扶正抑瘤颗粒对小鼠移植性肿瘤细胞间通讯的影响

目的:观察扶正抑瘤颗粒(红芪、当归、墓头回、莪术)含药血清对荷瘤小鼠H22细胞的凋亡和肿瘤细胞间通讯的影响.方法:Annexin V/PI双染法检测FYK含药血清对H22细胞凋亡情况的影响;应用共聚焦激光显微镜检测H22细胞RNA、DNA、[Ca2 ]、细胞间通讯状况.结果:扶正抑瘤颗粒含药血清可引起H22细胞的凋亡,细胞RNA、DNA含量降低,[Ca2 ]升高,细胞间通讯状况得到改善.结论:扶正抑瘤颗粒含药血清抑制H22细胞的增殖,并提高肿瘤细胞[Ca2 ],阻止肿瘤细胞分裂.     

扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌细胞H22凋亡的影响

目的:研究中药复方扶正抑瘤颗粒药物血清对小鼠肝癌H22细胞凋亡的影响.方法:扶正抑瘤颗粒含药血清温育体外培养的小鼠肝癌H22细胞,利用光镜、电镜、流式细胞仪、原位末端标记(TUNEL)等方法观察其诱导小鼠肝癌H22细胞的凋亡作用.结果:扶正抑瘤颗粒含药血清可明显诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡,随着培养时间的延长和用药剂量的增加,细胞凋亡率随之增加,与空白对照组比较P＜0.01或0.05.结论:扶正抑瘤颗粒药物血清可诱导肝癌H22细胞凋亡.     

扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌细胞(H22)DNA、RNA及自由基含量的影响

目的:探讨扶正抑瘤颗粒(FYK)对小鼠肝癌细胞(H22)DNA、RNA及自由基含量的影响。方法:荧光探针吖啶橙(A0)、乙酰乙酸盐-2,7-二氯氢化荧光素(2,7-dichlorofluorescin diacetate,D-399)染色,激光共聚焦显微镜(LSCM)检测经FYK治疗的小鼠肝癌(H22)腹水瘤细胞内DNA、RNA及自由基含量的变化,并和NS组对照。结果:FYK大剂量组DNA、RNA含量较NS对照组明显减少,自由基含量较NS对照组明显增加,两组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:FYK可以破坏H22细胞的DNA、RNA,使H22细胞内自由基含量增多,具有抗肿瘤作用。     

扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌H22细胞凋亡及Fas和FasL表达的影响

目的：观察扶正抑瘤颗粒含药血清诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡的作用和对细胞Fas、FasL表达的影响．方法：应用血清药理学方法，用不同剂量的含药血清与小氟肝癌细胞在体外共同孵育后，应用相差显微镜，流式细胞仪、电子显微镜对肿瘤细胞的生长和凋亡进行观察，用SABC法检测H22细胞Fas和FasL的表达结果：小鼠肝癌H22细胞经含药血清作用后，发生明显的形态学改变，相差显微镜下可见细胞体积缩小，折光性增强，染色质浓缩，核浆比例增大，密度增高，胞浆出现颗粒样物质。电镜下可见明显的凋亡形态变化，流式细胞仪可测到凋亡峰；SABC法显示，扶正抑瘤含药血清可上调小鼠H22细胞Fas的表达，而对FasL表达的影响不明显结论：扶正抑瘤颗粒能诱导H2：细胞发生凋亡，其机制可能与其上调H22细胞Fas的表达有关，     

扶正抑瘤颗粒对H22瘤细胞bax、bcl-2及 caspase-3蛋白表达的影响

目的观察扶正抑瘤颗粒对H 22瘤细胞bax、bcl-2及caspase-3蛋白表达的影响.方法采用免疫组织化学方法检测瘤组织切片中bax、bcl-2及caspase-3的蛋白表达.结果扶正抑瘤颗粒各治疗组bax及caspase-3的IOD值均高于模型组,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05);扶正抑瘤颗粒各治疗组bcl-2的IOD值均低于模型组,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05).结论通过促进bax及caspase-3的蛋白表达、抑制bcl-2基因的蛋白表达来诱导H22瘤细胞凋亡,进而发挥抑瘤效应.     

扶正抑瘤颗粒含药血清对小鼠肝癌细胞H22凋亡及细胞内Ca2+浓度的影响

目的:观察扶正抑瘤颗粒(FYK)含药血清诱导小鼠肝癌细胞H22凋亡的作用及其对细胞内钙离子浓度的影响,探讨其抗肿瘤机制。方法:FYK含药血清孵育体外培养的小鼠肝癌H22细胞,电子显微镜观察FYK含药血清诱导H22细胞凋亡的形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜测细胞内钙离子浓度的变化。结果:FYK含药血清能诱导小鼠肝癌H22细胞发生凋亡,同时使细胞内游离钙离子浓度升高,并与剂量和时间存在依赖性关系,细胞内钙离子浓度与相同时间点凋亡率呈正相关。结论:FYK含药血清可通过改变细胞内钙离子浓度诱导细胞发生凋亡,这可能是其抗肿瘤作用的机制之一。     

扶正抑瘤颗粒含药血清对小鼠肝癌H22细胞 p53和Caspases-3蛋白表达的影响

目的检测扶正抑瘤颗粒(FYK)含药血清诱导小鼠肝癌H22细胞凋亡过程中对其野生型p53和caspases-3蛋白表达的影响.方法选用小鼠肝癌H22细胞作为实验的细胞株,应用血清药理学方法制备FYK低、中、高剂量实验组含药血清和对照组天仙胶囊含药血清,用上述含药血清与H22细胞在体外共同孵育24h、48h、72h后,应用MTT法检测细胞生长抑制率,TUNEL法检测细胞凋亡,用免疫细胞化学技术检测H22细胞野生型p53和caspases-3蛋白表达水平.结果FYK含药血清可诱导H22细胞凋亡,处理48h和72h凋亡率明显高于对照组(P＜0.05),并有大量野生型p53和caspases-3蛋白表达,天仙胶囊含药血清处理后caspases-3蛋白表达上调,而野生型p53蛋白表达水平没有增强.结论FYK含药血清在诱导H22细胞发生凋亡过程中野生型p53和caspases-3蛋白表达水平均增强,这可能是其抗肿瘤作用的分子机制之一,而天仙胶囊含药血清仅上调caspases-3蛋白表达,二者诱导细胞凋亡的机制有所不同.     

扶正抑瘤颗粒对荷瘤(H22)小鼠T淋巴细胞Fas/FasL蛋白表达的影响

目的:观察复方中药制剂扶正抑瘤颗粒(FYK)对荷瘤(H22)小鼠T淋巴细胞凋亡相关基因Fas/FasL蛋白表达的影响。方法:将48只小鼠分为中药大、小剂量组、天仙胶囊阳性对照组和模型组,造模形成实体瘤后,分别灌胃FYK和天仙胶囊、生理盐水,18天后取血应用流式细胞仪测定Fas和FasL的蛋白表达。结果:各治疗组Fas蛋白表达较模型组下降,与模型组相比较有显著性差异(P<0.001)。各治疗组FasL蛋白表达较模型组升高,与模型组相比较有显著性差异(P<0.001)。结论:FYK可显著减轻荷瘤(H22)动物T淋巴细胞凋亡,在肿瘤的免疫逃逸中有重要意义。     

扶正抑瘤颗粒对荷瘤小鼠红细胞膜CD35和CD44s的影响

目的:观察扶正抑瘤颗粒(FYK)对荷瘤小鼠红细胞免疫功能的作用。方法:FYK灌服给予荷瘤小鼠(H22),观察生命延长率,检测红细胞天然免疫活性和红细胞膜CD35和CD44s数量。结果:FYK可使荷瘤小鼠生命延长率增加,红细胞天然免疫活性得到改善,CD35和CD44s数量增加。结论:FYK有一定的红细胞免疫调节作用。     

扶正抑瘤颗粒对食管癌放疗患者红细胞免疫功能的影响

为观察扶正抑瘤颗粒 (主药 :红芪、当归、莪术、墓头回 )对红细胞免疫功能的影响 ,6 3例食管癌患者随机分成常规放疗组和放疗 扶正抑瘤颗粒组。采用郭峰法测定放疗前和放疗 2 1d后患者红细胞C3b受体花环率 (RBC C3bRR)和红细胞黏附免疫复合物花环率 (RBC ICRR)。结果 :放疗前两组患者两红细胞免疫指标无明显差异 ,放疗 2 1天后扶正抑瘤颗粒组与常规放疗组RBC C3bRR分别是 10 0 3%、7 4 6 % ,P <0 0 1;RBC ICRR分别是 2 2 5 5 %、2 4 6 9% ,P <0 0 1。提示食管癌患者红细胞免疫功能紊乱 ,扶正抑瘤颗粒有纠正其紊乱的作用     

蛹虫草提取物对H22小鼠抗氧化能力的影响

目的 探讨蛹虫草提取物抗肿瘤作用的特点.方法 采用化学比色法分别测定蛹虫草提取物对H22荷瘤小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),过氧化氢酶(CAT),丙二醛的影响(MDA),对肝脏中SOD,GSH-Px的影响.结果 蛹虫草提取物可使小鼠血清中SOD,GSH-Px,CAT,肝脏中SOD,GSH-Px水平明显升高;使血清中MDA水平降低.结论 蛹虫草提取物通过调整荷瘤动物的抗氧化能力而达到抗肿瘤作用的目的.     

兖州卷柏总生物碱对小鼠H22肝癌移植瘤的影响

目的:皮下接种H22肝癌细胞株构建小鼠H22肝癌移植瘤模型,研究兖州卷柏总生物碱对小鼠抗肿瘤效果。方法:将H22肝癌移植瘤小鼠随机分5组,Ⅰ组为NS阴性对照组,每天一次性灌胃等量生理盐水;Ⅱ组按20 mg/kg剂量每天一次性灌胃环磷酰胺(CTX)水溶液;Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组分别按40、80、120 mg/kg剂量每天一次性灌胃兖州卷柏总生物碱溶液。连续2周,末次给药24 h后,称体重,观察治疗前后小鼠体重变化;颈椎脱臼处死小鼠,剖取腋下瘤组织、肝肝、脾脏和胸腺组织,分别称重,计算抑瘤率和胸脾指数。取部分肿瘤组织10%甲醛固定,切片,HE染色,观察肿瘤组织病理学变化。结果:各剂量的兖州卷柏生物碱均能延长H22肝癌移植瘤小鼠生存时间和抑制肿瘤生长,且各剂量组中抑瘤率呈现剂量-效应关系。结论:兖州卷柏生物碱对小鼠H22移植瘤具有抑制效果。     

石见穿对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响

目的:观察石见穿对肝癌H22小鼠肿瘤生长的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:肝癌H22荷瘤小鼠随机分为5组:模型组、石见穿提取物高、中、低(40,10,2.5 g·kg-1 ig)3个剂量组和阳性药环磷酰胺(CTX,0.025 g·kg-1,ip)对照组.连续10d.于第11天观测抑瘤率、脾指数、胸腺指数、血清中肿瘤坏死因子-a(TNF-α)和血骨内皮细胞生长因子(VEGF)的含量.结果:与模型组比较,石见穿提取物高、中、低剂量组的抑瘤率分别为23.83％,48.93％ (P ＜0.01)和27.48 (P＜0.05);石见穿提取物中、低剂量组脾指数和胸腺指数升高,但差异无统计学意义;石见穿提取物各剂量组血清中TNF-α和VEGF含量下降,以中剂量组VEGF含量下降明显,模型组(28.64±7.18)pg·mL-1,中剂量组(21.22 +5.60)pg·mL-1(P＜0.05).结论:石见穿提取物对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长具有明显的抑制作用,其作用机制可能与下调细胞因子VEGF含量有关.     

葶苈子对昆明种小鼠移植H22肝癌移植瘤抑瘤作用的研究

目的：探讨不同品种葶苈子对H22荷瘤小鼠动物模型的影响。方法：观察不同品种葶苈子对H22荷瘤小鼠肿瘤的抑瘤率、生命延长率、肝体比、肺体比、胸腺指数、脾指数以及用药前后的体重变化等指标的影响。结果：南北葶苈子的抑瘤作用与荷瘤对照组比较有显著性差异（P〈0．05）;南北葶苈子与顺铂合用组与单用顺铂组比较有极显著性差异（P〈0．01）。结论：葶苈子具有一定的抑瘤作用;与顺铂合用,可以明显对抗顺铂对肺的损伤和对机体的免疫抑制作用,具有显著的减毒增效作用。     

附子多糖对H22和S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究

目的 :研究附子粗多糖和酸性多糖对S180、H2 2荷瘤小鼠的抑瘤作用并探讨其作用机制。方法 :采用水提醇沉法得到附子粗多糖和酸性多糖 ,通过腹腔注射和灌胃两种途径给药 ,以肿瘤生长抑制率和存活延长率为指标观察附子多糖对荷瘤小鼠 (S180和H2 2 )的抑瘤作用 ,并通过检测淋巴细胞转化能力、NK细胞活性、肿瘤细胞凋亡率、癌基因和细胞增殖指数 (PI)等指标探讨其抗肿瘤作用机制。结果 :附子粗多糖和酸性多糖对H2 2荷瘤小鼠肿瘤有显著的抑瘤作用 ,灌胃给药的抑瘤率分别为 4 5 30 %和 5 9 36 % (P <0 0 1) ,腹腔给药的抑瘤率分别为 4 9 6 5 %和 6 9 2 8% (P <0 0 1)。两种多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤也有较显著的抑制作用。附子多糖对S180和H2 2荷瘤小鼠有延长存活时间的作用 (P <0 0 5或P <0 0 1)。两种多糖均明显增大了小鼠脾脏的重量 (P <0 0 1) ,提高了荷瘤小鼠的淋巴细胞转化能力 (P <0 0 5 )和NK细胞活性 (P <0 0 1) ,提高了抑癌基因p5 3和Fas的表达 (P <0 0 1) ,并且提高了肿瘤细胞凋亡率 (P <0 0 1)。结论 :附子粗多糖和酸性多糖有显著的抑瘤作用 ,其作用机制主要是增强机体的细胞免疫功能 ,诱导肿瘤细胞凋亡和调节癌基因的表达。     

白花蛇舌草诱导HSP70表达对H22肝癌细胞移植瘤的干预作用

目的观察白花蛇舌草诱导HSP7。表达对H22肝癌细胞移植瘤小鼠病理改变及T细胞亚群的影响。方法将中药处理后的H22肝癌细胞免疫小鼠采用HSP70单抗封闭技术分为白花蛇舌草未封闭、封闭，党参未封闭、封闭及RPMI-1640空白对照共5组，观察各组移植瘤小鼠瘤组织、胸腺及脾脏的病理改变及外周血CD4^＋、CD8^＋表达情况。结果白花蛇舌草未封闭组肿瘤组织坏死较为明显，胸腺皮质及脾脏白髓增厚，可见大量巨噬细胞；白花蛇舌草封闭组，党参未封闭及封闭组肿瘤组织的坏死、胸腺及脾脏的病理改变与空白对照组比较除脾脏可见少量巨噬细胞外，未见其他明显不同。白花蛇舌草未封闭、封闭和党参未封闭、封闭组CD3^＋的表达均较空白对照组增高；与空白对照组比较，白花蛇舌草未封闭组CD8^＋、封闭组CD4^＋表达明显上调。党参未封闭及封闭组CD4^＋、CD8^＋表达与空白对照组比较也有所增高，但差异无显著性意义。结论经白花蛇舌草处理的H22肝癌细胞能一定程度提高小鼠对同种移植瘤的主动免疫抗瘤作用，其机理可能与诱导肝癌细胞HSP7。表达，增强其免疫原性有关。     

扶正抑瘤颗粒对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞P53、 BCL-2蛋白表达的影响

目的:观察扶正抑瘤颗粒(FYK)对小鼠肿瘤细胞凋亡相关基因P53、BCL-2蛋白表达的影响。方法:将48只小鼠分成FYK大剂量组、FYK小剂量组、天仙胶囊阳性对照组和荷瘤模型组,造模形成实体瘤后分别灌胃FYK、天仙胶囊、生理盐水18天,取瘤组织用流式细胞仪检测P53、BCL-2蛋白表达。结果:FYK组肿瘤细胞P53蛋白表达升高、BCL-2蛋白表达下降,与模型组相比较有显著性差异(P<0.01)。结论:FYK具有促进肿瘤细胞P53表达和抑制BCL-2表达作用。     

华蟾素注射液对H22肝癌小鼠肿瘤组织中Fas、FasL基因表达情况的影响

目的:探讨华蟾素注射液对H22肝癌小鼠肿瘤组织中Fas、FasL基因表达的影响。方法:40只ICR小鼠采用皮下接种H22肝癌细胞株的方法复制小鼠肝癌模型,造模成功后,将小鼠随机分为4组:模型组,顺铂组,华蟾素注射液低、高剂量组。采用荧光定量RT-PCR方法检测华蟾素注射液对H22肝癌小鼠肿瘤组织中Fas、FasL基因表达的影响。结果:华蟾素高剂量组、顺铂(DDP)组的抑瘤率分别为41.35%、53.85%,具有明显的抑制肿瘤生长作用。与模型组比较,华蟾素低剂量组小鼠肿瘤组织中的Fas、FasL mRNA表达无显著性差异(P>0.05)。而华蟾素高剂量组、DDP组能促进肝癌小鼠肿瘤组织中的Fas mRNA表达升高,与模型组比较有显著性差异(P<0.05),同时降低FasL mRNA表达,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:华蟾素注射液抑制肝癌生长的分子机制可能是通过上调Fas基因表达并下调FasL基因表达,从而促进肿瘤细胞发生凋亡,达到抗肿瘤作用。