心源性猝死病人心肌SOCS-1和C-JUN表达及法医学意义

目的探讨心源性猝死（SCD）病人细胞因子信号转导抑制分子-1（SOCS-1）和原癌基因蛋白（C-JUN）的表达及法医学意义。方法收集SCD尸检病理标本43例,其中冠心病猝死23例,肺动脉栓塞猝死12例,病毒性心肌炎猝死5例,扩张型心肌病猝死3例;选择因交通事故、外伤等所致死亡者标本10例为对照组。应用免疫组织化学方法检测两组心肌细胞中SOCS-1和C-JUN蛋白的表达。结果 SCD组心肌细胞中SOCS-1和C-JUN表达显著高于对照组（F=11.94、56.68,q=4.815～20.669,P〈0.01）。SCD组心肌细胞中SOCS-1与C-JUN表达呈正相关（r=0.316,P〈0.01）。结论 SCD病人心肌细胞内SOCS-1和C-JUN基因蛋白表达可能参与了SCD的发病,可作为法医鉴定SCD的重要指标。     

腺病毒肺炎患儿血清MIP-1α和外周血SOCS-1 mRNA、SOCS-3 mRNA的变化及意义

目的探讨腺病毒肺炎患儿血清巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)和外周血细胞因子信号抑制因子-1(SOCS-1) mRNA、SOCS-3 mRNA水平的变化和意义。方法采用前瞻性方法,选取2019年3月至2019年7月首都医科大学附属北京友谊医院收治的50例腺病毒肺炎患儿作为腺病毒感染组,50例非腺病毒感染肺炎患儿作为非腺病毒感染组,以及30例健康体检儿童作为对照组,采集三组受试者的外周血进行血清MIP-1α和外周血SOCS-1 mRNA和SOCS-3 mRNA水平的检测,比较各组间的差异,绘制ROC曲线分析血清MIP-1α和外周血SOCS-1 mRNA、SOCS-3 mRNA对腺病毒肺炎的诊断价值。结果三组受试者的血清MIP-1α水平比较为:腺病毒感染组(39.63±10.22ng/L)非腺病毒感染组(29.03±6.11 ng/L)对照组(25.30±4.69 ng/L),腺病毒感染组与非腺病毒感染组相比、腺病毒感染组与对照组相比及非腺病毒感染组与对照组相比,差异均有统计学意义(P 0.05),三组间比较,差异有统计学意义(P 0.001)。三组受试者的外周血SOCS-1 mRNA水平比较为:腺病毒感染组(0.76±0.24)非腺病毒感染组(0.56±0.13)对照组(0.52±0.11),腺病毒感染组与非腺病毒感染组相比、腺病毒感染组与对照组相比及非腺病毒组与对照组相比,差异均有统计学意义(P 0.05),三组间比较,差异有统计学意义(P 0.001)。三组受试者的外周血SOCS-3 mRNA水平比较为:腺病毒感染组(0.82±0.32)非腺病毒感染组(0.63±0.12)对照组(0.58±0.14),腺病毒感染组与非腺病毒感染组相比、腺病毒感染组与对照组相比及非腺病毒感染组与对照组相比,差异均有统计学意义(P 0.05),三组间相比,差异有统计学意义(P 0.001)。血清MIP-1α和外周血SOCS-1 mRNA、SOCS-3 mRNA对儿童腺病毒肺炎的诊断曲线下面积分别为0.792、0.728和0.764,诊断敏感度分别为72.0%、78.5%和73.5%,诊断特异度分别为83.3%、75.5%和78.2%。结论血清MIP-1α和外周血SOCS-1 mRNA、SOCS-3 mRNA水平在腺病毒肺炎患儿中呈升高趋势,具有一定的临床诊断价值。     

前列腺素E1预先给药对出血性休克复苏后大鼠肾组织Caspase-3表达的影响

目的 探讨PGE1预先给药对急性出血性休克复苏后大鼠肾组织活化Caspase-3以及TNF-α mRNA,iNOS mRNA表达的影响.方法 32只雄性SD健康大鼠随机分成4组(n=8),A:正常对照组,不进行任何处理;B:手术对照组,0.5 mL生理盐水尾静脉注射,1 h后切开左侧腹股沟皮肤暴露股动静脉;C:出血性休克复苏组,大鼠硫喷妥纳麻醉后,经股静脉穿刺置管放血,平均动脉血压降至25～35 mmHg,维持1 h,自体温血复苏30 min,维持平均动脉血压80～100 mmHg,制作失血性休克复苏模型;D:出血性休克复苏+lipo-PGEl预先给药组,lipo-PGEl按10 μg/kg溶于0.5 mL生理盐水尾静脉汴射,1 h后制作出血性休克复苏模型.各组分别于复苏后6 h时间点用Northern blotting法检测肾组织TNF-α mRNA和iNOS mRNA的表达;免疫组化检测肾脏组织活化Caspase-3的表达.数据采用单因数方差分析(SNK-q检验),以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 出血性休克复苏模型组肾组织出现Caspase-3阳性表达细胞;TNF-α mRNA和iNOS mRNA的表达也明显高于正常对照组[(0.651±0.028)vs.(0.030±0.003),(0.524±0.022)vs.(0.026±0.003),P<0.05]和手术对照组[(0.651±0.028)vs.(0.029±0.002),(0.524±0.022)vs.(0.025±0.003),P<0.05];预先给药组肾组织Caspase-3阳性细胞数量显著减少;TNF-αmRNA和iNOS mRNA的表达明显低于模型组[(0.250±0.019)vs.(0.651±0.028),(0.203±0.020)vs.(0.524±0.022),P<0.05],正常对照组和手术对照组间肾组织Caspase-3的表达以及TNF-α mRNA和iNOS mRNA的表达尢显著差异[(0.029±0.002)vs.(0.030±0.003),(0.029±0.002)vs.(0.030±0.003),P>0.05].结论 lipo-PGEl预先给药可以下调出血性休克复苏后大鼠肾组织Caspase-3的表达水平,其机制可能与在基因转录水平抑制TNF-α和I-NOS的表达有关.     

多器官功能障碍综合征患者外周血单个核细胞SOCS-1/3表达及与预后的关系研究

目的 了解外周血单个核细胞(PBMCs)中细胞因子信号转导抑制因子-1/3(SOCS-1/3)表达与多器官功能障碍综合征(MODS)预后的关系.方法 选择32例MODS患者和24例健康志愿者.采用淋巴细胞分离密度梯度离心法分离PBMCs,分别以逆转录-聚合酶链反应及蛋白质免疫印迹法检测PBMCs中SOCS-1/3的mRNA及蛋白表达,分析其与预后及MODS评分的关系.结果 MODS组SOCS-1 mRNA表达与正常组比较差异无统计学意义(0.526±0.044比0.466±0.047,P＞0.05),而SOCS-1蛋白表达显著高于与正常组(0.814±0.045比0.479±0.021,P＜0.05);MODS组中死亡者SOCS-1 mRNA表达显著低于存活者(0.487±0.032比0.532±0.028,P＜0.05),蛋白表达显著低于存活者(0.787±0.029比0.838±0.040,P＜0.05);MODS患者SOCS-1的mRNA及蛋白表达与MODS评分均呈显著负相关(r1＝-0.731,r2=-0.526,P均＜0.01).MODS组SOCS-3 mRNA表达显著高于正常组(0.993±0.415比0.461±0.046,P＜0.05),SOCS-3蛋白表达显著高于正常组(0.458±0.033比0.403±0.024,P＜0.05);MODS组中死亡者SOCS-3 mRNA表达显著高于存活者(1.245±0.408比0.805±0.326,P＜0.05),蛋白表达显著高于存活者(0.486±0.021比0.425±0.016,P＜0.05);MODS患者SOCS-3 mRNA表达与MODS评分呈正相关,但不显著(r＝0.468,P＞0.05),SOCS-3蛋白表达与MODS评分呈显著正相关(r=0.783,P＜0.01).结论 MODS中SOCS-1表达可能起到保护组织避免损伤的作用,其表达减少可能提示患者预后不良;SOCS-3的表达可能起损伤作用或增加组织对损伤的易感性,其表达增加可能提示病情严重及预后不良.     

高糖诱导下肾小管上皮细胞中细胞因子信号转导抑制因子-1/3的表达及意义

目的 观察高糖诱导下肾小管上皮细胞形态学改变及细胞因子信号转导抑制因子(SOCS-1/3)在肾上管上皮细胞中的表达及意义. 方法 体外培养人肾近曲小管上皮细胞株(HKCs),并分为空白对照组、高糖组、Janus激酶2抑制剂AG490组.空白对照组以无血清培养基(5.5 mmol/L葡萄糖)培养细胞8 h;高糖组在含1%胎牛血清培养基中加高糖(300.0 mmol/L葡萄糖)培养;AG490组在高糖组基础上加10 μmol/L AG490培养.后两组再按培养时间分为2、4、6、12、24、48 h 6个亚组,每组6孔.倒置显微镜和电镜下观察细胞形态学及超微结构改变,采用免疫细胞化学和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测SOCS-1/3蛋白表达,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测SOCS-1/3 mRNA表达. 结果 与空白对照组比较,高糖组12 h后细胞呈梭形改变,有不规则突起,随时间延长细胞界限不清,胞质内颗粒增多;电镜下细胞表面微绒毛及细胞内线粒体明显减少,粗面内质网明显增加.AG490组细胞变化不明显.免疫细胞化学显示,SOCS-1/3蛋白表达以胞质为主,散在胞核表达.SOCS-1/3在正常HKC中有基础表达(0.218±0.023,0.337±0.009);高糖组4～24 h SOCS-1/3蛋白表达均高于空白对照组,其中SOCS-1以4 h表达最高(1.022±0.072),SOCS-3以6 h表达最高(1.256±0.105,均P<0.01);AG490组SOCS-1/3蛋白表达较高糖组明显下降(4 h SOCS-1:0.589±0.167,6 h SOCS-3:0.656±0.075,均P<0.05).高糖组2～12 h SOCS-1/3 mRNA表达高于空白对照组,其中SOCS-1以4 h表达最高(1.716±0.098比0.475±0.045,P<0.05),SOCS-3以6 h表达最高(2.848±0.116比0.749±0.086,P<0.01);AG490组则低于高糖组(4 h SOCS-1:0.865±0.075,6 h SOCS-3:0.923±0.116,均P<0.05). 结论 高糖可诱导肾小管上皮细胞发生形态学及超微结构改变,在早期即有SOCS-1/3表达上调,可能与Janus激酶(JAK)/信号转导和转录激活因子(STAT)/SOCS信号转导通路的负反馈调节途径有关.     

SOCS-3在脓毒症患者外周血单个核细胞中表达的研究

目的探讨细胞因子信号转导抑制因子-3（SOCS-3）在脓毒症发病机制中的作用。方法选择36例脓毒症患者,30例健康志愿者为对照组,应用RT-PCR方法测定SOCS-3在外周血单个核细胞中的表达,并和患者APACHEⅡ评分进行相关分析。结果SOCS-3在脓毒症组和对照组的外周血单个核细胞中均有表达,脓毒症组较对照组表达显著增加（P〈0．001）,SOCS-3 mRNA的表达和脓毒症A—PACHEⅡ评分呈负相关,相关系数（r）为-0．746（P〈0．01）。结论SOCS-3参与了脓毒症的发病过程,SOCS-3的表达在脓毒症患者中可能起着保护作用。     

三硝基丙酸预处理对缺血-再灌注兔心肌细胞凋亡的影响

目的 观察三硝基丙酸(3-NPA)预处理对缺血-再灌注兔心肌细胞凋亡的影响及其机制.方法 24只新两兰大耳兔随机分为对照组(C组)、实验组(3-NPA组)和阻滞剂组(5-HD)组),每组8只.5-HD组在开胸前24 h通过耳缘静脉注射特异性线粒体NIP敏感钾通道阻滞剂5-羟基癸酸(5 mg·kg-1),C组和3-NPA组注射同样体积的生理盐水.10 min后3-NPA组和5-HD组注射3-硝基丙酸(3mg·kg-1),C组注射同样体积的生理盐水.通过结扎兔左冠状动脉建立心肌缺血-再灌注动物模型,三组缺血 30 min再灌注120 min.检测再灌注120 min后心肌梗死面积、心肌细胞凋亡指数、Bcl-2和Bax蛋白的表达.对实验数据进行方差分析榆验.结果 3-NPA组的心肌梗死面积显著低于其它C组[(0.26±0.07)vs.(0.45±0.09),P＜0.01]和5-HD组[(0.26±0.07)vs.(0.40±0.07),P＜0.01];C组和5-HD组之间没有显著性差异[(0.45±0.09)vs.(0.40±0.07),P＞0.05].3-NPA组心肌细胞凋亡指数明显小于C组[(27.72±5.18)vs.(45.91±10.54),P＜0.01]和5-HD组[(27.72±5.18)vs.(43.44±7.33),P＜0.01].3-NPA组bcl-2表达高于另外两组[(0.123±0.046)vs.(0.079±0.019),(0.080±0.019),P＜0.05],而Bax明显低于另外两组[(0.095±0.020)vs.(0.14±0.05) and(0.15±0.05),P＜0.05].结论 3-NPA预处理对缺血-再灌注心肌具有良好的扰凋亡作用,这与其开放断线粒体ATP敏感钾通道有关.     

SOCS-1 SOCS-3在有机磷中毒鼠肝脾中表达的研究

目的 观察有机磷中毒(AOPP)小鼠肝脏、脾脏中SOCS-1、SOCS-3 mRNA表达的变化,探讨SOCS-1、SOCS-3在AOPP致多器官功能衰竭(MODS)中的发病机制,从而为MODS的防治提供新的策略.方法 健康雄性BALB/c小鼠随机分成敌敌畏中毒组24只,生理盐水对照组6只,正常对照组6只,中毒组于染毒后2、6、12、24 h取肝脾, 以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定SOCS-1、SOCS-3表达水平, 用SPSS统计软件测定之间的变化关系.结果 AOPP小鼠肝脾SOCS-1、SOCS-3水平均升高, 与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).统计分析显示, 肝脏中SOCS-1和SOCS-3 mRNA明显正相关(r=0.922,P<0.01) ,脾脏中SOCS-1和SOCS-3 mRNA明显正相关(r=0.957,P<0.01).结论 AOPP可诱导SOCS-1、SOCS-3在肝脾中表达,不同时间点AOPP中毒小鼠肝脏、脾脏中SOCS-1、SOCS-3 mRNA表达升高趋势一致.     

雷米普利对糖尿病心肌梗死大鼠葡萄糖转运体4的影响

目的 观察2型糖尿病合并心肌梗死大鼠室重构及葡萄糖转运体(GLUT4)表达及雷米普利对其影响.方法 46只雄性Wistar大鼠由哈尔滨医科大学第一临床医学院实验动物中心提供.高脂喂养加低剂量链脲佐菌素(STZ,30mg/kg)腹腔注射,血糖值≥16.7 mmol/L为2型糖尿病模型,结扎冠状动脉左前降支制备心肌梗死模型;糖尿病合并心肌梗死大鼠随机(随机数字法)分为安慰剂组(n,=9),雷米普利组(n=10),糖尿病假手术组(n=10);非糖尿病大鼠随机分为心肌梗死组(n=9)及非糖尿病假手术组(n=8).术后6周查心脏超声、测定心室重量指数、心肌梗死面积及左室非梗死区心肌胶原容积分数.取大鼠非梗死区心肌,采用实时定量RT-PCR技术测定GLUT4 mRNA.Western blot法测定GLUT4蛋白含量.用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析;组间比较用方差分析,P<0.05为差异具有统计学意义.结果 与糖尿病假手术组和非糖尿病心肌梗死组相比,安慰剂组EF值显著降低[(32±3)%vs.(65±4)%,P<0.01;(32±3)%vs.(38±4)%,P<0.05];E/A比值(P<0.01)、左室非梗死区胶原容积分数(P<0.05)及心室重量指数(P<0.05)升高.与安慰剂组相比,雷米普利组盯值改善明显[(45±3)%vs.(32±3)%,P<0.01],且E/A比值显著降低(P<0.01),左室非梗死区胶原容积分数下降、心室重量指数减少[(3.1±0.2) vs.(4.2±0.4),P<0.01].安慰剂组GLUT4 mRNA及蛋白表达较非糖尿病心肌梗死组低,与糖尿病假手术组相比差异无统计学意义.与安慰剂组相比,雷米普利组GLUT4 rnRNA及蛋白表达升高.结论 雷米普利可防治心室重构并改善心脏收缩及舒张功能;2型糖尿病合并心肌梗死大鼠心肌GLUT4 mRNA和蛋白的表达下降,雷米普利可以改善糖尿病合并心肌梗死大鼠心肌GLUT4 mRNA和蛋白的表达.     

结肠癌组织中SOCS-3 mRNA的表达

目的 探讨人结肠癌细胞因子信号转导抑制因子3（SOCS-3）的表达。方法 应用RT-PCR法测定10例人正常结肠组织、14例癌旁组织、15例结肠癌组织SOCS-3的表达。结果 与正常结肠组织相比较，86．7％（13／15）病例SOCS-3 mRNA的表达显著降低或未检测到表达（P〈0．001）；癌旁组织均检测到SOCS-3表达，表达水平与正常结肠组织无显著差异（P〉0．05）。结论 SOCS-3基因缺失可能与结肠癌的发生、发展密切相关。     

Expressions of SOCS-1 and SOCS-3 in the myocardium of patients with sudden cardiac death

BACKGROUND:

As the regulators of cytokines, suppressors of cytokine signaling (SOCS) play an important role in the inflammation reaction. Some studies found that SOCS-1 and SOCS-3 were involved in the pathogenesis of some inflammatory diseases such as rheumatoid arthritis, inflammatory bowel disease. But the expressions of SOCS in coronary heart disease have not yet been reported. This study aimed to investigate the expression and clinical significance of SOCS-1 and SOCS-3 in the myocardium of patients with sudden cardiac death (SCD).

METHODS:

Myocardial autopsy specimens were collected from 24 patients at the Forensic Medicine Department of Sun Yat-Sen University, Guangzhou, China between 2005 and 2006. Of them, 9 patients had autopsy findings consistent with coronary atherosclerosis (non-myocardial infarction) leading to SCD (non-MI group), 7 died of acute myocardial infaction (MI group), and 8 died from traffic accidents and trauma (control group). The expressions of SOCS-1 mRNA and SOCS-3 mRNA in the myocardium of the non-MI, MI and control groups were detected using RT-PCR. The levels of SOCS-1 and SOCS-3 proteins were detected using immunohistochemistry. Statistical analyses were performed using SPSS version 13.0 software and the data were analyzed by ANOVA.

RESULTS:

The expressions of SOCS-1 mRNA and SOCS-3 mRNA in the non-MI and MI groups were significantly higher than those in the control group[(0.788±0.101), (0.741±0.111) vs. (0.436±0.044), (P<0.01); (0.841±0.092), (0.776±0.070) vs. (0.454±0.076), (P<0.01)] respectively. The antibody-positive cells of SOCS-1 protein in the myocardium of the non-MI and MI groups were significantly higher than those in the myocardium of the control group[(320.00±48.48), (347.14±70.88) vs. (42.50±10.35), (P<0.01)] respectively. The antibody-positive cells of SOCS-3 protein in the myocardium of the non-MI and MI groups were significantly higher than those in the myocardium of the control group[(381.11±59.25) vs. (40.00±10.69), (P<0.01)] and[(332.86±111.91) vs. (40.00±10.69), (P=0.001)].

CONCLUSION:

The expressions of SOCS-1 and SOCS-3 in the myocardium of patients with SCD from coronary heart disease are significantly increased and contribute to the pathogenesis of SCD.KEY WORDS: Sudden cardiac death, Myocardial infarction, Suppressor of cytokine signaling-1, Suppressor of cytokine signaling-3     

胰岛素样生长因子-Ⅰ对重症急性胰腺炎大鼠小肠黏膜上皮细胞凋亡的影响

目的 研究外源性胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠黏膜上皮细胞凋亡及凋亡相关基因bax,bcl-2,caspase-3 mRNA表达的影响.方法 72只雄性Wistar大鼠按照随机数字表法分为假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、IGF-Ⅰ治疗组(IGF-Ⅰ组)共三组.通过胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠制作大鼠SAP模型,SO组用同样方法经胰胆管逆行注射生理盐水;IGF-Ⅰ组分别于术后30 min和术后3 h经后肢内侧皮下注射ICF-Ⅰ.各组动物分别于术后6,12,24 h处死8只,检测血浆淀粉酶,TUNEL法检测小肠黏膜上皮细胞凋亡,观察小肠组织病理学变化并进行病理评分,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测小肠黏膜上皮细胞中bax,bcl-2和caspase-3mRNA的表达.数据采用SPSS 11.0统计软件分析,多组间比较采用单因素方差分析.结果 IGF-Ⅰ治疗组与SAP组各时相点相比,血浆淀粉酶和小肠病理评分均低于各相应时相点,于12 h和24 h差异有统计学意义,均P<0.05;小肠黏膜上皮细胞凋亡指数IGF-Ⅰ组与SAP组各相应时相点相比均显著降低[6 h:(13.88±1.73)vs.(19.00±2.78);12 h:(10.13±1.55)vs.(17.63±1.60);24 h:(9.50±1.07)vs.(17.25±2.76)],P<0.05;电镜示小肠组织病理变化较SAP组明显改善.bax mRNA表达在SAP组各时点较SO组相应时相点明显增高[6 h:(1.35±0.18)vs.(0.85±0.12);12 h:(1.21±0.21)vs.(0.86±0.24);24 h:(1.14±0.24)vs.(0.95±0.22)],6 h即达高峰,而在IGF-Ⅰ组的表达与SAP组相应时相点比较则明显减弱,在12 h和24 h差异具有统计学意义(P<0.05),于24 h即接近SO组;caspase-3 mRNA表达在SAP组各时相点较SO组相应时相点明显增高[6 h:(0.78±0.01)vs.(0.55±0.04);12 h:(0.79±0.04)vs.(0.57±0.05);24 h:(0.81±0.06)vs.(0.55±0.01)(P<0.01)],而在IGF-Ⅰ组的表达与SAP组相应时相点比较则明显减弱,在12 h和24 h差异具有统计学意义(P<0.05):bcl-2 mRNA的表达在SO组和SAP组均较弱且差异无统计学意义,P>0.05,而在IGF-Ⅰ组各时相点的表达则明显增强[6 h:(0.65±0.07)vs.(0.54±0.04)vs.(0.57±0.06);12 h:(0.69±0.04)vs.(0.56±0.05)vs.(0.53±0.05);24 h:(0.72±0.05)vs.(0.54±0.07)vs.(0.58±0.08),P<0.05].结论 外源性IGF-Ⅰ通过拮抗SAP大鼠小肠黏膜上皮细胞的凋亡从而可以减轻SAP大鼠肠黏膜损害,其机制可能与其上调bcl-2 mRNA表达及下调bax,caspase-3 mRNA表达有关.     

中枢拮抗高迁移率族蛋白 B1对脓毒症脑损伤的影响

目的：探讨脓毒症时脑组织高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达规律及其与脑损伤的关系。方法40只C57BL／6小鼠随机（随机数字法）分为4组：假伤组、脓毒症组、侧脑室注射假伤组以及脓毒症动物侧脑室注射HMGB1抑制剂（ BoxA）组。采用盲肠结扎穿孔复制脓毒症模型及全自动小鼠脑立体定位仪构建侧脑室置管模型,脓毒症后立即经侧脑室导管向侧脑室注射1μg BoxA,于24 h取出脑组织并分离出海马结构,采用组织免疫荧光、蛋白印迹分析、组织TUNEL染色及HE染色方法分别检测脑组织HMGB1、胱天蛋白酶（ caspase）-3表达及组织凋亡、损伤等改变,组间差异采用单因素方差分析,两组之间采用t检验。结果（1）脓毒症组较假伤组海马组织HMGB1表达明显增加（22.74±9.29 vs.4.57±2.18, P＜0.01）;（2）脓毒症组与假伤组比较,海马组织细胞凋亡明显增加[（35±9.17） vs.（1.67±1.53）, P＜0.01]及caspase-3表达显著上调[（16.79±8.17） vs.（3.39±2.09）, P＜0.05],组织损伤明显加重;（3）侧脑室注射BoxA能有效地抑制海马组织HMGB1表达[（2.66±2.06） vs.（22.74±9.29）, P＜0.01];（4）侧脑室注射BoxA能减轻脑组织损伤,并减少组织细胞凋亡[（12±4.36） vs.（35±9.17）, P ＜0.01]及 caspase-3表达[（4.10±2.11） vs.（16.80±8.17）, P＜0.05]。结论脓毒症状态下HMGB1表达增加与脓毒症脑组织损伤的发生、发展密切相关,中枢抑制HMGB1能明显减轻脓毒症脑损伤。     

Promoter methylation and expression of SOCS-1 affect clinical outcome and epithelial-mesenchymal transition in colorectal cancer

BackgroundAbnormal DNA methylation can cause gene silencing in colorectal cancer (CRC) patients. A gene that is suspected to have a crucial role in various types of cancers is the suppressor of cytokine signaling 1 (SOCS-1). Thus, this study will analyze the ramifications of SOCS-1 promoter methylation in CRC patients. This study will also test the therapeutic effects of hypomethylation as a possible CRC therapy.MethodsFirst, 97CRC patients’ tumor and adjacent normal tissues were collected. Next, the methylation status of the SOCS-1 promoter region was assessed by methylation-specific polymerase chain reaction (MS-PCR); SOCS-1 protein and mRNA expression were also measured. A 48-month median follow-up period was used for the survival analysis of research participants. Lastly, to analyze the changes in cell invasion and migration in conjunction with protein and mRNA expression, the demethylating agent 5-azacytidine was applied in vitro to human CRC cells.ResultsThe results showed increased SOCS-1 hypermethylation in CRC samples compared to controls. Methylated SOCS-1 was associated with significant suppression of SOCS-1 expression in tumors. Additionally, SOCS-1 hypermethylation was significantly correlated with lymph node metastasis and TNM stage. The study also found a poor overall survival rate to be significantly correlated with reduced expression of SOCS-1. After 5-azacytidine treatment, reduced in vitro DNA methylation and increased SOCS-1 expression were observed, and decreased cell migration and epithelial-mesenchymal transition biomarker expression alteration were further confirmed.ConclusionsIn colorectal cancer tissues, the rate of methylation in the SOCS-1 promoter region is high. Through promoter hypermethylation, the SOCS-1 gene was severely down-regulated in the CRC tissue samples, thereby revealing a plausible therapeutic target for CRC therapy.     

重组腺病毒介导反义p38α基因抑制烧伤复合缺氧条件下乳鼠心肌细胞凋亡的研究

目的 探讨烧伤血清复合缺氧条件下乳鼠心肌细胞p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)活化与细胞凋亡之间的关系.方法 采用原代培养的乳鼠心肌细胞,按照处理因素不同分为3组:正常对照组细胞自然生长;烧伤缺氧组细胞给予烧伤血清+缺氧刺激(含10%的40%总体表面积Ⅲ度烫伤大鼠伤后6 h血清的DMEM/F12培养液+1%O2、5%CO2和94%N2);反义阻断组在细胞转染反义p38α重组腺病毒(AD-ASp38α)后给予烧伤血清+缺氧刺激.细胞培养6 h后,采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测p38磷酸化水平;采用DNA片断和流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况.结果 与正常对照组比较,烧伤缺氧组p38磷酸化水平(灰度值)明显提高(8.68±0.14比3.21±0.05,P＜0.01),细胞凋亡率明显增高[(50.367±0.451)%比(2.063±0.111)%,P＜0.01];心肌细胞转染AD-ASp38α后,p38磷酸化水平(灰度值)明显下降(5.46±0.16比8.68±0.14,P＜0.01),细胞凋亡率明显降低[(13.200±0.121)%比(50.367±0.451)%,P＜0.01].结论 烧伤血清复合缺氧条件下通过促使p38MAPK活化导致心肌细胞凋亡增多;阻断p38MAPK信号转导通路可减轻严重烧伤早期心肌细胞的损伤.     

心肺复苏大鼠海马神经元磷脂酰肌醇-3-激酶、蛋白激酶B和磷酸化cAMP应答元件结合蛋白表达的变化及APP17肽的影响

目的 探讨心肺复苏后大鼠海马神经元磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)、磷酸化cAMP应答元件结合蛋白(phosphorylation of cAMP respouse element binding protein,p-CREB)表达的变化,以及APP17肽对它们的影响.方法 实验地点在宣武医院神经变性病学重点实验室.雄性Wistar大鼠21只,随机分3组,每组7只:假手术对照组(A组)、心肺复苏组(B组)、心肺复苏+APP17肽组(C组).自主呼吸循环恢复(return of spontaneous circulation,ROSC)标准为心电图出现正常的QRS波群,心室内压≥60 mmHg,持续10 min以上;夹闭气管制作大鼠心跳呼吸停止模型,行心肺复苏.当大鼠出现ROSC时,复苏组静脉注射生理盐水;APP17肽组静脉注射APP17肽10μg·(300 g)~(-1).对照组行假手术,静脉注射生理盐水.维持生命体征至2 h,断头取脑,行冰冻切片.应用免疫组化法观察3组大鼠复苏2 h后海马神经元PI3K,PKB,p-CREB表达情况;三组中各取1只大鼠于ROSC后2 h,分离海马;应用Western-blot方法测定海马神经元PKB,p-CREB蛋白含量.数据以均数±标准差((x)±s)表示,组间数据用方差分析,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 免疫组化法显示:B组PI3K阳性细胞表达为(2.75±1.80),略高于A组(2.53±1.53),差异没有统计学意义;而C组为(5.85±2.83),较B组增加,差异具有统计学意义(P<0.01).B组PKB和p-CREB阳性细胞分别较A组明显减少[(2.45±1.36)vs.(5.22±2.50),(P<0.05);(2.41±1.11)vs.(8.31±3.02),P<0.01];C组PKB和p-CREB阳性细胞分别较B组增高[(9.66±4.32)vs.(2.45±1.36),P<0.01;(14.18±3.96)vs.(2.41±1.11),P<0.01].Western-blot法测定PKB,p-CREB蛋白含量B组较A组明显减少;C组较B组明显增加.结论 心肺复苏大鼠ROSC 2 h海马神经元PKB,p-CREB表达降低,APP17肽能恢复神经元PI3K,PKB,p-CREB的表达,对心肺复苏后海马神经元损伤有保护作用.