UPLC-MS/MS法同时检测人血浆中卡马西平和苯巴比妥浓度

摘 要 目的：建立同时检测人血浆中卡马西平和苯巴比妥浓度的UPLC-MS/MS方法,应用于临床卡马西平和苯巴比妥血药浓度监测。方法: 以地西泮为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白,运用Waters XEVO TQD三重四级杆液质联用仪检测, 色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C₁₈柱(50 mm×2.1 mm,1.7 μm);流动相为乙腈（10 mmol·L^-1甲酸铵） 水（10 mmol·L^-1甲酸铵,含0.1%甲酸）,梯度洗脱,流速为0.4 ml·min^-1,柱温40℃;采用电喷雾离子化源(ESI),正离子多反应监测模式扫描分析;加入200 μl乙腈沉淀蛋白,12 000×g离心10 min转移至1.5 ml EP管中取2 μl上样。 结果: 卡马西平的保留时间为1.23 min,线性范围为0.25～25 μg·mL^-1(r=0.999 7),最低定量限为0.01 μg·ml^-1;苯巴比妥的保留时间为1.11 min,线性范围为0.5～50 μg·mL^-1 (r=0.999 6),最低定量限为0.05 μg·mL^-1。卡马西平的高、中、低浓度的回收率为(82.1±6.83)%,(82.91±4.3)%和(84.35±3.09)%;苯巴比妥的高、中、低浓度的回收率为(84.27±6.91)%, (84.32±7.74)%和(89.07±6.24)%。卡马西平和苯巴比妥的日内、日间RSD均<10% ,血浆样品体系中的其他内源性物质不干扰测定。结论:该方法准确可靠,操作简便,重复性好,适于检测人血浆中卡马西平和苯巴比妥的血药浓度测定。     

UPLC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平浓度

目的:建立UPLC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平浓度并进行方法验证,应用于室间质评的样品测定。方法:采用UPLC-MS/MS法,以卡马西平-d8为内标,XSelect CSH C18柱(2.1 mm×75 mm,2.5μm)为分析柱,流动相A为含0.05%甲酸的水溶液,流动相B为含0.05%甲酸的乙腈溶液,流速为0.3 mL·min^-1,梯度洗脱;采用电喷雾离子源,以多反应监测(MRM)正离子模式进行检测,用于定量分析的离子对为m/z 237.1→194.1(卡马西平)、m/z 245.0→202.1(卡马西平-d8)。结果:卡马西平在5~1000 ng·mL^-1范围内线性关系良好(r≥0.9993),批内批间精密度和准确度、回收率和基质效应以及稳定性均符合生物样品测定要求。应用该方法测定的室间质评样品结果全部通过。结论:该方法准确、灵敏、选择性好、重现性高,适用于血浆中卡马西平浓度测定及室间质评。     

HPLC-MS同时测定人血浆中卡马西平和苯妥英钠的血药浓度

目的 建立一种快速、灵敏并同时测定人血浆中卡马西平（CBZ）和苯妥英钠（PT）浓度的高效液相色谱-质谱联用检测方法。方法 以兰索拉唑为内标,血浆样品经乙腈沉淀后,经HPLC-MS分离分析。采用Diamonsil C18柱（2.1 mm×150 mm,5 μm）,流动相：甲醇-水（含0.1%甲酸）=0.20∶0.10;流速：0.3 mL·min^-1,采用电喷雾离子源（ESI）,以多反应监测方式（MRM）进行正离子监测,CBZ、PT和兰索拉唑的定量分析离子对分别为m/z 237.0/194.0,253.2/182.0,392.0/188.2。结果 CBZ在40.30-20 150.00 ng·mL^-1（r=0.993 7）内线性良好,为40.3 ng·mL^-1,低（66.08 ng·mL^-1）、中（660.8 ng·mL^-1）、高（16 120 ng·mL^-1）3个浓度的平均回收率RSD均〈15%。PT在80.1-40 050.0 ng·mL^-1（r=0.997 6）内线性良好,最低定量限为80.1 ng·mL^-1,低（133.5 ng·mL^-1）、中（1 335.00 ng·mL^-1）、高（32 040.00 ng·mL^-1）3个浓度的平均回收率RSD均〈15%。结论 该方法快速简便,灵敏准确,可用于CBZ和PT同时应用时两者的血药浓度监测及其药动学研究。     

UPLC-MS/MS法测定人血浆中奥氮平、利培酮和帕潘立酮的浓度

目的:建立同时测定人血浆中奥氮平、利培酮和帕潘立酮浓度的方法。方法:血浆样品经液-液萃取后,以盐酸丁螺环酮为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定。色谱柱为ACQUITY UPLCTM BEH C_(18),流动相为甲醇-0.01 mol/L甲酸铵水溶液,梯度洗脱,流速为0.2 mL/min,柱温为45℃,进样量为5μL。采用电喷雾离子源,以多反应监测模式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 313.29→256.25(奥氮平)、m/z 411.42→191.19(利培酮)、m/z 427.45→207.18(帕潘立酮)和m/z 386.43→122.37(内标)。结果:奥氮平、利培酮、帕潘立酮血药浓度分别在0.426~108.954、0.213~54.476、0.213~54.476 ng/mL范围内线性关系良好;日内、日间RSD<20%,方法回收率分别为83.3%~112.9%,90.0%~109.8%和95.2%~114.9%,提取回收率分别为65.5%~95.0%、73.9%~98.5%和73.6%~99.4%,基质效应和稀释效应均不影响待测物血药浓度的测定。采用该法测得100例精神分裂症患者奥氮平、利培酮和帕潘立酮的血药浓度分别为(103.3±73.6)、(13.1±13.1)和(23.2±20.0)ng/mL。结论:该方法简单、快速、灵敏、特异性高,可用于奥氮平、利培酮和帕潘立酮血药浓度测定及药动学研究。     

人血浆中左乙拉西坦和卡马西平同时测定方法的建立

目的 建立同时测定人血浆中左乙拉西坦和卡马西平浓度的方法.方法 血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以卡马西平-D10为内标,采用高效液相色谱-串联质谱法测定其中左乙拉西坦和卡马西平的浓度.以XBridge BEH C18为色谱柱,以甲醇-0.1％甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.35 mL/min,柱温为40℃,进样量为...     

LC-MS/MS法测定癫痫患者血清中卡马西平的浓度

目的:建立以高效液相色谱-电喷雾串联质谱(LC-MS/MS)法测定癫痫患者血清中卡马西平浓度的方法。方法:色谱柱为Zorbax Extend-C18,流动相为甲醇-0.01mmol.L-1乙酸铵溶液(80:20),流速为0.3mL.min-1,进样量为10μL;离子源为电喷雾离子化源,正离子方式检测,扫描方式为正离子监测,卡马西平的碰撞诱导解离电压为30V,用于定量分析的离子反应为m/z237.2→m/z194.2。结果:卡马西平血药浓度在2.0～40.0ng.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9974);平均提取回收率为101.1%,日内、日间RSD分别为3.39%、4.11%。10名患者血清中卡马西平的平均浓度为5.69ng.mL-1(RSD=4.75%),比荧光偏振免疫法测定结果的RSD小。结论:本方法专属性强,灵敏度和准确度、重现性好,易于操作,可用于癫痫患者血清中卡马西平浓度的测定。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中阿魏酸和芍药苷的含量

目的:建立一种同时测定人体血浆中阿魏酸和芍药苷的方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测技术,分别以羟甲香豆素和栀子苷为内标,采用正离子方式检测,多反应监测模式扫描,检测离子通道为阿魏酸m/z 195.1→151.2和羟甲香豆素m/z 177.1→161.2、芍药苷m/z 503.1→219.2和栀子苷m/z 411.1→216.1。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C18(150 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为0.5%冰醋酸-乙腈(82∶18,V/V),流速为0.3 ml/min,柱温为40℃。结果:两种成分均在3 min内完成检测。阿魏酸、芍药苷的质量浓度分别在4.5²50.0、37.5250.0、37.5² 000.0 ng/ml范围内与指标成分和内标峰面积比呈良好线性关系,定量限分别为4.5、37.5 ng/ml;高、中、低质量浓度阿魏酸平均加样回收率分别为(91.2±5.7)%、(93.8±7.6)%、(92.7±7.5)%,芍药苷平均加样回收率分别为(90.5±7.6)%、(90.2±4.4)%、(91.7±4.2)%;精密度RSD在5.3%2 000.0 ng/ml范围内与指标成分和内标峰面积比呈良好线性关系,定量限分别为4.5、37.5 ng/ml;高、中、低质量浓度阿魏酸平均加样回收率分别为(91.2±5.7)%、(93.8±7.6)%、(92.7±7.5)%,芍药苷平均加样回收率分别为(90.5±7.6)%、(90.2±4.4)%、(91.7±4.2)%;精密度RSD在5.3%⁹.4%范围内;稳定性RSD<±10%。结论:所建方法分析时间短、专属性好、准确度高,适用于同时测定人血浆中阿魏酸和芍药苷的含量。     

LC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平的浓度及其在室间质评中的应用

目的:建立并验证测定人血浆中卡马西平(CBZ)浓度的方法,并应用于CBZ的室间质评。方法:血浆样品经乙腈沉淀后,采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定。内标为氯雷他定,色谱柱为Kromasil C18,流动相为水(含0.1%甲酸)-乙腈,梯度洗脱,流速为0.6 ml/min,柱温为40℃;采用电喷雾离子源,以多反应监测方式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z237.1→194.0(CBZ)、m/z 383.1→267.0(内标)。结果:CBZ血药浓度在5~1 000 ng/ml范围内线性关系良好(r>0.998),定量下限为5 ng/ml;日内、日间RSD为1.00%~6.42%,相对偏差为-6.93%~0.32%;5个室间质评样品的检测结果分别为679.0、475.0、104.0、29.2、26.2 ng/ml,评价结果通过率为100%。结论:该方法灵敏、准确、专属性强,可用于CBZ血药浓度测定及其室间质评。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中硝苯地平的浓度

目的：建立测定人血浆中硝苯地平浓度的方法。方法：采用液-液萃取法处理血浆后以超高效液相色谱-串联质谱法进样测定。色谱柱为WatersAcquityUPLCBEHC18,流动相为甲醇-10mmol·mL-1甲酸铵水溶液（85∶15）,流速为0.2mL·min-1,正离子多离子反应监测（MRM）扫描分析,离子通道分别为m/z347.14→315.15（硝苯地平）、m/z384.10→338.10（非洛地平）。结果：硝苯地平血药浓度在1～200ng·mL-1范围内线性关系良好（r=0.9980）,定量下限为1ng·mL-1,提取回收率为68.2%～71.2%,方法回收率为94.0%～106.5%,日内、日间RSD均〈11%。结论：本方法操作简便、快速、特异性强、灵敏度高,可用于硝苯地平的药动学研究。     

HPLC-MS/MS测定人血浆中舒巴坦钠浓度

目的:建立以高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定血浆中舒巴坦钠浓度的方法.方法:以丹参素钠为内标,采用Agilent Zorbax SB C18(l00 mm×3.0 mm,3.5 μm)进行分离,通过串联质谱仪,以选择反应监测方式进行测定.用于定量分析的离子对分别为m/z 231→140(舒巴坦钠)和197→135(丹参素钠).结果:舒巴坦钠血药浓度在0.103 ～51.300 mg·L-1范围内线性关系良好(r2=0.999 9),定量下限为0.103 mg·L-1,相对回收率均大于90.0％,日内和日间RSD均小于5％.结论:本方法快速、简便、准确、灵敏,适用于舒巴坦钠的人体药动学研究.     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮及其代谢物奥沙西泮浓度

目的 建立同时测定人血浆中卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮及其代谢物奥沙西泮浓度的方法。方法 采用超高效液相色谱-质谱联用法（UPLC-MS/MS）,以磺胺甲噁唑（SMZ）为内标,血浆经甲醇直接沉淀后进样分析。色谱柱为WatersACQUITYUPLCHSSPFP柱（2.1mm×100mm,1.8μm）,流动相为0.1%甲酸的5mmol·L1乙酸铵水溶液-0.1%甲酸的甲醇溶液（0~5min,35∶65→10∶90）,流速为0.2mL·min1。电喷雾离子源,正离子多反应监测扫描分析,卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮和奥沙西泮的离子对分别为m/z237.0→194.06、m/z255.98→144.95、m/z316.01→270.0、m/z285.04→193.07和m/z287.02→241;内标磺胺甲噁唑的离子对为m/z253.96→91.97。结果 卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮和奥沙西泮血药浓度分别在2.4~600ng·mL1（r=0.9997）,2.52~630ng·mL1（r=0.9920）,2.08~520ng·mL1（r=0.9979）,2.28~570ng·mL1（r=0.9982）,8.0~800ng·mL1（r=0.9992）线性关系良好;最低检出限分别为0.24,0.63,0.52,0.57,3.2ng·mL1。日内、日间精密度均〈15%;提取回收率均〉70%,且RSD〈15%。结论 该方法灵敏、快速、专属性强,可用于临床血药浓度测定及药动学研究。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中氯吡格雷及其代谢物的浓度

目的:建立同时测定人血浆中氯吡格雷(CLO)及其活性代谢产物(CATM)、非活性代谢产物(CCAM)浓度的方法,并用于药动学研究。方法:取烷化剂2-溴-3′-甲氧基苯乙酮(MPB)保护的血浆样品,经乙腈沉淀蛋白后,以卡马西平为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3,流动相为水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸),梯度洗脱,流速为0.50 ml/min。采用电喷雾电离源(ESI),多反应监测(MRM)方式进行正离子监测,用于定量分析的离子对分别为m/z 322.1→211.8(CLO)、m/z 504.1→155.0(CATM烷化衍生物,CATMD)、m/z 308.3→198.0(CCAM)、m/z 273.2→194.3(内标)。结果:CLO、CATMD、CCAM血药浓度分别在0.03~20.00、0.30~200.00、10.00~10 000.00 ng/ml范围内线性关系良好;日内、日间RSD<15%,相对误差(RE)为-3.5%~5.7。5名健康受试者单剂量口服CLO 300 mg后,CLO、CATM、CCAM的cmax分别为(7.89±5.46)、(15.58±8.08)、(8 023.33±1 047.39)ng/ml,tmax分别为(1.25±0.43)、(1.25±0.43)、(1.67±0.29)h,t1/2分别为(2.31±0.61)、(0.64±0.08)、(6.53±2.55)h,AUC0-t分别为(17.19±14.59)、(21.39±9.58)、(30 648.85±8 026.63)ng·h/ml。结论:该方法操作简便、灵敏度高、分析时间短,适用于CLO及其代谢物血药浓度测定及药动学研究。     

超高效液相质谱联用法测定阿昔洛韦血药浓度

目的 建立UPLC-MS/MS法测定人血浆中阿昔洛韦浓度,为其药动学研究提供测定方法 .方法 色谱条件:Acquity UPLC BEHC18色谱柱(2.1mm×50mm,1.7μm)、流动相为甲醇-0.01%甲酸水(60︰40,V/V)、流速0.20mL·min-1.质谱条件:电喷雾离子源(ESI-)、多反应离子监测模式(MRM)、阿昔洛韦检测离子对为(m/z)255.0→152.0、毛细管电压3.7KV、锥孔电压30V、碰撞能量20V.血浆样品采用液-固取预处理后进样.结果 血浆中阿昔洛韦线性范围50~1600 ng·mL-1;方法 回收率为99.6%±6.4,日内、日间的RSD值均<10%,最低检测限为1ng·mL-1(S/N≥3).结论 UPLC-MS/MS法测定血浆中阿昔洛韦浓度灵敏度高、重现性好,且操作简便、试剂价廉低毒,适用于临床常规监测及药动学研究.     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中卡马西平浓度的不确定度评定

摘 要 目的： 评定HPLC MS/MS测定人血浆中卡马西平(CBZ)浓度的不确定度。方法: 分析HPLC MS/MS法测定人血浆中CBZ浓度的不确定度来源,计算并进行合成和扩展。结果: 人血浆中低浓度(7.46 ng ·mL^-1)和高浓度(745 ng ·mL^-1)CBZ的扩展不确定度分别为0.410 ng ·mL^-1和33.400  ng ·mL^-1 (P=95%,k=2)。结论:HPLC MS/MS法测定人血浆中CBZ浓度的不确定度在低浓度时主要由回收率、生物样品配制和基质效应引入,在高浓度时主要由生物样品配制和重复性引入。     

超高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中阿托伐他汀浓度

目的建立测定人血浆中阿托伐他汀浓度的超高效液相色谱串联质谱（UPLC—MS／MS）法。方法色谱柱为Acquity UPLC BEH C18柱（50mm×2．1mm。1．7μm）,柱温40℃,流动相为乙腈-含0．01％甲酸的水溶液（70：30）,流速为0．3mL／min,进样量10μL,电喷雾离子化（ESI^＋）正离子MRM扫描。检测离子为m／z 559．2[M＋H]^＋→440．5[M＋H]^＋（阿托伐他汀）,m／z315．5[M＋H]^＋→109．3[M＋H]^＋（黄体酮）,血浆样品采用乙酸乙酯提取,50℃水浴氮气挥干,用黄体酮作为内标定量分析。结果阿托伐他汀血药浓度在0．01。50ng／mL线性关系良好（r=0．9989）。回收率在95％-106％之间,萃取回收率在72％-79％之间（RSD〈4％,n=5）,日内、日间精密度的RSD均小于5％（n=5）,最低检测质量浓度为0．002ng／mL。结论该方法准确、灵敏、简便,适用于阿托伐他汀的血药浓度测定。     

高效液相色谱-质谱串联法同时测定人血清中拉莫三嗪及卡马西平的含量

目的:建立高效液相色谱-质谱串联(LC-MS/MS)法测定人血清中拉莫三嗪及卡马西平的含量。方法:取人血清经乙腈直接沉淀后进样分析,色谱柱为Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇∶0.2%甲酸水溶液,流速为0.4 mL.min-1;流动相采用梯度洗脱。质谱采用ESI离子源,正离子多反应监测扫描分析,拉莫三嗪离子对为m/z 256→145,卡马西平离子对为m/z 237→194。结果:卡马西平和拉莫三嗪血药浓度分别在5～500μg.L-1(r=0.998 9)和5～500μg.L-1(r=0.997 2)范围内线性关系良好,定量下限分别为5μg.L-1。日内、日间RSD均<7.0%;提取回收率均>85%。结论:本方法处理样品简便,适用于临床血药浓度监测及为联合用药的药动学研究奠定基础。     

LC-MS/MS法同时测定人血清中卡马西平和拉莫三嗪浓度

目的:建立同时测定人血清中卡马西平和拉莫三嗪浓度的方法。方法:采用液-质联用法,以伐地那非和红地那非为内标,血清经乙腈直接沉淀后进样分析。色谱柱为XbridgeTMPhenyl,流动相为含0.02%甲酸的水溶液-含0.02%甲酸的乙腈溶液(60∶40),流速为0.3mL·min-1。电喷雾离子源,正离子多反应监测扫描分析,卡马西平和内标伐地那非的离子对分别为m/z237→194和m/z489→72;拉莫三嗪和内标红地那非的离子对分别为m/z256→43和m/z467→111。结果:卡马西平和拉莫三嗪血药浓度分别在5～500μg·L-1(r=0.9988)和100～10000μg·L-1(r=0.9964)范围内线性关系良好,定量下限分别为5、100μg·L-1。日内、日间RSD均<8%;平均提取回收率分别在88.9%～100.9%和89.5%～100.3%范围内。结论:本方法样品处理简便,适用于临床血药浓度监测及药动学研究。