miR-146a在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义

目的观察microRNA-146a（miR-146a）在乳腺浸润性导管癌及癌旁正常对照组织中的表达,探讨miR-146a的表达与乳腺癌临床病理特征的关系及其对乳腺癌发生发展的影响。方法采用组织芯片平台,应用原位杂交方法检测65例乳腺浸润导管癌及癌旁正常对照组织中miR-146a的表达。结果乳腺浸润性导管癌miR-146a阳性率低于癌旁正常对照组织（44.6%vs 66.2%,P〈0.05）;乳腺浸润性导管癌中miR-146a的表达与淋巴结转移有关联（P〈0.01）,与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、TNM分期、ER、PR、c-erbB-2、ki67、p53、E-cadherin过表达均无相关性（P〉0.05）。结论 miR-146a在乳腺浸润性导管癌中表达下调,提示其可能作为重要的抑癌因子参与乳腺癌的发生发展过程,并可能成为乳腺癌新的肿瘤标记物或预后因子。     

p16INK4a蛋白可作为乳腺癌特异性分子标志

目的探讨p16INK4a 蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法收集2014 年~2015 年间手术切除的132 例乳腺癌标 本,采用罗氏全自动免疫组化染色仪进行免疫组织化学染色,检测ER、PR、Her-2、Ki67、CK5/6、和p16INK4a表达,并按照不同 表达模式进行结果判读和分子分型,观察p16INK4在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌免疫表型、分子亚型及临床指标的相关性。 结果132例浸润性乳腺癌中Luminal A型58例、Luminal B型32例、Her-2型21例、basal-like（BLBC）型12例、Normal-like型9 例。p16INK4a蛋白表达阴性（0）、弱阳性（1+）、阳性（2+）和强阳性（3+）表达样本分别占总数的5.30%（7/132）、11.36%（15/132）、 30.30%（40/132）、53.03%（70/132）。按照p16INK4a表达强度,将阴性（0）和弱阳性（1+）病例合并为阴性组（≤1+）、将阳性（2+） 和强阳性（3+）病例合并为阳性组（≥2+）,p16INK4a 阴性（≤1+）表达率为16.67%（22/132）、p16INK4a 阳性（≥2+）表达率为 83.33%（110/132）。按照构成比进行统计分析,发现p16INK4a蛋白的表达强度除在不同年龄分组中具有统计学差异（P<0.05） 之外,与ER、PR、Her-2及分子分型和是否存在转移之间均无统计学差异（P>0.50）。结论p16INK4A代偿性高表达是浸润性乳 腺癌细胞周期异常的主要机制,且p16INK4A可作为浸润性乳腺癌细胞特异性的分子标志,采用IHC技术检测p16 INK4a 的表 达不仅为乳腺癌诊断提供了一种重要方法,也为乳腺癌的机制研究提供有价值的信息。     

不同分子亚型青年乳腺癌表皮生长因子受体表达及其临床病理分析

目的探讨不同分子亚型青年乳腺癌表皮生长因子受体(EGFR)表达情况及其与临床病理的关系。方法收集广东省江门市中心医院2003年5月~2014年7月经手术切除及病理证实的青年(年龄≤35岁)浸润性乳腺癌182例标本,应用Envision二步法检测肿瘤组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(HER2)及EGFR表达情况,分析EGFR在不同分子亚型青年乳腺癌的表达情况及其与临床病理的关系。结果 182例青年乳腺癌中Luminal A型、Luminal B型、HER2过表达型和Basal-like型EGFR的阳性率分别为43.5%(48/108)、22.2%(2/9)、93.6%(44/47)和73.1%(19/26);不同分子亚型青年乳腺癌中EGFR阳性率差异有统计学意义(χ2=35.154,P<0.05),其中HER2过表达型EGFR阳性表达率最高。不同分子亚型青年乳腺癌的EGFR阳性表达与肿瘤大小和组织学分级等无关(P>0.05),但与TNM分期、淋巴结转移数及远处转移有关(P<0.05)。患者TNM分期和HER2表达是影响患者预后的独立因素(相对危险度分别为6.013、2.612,P<0.05)。结论不同分子亚型青年乳腺癌中EGFR阳性表达率不同,不同亚型青年乳腺癌EGFR阳性表达与TNM分期和HER2表达有关,且两者为影响患者预后的独立因素。     

CD44^＋/CD24^-表型在乳腺癌分子亚型中的表达和分布

目的：研究CD44＋/CD24-表型在乳腺癌中的表达并探讨其与乳腺癌各分子亚型的相关性.方法：根据免疫学标志物（ER,PR,HER2,CK5/6,P53）把217例乳腺癌划分为5类分子亚型：basal-like型、LuminalA型、LuminalB型、Her2过表达型和Normalbreast-like型.应用双重免疫组织化学检测CD44/CD24双染的情况,分析CD44＋/CD24-表型与乳腺癌5个分子亚型的相关性.结果：217例乳腺癌病例中,luminalA型130例、luminalB型15例、HER2过表达型21例、basal-like型29例、Normalbreast-like型22例.38%的乳腺癌组织表达CD44＋/CD24-表型,CD44＋/CD24-表型在basal-like型、Lu-minalA型、LuminalB型、Her2过表达型、Normalbreast-like型乳腺癌中表达率分别为69.0%,36.2%,26.7%,19.0%,31.8%.CD44＋/CD24-表型在乳腺癌各分子亚型中的表达具有显著差异性（P=0.003）,高表达在basal-like乳腺癌中（69%）.结论：CD44＋/CD24-乳腺癌干细胞与basal-like乳腺癌有相关性; 其他乳腺癌干细胞标志物仍需得到进一步鉴定.     

JunD在浸润性乳腺癌分子亚型中的表达及意义

【目的】分析JunD在浸润性乳腺癌分子亚型及乳腺良性恶性病变中的表达差异及临床意义。【方法】采用免疫组织化学SP法检测JunD在160例浸润性乳腺癌组织、191例乳腺增生组织及20例正常乳腺组织中的表达情况,分析JunD在浸润性乳腺癌分子亚型及乳腺增生性病变中的的表达差异及临床意义。【结果】①与其他分子亚型相比较,JunD在浸润性乳腺癌TNBC亚型中的表达水平明显升高（P<0.05）,其他亚型之间两两比较差异无统计学意义（P>0.05）。②JunD在乳腺癌组织中的表达水平明显低于乳腺增生组织及正常乳腺组织（P<0.01）。③JunD在乳腺癌组织中的高表达率与低组织学分级相关（P<0.01）,与肿物直径大小、年龄、淋巴结转移、ER、PR及临床分期无关（P>0.05）。【结论】JunD在浸润性乳腺癌TNBC亚型中显著高表达,有可能为TBNC亚型乳腺癌患者个性化靶向治疗提供一定方向;JunD在乳腺癌组织中的表达水平明显低于乳腺增生组织及正常乳腺组织,有利于乳腺良恶性病变的鉴别诊断。     

三阴性乳腺癌治疗的最新研究进展

1概述 乳腺癌是一种异质性肿瘤,在组织形态、免疫表型、生物学行为及治疗反应上存在着极大的差异。Perou等通过CD-NA微阵列技术分析乳腺癌基因表达,发现2类ER阳性亚型：导管A型（1uminalA）和导管B型（1uminalB）乳腺癌,临床预后最好;而3类ER阴性亚型：HER-2过度表达型（HER-2over-expression）、基底样型（basal-like,BBC）和正常型（normal-1ike）乳腺癌,对治疗反应和预后存在显著差异。三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer,TNBC）约占所有乳腺癌的12．5％-15％,根据临床和组织学特征还可分为basal-1ike（75％）和non-basal-like（25％）2种亚型。     

EZH2与乳腺癌分子亚型的关系及对临床病理的意义

［摘要］目的：研究EZH2与乳腺癌分子亚型和临床病理参数的关系,探讨EZH2对评价乳腺癌分子亚型预后的价值。方法：回顾分析80例临床病理资料及术后随访资料均完整的乳腺癌患者,通过免疫组织化学Max Vision快捷法,检测ER、PR、HER-2、CK5/6、CK14、EGFR、EZH2蛋白的表达,分析EZH2阳性表达与乳腺癌分子亚型及临床病理参数的关系,观察EZH2对患者预后的影响。结果：80例乳腺癌病例中,Luminal型49例,HER-2（+）型8例,Basal-like型20例,Normal breast-like型3例;各分子亚型只与患者绝经与否具有相关性;Luminal型乳腺癌总生存率最高,Basal-like型最低（P<0.05）。EZH2阳性表达率45.00%,其阳性表达与患者同侧腋窝淋巴结转移与否和肿瘤组织学分级及术后临床分期相关（P<0.05）;EZH2在Luminal型、HER-2（+）型、Basal-like型乳腺癌阳性表达率分别为34.60%、50.00%和70.00%,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：EZH2阳性表达提示患者预后不良;EZH2有望成为Basal-like型乳腺癌的特异性标记物之一。     

乳腺癌组织miR-23a、miR-1247-5p表达与临床病理特征及预后的关系

目的检测微小RNA（miR）-23a、miR-1247-5p在乳腺癌组织中的表达情况,并分析miR-23a、miR-1247-5p表达与乳腺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法收集2012年1月至2013年12月在昆山市第二人民医院行手术切除的150例乳腺癌患者术后的乳腺癌组织及癌旁正常组织样本,采用RT-PCR法检测组织样本中miR-23a、miR-1247-5p表达水平。单因素分析miR-23a、miR-1247-5p表达水平与患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析不同miR-23a、miR-1247-5p表达水平患者的术后生存情况;ROC曲线分析miR-23a、miR-1247-5p对患者预后的预测价值。结果与癌旁正常组织相比,乳腺癌组织miR-23a表达水平较高、miR-1247-5p表达水平较低（均P＜0.05）。乳腺癌组织miR-23a表达水平与肿瘤直径、分子分型、淋巴结转移、TNM分期有关（均P＜0.05）,miR-1247-5p表达水平与组织病理分级、分子分型、淋巴结转移、TNM分期有关（均P＜0.05）。miR-23a高表达、miR-1247-5p低表达患者的术后5年总生存率及中位生存时间均分别低于miR-23a低表达、miR-1247-5p高表达患者（均P＜0.05）。检测乳腺癌组织miR-23a、miR-1247-5p表达水平对患者预后预测的AUC分别为0.709（95%CI：0.625~0.793）、0.690（95%CI：0.606~0.775）,灵敏度分别为0.812、0.749,特异度分别为0.637、0.622。结论乳腺癌组织miR-23a表达上调,miR-1247-5p表达下调,且与患者预后有关。检测乳腺癌患者术后癌组织miR-23a、miR-1247-5p表达水平对患者预后预测有一定的临床价值。     

不同亚型乳腺癌的治疗效果及预后分析

目的：探讨不同亚型乳腺癌的治疗效果及其预后。方法：回顾性分析2003年6月～2012年12月在我院初诊并接受治疗的223例乳腺癌患者的临床资料,采用免疫组织化学方法确定其分子分型,分析不同亚型乳腺癌的临床病理特征,并分析采用同一种治疗方法治疗不同亚型乳腺癌的治疗效果和预后。结果：在本组病例中,乳腺癌的分型在不同肿瘤直径、组织学分级以及淋巴结转移间的分布差异均有统计学意义（P〈0．05）;经卡方检验,复发率最低的是LuminalA型,其次是LuminalB型,人表皮生长因子受体-2（HER-2）阳性型及基底细胞样型复发率最高（P〈0．05）;4种亚型的病死率差异也具有统计学意义（P〈0．05）,最低的是LuminalA型,HER=2过表达型的病死率最高;LuminalA型乳腺癌的预后最好,其次为LuminalB型、基底样细胞型,HER-2过表达型乳腺癌的预后最差（P=0．016）。结论：乳腺癌的分子分型对评估乳腺癌的病情严重程度、指导治疗、预测预后提供了重要的依据,为分子靶向治疗提供了新的方向。     

雄激素受体在浸润性乳腺癌基于免疫组织化学的分子亚型中的表达及意义

目的:探讨雄激素受体在浸润性乳腺癌基于免疫组织化学的分子亚型中的表达及意义。方法:选取2017年1月-2018年12月在广东省第二人民医院手术切除的浸润性乳腺癌标本123例,运用免疫组织化学方法对雄激素受体(AR)的表达情况进行检测,观察AR、ER、PR、Ki-67、HER-2的阳性表达情况、AR与乳腺癌患者临床病理特征的关系、AR与乳腺癌分子亚型的关系,并分析其临床意义。结果:经过免疫组织化学检测后可知,AR的阳性表达率为82.93%;AR与淋巴结转移、ER、PR、Ki-67均有密切关联(P0.05),AR与年龄、肿瘤大小、临床分期、组织分级、HER-2均无关联(P0.05);AR与Luminal A型、Luminal B型、HER-2过表达型、三阴性型均有密切关联(P0.05)。结论:AR在乳腺癌组织中具有较高的表达率,在不同的分子亚型中AR的阳性表达率具有较大差异;AR阳性表达与ER、PR、Ki-67及腋淋巴结转移均有密切关联;同时AR可能将成为治疗乳腺癌的新一代靶向药物。     

ACL的构建及其对结直肠癌HCT116细胞增殖和迁移的作用

目的探讨miR-363-5p靶向三结构域蛋白14(TRIM14)对3种乳腺癌细胞系凋亡的影响。 方法采用实时荧光定量PCR法比较不同化疗药物诱导3种乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-435、MCF-12A)中miR-363-5p和TRIM14 mRNA表达水平,采用免疫组化法检测不同亚型乳腺癌组织TRIM14表达情况。采用Western blotting检测TRIM14蛋白表达。采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。应用生物信息学方法预测miR-363-5p与TRIM14的结合位点,通过干扰miR-363-5p和TRIM14研究miR-363-5p对3种乳腺癌细胞中TRIM14的调控作用。Pearson相关分析各亚型乳腺癌组织中miR-363-5p与TRIM14的相关性。 结果3种化疗药物均能促进细胞凋亡,化疗药物处理3种亚型乳腺癌细胞后miR-363-5p表达上升,TRIM14 mRNA表达下降。荧光素酶报告基因实验发现TRIM14是miR-363-5p的靶基因。过表达miR-363-5p后,3种亚型乳腺癌细胞凋亡率上升,TRIM14蛋白和mRNA下降。敲低TRIM14后3种亚型乳腺癌细胞凋亡率上升,过表达TRIM14后3种亚型乳腺癌细胞凋亡率下降。3种亚型乳腺癌组织miR-363-5p与TRIM14表达呈负相关。 结论化疗药物诱导3种亚型乳腺癌细胞后miR-363-5p表达上升,miR-363-5p靶向抑制TRIM14表达,促进3种乳腺癌细胞系凋亡。     

miR-363-5p靶向TRIM14对化疗药物诱导的乳腺癌细胞系凋亡的影响

目的探究抑制IL-17A的表达对脓毒血症小鼠急性肾脏损伤的影响。 方法24只小鼠按照随机数字表法均分为对照组、模型组和抑制剂组。模型组和抑制剂组小鼠腹腔注射高剂量LPS(10 mg/kg)建立脓毒血症急性肾损伤模型,抑制剂组给与IL-17A抑制剂SGC-CBP30(30 mg/kg)。检测血清肌酐、尿素氮和炎症因子水平,分析肾功能的变化,通过HE染色和过碘酸雪夫染色分析肾脏病理变化,分析肾脏炎症因子水平和细胞凋亡蛋白的变化。 结果IL-17A抑制剂处理能够显著下调脓毒血症小鼠血清肌酐、尿素氮和炎症因子IL-6和TNF-α水平(P＜0.05);抑制IL-17A的表达能够显著改善脓毒血症小鼠肾脏的损伤,下调肾脏炎症因子和细胞凋亡蛋白的表达。 结论抑制IL-17A的表达能够改善脓毒血症小鼠急性肾损伤。     

血管内皮生长因子在乳腺癌中的表达及与分子分型的关系

目的: 检测血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺癌中的表达情况,探讨其与乳腺癌临床病理参数及分子分型之间的关系.方法: 采用免疫组织化学法检测乳腺癌标本中VEGF、雌激素受体、孕激素受体、人表皮生长因子受体2(Her-2)及增殖细胞核抗原67的表达情况.对Her-2(2+)的组织进行荧光原位杂交检测.根据雌激素受体、孕激素受体、Her-2及增殖细胞核抗原67的表达情况,将乳腺癌标本分为4个亚型,检测VEGF在各分子亚型中的表达情况.结果: VEGF在乳腺癌组织组中的阳性率显著高于良性病变组及癌旁组织组(P<0.01).VEGF在淋巴结转移者中的阳性率高于无淋巴结转移者(P<0.05).VEGF的阳性率均随着组织学分级、临床分期的升高而升高(P<0.05~P<0.01).在不同乳腺癌分子亚型中,Basal-like型乳腺癌组织中VEGF的阳性率高于Luminal A型(P<0.05).结论: VEGF参与乳腺癌的发生、发展及浸润转移过程,有可能成为指导临床治疗的重要靶向指标之一.将乳腺癌中VEGF的表达情况与乳腺癌分子分型相互结合,有助于肿瘤恶性程度及预后的判断,有可能成为指导分子分型的又一重要指标.     

vMIP-ⅡN端肽对趋化因子受体CXCR4表达调控的机制研究

目的:探讨病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ（vMIP-Ⅱ）对乳腺癌细胞CXCR4表达的影响及分子机制。方法:设计并合成扩增CXCR4核心启动子基因序列,构建荧光素酶报告载体,酶切鉴定;通过检测报告基因荧光素酶活性反映病毒巨噬细胞炎性蛋白N端21肽（NT21MP）对CXCR4启动子的作用;通过荧光定量PCR技术和Western blot检测CXCR4干扰或过表达、HER-2干扰,以及miRNAs抑制剂和类似物转染后相关基因及miRNAs表达;采用磺酰罗丹明B（SRB）染色法检测细胞增殖活性,PI染色法检测细胞周期,Annexin V/PI染色法检测细胞凋亡。结果:NT21MP下调CXCR4的表达,并上调miR-125b、miR-135a和miR-146a的表达（P < 0.05~P < 0.01）;NT21MP降低CXCR4核心启动子的活性;SP1为CXCR4核心启动子高频结合转录因子,miR-135a可下调SP1的表达（P < 0.01）;过表达CXCR4上调HER-2表达（P < 0.01）,而干扰CXCR4表达则下调HER-2表达（P < 0.01）;miR-125b可下调HER-2的表达（P < 0.01）;HER-2表达下调诱导miR-146a的表达;miR-146a抑制CXCR4表达（P < 0.01）;相对于空白对照组,miR-146a和miR-135a均可抑制细胞增殖,阻断细胞周期,并诱导凋亡（P < 0.01）。结论:NT21MP通过诱导miR-125b、miR-135a和miR-146a负调控CXCR4的表达,从而抑制乳腺癌细胞的增殖能力,为NT21MP应用于乳腺癌患者的治疗提供了理论基础。     

新疆妇女宫颈病变组织 miR-146a/133b 的表达及临床意义

目的：探讨miR-146 a/133 b在新疆维、汉民族宫颈组织中的差异性表达及其临床意义。方法采用RT-qPCR法检测 miR-146a/133b 在石蜡包埋的宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌组织中的相对表达量,分析其在宫颈癌发生、发展中的临床意义。结果与宫颈炎组织比,CIN 和宫颈癌组织 miR-146a/133b 的表达水平显著升高(P <0.05),且随宫颈病变的加重,两者的表达水平逐渐升高,宫颈癌组织中维、汉民族 miR-146a 存在差异性表达(P <0.05)。结婚年龄小于20岁、肿瘤直径大于或等于4 cm、有 HPV 感染的宫颈癌组织中 miR-146a/133b 呈高表达(P <0.05)。结论miR-146a/133b 参与宫颈癌的发生、发展,可能成为宫颈癌病情预测及评估新的分子标志物。     

miR-195在乳腺癌患者血浆中的表达及其临床意义

目的：探讨mtR-195在乳腺浸润性导管癌患者术前、术后2周血浆中的表达及其与乳腺癌临床病理特征的相关性。方法：以miR-16为内参,采用茎环RT-qPCR方法检测48例术前、术后2周乳腺浸润性导管癌患者及35例健康对照者血浆中miR-195的表达,并分析其表达与乳腺浸润性导管癌临床病理指标的关系。结果：乳腺浸润性导管癌患者血浆中miR-195的表达较健康对照者明显升高（P〈0．05）,术后2周表达明显降低至健康对照者水平。ROC曲线显示,血浆miR-195评价乳腺浸润性导管癌的敏感性和特异性可达94．4％和68．8％。与临床特征相关性分析统计未见血浆miR-195表达与乳腺浸润性导管癌肿块大小、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、人类表皮生长因子受体-2（Her-2）状态及淋巴结转移状态等临床病理特征有明显相关（P〉0．05）。结论：血浆中miR-195的异常表达可作为乳腺癌诊断的新的肿瘤标志物。     

宫颈癌组织中微小 RNA 的检测及其临床意义

目的：探讨miR-21、miR-146a和miR-224在宫颈癌组织中的表达及其临床意义。方法采用实时定量PCR仪检测60例正常宫颈组织及60例宫颈癌组织中miR-21、miR-146a和miR-224表达情况,t检验分析2种组织中miR表达量的差异及miR与宫颈癌临床病理特征的关系。对宫颈癌病人进行随访,采用Kaplan-Meier法log-rank检验和Cox比例风险回归模型分析miR表达水平与宫颈癌病人预后的关系。结果 miR-21在子宫颈癌组织和正常组织中的表达量分别为11.02±4.83和10.36±4.79,miR-146a分别为24.68±7.92和22.43±7.25,2项指标的组间差异均无统计学意义（P＞0.05）;miR-224在子宫颈癌组织和正常组织中的表达量分别为5.78±1.03和3.35±0.93,子宫颈癌组织明显高于正常组织（P＜0.001）。 miR-224表达量在低分化、高FIGO分级、有淋巴结转移和人乳头瘤病毒（HPV）感染阳性的宫颈癌组织中显著高于高分化、低FIGO分级、无淋巴结转移和无HPV感染的宫颈癌组织（ P＜0.05）,进一步的Logistic回归多因素分析结果显示,低分化、高FIGO分期及有淋巴结转移为miR-224高表达（＞5.65）的独立危险因素（P＜0.05）。宫颈癌组织中miR-224高表达的患者比低表达的患者中位生存时间更短（P＜0.05）,Cox模型多因素分析显示,miR-224表达量是影响患者生存预后的独立因素（ P ＜0.05）。结论 miR-224表达与宫颈癌的分化和转移有关,是影响宫颈癌病人预后的危险因素,可作为判断宫颈癌预后的标志物。     

miR-146a在结肠癌中的表达及意义

目的探讨miR-146a在结肠癌中的表达与功能。方法qRT-PCR分析结肠癌组织、毗邻正常细胞组织以及结肠癌细胞系
miR-146a的表达水平,MTT法测定结肠癌细胞系SW620转染miR-146a模拟物后的增值,FACS法检测细胞周期与凋亡状况。
结果43 份结肠癌组织样品中,36 份呈现miR-146a 表达量下调,并且该下调表达情况与肿瘤增殖情况（P=0.010）相一致,
miR-146a表达量还与患者肿瘤大小、临床分期密切相关,同时miR-146a表达量较高的患者较比表达量低的患者寿命要长（P=
0.011）,MTT检测表明,miR-146a能抑制细胞增殖（P<0.005）,流式细胞仪检测结果表明,转染miR-146a的SW620细胞相比对
照组细胞,凋亡比例上升（11.9%∶5.9%）,但是对细胞周期没有什么影响。结论miR-146a可能是结肠癌新的抗癌靶标,能抑制结
肠癌细胞增殖,在结肠癌中具有重要作用。