支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞表型转变及止喘胶囊的干预作用

目的观察支气管哮喘气道平滑肌细胞表型转变及止喘胶囊的干预作用。方法雄性SD大鼠60只随机分为正常对照组、模型组、止喘胶囊组(中药组)、地塞米松组(西药组)、中西医结合组(结合组),每组12只,制备支气管哮喘大鼠模型。于激发第4周用电子显微镜观察气道平滑肌细胞组织形态学改变;分别于激发第2周、第4周检测中小气道smα-actin和sm-MHC蛋白表达。结果电镜下可见模型组气道平滑肌细胞内肌丝稍减少,合成细胞器增多;与正常对照组比较,激发第4周时模型组骨架蛋白sm-MHC和smα-actin表达减少(P0.05)。西药组平滑肌细胞内肌丝正常,但可见线粒体嵴断裂,基质丢失等缺氧改变;中药组平滑肌细胞内肌丝变化不大,胞内粗面内质网、核糖体未见增多,其高尔基体不发达,而结合组平滑肌细胞同正常对照组;与模型组比较,激发第4周各治疗组smα-actin和sm-MHC表达增强,差异有统计学意义(P0.05)。结论哮喘大鼠气道平滑肌细胞由收缩表型转变为合成表型,止喘胶囊具有抑制表型转变的作用。     

舒康平喘胶囊对哮喘大鼠气道平滑肌增生的干预作用

气道炎症和气道重建是支气管哮喘的两个主要病理学特征。近年临床研究表明，哮喘患者气道平滑肌细胞的原癌基因c-fos与c-jun表达增强。舒康平喘胶囊具有化痰平喘、软坚散结、活血化瘀之功效。本研究通过建立卵蛋白哮喘模型，观察舒康平喘胶囊对气道平滑肌增生的影响，探讨其防治哮喘的作用机制。     

小青龙汤干预哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖作用的研究

目的：探讨小青龙汤对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的作用机制。方法：40只清洁级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组和小青龙汤组,每组10只。观察哮喘大鼠气道平滑肌形态学变化;采用SYBR Green Real Time PCR测定哮喘大鼠肺组织中ERK1、ERK2和Cyclin D1的mRNA表达变化。结果：哮喘模型组肺组织中ERK1、ERK2和Cyclin D1的mRNA表达显著高于正常对照组（P〈0.01）,小青龙汤组和地塞米松组肺组织中ERK1、ERK2和Cyclin D1的mRNA表达显著低于哮喘模型组（P〈0.01）。结论：小青龙汤抑制哮喘大鼠气道平滑肌细胞的增殖可能是通过抑制ERK1、ERK2的磷酸化和降低Cyclin D1的表达实现。     

加味芎蝎散对咳嗽变异性哮喘大鼠气道重塑及气道平滑肌相关凋亡分子表达的影响

目的探讨加味芎蝎散对咳嗽变异性哮喘(CVA)大鼠气道重塑的作用及相关凋亡分子表达。方法 40只大鼠随机分成对照组、模型组、顺尔宁组、加味芎蝎散组;造模后分组给予相应的药物干预;采用HE观察各组支气管上皮细胞损伤情况、Masson染色法对大鼠支气管厚度,平滑肌厚度及胶原纤维沉积进行检测,免疫组化法检测气道平滑肌凋亡相关分子Bax、Bcl-2、Fas、Fas L、Caspase3的表达。结果模型组支气管上皮变性、坏死,支气管厚度增加,胶原纤维沉积明显,气道平滑肌细胞Bax/Bcl-2、Fas、Caspase3表达减少,而顺尔宁组、加味芎蝎散组具有明显升高的作用。结论加味芎蝎散可通过促进气道平滑肌凋亡分子的表达来减轻CVA大鼠的气道重塑作用,从而发挥对于CVA的治疗作用。     

自体血穴位注射治疗支气管哮喘临床观察

目的观察自体血穴位注射治疗支气管哮喘的临床疗效。方法将90例患者随机分为治疗组与对照组各45例,均予抗炎、化痰及解痉平喘等西医常规治疗,治疗组加用自体血穴位注射外治疗法。结果两组治疗后哮喘症状评分、血清特异性总IgE、嗜酸性粒细胞计数和FEV1%预计值均明显改善,而治疗组改善程度优于对照组。结论自体血穴位注射治疗支气管哮喘临床疗效确切。     

止喘胶囊对哮喘模型大鼠气道壁胶原和平滑肌影响的实验研究

目的:探讨止喘胶囊对大鼠哮喘模型气道壁胶原和平滑肌细胞的影响.方法:通过长期反复的给予致敏大鼠吸入不同浓度的卵蛋白,建立大鼠慢性哮喘气道重塑模型.40只大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药组、西药组、中西医结合组,分别给药治疗后处死,免疫组化技术检测气道壁MMP-9、TIMP-1、调宁蛋白calponin以及Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型胶原蛋白表达,计算机图像分析显微测定气道壁厚度.结果:模型大鼠气道上皮损伤、脱落,嗜酸性粒细胞浸润.治疗后大鼠气道壁厚度、胶原沉积、TIMP-1表达模型组明显高于正常对照组,中药组、西药组、中西医结合组明显低于模型组,其中中西医结合组疗效最佳:治疗各组大鼠调宁蛋白表达明显高于模型组,中西医结合组疗效最佳.结论:止喘胶囊能显著抑制TIMP-1的高表达,减少气道壁厚度和胶原沉积,上调调宁蛋白表达,抑制平滑肌过度收缩与增殖,从而阻抑气道重塑的发生和发展,与地塞米松有协同作用.     

咳喘宁对支气管哮喘大鼠气道炎症的影响

目的：观察咳喘宁对支气管哮喘大鼠气道形态学和肺泡灌洗液（BALF）中淋巴细胞、嗜酸粒细胞、中性粒细胞的影响。方法：40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、咳喘宁高剂量组（2．7g生药／ml）、咳喘宁低剂量组（1．35g生药／ml）、桂龙咳喘宁胶囊对照组（0．41g／kg体重），每组8只。除正常组外以卵蛋白致敏并吸入激发法制备大鼠支气管哮喘模型，各治疗组均从第1次哮喘激发开始（造模第3周）至处死前每天灌胃给药，激发并给药4周后处死大鼠，回收BALF，作细胞总数浓度计数，计算嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞的比例；取肺组织HE染色，彩色图象分析仪测量支气管管壁厚度、平滑肌厚度。结果：与正常组比较，模型组大鼠BALF细胞总数、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞比例明显增加（P〈0．01），支气管管壁和平滑肌厚度明显增加（P〈0．01）；与模型组比较，各治疗组细胞总数、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞比例以及支气管管壁和平滑肌厚度均显著下降（P〈0．05或P〈0．01）；且高、低剂量组优于桂龙咳喘宁胶囊组（P〈0．05或P〈0．01）。结论：咳喘宁可减轻支气管哮喘大鼠炎症反应，抑制气道重塑。     

柴朴汤对支气管哮喘大鼠气道重塑及肺组织中α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的:观察支气管哮喘大鼠气道重塑和α-平滑肌肌动蛋白( α-SMA)在哮喘大鼠模型中的动态表达及柴朴汤的干预作用.方法:将70只SD大鼠随机分为对照组、哮喘模型组、柴朴汤干预组,用卵蛋白(OVA)致敏激发建立大鼠哮喘模型,采用HE染色的方法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学方法研究肺组织气道形态学参数的改变及α-SMA的表达.结果:①哮喘2,4,8周组总管壁面积( WAt/Pbm)、内壁面积(WAi/Pbm)及平滑肌面积(Wam/Pbm)均高于对照组(P＜0.05),且随着激发天数的增加,上述指标有增加的趋势,哮喘4周组高于2周组,哮喘8周组高于4周组(均P ＜0.05);柴朴汤2,4,8周组,哮喘2,4周组WAt/Pbm,WAi/Pbm,Wam/Pbm均低于哮喘8周组(均P＜0.05),但柴朴汤组高于对照组.②哮喘2,4,8周组的α-SMA的mRNA和蛋白水平明显高于柴朴汤2,4,8周组及对照组(均P＜0.05);α-SMA的mRNA和蛋白水平随激发天数的增加而明显增加(均P ＜0.05);柴朴汤2周组的α-SMA的mRNA和蛋白水平与对照组相比,差异没有显著性;柴朴汤各周组与哮喘各相应周组比较,差异有显著性(P＜0.05).结论:哮喘大鼠肺组织α-SMA呈动态过量表达.柴朴汤可通过下调α-SMA表达,抑制气道平滑肌收缩及增生抑制气道重构.     

阳和平喘颗粒对气道平滑肌细胞增殖的影响

目的:研究阳和平喘颗粒在体外对支气管哮喘大鼠气道平滑肌增殖及PI3K/PKB通路相关因子的影响。方法:将阳和平喘颗粒含药血清及PI3K/PKB通路阻断剂分别组合作用于体外培养的支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞,噻唑蓝比色法(MTT)检测大鼠气道平滑肌细胞的增值情况,实时聚合酶链反应(Realtime-PCR)检测阳和平喘颗粒对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(PKB)、肾上腺素受体(AR)、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)、增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA表达水平的影响,蛋白印迹法(Western-Blot)检测阳和平喘颗粒对PI3K、PKB、AR、eNOS、PCNA蛋白表达水平的影响,酶联免疫吸附测定(ELISA)阳和平喘颗粒对磷脂酰肌醇二磷酸(PIP2)和磷脂酰肌醇三磷酸(PIP3)表达水平的影响。结果:50%阳和平喘颗粒(18.45g/kg)含药血清对支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞的增殖具有明显的抑制作用,阳和平喘颗粒含药血清及PI3K/PKB通路阻断剂能显著抑制支气管哮喘大鼠细胞内PI3K、PKB、PIP2、PIP3和PCNA的表达,促进eNOS和AR的生成。结论:阳和平喘颗粒具有在体外通过PI3K/PKB通路治疗支气管哮喘大鼠气道重塑的作用。     

针刺对哮喘大鼠肺功能及气道平滑肌痉挛的影响

目的：观察针刺“孔最”“鱼际”对哮喘大鼠引喘潜伏期、肺功能及内皮素-1(ET-1)、金属硫蛋白-2(MT-2)表达的影响,探讨针刺缓解气道平滑肌痉挛、改善哮喘急性发作的作用机制。方法：将40只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、药物组及针刺组,每组10只。除正常组外,其余3组均采用卵蛋白致敏法建立哮喘模型。药物组予沙丁胺醇雾化,针刺组针刺双侧“孔最”“鱼际”,均每日1次,共14 d。观察各组大鼠引喘潜伏期及肺功能,ELISA法检测血清及支气管肺泡灌洗液（BALF）ET-1及肿瘤坏死因子（TNF）-α含量,采用Masson染色观察气道形态,采用透射电镜观察气道平滑肌超微结构,采用实时荧光定量PCR及Western blot法检测肺组织ET-1、MT-2的mRNA及蛋白表达。结果：与正常组比较,模型组引喘潜伏期缩短（P<0.01）,气道阻力（RL）升高、肺顺应性（Cdyn）降低（P<0.01,P<0.05）;血清及BALF中ET-1及TNF-α含量升高（P<0.01）;支气管周围可见胶原纤维及胶原沉积,气道平滑肌增厚;细胞损伤较重,线粒体肿胀;ET-1 mR...     

血府逐瘀汤对血管平滑肌细胞c-fos及c-jun蛋白表达影响的实验研究

目的探讨血府逐瘀汤及其拆方对动脉粥样硬化血管平滑肌细胞MAPK下游效应因子c-fos、c-jun蛋白表达的影响。方法采用高脂饲料复制动脉粥样硬化模型,免疫组织化学法检测主动脉c-fos、c-jun的表达。结果与空白组比较,模型组c-fos、c-jun表达显著增高（P〈0.01）;与模型组比较,血府逐瘀汤组和桃红四物组c-fos表达均降低（P〈0.05或P〈0.01）;血府逐瘀汤组、桃红四物组和四逆散组c-jun蛋白表达均降低（P〈0.05）;四逆散组c-fos差异无统计学意义（P〉0.05）。结论血府逐瘀汤可以有效降低血管平滑肌c-fos、c-jun阳性颗粒的表达,可能是其抗动脉粥样硬化血管平滑肌细胞增殖的机制之一。     

起止点合谷刺法治疗肩胛提肌损伤156例

目的:观察起止点合谷刺法治疗肩胛提肌损伤的临床疗效.方法:150例肩胛提肌损伤患者,均采用起止点合谷刺法为主治疗,3天一次,5次为一个疗程,连续治疗2个疗程并随访3个月,统计疗效.结果:经本方法治疗后治愈率66.0%,显效率20.5%,好转率12.8%,总有效率99.3%.结论:起止点合谷刺法是治疗肩胛提肌损伤的有效方法.     

水蛭和丹参对血管成形术后平滑肌细胞增殖影响的实验研究

目的：探讨腔内血管成形术（ＴＡ）后再狭窄的预防方法。方法：将６０支髂动脉（３０只家兔）随机分为３组（每组２０支髂动脉）：水蛭组、丹参组和对照组，造成实验性动脉粥样硬化狭窄并进行ＴＡ后，水蛭组每天饲喂２ｇ水蛭粉和普通饲料，丹参组每天饲喂２ｇ丹参粉和普通饲料，对照组每天只饲喂普通饲料，３０天后，进行血管造影和病理形态学检查。结果：（１）水蛭组髂动脉内膜厚度（４０．１±９．８μｍ）显著小于丹参组（４８．     

针刺合谷穴治疗牙痛的临床研究

目的观察针刺合谷穴治疗牙痛的临床疗效。方法将278例病例随机分为治疗组（139例）和对照组（139例）,治疗组采用电针针刺合谷穴治疗,对照组采用电针针刺承山穴治疗,疗程为3d,分别对疼痛分级及镇痛情况进行观察。结果治疗1d拔针前显效率比较实验组与对照组无统计学意义（P〉0．05）,其余各时间点显效率实验组均明显高于对照组（P〈0.05）。结论针刺合谷穴治疗牙痛有效。     

芦荟多糖对大鼠脑缺血c-fos蛋白表达的影响

目的:观察芦荟多糖抗大鼠脑缺血作用及机制。方法:制备大鼠脑缺血模型,观察芦荟多糖对大鼠脑缺血的行为学及对大脑皮质细胞c-fos凋亡蛋白的影响。结果:芦荟多糖改善大鼠脑缺血的行为学、抑制大脑皮质细胞c-fos蛋白表达。结论:芦荟多糖抑制c-fos的蛋白表达,具有保护大鼠脑缺血作用。     

银杏叶提取物诱导大鼠主动脉平滑肌细胞中血红素氧合酶-1表达的实验研究

目的 探讨银杏叶提取物(EGb)诱导大鼠主动脉平滑肌细胞(SMC)中血红素氧合酶-1(HO-1)表达的量效关系,并初步探讨EGb诱导HO-1表达的分子机制.方法 复苏并传代培养大鼠主动脉SMC,分组实验,分别采用0,50,100,200,400 μg/ml 5个不同浓度的EGb以及200 μg/ml EGb加放线菌素D(ActD)孵育SMC 8 h,Western blot法检测HO-1蛋白,以HO-1条带灰度值代表HO-1的表达量.结果 不加EGb的对照组中HO-1蛋白仅有微量基础表达,加用EGb各组中HO-1蛋白的表达随EGb浓度的增加而增加(P＜0.05),在EGb浓度为200 μg/ml时达到峰值,随后则有所下降.加用ActD能显著抑制EGb所诱导的HO-1蛋白表达(P＜0.05).结论 EGb能够诱导大鼠主动脉SMC中HO-1表达,且这种表达在一定范围内具有量效关系;EGb诱导HO-1表达有赖于基因重新转录.     

大黄素抑制软脂酸诱导的大鼠VSMCs炎性细胞因子的表达

目的:探讨大黄素对软脂酸诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)炎症细胞因子CRP、TNF-α及i NOS的影响。方法:培养鉴定原代大鼠VSMCs,使用不同浓度的大黄素(1、10、50μmol·L~(-1))预孵育VSMCs 24 h,再以浓度为100μmol·L~(-1)的软脂酸刺激24 h,使用RT-PCR、western blot分别测定VSMCs CRP、TNF-α、i NOS的mRNA和蛋白的表达变化。结果:浓度为50μmol·L~(-1)的大黄素预孵育大鼠VSMCs 24 h后,与软脂酸组相比,CRP、TNF-α、i NOS的mRNA及蛋白的表达显著性降低,且差异有统计学意义(P0.05)。结论:大黄素能浓度依赖性地抑制软脂酸诱导的大鼠VSMCs炎性因子的表达,可以通过抗炎而达到抗动脉粥样硬化的作用。     

咳喘三伏贴穴位敷贴防治咳喘100例

2008～2010年,我们在夏季三伏用咳喘三伏贴穴位敷贴防治咳喘100例,取得满意疗效,现报告如下。1临床资料100例中,男55例,女45例;年龄16～30岁23例,31～50岁38例,51～78岁39例;病程5年以内35例,5～15年37例,15年以上28例。     

大鼠胃平滑肌细胞药物模型的改良组织块培养法建立

目的 建立一种新型大鼠胃平滑肌细胞药物模型,更好地研究中药胃肠舒片的作用机制.方法 培养SD大鼠胃平滑肌细胞,分为传统方法对照组、传统方法西沙必利组、传统方法胃肠舒片组和改进方法对照组、改良方法西沙必利组、改良方法胃肠舒组,对不同组的细胞给予不同方式药物作用,观察细胞生长情况.结果 两种方法培养细胞免疫荧光染色均显示特异性平滑肌肌动蛋白阳性.第三代细胞药物模型构建24 h后细胞浓度比较,传统方法对照组和改良方法对照组间无统计学意义(P＞0.05),而传统方法西沙必利组和改良方法西沙必利组间、传统方法胃肠舒片组和改良方法胃肠舒组间细胞浓度均为改良方法组大于传统方法组,有统计学意义(P＜0.05).结论 改良方法可以有效地构建大鼠胃平滑肌细胞药物模型,用药后可以获得更多高纯度的胃平滑肌细胞.