氟尿嘧啶合扶正抑瘤颗粒诱导肝癌细胞H22凋亡的超微结构观察

目的 观察氟尿嘧啶合扶正抑瘤颗粒诱导荷瘤小鼠肝癌细胞H22凋亡的超微结构.方法 建立肝癌H22荷瘤小鼠动物模型.随机分为空白组、模型组、氟尿嘧啶组、氟尿嘧啶合扶正抑瘤颗粒4组,通过透射电镜观察4组肿瘤细胞的超微结构变化.结果 氟尿嘧啶合扶正抑瘤颗粒组作用明显,其肝癌细胞核异染色质边聚成半月状,线粒体缩小明显,电子密度增...     

扶正抑瘤颗粒药物血清诱导小鼠肝癌细胞凋亡及其机制的研究

目的:研究中药复方扶正抑瘤颗粒药物血清对小鼠肝癌H22细胞凋亡的影响及其作用机制.方法:采用扶正抑瘤颗粒药物血清,温育体外培养的H22小鼠肝癌细胞.流式细胞仪进行细胞周期分析,检测凋亡率;透射电镜观察细胞超微结构变化;链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(streptavidin-biotin peroxidase complex,SABC)免疫细胞化学法观察凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的变化.结果:扶正抑瘤颗粒药物血清可影响细胞周期,使小鼠肝癌H22细胞的增殖阻滞在G1/G0期,并可测到凋亡峰,同时可下调Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达(扶正抑瘤颗粒药物血清组与空白对照组比较,P<0.05).结论:扶正抑瘤颗粒可通过影响细胞生长周期,调节Bcl-2和Bax蛋白的表达诱导小鼠肝癌细胞凋亡.     

半枝莲含药血清对肝癌H22细胞凋亡及线粒体膜电位的影响

目的：探讨中药半枝莲提取物（Scutellaria Barbata extract,ESB）含药血清对肝癌H22细胞凋亡率及线粒体膜电位的影响。方法：体外培养小鼠H22肝癌细胞,以ESB高、中、低剂量含药血清培养液作用于H22细胞,并设立空白血清及5-氟尿嘧啶（fluorouracil,5-Fu）组（阳性对照组）。应用四甲基偶氮唑盐法检测药物对细胞增殖的抑制作用;透射电镜下观察肿瘤细胞的超微结构变化;碘化丙啶标记,流式细胞术检测肿瘤细胞周期及细胞凋亡情况;采用荧光探针罗丹明123负载,激光扫描共聚焦显微镜下观察H22细胞的荧光强度,分析H22细胞线粒体膜电位的大小。结果：ESB含药血清有一定的抑制H22细胞增殖的作用,高、中剂量组96 h抑制率分别为（47.5±6.4）%和（36.3±4.5）%。透射电镜下可见部分细胞呈典型凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示,ESB中、高剂量组有明显的诱导凋亡作用,其凋亡率分别为（3.15±1.12）%和（7.83±2.25）%,与空白组相比差异有统计学意义（P〈0.01）。空白对照组、5-Fu组和ESB低、中、高剂量,H22细胞线粒体膜电位分别为（245.45±67.37）、（127.42±41.35）和（213.68±65.52）、（186.34±56.37）、（142.65±39.44）,各组线粒体膜电位与细胞凋亡率呈负相关（r=-0.826,P〈0.01）。结论：ESB含药血清可有效诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与降低肿瘤细胞线粒体膜电位有关。     

线粒体跨膜电位和细胞凋亡相关性的研究

线粒体跨膜电位的降低是细胞凋亡早期的不可逆事件。线粒体膜内外的电势差降低,可引起线粒体膜内外一系列的生化改变,如诱导细胞色素C释放,活化caspase蛋白酶家族,呼吸链与氧化磷酸化失耦联,三磷酸腺苷合成停止;线粒体膜通透性改变;凋亡诱导因子(AIF)的释放等,引起细胞凋亡的级联反应,最终导致细胞凋亡。本文就线粒体跨膜电位的形成,其在细胞凋亡时的变化及其机制进行综述。     

扶正活血抗癌方对H22肝癌小鼠抑瘤及免疫调节的实验研究

目的：探讨扶正活血抗癌方对H22肝癌小鼠抑瘤及免疫调节的作用。方法：选择移植性肝癌H22小鼠为模型,设生理盐水组（对照组）10只,予生理盐水灌胃;实验组（治疗组）10只,予扶正活血抗癌方灌胃,均为15d。观察扶正活血抗癌方的抑瘤作用,检测T淋巴细胞增殖功能、NK细胞杀伤功能、T淋巴细胞表型变化及IFN-γ、IL-4含量。结果：扶正活血抗癌方对荷瘤小鼠肿瘤有显著的抑制作用,抑瘤率为28％;实验组小鼠NK细胞杀伤百分数均比生理盐水组显著增加（P〈0．01）;与生理盐水组相比,实验组更能改变T淋巴细胞亚群比例;实验组小鼠T细胞分泌IFN-γ及IL-4能力均有显著升高（P〈0．05,P〈0．01）。结论：扶正活血抗癌方具有抑制肿瘤组织生长的作用,对荷瘤小鼠的免疫功能有一定调节作用。其作用机制包括增强小鼠体内T细胞免疫功能、NK细胞的杀伤功能以及体液免疫功能。     

扶正抑瘤颗粒对食管癌组织细胞周期及NF-κB影响的临床观察

目的观察扶正抑瘤颗粒对食管癌患者肿瘤组织细胞周期及核转录因子NF-κB的影响.方法68例食管癌患者随机分为治疗组和对照组,治疗组服用扶正抑瘤颗粒15 d后手术,取两组患者手术切除的肿瘤组织,检测细胞周期和NF-κB.结果治疗组较对照组NF-κB明显升高(P＜0.05);肿瘤细胞G0/G1期比率明显升高(P＜0.01),S期比率明显降低(P＜0.01);治疗组凋亡率与对照组比较差异有显著性(P＜0.001).结论扶正抑瘤颗粒可提高肿瘤细胞NF-κB的表达,阻止肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡.     

TRAIL重组蛋白联合扶正抑瘤方诱导HepG2肝癌细胞凋亡的研究

目的:研究重组人可溶性TRAIL蛋白联合扶正抑瘤方诱导肝癌细胞HepG2凋亡的作用和意义。方法:HepG2细胞经重组人可溶性TRAIL蛋白及联合扶正抑瘤方处理后,以MTT法测定细胞存活率、流式细胞术检测细胞凋亡指数。结果:扶正抑瘤方对促进TRAIL蛋白诱导的HepG2的凋亡作用存在较好的量效和时效关系,其最佳作用剂量和最佳作用时间分别为105mg/ml和24小时。结论:扶正抑瘤方能加强TRAIL诱导HepG2肝癌细胞凋亡作用。     

PUVA对HL-60细胞凋亡及线粒体膜电位的影响

[目的]研究补骨脂素（PSO）加长波紫外线（UVA）光化学疗法（PUVA）对人白血病细胞HL-60凋亡及线粒体膜电位的影响。[方法]HL-60细胞接受或不接受UVA照射后,在不同浓度PSO培养,电镜下观察细胞超微结构改变,流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化,多因素方差分析法进行统计学处理。[结果]PUVA处理后的HL-60细胞超微结构出现明显的凋亡形态;PSO、UVA照射及PUVA在作用后24 h均可使细胞凋亡率增加,ΔΨm下降,对照组、80μg/mL PSO组、5 m in UVA组及PUVA（80μg/mL PSO＋5 m in UVA）组凋亡率分别为（10.60±0.31）%、（26.94±0.26）%、（28.53±0.05）%、（37.72±0.09）%;线粒体膜电位水平分别为388.47±6.35、173.17±10.89、200.00±2.91以及71.83±9.47,各组间P〈0.01,PUVA的作用明显强于前两者。[结论]PUVA可诱导人白血病细胞HL-60发生凋亡,诱导凋亡的途径之一为下调线粒体膜电位。     

扶正抑瘤方对ICR小鼠H22皮下移植瘤组织中凋亡相关因子表达的影响

目的 探讨扶正抑瘤方(FYG)与5-FU联用对凋亡相关因子及5-FU靶酶TS基因、蛋白表达的影响. 方法 建立H22肝癌ICR小鼠皮下移植瘤模型,分模型组、5-FU组、FYG组、5-FU+FYG 4组,连续给药FYG(3.6 g/kg·d)和5-FU(10 mg/kg·d)5 d,免疫组化方法检测肿瘤组织中凋亡相关因子...     

白藜芦醇通过影响线粒体膜电位诱导HepG2细胞凋亡

目的 研究白藜芦醇诱导HepG2细胞凋亡的机制,探讨白藜芦醇诱导HepG2细胞凋亡过程中线粒体膜电位的变化。方法采用MTT法测定白藜芦醇对HepG2细胞的生长抑制作用,通过荧光染色及流式细胞术检测细胞凋亡,电子显微镜观察细胞超微结构的变化,用Rhodaminel23和TMRE标记细胞线粒体膜电位（△ψ）,并分别通过流式细胞仪和共聚焦激光扫描显微镜检测。结果低浓度白藜芦醇（≤25μmoFL）对HepG2细胞的生长抑制作用不显著,而高浓度白藜芦醇（〉25μmol／L）显著地抑制HepG2细胞的生长,且呈时间和浓度的依赖性（F=18．532,P〈0．05）;流式细胞术分析显示,白藜芦醇能显著诱导HepG2细胞凋亡,且呈浓度依赖性（P〈0．05）;白藜芦醇能降低HepG2细胞线粒体膜电位。结论白藜芦醇抑制HepG2细胞增殖,并诱导细胞凋亡,白藜芦醇使HepG2细胞线粒体膜电位去极化,提示线粒体膜电位去极化在白藜芦醇诱导细胞凋亡的过程中起作用。     

扶正抑瘤方对肝癌组织中增殖诱导配体及其受体表达的影响

目的 探讨扶正抑瘤方对增殖诱导配体(APRIL)及其受体蛋白表达的影响. 方法取40只SPF-VAF级雄性ICR小鼠随机分为5组:空白组、模型组、5-氟尿嘧啶组、5-氟尿嘧啶加挟正押瘤方组、5-氟尿嘧啶加胸腺肽组,制备皮下移植瘤动物模型,采用免疲组织化学法检测5组APRIL及其受体的蛋白表达情况. 结果APRIL及其受...     

扶正抑瘤颗粒对放疗食管癌患者癌组织中CD44v6与nm23-H1表达的影响

目的:观察扶正抑瘤颗粒对放疗食管癌患者癌组织中CD44v6、nm23-H1表达的影响.方法:63例患者随机分为扶正抑瘤颗粒加放疗组(治疗组,30例)和常规放疗组(对照组,33例).于治疗前和治疗21 d后做电子胃镜检查,活检瘤组织,固定、脱水、浸蜡包埋、切片,用免疫组化SABC法检测CD44v6、nm23-H1.结果:治疗21 d后,治疗组与对照组CD44v6分别为40.00%、69.70%,两组比较有显著性差异(P＜0.05);而治疗组和对照组的nm23-H1分别为20.00%、21.21%,两组比较无显著差异(P＞0.05).结论:扶正抑瘤颗粒可降低放疗食管癌组织中CD44v6表达,从而起到抑制食管癌浸润和转移的作用.     

p53在漆树黄酮诱导人肝癌细胞系HepG2细胞凋亡的作用

目的:观察漆树黄酮诱导人肝癌细胞系HepG2细胞凋亡的现象,研究p53在漆树黄酮诱导人肝癌细胞系HepG2细胞凋亡的作用究。方法：用不同浓度的漆树黄酮（50μmol•L-1、100μmol•L-1、200μmol•L-1）处理HepG2细胞24h和100μmol•L-1漆树黄酮处理HepG2细胞不同时间（12h、24h、48h）,流式细胞术和免疫荧光法观察漆树黄酮作用HepG2细胞的凋亡情况; Westem blot法检测漆树黄酮对HepG2细胞p53、Caspase-3 和Caspase-8蛋白的表达情况。结果:漆树黄酮能诱导HepG2细胞凋亡,呈剂量一时间依赖性; 漆树黄酮可增加p53蛋白的表达,降解Caspase-3 、Caspase-8酶原,提高Caspase-3 、Caspase-8活性。p53蛋白的上调与凋亡的发生呈正相关,Caspase-3 、Caspase-8酶原的降解与与凋亡的发生呈负相关。结论:漆树黄酮可诱导HepG2细胞凋亡,其机制可能与上调p53表达,活化Caspase-3、 Caspase-8有关。     

重组人生长激素对肝癌细胞MHCC-97H的作用及机制

目的探讨重组人生长激素（rhGH）对肝癌细胞MHCC-97H的作用及机制。方法以无血清培养液诱导肝癌细胞MHCC-97H凋亡,再以浓度为0μg/L（GH0组）、5μg/L（GH5组）、25μg/L（GH25组）、50μg/L（GH50组）、100μg/L（GH100组）和500μg/L（GH500组）的rhGH完全培养液进行培养,MTT法观察MHCC-97H细胞生长情况,流式细胞技术检测细胞凋亡率、细胞周期和细胞增殖指数,RT-PCR和Western blotting法分别检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白表达情况。结果与GH0组比较,GH25组、GH50组、GH100组和GH500组MHCC-97H细胞增殖明显,S期细胞百分比和细胞增殖指数显著增加（P〈0.05）;GH25组、GH50组和GH100组细胞凋亡率显著降低（P〈0.05）,Bax mRNA和蛋白表达显著降低（P〈0.05）,Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著增加（P〈0.05）。结论 rhGH体外显著促进肝癌细胞MHCC-97H增殖,并通过调节凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达来抑制无血清培养液诱导的细胞凋亡。     

一氧化氮对肝癌细胞线粒体膜通透性和胞浆中细胞色素C含量的影响

目的探讨一氧化氮(NO)对肝癌细胞线粒体膜通透性和胞浆中细胞色素C(cytC)含量的影响.方法用NO供体硝普钠(SNP)诱导SMMC-7721和HepG2肝癌细胞株凋亡,流式细胞术检测SMMC-7721和HepG2细胞凋亡率,MTT法观察肝癌细胞生长增殖情况,流式细胞术检测细胞线粒体跨膜电位变化,Western blot检测胞浆中cyt C含量的变化,同时应用线粒体膜通透性转变孔开放抑制剂CsA和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶抑制剂BSO预处理细胞,并观察以上各指标的变化.结果 SNP能诱导人肝癌细胞SMMC-7721和HepG2凋亡,并可导致两株细胞线粒体跨膜电位下降,胞浆中cyt C含量增加,与SNP的作用时间成正比.CsA能够抑制SNP所致的肝癌细胞线粒体跨膜电位的下降及胞浆中cyt C含量的增加;而BSO则可促进线粒体跨膜电位下降,cyt C从线粒体释放到胞浆.结论 NO可能通过下调线粒体跨膜电位、开放线粒体膜通透性转变孔并释放线粒体cyt C,来诱导SMMC-7721和HepG2细胞凋亡.     

益气活血软坚解毒方含药血清诱导BEL-7402细胞内Ca2+、线粒体膜电位的变化

目的:研究益气活血软坚解毒(YHRJ)方含药血清诱导人肝癌细胞系BEL-7402细胞内Ca2+、线粒体膜电位(△ψm)变化.方法:YHRJ方组成:生黄芪、炒白术、田三七、水红花子、藤梨根、凌霄花、炮山甲、白花舌蛇草,半枝莲.将新西兰大耳白兔12只随机分为3组,每组各4只,分别灌服生理盐水、等效剂量YHRJ方(约为人用量的5倍)与高剂量YHRJ方(约为人用量的10倍)水煎剂,用药5次后制备3种含药血清.BEL-7402细胞分为生理盐水组、生理盐水+顺铂氨铂(NS+DDP)组、YHRJ等效剂量(YHRJD)组、YHRJ等效剂量+顺铂氨铂(YHRJD+DDP)组、YHRJ高剂量(YHRJG)组、YHRJ高剂量+顺铂氨铂(YHRJG+DDP)组,分别加入生理盐水、YHRJ等效剂量、YHRJ高剂量兔血清至终浓度100 ml/L,DDP至终浓度4.5 mg/L,孵育8、12、24、48、72 h后分批处理细胞,罗丹明123、Fluo-3染色,流式细胞术(FCM)检测细胞内Ca2+、线粒体膜电位水平.结果:与NS组相比,在12、24、48 h各加中药组细胞内Ca2+浓度普遍增高(P<0.05).在12 h,各加中药组膜电位普遍增高(P<0.05),出现超极化现象;在24 h,与前基础电位相比,各加中药组线粒体膜电位明显降低(P<0.05);在48 h,各加中药组膜电位也保持在相对低的水平.结论: YHRJ含药血清有促进细胞内Ca2+内流与降低线粒体膜电位的作用.     

塞来昔布对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制作用

目的研究环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制作用.方法用MTr比色法观察其对肝癌细胞生长的影响;荧光显微镜和透射电子显微镜检测细胞凋亡,TUNEL染色法记数细胞凋亡指数,流式细胞仪定量分析.结果塞来昔布以剂量依赖的方式抑制SMMC-7721细胞的生长,2、10、20及40mmol/L塞来昔布对肝癌细胞的生长抑制率分别为20.78%、33.37%、48.57%和64.96%(P＜0.01).荧光显微镜和透射电镜观察到细胞皱缩、核质浓缩、核碎裂以及凋亡小体形成等凋亡形态学改变.流式细胞仪定量分析示2、10、20及40mmol/L浓度下细胞凋亡率分别为(7.44±0.34)%、(19.59±1.73)%、(29.04±4.18)%和(42.14±2.40)%,与对照组(2.13±0.17)%比较均有显著性差异.结论塞来昔布能抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖,亦能诱导其凋亡;诱导肿瘤细胞凋亡可能是塞来昔布抑制人肝癌细胞生长的机制.     

天花粉蛋白抗小鼠H22肿瘤作用的研究

对天花粉蛋白注射液（TCS）抗BALB/c小鼠体内H22肿瘤的作用进行了初步研究。建立移植型H22肝癌小鼠模型,腹腔注射TCS治疗,检测抑瘤率、皮内肿瘤微血管新生等指标,并通过细胞流式分析和体外鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）实验对其抗肿瘤作用机制进行探讨。结果显示,TCS治疗组实体瘤重与皮内肿瘤微血管新生数都明显小于模型对照组（P<0.01）。证明TCS通过抑制血管生长表现出一定的抗小鼠体内H22肿瘤生长的作用。     

虎杖提取物白藜芦醇对鼠肝癌细胞H22生长及扩增的影响(英文)

目的　测定虎杖的有效成分白藜芦醇对体外培养的小鼠肝癌H2 2的抗癌活性。方法　肝癌细胞H2 2调节到 (1× 10 6)·ml-1,将适宜H2 2细胞数 (2× 10 4 /孔 )接种在 96孔培养板上 ,在 5 %CO2 、37℃培养箱中温育 12h后 ,用MTT法测定白藜芦醇对肝癌细胞的生长抑制率 ,并在显微镜和电镜下观察肝癌细胞的变化。结果　白藜芦醇终浓度为 5 .0 μg·ml-1、10 μg·ml-1及 2 0 μg·ml-1,在 8h、12h、2 4h和 48h及白藜芦醇终浓度为 2 .5 μg·ml-1的抑制率 ,较对照组有显著性差异 (P <0 .0 5 )。显微镜下观察经药物处理 48h的肝癌细胞可见细胞膜不规则、肿胀和染色质断裂 ,电镜下可见细胞出现细胞电子密度增加及出现凋亡小体。结论　白藜芦醇对体外培养的肝癌细胞H2 2的生长具有抑制作用 ,它的机制也许是诱导H2 2细胞凋亡。