不良，发育异常率增高；高浓度组能诱发多种畸形，主要为神经系统，心脏、肢芽等器官系统畸形。结论体外实验条件下，COFC对小鼠胚胎具有一定的胚胎毒性和致畸性。     

Al（NO3）3对大鼠胚胎的发育毒性研究

应用体外全胚胎培养方法,以Al(NO3)3为受试物,培养基中Al3+浓度为0.6～9.0μg/ml,直接染毒旋转培养的大鼠胚胎48h,观察Al(NO3)3对大鼠胚胎生长发育和形态分化的影响,以探讨铝的胚胎发育毒性及其机理。结果发现,随着铝剂量增加,胚胎生长发育和器官分化的各项指标均呈现下降趋势,有一定的剂量-效应关系。其中,胚胎卵黄囊、神经管及心脏分化发育等对铝的作用较为敏感,相关指标在Al3+浓度为1.2μg/ml时比对照组显著降低(P<0.05)。≥3.0μg/ml时,除下颌外各项指标均明显降低(P<0.05或P<0.01),同时胚胎畸形发生率明显升高,畸形以神经管闭合不全、体屈异常多见。表明Al(NO3)3可导致胚胎发育迟缓和神经系统等器官发育畸形。     

邻苯二甲酸二-(2-乙基己基)酯对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

为探讨邻苯二甲酸 二 2 乙基己基酯 (Di 2 ethylhexylphthalate ,DEHP)对体外培养小鼠胚胎的发育毒性 ,采用植入后全胚胎培养模型 ,将 8.5天龄Balb c小鼠胚胎移入含DEHP即刻离心血清培养 48h ,DEHP终浓度为 0、12 .5、2 5、5 0、10 0和 2 0 0mg L ,观察DEHP对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果显示DEHP对体外培养小鼠胚胎生长发育毒性的最大无作用剂量为 12 .5mg L ,≥ 2 5mg L的DEHP可诱发胚胎生长迟缓及组织器官形态分化异常 ,出现心脏、神经系统、腮弓发育异常及小肢芽、体位异常等畸形 ;10 0mg L的DEHP对体外培养胚胎偶尔呈致死效应 ;2 0 0mg L时各组织器官形态分化均出现了异常 ,但未发现死胎。上述改变具有明显的剂量 -效应及剂量 -反应关系。提示DEHP对体外培养的小鼠胚胎具有胚胎毒性 ,并以致畸效应为主     

双酚A致体外培养大鼠胚胎发育毒性的时间-效应关系研究

目的探讨双酚A（BisphenolA）对大鼠胚胎毒性的时间-效应关系。方法采用全胚胎培养模型,对9.5d龄大鼠胚胎分别染毒BisphenolA（100mg/L）6、16、26、48h,观察体外培养胚胎生长发育的影响。结果早期暴露6h对体外培养的大鼠胚胎的生长发育无不良影响,染毒16h即可影响大鼠胚胎的生长发育,染毒26h和48h对胚胎生长发育和形态分化均有明显的抑制作用。光镜下发现只有染毒26h以上才出现卵黄囊及大鼠胚胎脑组织结构的改变。结论体外实验条件下,BPA对器官形成期的早期大鼠胚胎的毒性作用具有明显的时间-效应关系,其毒性表现为慢性毒性作用。     

固相萃取-超高效液相色谱法同时测定人参中11种人参皂苷的含量

目的:建立了人参中11种人参皂苷同时检测的超高效液相色谱分析方法。方法:采用Waters Ac-quity UPLC BEH C18色谱柱(1.7μm,50 mm×2.1 mm)、乙腈-水流动相(流速0.5 ml/min)柱温30℃、检测波长:203 nm的色谱条件,同时分离测定人参皂苷R1、Rg1、Re、Rf、Rh1、Rg2、Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rg3。样品以水饱和正丁醇为提取溶剂,经大孔吸附树脂柱除去基质干扰,取2μl注入UPLC。结果:11种人参皂苷在10 mg/L～100 mg/L范围内呈良好的线性关系,方法定量限为0.01%,加标回收率在90.9%～101.8%,所测定的RSD在1.89%～4.23%之间。结论:方法灵敏、快速,结果准确可靠。     

舒胸滴丸中人参皂苷Rg1的含量测定

目的建立舒胸滴丸中人参皂苷Rg1的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定舒胸滴丸中人参皂苷Rg1的含量，色谱柱为Kromasil C18柱，流动相为乙腈-水（22：78），流速为1mL／min，检测波长为203nm。结果人参皂苷Rg1的浓度在33．1-220．4μg／mL内线性关系良好（r=0．9991），平均回收率（n=6）为97．2％，相对标准偏差（relative standard deviation，简称RDS）为1．3％。结论高效液相色谱法快速、可靠、准确，重复性好，可用于舒胸滴丸中人参皂苷Rg1的含量测定。     

Somatic embryogenesis and ginsenoside production of Panax ginseng in phytohormone-free medium

Embryogenic cultures of Panax ginseng were established without using phytohormones. Somatic embryos developed from the roots of an in vitro seedling and from excised leaf and petiole segments cultured in half-macro-salt strength Murashige and Skoog medium. Excised leaf and petiole segments were obtained from in vitro germinated seedlings. Plantlets were subsequently obtained from developing somatic embryos in phytohormone-free media. Shoot formation from somatic embryos was influenced by light intensity. The rate of growth and frequency of embryogenesis were improved when cut-up embryogenic tissues were inoculated into liquid media in the dark. The ginsenoside contents of a 4 year-old field-cultivated root, seedlings from zygotic embryos, somatic embryos and embryogenic tissues were determined and compared. Somatic embryos contained 1.7 times the amount of ginsenoside Rb1 and 2.3 times the amount of ginsenoside Re compared to seedlings from zygotic embryos. Ginsenoside Rd, which was absent in the seedlings derived from zygotic embryos, was detected in somatic embryos. Higher ginsenosides Rd and Rg1 levels were found in embryogenic tissues grown on solid media than in tissues grown in liquid media. The total ginsenoside yields, including the ginsenosides Rb1 and Rg1 levels, of cut-up embryogenic tissues, were higher than those of clump tissues.     

人参皂苷Rg1通过NF-κB阻断缺氧诱导卵巢癌SKOV3细胞EMT

目的 探讨人参皂苷Rg1对卵巢癌SKOV3细胞上皮间质转化的影响及机制.方法 确定人参皂苷Rg1对SKOV3细胞生长的影响,构建缺氧诱导上皮间质转化(EMT)模型,观察细胞形态变化,检测E-cadherin,vimentin及核因子KappaB(NF-κB)蛋白的表达.结果 不同浓度的人参皂苷Rg1处理SKOV3细胞,超过40μg/mL的Rg1培养24h时对细胞生长稍有抑制,培养48h和72h时对细胞生长无明显抑制.缺氧诱导48h,SKOV3细胞呈现纺锤形、松散排列的形态,E-cadherin蛋白表达消失,vimentin蛋白表达增强.40μg/mL人参皂苷Rg1处理缺氧诱导的SKOV3细胞48h,细胞形态变化被部分逆转.E-cadherin蛋白表达恢复,vimentin蛋白表达被抑制,同时,NF-κB蛋白的表达与E-cadherin呈相反的趋势.结论 人参皂苷Rg1可能通过调控NF-κB抑制缺氧诱导卵巢癌SKOV3细胞的EMT.     

氟、砷联合发育毒性的体外实验研究

用全胚胎培养模型探讨了氟、砷联合染毒对体外培养４８ｈ大鼠胚胎的发育毒性。结果显示，不同浓度氟与砷的联合作用类型属协同作用（Ｐ＝０．０００１）。除２．５ｍｇ／Ｌ氟＋０．５ｍｇ／Ｌ砷组外，其它各联合组的反映胚胎生长发育的指标（颅臀长、头长、体节数和胚胎干重）与对照组比较，均具有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。从氟砷联合胚胎毒性结果来看，二者相互增毒作用亦相当明显。例如３．０ｍｇ／Ｌ砷所致胚胎死亡率是１１．１％，但加２．５，１０和２０ｍｇ／Ｌ氟后，死胎率远大于二者单独作用之和，分别为３３．３％、４４．４％和１００％     

HPLC测定复方血栓通滴丸中人参皂苷Rg1的含量

目的建立复方血栓通滴丸中人参皂苷Rg1的含量测定方法。方法采用C18（10μm，250mm×4．6mm）柱，流动相为乙腈-0．05％磷酸溶液（21：79），流速：1．5ml／min，检测波长：203nm。结果人参皂苷Rg1在3．2～32μg线性关系良好，平均回收率人参皂苷Rg1为96．58％，RSD为2．11％。结论本法操作简便，结果稳定，重现性好，可作为质量控制方法。     

应用植入后大鼠体外全胚胎培养研究酒精对胚胎发育的影响

为探讨孕期饮酒对胚胎生长发育的影响,应用植入后全胚胎培养（ｗｈｏｌｅｅｂｒｙｏｃｕｌｔｕｒｅ,ＷＥＣ）进行研究,将孕９．５天龄鼠胚胎移植于酒精终浓度分别为０、０．４０、１．００、２．００、４．００ｇ／Ｌ的全胚胎培养基中,于体外培养４８小时,观察酒精对胚胎发育和器官形态分化影响。     

同型半胱氨酸对体外培养大鼠胚胎生长发育的影响

采用着床后体外全胚胎培养方法 ,观察同型半胱氨酸 (homocysteine,HCY)对大鼠胚胎生长发育的影响。将孕 9.5日龄大鼠胚胎移植于 HCY终浓度为 0、0 .15、1.5、2 .0、4.0、6 .0、8.0、10 .0 mm ol/L的全胚胎培养基中 ,于体外培养 48小时 ,观察 HCY对胚胎发育和器官形态分化的影响。结果显示 :HCY可影响大鼠胚胎在体外的生长发育 ,并呈现剂量 -效应关系 ;随着 HCY浓度的增加 ,卵黄囊体积减小、表面皱缩、血管减少及分化程度降低 ;胚胎生长发育迟缓并逐渐加重 ;同时伴有形态分化异常 ,出现多种畸形 ,主要畸形部位为神经系统和心脏等。上述结果提示 :HCY可能对胚胎有直接致畸作用 ,亦可能通过引起卵黄囊功能障碍而导致发育毒性。