咖啡因对体外培养人毛囊及毛乳头细胞的影响

目的:研究咖啡因对人毛囊及毛乳头细胞体外培养的影响.方法:选择不同浓度咖啡因作用于体外培养的人毛囊及毛乳头细胞,记录6 d内毛囊的生长速度和毛球部形态学改变,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定毛乳头细胞增殖活性;流式细胞技术测定细胞凋亡;RT-PCR技术进行血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、雌激素受体(ER)、雄激素受体(AR)及5α-还原酶(SRD5A)的mRNA定量.结果:与对照组相比,0.005%咖啡因明显促进毛囊生长,0.000 5%咖啡因促进毛乳头细胞增殖、抑制凋亡,并促进毛发生长正性相关因子表达,抑制负性相关因子表达.结论:在有效浓度范围内,咖啡因可以促进人毛发生长,高浓度咖啡因抑制毛发生长.     

血管生成素抑制雄激素性秃发区毛乳头细胞中Ⅰ型胶原和纤维连接蛋白表达的研究

目的 探讨血管生成素抑制雄激素性秃发区毛乳头细胞中Ⅰ型胶原和纤维连接蛋白表达的作用及可能机制。方法 分离培养雄激素性秃发区毛乳头细胞,实时定量荧光PCR检测雄激素受体mRNA在不同传代次数毛乳头细胞中的相对表达量,CCK8法检测0、10、20、40、80、160 μg/L血管生成素对含或不含0.1 nmol/L二氢睾酮培养基培养的毛乳头细胞增殖的影响。取生长融合的第1代毛乳头细胞传代后分为3组：对照组（不用二氢睾酮或血管生成素处理）、0.1 nmol/L二氢睾酮组、0.1 nmol/L二氢睾酮 + 80 μg/L血管生成素组。作用48 h后,用实时荧光定量PCR检测Ⅰ型胶原基因、纤维连接蛋白和转化生长因子β1（TGF?β1）mRNA的表达,Western印迹检测Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白、TGF?β1、p?Smad2和p?Smad3蛋白的表达。实验数据采用单因素方差分析、LSD检验和独立样本t检验进行分析。结果 体外培养的雄激素性秃发区毛乳头细胞随着传代次数增加,雄激素受体mRNA相对表达量明显降低（P < 0.05）。细胞增殖实验发现,20 ~ 160 μg/L血管生成素明显拮抗0.1 nmol/L二氢睾酮对毛乳头细胞增殖的抑制作用（均P < 0.05）。与对照组相比,二氢睾酮组Ⅰ型胶原基因、纤维连接蛋白和TGF?β1 mRNA显著升高,但二氢睾酮 + 血管生成素组较二氢睾酮组Ⅰ型胶原基因mRNA（1.563 ± 0.143比4.329 ± 0.165）、纤维连接蛋白mRNA（1.290 ± 0.063比2.156 ± 0.115）和TGF?β1 mRNA（1.136 ± 0.098比1.707 ± 0.100）显著降低（均P < 0.05）。而且,血管生成素还能明显抑制由二氢睾酮诱导的毛乳头细胞中Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白、TGF?β1、p?Smad2和p?Smad3蛋白的表达（均P < 0.05）。结论 血管生成素在体外能够抑制雄激素性秃发区毛乳头细胞中细胞外基质成分Ⅰ型胶原和纤维连接蛋白的表达,其机制可能与其下调TGF?β1表达及抑制TGF?β1/Smad信号通路的活化有关。     

The progress in molecular mechanism of androgenic alopecia

雄激素性秃发(AGA)的发病涉及多数雄激素信号转导通路.AGA 患者秃发区和胡须的毛乳头细胞Ⅱ型5α-还原酶的表达高于其他部位.雄激素受体(AR) 在AGA 患者毛乳头细胞的表达高于非脱发的患者.此外,AR 共激活因子Hic-5/ARA55 在雄激素敏感部位如AGA 的秃发区和胡须的毛乳头细胞高表达.Ⅱ型5α-还原酶、AR 和Hic-5/ARA55 的表达增强可上调AGA 秃发区毛乳头细胞对雄激素的敏感性.雄激素诱导毛乳头细胞分泌转化生长因子(TGF)-β1抑制角质形成细胞生长,提示TGF-β1作为生长抑制因子是AGA 发病的决定因素之一.TGF-β2 和DKK-1 亦是雄激素诱导的毛囊上皮细胞生长抑制剂.预计更多的发病递质将被发现,进一步揭示AGA 的发病机制并寻找更好的治疗靶点.     

101B对人毛乳头细胞增殖及4种脱发相关基因表达的影响

目的:通过检测101B对体外培养人毛乳头细胞增殖及脱发相关基因表达的影响,分析其可能的抗雄激素性秃发(AGA)效果.方法 :体外培养人毛乳头细胞经101B[对照二氢睾酮(DHT)]处理后,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞增殖变化,并筛选4个基因通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法...     

毛乳头细胞与雄激素性秃发的关系

雄激素性秃发是最常见的脱发类型,目前已知是多基因遗传性疾病,与雄激素尤其是二氢睾酮水平及精神因素有关,具体发病机制不明确.毛乳头细胞来源于成纤维细胞,是构成毛乳头的间充质细胞.可表达雄激素受体和分泌多种细胞因子,诱导毛囊再生,在调控毛囊的周期性生长中起重要作用.且毛乳头细胞参与雄激素的代谢,雄激素通过诱导易感毛囊毛乳头细胞分泌细胞因子引起脱发.可见毛乳头细胞与雄激素性秃发关系密切.     

血管生成素抑制头顶部人毛乳头细胞中Ⅰ型胶原和纤维连接蛋白表达的研究

目的:探讨血管生成素(Ang)对头顶部人毛乳头细胞中Ⅰ型胶原(COLLⅠ)和纤维连接蛋白(FN)表达的抑制作用。方法:体外培养人毛乳头细胞,将其分为0 nmol/L二氢睾酮(DHT)组和0.1 nmol/L DHT组,每组分别加入0、10、50、100及150μg/L Ang,并采用CCK8法检测不同浓度Ang对人毛乳头细胞增殖的影响。再将人毛乳头细胞分为3组:对照组、0.1 nmol/L DHT组及0.1 nmol/L DHT+100μg/L Ang组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测COLLⅠ、FN和转化生长因子(TGF)-β1 mRNA表达;采用Westen blot检测COLLⅠ、FN、TGF-β1、磷酸化信号传导蛋白(p-smad)3及p-smad5蛋白表达。结果:细胞增殖实验示50～150μg/L Ang均能降低0.1 nmol/L DHT对人毛乳头细胞增殖的抑制作用(P0.05)。与对照组比较,DHT组人毛乳头细胞中COLLⅠ、FN和TGF-β1 mRNA表达均上调(P0.05);且COLLⅠ、FN、TGF-β1、p-smad3及p-smad5蛋白表达均上调(P0.05)。与DHT组比较,DHT+Ang组COLLⅠ、FN、TGF-β1、p-smad3及p-smad5蛋白表达均减少(P0.05)。结论:Ang在体外能够抑制头顶部人毛乳头细胞中细胞外基质成分COLLⅠ和FN的表达,其机制可能与其下调TGF-β1表达及抑制TGF-β1/smad信号通路的活化有关。     

Wnt-3a信号途径对毛乳头细胞聚集性生长作用的初步研究

目的 探讨Wnt-3a信号途径对体外培养的毛乳头细胞聚集性生长特性的影响.方法 构建重组腺病毒pAdEasy-1/Wnt-3a,并以该重组腺病毒感染体外培养的毛乳头细胞,观察细胞生长特性的改变;应用激光共聚焦技术和Western印迹检测β-连环素及相关蛋白多功能蛋白聚糖的表达情况.结果 Wnt-3a的过表达可以有效诱导毛乳头细胞聚集性生长.激光共聚焦显微镜检查提示,Wnt-3a过表达的毛乳头细胞β-连环素和多功能蛋白聚糖的荧光强度分别由34.16±9.62和18.81±9.59升高至87.35±17.28和92.18±18.39(t值分别为11.98,17.88,P值均＜0.01);Western印迹也提示,Wnt-3a过表达的毛乳头细胞β-连环素和多功能蛋白聚糖的表达强度南15.27±2.17和19.32±2.46升高至60.09±7.24和58.46±2.78(t值分别为10.10,20.63,P值均＜0.01).结论 Wnt-3a是调节毛乳头细胞聚集性生长的重要分子,主要通过以β-连环素为核心蛋白的经典途径发挥调节作用,多功能蛋白聚糖作为Wnt信号途径的重要相关基因,是该调节的重要环节.     

皮肤科学基础

20 0 136 14　重组腺病毒载体转染 CTLA4 Ig基因在毛乳头细胞中的表达 /程波 (贵阳医学院附院皮肤科 )…∥中华皮肤科杂志 .- 2 0 0 1,34(4) .- 2 6 3～ 2 6 5通过构建的重组腺病毒载体将免疫耐受基因(CTLA4 Ig) c DNA导入培养的毛乳头细胞中 ,并将体外转染的毛乳头细胞转移到小鼠体内 ,通过组织学和免疫组化检测目的基因在体内和体外的表达。结果CTLA4 Ig蛋白在基因转染 6 h后即在细胞浆中表达 ,随转染时间的延长其表达逐渐增加 ;基因转染的毛乳头细胞移植到小鼠体内 ,目的基因在 2 4 h开始表达 ,能持续表达 2周 ;移植细胞未受到排…     

雄激素性秃发患者毛乳头细胞基因表达谱分析

【摘要】 目的 探讨3D培养下,雄激素性秃发患者毛乳头细胞基因表达谱的差异。 方法 分离雄激素性秃发患者毛乳头细胞进行3D培养,实验组经双氢睾酮处理,提取总RNA进行扩增,Cy3标记,用NimbleGen人类全基因组表达谱芯片杂交,筛选差异表达基因进行GO分析及pathway分析,实时 PCR对结果进行验证。结果 全基因组表达谱分析显示,有622 个基因有差异性表达,上调基因数359个,下调基因数为263个。其中GO分析显示,抑制细胞增殖、促进凋亡的基因出现上调,如CHEK1及Tob1等。促进细胞增殖、参与表皮生长发育的分子表达下调,如BAMBI、EFNA3、Dlx3及UCGC等。实时 PCR验证结果与芯片结果的差异趋势一致。Pathway分析显示,调节细胞周期信号转导通路的分子富集在首位。 结论 雄激素性秃发发病受多种信号分子及信号转导通路调节,可能集中在调节细胞周期、细胞增殖及凋亡等方面。     

皮肤科学基础

20 0 2 0 710　改良毛乳头细胞培养法 /程波 (三军大西南医院皮肤科 )…∥中华皮肤科杂志 .- 2 0 0 1,34(5 ) .- 387～ 388采用二步酶消化法分离毛乳头 ,分离得到毛乳头细胞 ,具有明显的多层凝集性生长的特性 ,在胶原凝胶表面表现更为显著 ,似乎是毛乳头细胞一种自发组织的结果。实验结果还表明 ,毛乳头细胞的最快增殖时间(4～ 7d)较真皮鞘细胞和成纤维细胞迟 (2～ 5 d)。体外培养的毛乳头细胞表达α-平滑肌肌动蛋白也是该细胞的特征之一。体内毛乳头细胞则不表达。图 4参 5　(张孝友 )2 0 0 2 0 711　 HPV16 L 1蛋白在原核表达系统中的表达与纯化 /包广宇 (哈医大微生物学教研室 )…∥哈尔滨医科大学学报 .- 2 0 0 1,35 (4) .- 2 35HPV(人乳头瘤病毒 )是一类无包膜双链 DNA病毒 ,有 70多个基因型 ,其中 HPV16与宫颈癌有关 ,为高危型别。由于 HPV不能体外培养增殖 ,阻碍了病毒疫苗及血清学诊断的研究应用。HPV16的主要衣壳蛋白 L1(HPV16 L1蛋白 )是主要的型特异性抗原 ,可刺激机体产生中和性抗体 ,阻止...