肝细胞性肝癌临床病理学特征与nm23—H1基因表达的关系

为探讨ｎｍ２３－Ｈ１基因与肝癌临床病理学特征之间的关系，用免疫组织化学方法对２９例肝细胞性肝癌中ｎｍ２３－Ｈ１基因表达进行研究。结果发现，ｎｍ２３－Ｈｌ蛋白在细胞浆内和细胞膜上都有表达；１８例ｎｍ２３－Ｈ１基因表达为阴性，其中１３例可见大体或镜下静脉癌栓。而１１例阳性肝癌中仅３例见到静脉癌栓；ｎｍ２３－Ｈ１表达阴性组血液中甲胎蛋白为２．７３４×１０￣６±Ｉ．４８７×１０￣６／Ｌ，阳性组为３．８６０ｘ１０￣６±１．９２０×１０￣７ｇ／Ｌ，两组比较差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５）。结果提示：①ｎｍ２３－Ｈ１基因表达下降与甲胎蛋白基因激活有关；②肝癌ｎｍ２３－Ｈ１基因表达下降有利于肿瘤转移。     

逆转录聚合酶链反应技术检测人肝癌nm23-H1基因mRNA表达

为探讨人肝癌中肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１的ｍＲＮＡ表达状况,设计特异性引物,应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测分析了２０例人肝癌组织及相应癌旁肝组织中ｎｍ２３－Ｈ１基因的ｍＲＮＡ表达。结果 特异性引物能成功扩增ｎｍ２３－Ｈ１基因的几乎整个编码序列：２０例肝癌及癌旁肝组织的ＲＴ－ＰＣＲ结果均为阳性,ｎｍ２３－Ｈ１基因ｍＲＮＡ未发生表达缺失或较大变异现象,由此表明,本实验建立的ＲＴ－Ｐ     

CD44v和nm23-H1产物在复发性膀胱癌表达的意义

目的探讨ＣＤ４４ｖ和ｎｍ２３－Ｈ１产物对诊断膀胱癌恶性程度和复发的意义。方法应用流式免疫法对４５例膀胱癌标本的ＣＤ４４ｖ和ｎｍ２３－Ｈ１基因产物的表达进行研究。结果ＣＤ４４ｖ产物的高表达和ｎｍ２３－Ｈ１产物的低表达与膀胱癌的浸润程度和复发均有关（Ｐ＜０．０５）。在膀胱癌中ＣＤ４４ｖ和ｎｍ２３－Ｈ１基因产物表达呈负相关（ｒ＝－０．２８７６）,在复发性膀胱癌中两者表达亦呈负相关（ｒ＝－０．４２３８）。结论ＣＤ４４ｖ和ｎｍ２３－Ｈ１表达在膀胱癌发生发展和预后中起协同作用,同时检测ＣＤ４４ｖ和ｎｍ２３－Ｈ１基因产物的表达能为判断膀胱癌的恶性程度和复发提供依据     

膀胱移行细胞癌nm23—H1和nm23—H2基因表达的检测及临床意义

目的 探讨ｎｍ２３基因与膀胱移行细胞癌转移之间的关系。方法 应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ技术分析１２例膀胱移行细胞癌和６例膀胱粘膜ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２的基因表达。结果 膀胱癌标本ｎｍ２３－Ｈ１ ｍＲＮＡ表达水平较膀胱粘膜显著升高，有盆腔淋巴结转移膀胱癌标本的ｎｍ２３－Ｈ１ ｍＲＮＡ表达显著高于无转移组（Ｐ〈０．０５），而ｎｍ２３－Ｈ２ ｍＲＮＡ在各组间的表达无显著性差异。结论 ｎｍ２３     

nm23-H1基因mRNA在人肝细胞癌中的表达

目的　研究人肝细胞癌中肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３Ｈ１ 的ｍＲＮＡ表达状况,并探讨其表达水平与肿瘤各项临床病理指标间的相关性。方法　应用半定量ＲＴＰＣＲ 方法检测分析人肝细胞癌组织、相应癌旁肝组织中ｎｍ２３Ｈ１ 的ｍＲＮＡ表达。结果　１５ 例肝癌及癌旁肝组织ＲＴＰＣＲ结果均为阳性,未见ｎｍ２３Ｈ１ 基因表达缺失或较大变异;肝癌组织中ｎｍ２３Ｈ１ ｍＲＮＡ表达水平明显高于相应癌旁组织（ Ｐ＝ ０－０３５）;ＡＦＰ阳性组ｎｍ２３Ｈ１ ｍＲＮＡ表达水平明显高于ＡＦＰ阴性组（ Ｐ＝０－００５） 。结论　人肝细胞癌中ｎｍ２３Ｈ１ 基因ｍＲＮＡ的异常表达可能与肿瘤的恶性生物学特征密切相关。     

乳腺癌中nm23—H1mRNA及其蛋白低表达的研究

目的：为探讨ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ及其蛋白低表达之间相关性及与乳腺癌生物学行为的关系。方法；应用ＲＴ／ＰＣＲ及免疫组化方法对５８例乳腺癌中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ及其蛋白的表达进行检测。结果：分别为４４．８％，４８．２％的乳腺癌伴有ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ或该基因编码蛋白的低表达，ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ与其蛋白表达蛋有相关性，但并不完全吻合。低水平的ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ或其蛋白与乳癌淋巴结转移呈显著     

转移抑制基因nm23—H1在人非小细胞肺癌中的表达研究

目的探讨ｎｍ２３－Ｈ１基因表达产物的表达水平与肺癌发生、发展和转移的关系。方法应用免疫组织化学法研究人非小细胞肺癌细胞中ｎｍ２３－Ｈ１基因表达产物的表达水平。结果ｎｍ２３－Ｈ１在肺癌组织中的表达水平（５４．０３％）明显低于癌旁正常肺组织（７３．４８％，Ｐ＜０．０１）。有淋巴结转移的原发癌ｎｍ２３－Ｈ１表达水平明显低于无淋巴结转移的原发癌（Ｐ＜０．０１）；转移癌组织表达水平明显低于原发癌组织（Ｐ＜０．０１）；低分化肺癌明显低于中－高分化肺癌（Ｐ＜０．０１）。结论ｎｍ２３－Ｈ１基因可能参与肺癌的发生、发展和转移过程的调控，ｎｍ２３－Ｈ１基因表达水平降低，预示肺癌的转移和预后不良。     

nm23-H1 cDNA克隆的构建及其mRNA表达与肝癌转移的关系

目的 构建转移抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１ｃＤＮＡ克隆，初步分析其ｍＲＮＡ表达与肝内转移，门静脉形成癌栓，ＴＮＭ分期等临床病理特征的关系。方法 利用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增ｎｍ２３－Ｈｄ１ｃＤＮＡ片段，并亚克隆入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＳＫ（－）质粒，借助Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法，检测１０例肝细胞癌及癌旁肝组织ｎｍ２３－Ｈ１基因ｍＲＮＡ表达水平。结果 ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ低表达，诱发肝细胞癌伴肝内转移     

nm23-H1杂合性等位基因丢失与肝癌转移的关系

目的从ＤＮＡ水平揭示ｎｍ２３－Ｈ１杂合性基因丢失与人原发性肝癌肝内转移、门静脉形成癌栓等的临床病理特征的关系。方法应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交技术,对２５例肝癌及癌旁肝组织ＤＮＡ进行分析。结果ｎｍ２３－Ｈ１两条等位基因分别为７．６Ｋｂ、２．３Ｋｂ,杂合性等位基因丢失率为３１．２５％（５／１６）。ｎｍ２３－Ｈ１杂合性基因丢失多见于分化较差的ＥｄｍｏｎｄｓｏｎⅢ、Ⅳ级和伴肝内转移或门静脉形成癌栓的肝癌。结论ｎｍ２３－Ｈ１可能诱发肝细胞肝癌的转移潜能,有助于预测肝癌复发和转移。     

转移抑制基因nm23在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的：探讨转移抑制基因ｎｍ２３与膀胱移行细胞癌转移之间的关系。方法：应用Ｎｏｒｔｈ－ｅｒｎ ｂｌｏｔ技术分析１２例膀胱移行细胞癌和６例肉眼未见异常的癌旁膀胱粘膜ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２基因的表达。结果：膀胱移行细胞组ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达水平较癌旁膀胱粘膜组显著升高,有盆腔淋巴结转移的膀胱移行细胞癌组的ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达显著高于无盆腔淋巴结转移组（Ｐ〈０．０５）,而ｎｍ２３－Ｈ２     

肝细胞癌中CD_(15)和nm23H1的mRNA表达及其意义

目的　研究CD15mRNA表达与肝细胞癌 (HCC)侵袭转移和预后关系 ,以及与nm2 3H 1mRNA表达的相关性。方法　应用原位杂交和免疫组织化学方法 ,检测分析HCC组织中CD15mRNA及其蛋白和nm 2 3H1mRNA表达。结果　 99例HCC中 ,CD15mRNA及其蛋白和nm2 3H1mRNA表达阳性率分别为 3 8.4%、3 6.4%和 76.8%。CD15mRNA表达与蛋白表达一致 ,与nm2 3H1mRNA表达呈负相关。CD15mRNA及其蛋白和nm2 3H1mRNA表达均与HCC侵袭转移倾向和患者预后相关。结论　检测CD15表达有可能成为HCC侵袭转移和预后判断的一项新的病理生物学指标。     

p21 ras和nm23-H1表达与胃癌淋巴结转移的关系

为探讨ｐ２１ｒａｓ和ｎｍ２３－Ｈ１表达与胃癌淋巴结转移的关系,采用ＬＳＡＢ法观察了８０例胃癌患者的ｐ２１ｒａｓ和ｎｍ２３Ｈ１的表达,并分析其与淋巴结转移的关系,结果：有淋巴结转移（ＬＮＭ）组ｐ２１ｒａｓ表达阳性率（６２．５％）明显高于无ＬＮＭ组（４２．５％）但ｎｍ２３－Ｈ１表达阳性率（２７．５％）则明显低于无ＬＮＭ组（４７．５％）ＬＮＭ数为１－３枚和ｐ２１ｒａｓ表达阳性率（３３．３％）明显低于４－     

肝细胞癌组织中MMP-9,CD44V6与nm23-H1表达的相关性及意义

目的 检测肝细胞癌(HCC)组织中MMP-9,CD44V6及nm23-H1的表达水平,了解HCC中MMP-9,CD44V6与nm23-H1表达的相关性及其与HCC侵袭转移的关系. 方法 采用免疫组化SP法检测60例HCC中MMP-9,CD44V6及nm23-H1的表达. 结果 侵袭转移倾向高危组的35例HCC标本中,MMP-9,CD44V6及nm23-H1表达的强阳性率分别为71.4%(25/35),68.6%(24/35)和25.7%(9/35);侵袭转移倾向低危组的25例HCC标本中,MMP-9,CD44V6及nm23-H1表达的强阳性率分别为40.0%(10/25),36.0%(9/25)和60.0%(15/25);MMP-9及CD44V6的表达与HCC侵袭转移倾向呈正相关性(P<0.01),nm23-H1的表达与HCC的侵袭转移倾向呈负相关性(P<0.01),MMP-9与CD44V6的表达呈正相关性,而MMP-9,CD44V6与nm23-H1的表达呈负相关性. 结论 MMP-9,CD44V6及nm23-H1的表达可能作为HCC预后及转移潜能判断的指标.     

miR-103通过抑制LATS2促进肝细胞肝癌侵袭转移的机制

目的研究原发性肝癌中miR-103的表达及对肝癌细胞系转移能力的影响。方法 RT-PCR检测miR-103在肝癌组织及肝癌源性细胞系中的表达。分别转染miR-103 mimic至L02细胞、转染miR-103抑制剂至HepG2细胞,CCK8法检测miR-103对细胞增殖的影响,TUNEL法检测miR-103对细胞凋亡的影响,Transwell实验检测miR-103对肿瘤细胞侵袭和转移的影响。生物信息学分析miR-103的靶基因,western blot验证靶基因表达与rmiR-103的相关性。结果 miR-103在肝癌标本和肝癌源性细胞系中表达上调,miR-103可以促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,Transwell实验结果表明miR-103增加细胞侵袭和转移能力。生物信息学分析表明拉特抑癌基因同源分子2(LA,TS2)为miR-103的潜在靶基因。miR-103的表达与LATS2呈负相关。结论以上数据证明miR-103通过抑制LA,TS2促进肝细胞肝癌侵袭转移,miR-103/LA,TS2失调有可能成为治疗肝癌的新靶点。     

E-钙黏蛋白和nm23-H1在肝细胞性肝癌中的表达及其临床意义

目的探讨E-钙黏蛋白(E-cadherin)和nm23-H1在肝细胞性肝癌(HCC)中的表达及其与肝癌浸润转移之间的关系。方法应用免疫组化S-P技术,检测50例肝癌组织中E-cadherin和nm23-H1的表达,分析与肝癌侵袭转移之间的关系。结果50例肝癌组织中E-cadherin和nm23-H1的表达与HCC的Edmondson分级、侵袭转移能力密切相关,而与患者性别、年龄、肿瘤大小无关。E-cadherin和nm23-H1的表达具有高度协同性。结论E-cadherin和nm23-H1的表达能反映HCC的侵袭转移能力。联合检测两种蛋白在肿瘤组织中的表达,可以更准确判断HCC的恶性程度和生物学行为。     

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3促进肝细胞癌侵袭和转移的初步研究

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）是否能促进肝细胞癌（HCC）侵袭、转移。 方法通过siRNA靶向沉默GPC3在人肝癌细胞Hep3B、HepG2中的表达,慢病毒介导GPC3在人肝癌细胞SMMC-7721和SK-HEP-1中过表达,用于体外细胞功能试验和建立体内裸鼠原位种植瘤模型。Western blotting、qPCR检测GPC3、上皮间质转化（EMT）相关分子N-Cadherin、E-Cadherin、SNAIL、Vimentin和基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-3、MMP-7的表达。 结果过表达GPC3的Hep3B、HepG2细胞株的迁移和侵袭能力显著大于GPC3低表达的SMMC-7721、SK-HEP-1细胞株（P<0.05）;小鼠肝脏原位癌模型显示,过表达GPC3的HCC肝脏转移发生率明显高于GPC3低表达者（P<0.05）。过表达GPC3可以降低E-Cadherin,上调N-Cadherin的表达;干扰GPC3表达后,E-Cadherin表达上调,N-Cadherin表达下调。GPC3过表达可显著上调MMP-2、MMP-3、MMP-7的表达（P<0.05）。 结论GPC3可通过诱导HCC发生EMT和分泌MMPs,促进HCC细胞迁移和侵袭。     

miR-542-3p对肝癌细胞恶性生物学行为的影响及机制探讨

目的 探讨microRNA-542-3p(miR-542-3p)在人肝癌细胞系及组织中的表达水平及其对肝癌细胞增殖、侵袭转移能力的影响.方法 采用RT-PCR检测miR-542-3p在肝癌细胞系(HCCLM3、Hep3B、Huh7、SMMC-7721、MHCC-97H、MHCC-97L)以及人正常肝细胞LO2中的表达;...     

人肿瘤转移抑制基因NM23-H1抑制卵巢癌转移机制体内体外实验研究

目的研究卵巢癌的人转移抑制基因NM23H1转移抑制的机制。方法首先构建由人肿瘤转移抑制基因NM23H1及真核细胞表达载体PcDNA3.1/zero构建成重组质粒PcDNA.NM23H1,并将其转染到高转移卵巢癌细胞株HO8910。体外实验:通过细胞DNA合成的流式细胞仪分析,以发现NM23H1对癌细胞生长的改变采用成集落实验,以观察转染组对转化生长因子(TGF)β刺激形成的集落数及细胞数并与对照组对比。同时检测转染组对化疗药物顺铂的敏感性。体内实验:将转染细胞注射于裸鼠皮下观察成瘤时间和肿瘤转移情况。结果NM23H1对卵巢癌细胞生长有一定抑制作用;实验组与对照组比较,实验组所形成的集落少,集落中细胞数目也少;被转染的细胞比对照组对顺铂更敏感,细胞死亡数多;裸鼠体内实验表明NM23H1对卵巢癌有抑制生长作用,主要对淋巴道转移有一定程度的抑制作用。结论NM23H1经高转移卵巢癌细胞株的体外实验发现对卵巢癌细胞生长及转移均有一定抑制作用;可增加对顺铂治疗的敏感性;体内实验表明,NM23H1可抑制癌瘤生长,对卵巢癌淋巴道转移有一定抑制作用。     

RhoC基因对肝癌细胞促血管生长因子表达的影响

目的:观察RhoC基因对肝癌HepG2细胞表达促血管生长因子（VEGF，bFGF）的影响。 方法:将pcDNA3.1-RhoC重组质粒和空载体pcDNA3.1转染HepG2细胞，用RT-PCR及免疫组化检测HepG2细胞的RhoC mRNA及RhoC蛋白表达情况;RT-PCR及免疫组化检测HepG2细胞VEGF和bFGFmRNA及蛋白的表达。将转染pcDNA3.1-RhoC重组质粒和空载体pcDNA3.1的HepG2细胞接种裸鼠，观察肿瘤的成瘤率。结果:与转染空载体pcDNA3.1的HepG2细胞相比，转染pcDNA3.1-RhoC重组质粒的细胞表达RhoC mRNA及RhoC 蛋白增强，其表达VEGF和bFGFmRNA及蛋白明显增强（P＜0.01）;重组质粒转染组成瘤率高于空载体组。结论:RhoC表达可促进HepG2细胞表达血管内皮生成因子。RhoC可促进肝癌细胞分泌促血管生长因子，可能是促进肝癌侵袭、转移的机制之一。     

肝细胞性肝癌中E-cadherin和nm23-h1的表达与转移的关系

目的　探讨E -cadherin和nm2 3 -h1表达与肝细胞性肝癌 (HCC)侵袭转移的关系。方法　应用免疫组化技术S -P法 ,检测 40例癌组织和癌旁组织中E -cadherin和nm2 3 -h1的表达水平 (用平均吸光度表示 ) ,结合肿瘤的侵袭转移能力、Edmondson分级进行分析。结果　 40例肝癌组织中E -cadherin和nm2 3 -h1的表达强度均弱于癌旁组织中的表达 ;E -cadherin和nm2 3-h1的表达强度与肿瘤的分化程度、侵袭转移能力密切相关 ;对E -cadherin和nm 2 3 -h1在癌旁和癌组织、有侵袭转移组中的表达进行相关性分析 ,均具有明显正相关。结论　E -cadherin和nm2 3 -h1的表达水平能反映HCC的分化程度和侵袭转移能力 ;两种蛋白的表达水平之间呈明显正相关 ;联合检测两种蛋白在肿瘤组织中的表达 ,对临床判断HCC的预后有一定的指导意义