苁蓉舒痉颗粒对帕金森病患者黑质代谢物影响随机对照研究

目的 评估苁蓉舒痉颗粒对帕金森病（PD）患者黑质代谢物影响的临床疗效及安全性。方法 采用双中心分层随机化的方法,两中心分别将符合入组标准的PD患者30例,随机分2组,观察组15例予苁蓉舒痉颗粒加基础西药治疗,对照组15例予中药安慰剂加基础西药治疗,疗程12周。治疗前后进行国际运动障碍学会帕金森病综合评定量表（MDS-UPDRS）评分、磁共振波谱检测、肌电图检查、39项帕金森病生活质量问卷（PDQ-39）、非运动症状评定量表（NMSS）评分,并检测血尿常规、肝肾功能、心电图,记录不良反应事件。结果 两中心意向性分析人群60例,安全性分析人群60例,磁共振波谱符合方案人群53例,肌电图符合方案人群45例。与本组治疗前比较,对照组治疗后MDS-UPDRSⅠ、PDQ-39及NMSS评分均降低（P<0.05）;观察组治疗后MDS-UPDRS量表各部分评分及总分、PDQ-39与NMSS评分均降低,病轻侧黑质N-乙酰天冬氨酸/肌酸（NAA/Cr）值升高（P<0.05）。与对照组同期比较,观察组治疗后MDS-UPDRSⅠ、MDS-UPDRSⅢ、PDQ-39及NMSS评分均降低,病轻侧黑质N...     

电针对帕金森病小鼠SIRT3/PINK1/Parkin通路介导的线粒体自噬的影响

目的：观察电针“风府”“太冲”“足三里”对帕金森病（PD）小鼠中脑黑质沉默调节蛋白3(SIRT3及其下游PTEN诱导的假定激酶1(PINK1)、PARK2基因编码蛋白（Parkin）介导的线粒体自噬的影响,探讨电针治疗PD的可能机制。方法：C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、电针组、假电针组,每组12只。采用腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶复制PD小鼠模型。电针组小鼠给予针刺“风府”“太冲”“足三里”,每天1次,每次20 min,连续12 d。以旷场实验评估各组小鼠的运动能力;免疫组织化学法检测各组小鼠中脑黑质区酪氨酸羟化酶（TH）、α-突触核蛋白（α-syn）阳性表达;透射电镜观察黑质区神经元超微结构;免疫荧光染色法检测小鼠黑质自噬轻链蛋白3(LC3)的阳性表达;实时荧光定量PCR法检测小鼠黑质TH、α-syn、SIRT3、PINK1、Parkin和线粒体自噬受体蛋白P62、Beclin-1、LC3ⅡmRNA表达水平;Westernblot法检测小鼠黑质TH、α-syn、SIRT3、PINK1、Parkin、P62、Beclin-1、LC3Ⅱ蛋白表达水平。结...     

葛根芩连汤对db/db糖尿病小鼠SIRT1/FoxO1自噬通路的影响

目的：探究葛根芩连汤是否通过调控沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框蛋白O1(FoxO1)自噬通路减轻db/db糖尿病小鼠胰岛素抵抗。方法：选取SPF级自发性2型糖尿病动物模型db/db小鼠75只及对照db/m小鼠15只予维持饲料喂养1周后检测血糖,随机分为6组,每组15只。正常组(生理盐水0.2 g·kg^-1)、二甲双胍组(0.2 g·kg^-1)、葛根芩连汤高、中、低剂量组(31.9、19.1、6.9 g·kg^-1)及模型组(生理盐水0.2 g·kg^-1),连续灌胃给药8周,1次/d,使用罗氏血糖仪检测空腹血糖(FBG),全自动生化分析仪检测血清中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清空腹胰岛素(INS)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏组织中Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)及SIRT1/FoxO1自噬通路...     

基于AHP-CRITIC优选苁蓉舒痉颗粒的提取工艺北大核心CSCD

通过比较层次分析法(AHP)、基于指标相关性的权重确定方法(CRITIC)、AHP-CRITIC混合加权法确定指标权重系数,并对正交试验各组指标成分(松果菊苷、丹酚酸B、芍药苷、出膏率)进行综合评分比较,优选苁蓉舒痉颗粒的提取工艺。结果显示AHP-CRITIC混合加权法科学优选出最佳提取工艺为加复方饮片6倍量水、提取2次、每次1 h,3次重复性验证试验指标成分松果菊苷、丹酚酸B、芍药苷的平均质量分数分别为0.72、9.34、5.92 mg·g^(-1),平均出膏率为47.18%。AHP-CRITIC混合加权法结合正交试验确定苁蓉舒痉颗粒的提取工艺稳定可行,可用于产业化生产。     

基于SIRT1/FoxO1通路探究小檗碱抑制卵巢颗粒细胞凋亡与自噬的调节机制

目的：通过观察小檗碱(BBR)对卵巢颗粒细胞衰老的影响,探究其保护作用及调节机制。方法：应用H₂O₂诱导建立人卵巢颗粒样肿瘤(KGN)细胞衰老模型;设置空白组、模型组、BBR高剂量(1μmol·L^-1)组和BBR低剂量(0.5μmol·L^-1)组,模型组与BBR组加入浓度为10μmol·L^-1 H₂O₂,孵育40 min。通过细胞增殖与活性检测(CCK-8)分析检测BBR对KGN细胞增殖的影响;通过β-半乳糖苷酶染色检测BBR对KGN细胞衰老状态的影响;应用流式细胞术检测BBR对KGN细胞凋亡和ROS含量的影响;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测BBR对KGN细胞抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)/促凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)比值、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、叉头框转录因子O1(FoxO1)及过氧化氢酶(CAT)mRNA表达的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测BB...     

从线粒体自噬探讨帕金森病中西医微观层次的结合点

帕金森病是一种常见的中老年人神经系统变性疾病,临床以静止性震颤、运动迟缓、肌强直和姿势步态异常为主要特征.本病的药物治疗是个复杂的问题,迄今为止尚无根治药物,复方左旋多巴仍是控制帕金森病运动症状的有效药物,但几乎所有的病例均需终身服药,以控制症状,但长期使用可导致运动并发症如疗效减退、开-关现象、异动症等.近年来开展的...     

扶正解毒方对病毒性心肌炎大鼠氧化应激及Sirt1/FoxO3a通路的影响

目的 基于沉默信息调节因子2相关酶1(Sirt1)/叉头蛋白O3a(FoxO3a)通路探究扶正解毒方对病毒性心肌炎(VMC)大鼠的影响。方法 大鼠腹腔注射柯萨奇B3病毒(CVB3)法建立VMC模型,随机分为模型组、扶正解毒方低剂量组(28 g/kg)、扶正解毒方高剂量组(112 g/kg)、EX527组(Sirt1抑制剂,1μg/kg)、扶正解毒方(28 g/kg)+EX527(1μg/kg)组,每组15只,另取未造模的正常大鼠15只为正常组,连续给药10 d。检测大鼠超声心动图Tie指数,HE染色观察心肌组织病理损伤情况,ELISA法检测血清心肌损伤标志物、氧化应激水平,TUNEL法检测心肌组织细胞凋亡率,免疫组化法检测心肌组织Sirt1表达,Western blot法检测心肌组织FoxO3a、磷酸化FoxO3a(p-FoxO3a)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)、细胞周期抑制蛋白p27、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase3)表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠心肌细胞坏死加重,大鼠出现死亡,Tie指数、血清心肌损伤标志物、氧化...     

加减薯蓣丸介导线粒体自噬改善APP/PS1小鼠氧化应激损伤及学习记忆能力

目的:探讨加减薯蓣丸对阿尔茨海默病(AD)小鼠学习记忆能力减退的作用及相关机制。方法:将40只5月龄SPF级APP/PS1小鼠随机分为模型组、多奈哌齐组、加减薯蓣丸组、加减薯蓣丸+氯喹(CQ)组,每组10只,同背景野生型C57BL/6J小鼠10只设定为正常组。其中加减薯蓣丸组予以加减薯蓣丸煎剂(10 g·kg^-1)灌胃,多奈哌齐组予以盐酸多奈哌齐溶液(0.45 mg·kg^-1)灌胃,加减薯蓣丸+CQ组则在加减薯蓣丸组基础上予以CQ(10 mg·kg^-1)腹腔注射1次,与灌胃同时进行,正常组与模型组予以等量生理盐水灌胃,1次/d,共35 d。给药结束后,Morris水迷宫实验和新物体识别实验检测小鼠空间记忆能力;原位末端标记法(TUNEL)染色检测小鼠海马CA1神经元凋亡水平;生化检测小鼠海马神经元活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;透射电镜观察小鼠海马CA1区神经元线粒体超微结构;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠海马线粒体自噬接头蛋白(p62)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、PTEN诱...     

红景天苷调控SIRT1/FoxO1通路对缺氧复氧人冠状内皮细胞的作用及机制探讨

目的 探讨红景天苷对缺氧复氧人冠状内皮细胞(HCAEC)的保护效应及机制。方法 通过缺氧复氧构建HCAEC缺血/再灌注损伤模型,给予不同剂量红景天苷(10、20、40μmol·L^-1)进行干预。采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(ROS)水平,分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)活性、丙二醛(MDA)含量,蛋白免疫印迹法检测二价金属离子转运体1(DMT1)、膜铁转运蛋白(FPN)、沉默信息调节因子1(SIRT1)、叉头框转录因子1(FoxO1)乙酰化表达水平。利用siRNA沉默SIRT1后,给予高剂量红景天苷干预,检测SOD、GSH和MDA含量。结果 与空白对照组比,缺氧复氧模型组中细胞活力、SOD、GSH活性和FoxO1乙酰化水平降低,细胞凋亡率、MDA含量、ROS水平、SIRT1、DMT1、FPN表达升高(P<0.05,P<0.01)。与缺氧复氧模型组比,低、中、高剂量红景天苷干预后,各组上述指标均呈现逆转,中、高剂量组差异有统计学意义(P<0.05),且具有一定的剂量依赖性(P<0.05...     

肾舒胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏mTOR、beclin-1自噬通路的表达及意义

目的:研究肾舒胶囊对STZ诱导的糖尿病肾病(DN)大鼠肾损伤的改善作用及机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、肾舒胶囊低剂量组、肾舒胶囊高剂量组、厄贝沙坦组,每组10只。除空白对照组外,余组予高脂高糖饲料喂养2个月后,连续5天腹腔注射链脲佐菌素(35 mg/kg)诱导建立DN模型。空白对照组、模型组大鼠予以生理盐水灌胃,肾舒胶囊低、高剂量组大鼠予以肾舒胶囊溶液灌胃,厄贝沙坦组大鼠予以厄贝沙坦溶液灌胃。1周后,检测各组小鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)指标,采用HE和PAS染色检测肾脏病理组织改变,以Western Blot检测p-mTOR、beclin-1蛋白含量,以Realtime-PCR检测beclin-1 mRNA表达水平。结果:(1)肾功能指标:与空白对照组比较,模型组大鼠Scr、BUN明显升高,差异有统计学意义(P0.01);与模型组比较,肾舒胶囊低、高剂量组和厄贝沙坦组大鼠Scr、BUN水平降低,差异有统计学意义(P0.05);与厄贝沙坦组比较,肾舒胶囊低剂量组与高剂量组Scr、BUN有所下降,但差异无统计学意义;与肾舒胶囊低剂量组比较,肾舒胶囊高剂量组大鼠Scr、BUN降低,差异无统计学意义。(2)肾脏形态学:HE和PAS染色结果显示,空白对照组大鼠肾小球、肾小管和肾间质形态结构无异常改变;模型组大鼠肾组织可见炎性细胞浸润,肾小球系膜细胞增生,基底膜增厚,肾小管上皮细胞空泡变性,管腔扩张。肾舒胶囊低、高剂量组及厄贝沙坦组大鼠可见肾小球、肾小管、肾间质病理损伤程度减轻,其中肾舒胶囊高剂量组大鼠肾脏损害明显改善。(3)自噬通路因子:与空白对照组比较,模型组p-mTOR、beclin-1蛋白表达水平和beclin-1 mRNA表达水平均显著增高(P0.05或P0.01);与模型组比较,肾舒胶囊低、高剂量组及厄贝沙坦组大鼠肾组织p-mTOR、beclin-1蛋白表达水平和beclin-1 mRNA表达水平均有不同程度下降(P0.05或P0.01)。结论:肾舒胶囊能明显改善糖尿病大鼠早期肾脏损害,其机制可能与抑制肾组织mTOR、beclin-1的表达水平有关。     

柴胡疏肝散对功能性消化不良大鼠胃组织线粒体功能及线粒体自噬的影响

目的 观察柴胡疏肝散对功能性消化不良（FD）模型大鼠胃动力、胃组织线粒体功能及线粒体自噬的影响,揭示柴胡疏肝散防治FD的作用机制。方法 将32只SPF级SD大鼠适应性喂养1周后随机分为正常组、模型组、柴胡疏肝散组（4.8 g·kg^-1）,多潘立酮组（4.5 mg·kg^-1）,每组8只。除正常组外,其余3组均采用改良夹尾刺激法复制FD大鼠模型。4周后,采用营养性半固体糊法观察FD大鼠胃排空率,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清柠檬酸合成酶（CS）,胃动素（MTL）,胃泌素（GAS）含量,苏木素-伊红（HE）染色观察胃组织病理变化,透射电镜观察线粒体特征,免疫荧光共定位法观察胃组织微管相关蛋白1轻链3（LC3）与电压依赖性阴离子通道蛋白1（VDAC1）表达,提取新鲜胃组织线粒体,生化试剂盒检测线粒体活性氧（ROS）,丙二醛（MDA）水平,超氧化物歧化酶（SOD）含量,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测线粒体LC3,自噬关键分子酵母Atg6同系物（Beclin1）,p62蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠胃排空率显著降低（P<0.01）,血清CS,MTL,GAS含量显著降低（P<0.01）,HE染色可见各组大鼠胃组织未见糜烂、溃疡等病理改变,透射电镜观察胃组织线粒体肿胀、扩张,出现空泡病变,LC3和VDAC1免疫荧光共定位表达显著增加（P<0.01）,线粒体ROS,MDA含量显著升高（P<0.01）,SOD含量显著降低（P<0.01）,LC3,Beclin1蛋白表达水平明显升高（P<0.05,P<0.01）,p62蛋白表达水平明显下降（P<0.05）;与模型组比较,柴胡疏肝散组和多潘立酮组大鼠胃排空率均明显升高（P<0.05）,血清CS,MTL,GAS含量明显升高（P<0.05,P<0.01）,透射电镜观察胃组织线粒体核膜完整,内部嵴形态清晰,嵴密度较高,部分存在线粒体分裂融合现象,LC3和VDAC1共定位表达显著减少（P<0.01）,线粒体ROS,MDA含量均明显降低（P<0.05,P<0.01）,SOD含量明显升高（P<0.05）,LC3,Beclin1蛋白表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,p62蛋白表达水平显著升高（P<0.01）。结论 柴胡疏肝散防治FD的作用机制可能与改善胃组织线粒体功能、抑制线粒体自噬有关。     

基于Pink-1/Parkin信号通路补青颗粒含药血清对高糖诱导人晶状体上皮细胞线粒体自噬的影响

目的:探讨补青颗粒含药血清对高糖诱导的人晶状体上皮(HLE)细胞线粒体自噬的影响。方法:体外培养HLE细胞,空白组将HLE细胞在正常培养液中培养48 h,模型组在空白组培养液中添加30 mmol·L~(-1)葡萄糖,实验组在模型组基础上加入不同含药血清刺激培养48 h。采用CCK-8法检测不同含药血清对高糖诱导的HLE细胞增殖活力的影响;利用免疫荧光技术及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测Pink-1,Parkin,p62蛋白表达。结果:CCK-8法结果显示模型组较空白组HLE细胞增殖活力增强(P0.01);与模型组比较,杞菊组与补青颗粒高、中、低剂量组细胞增殖活力均降低(P0.01);与杞菊组比较,补青颗粒中剂量组细胞增殖活力明显降低(P0.01);补青颗粒不同剂量组间比较,补青颗粒中剂量组细胞增殖活力显著降低(P0.01)。细胞免疫荧光结果显示Pink-1,Parkin,p62蛋白主要在细胞胞浆表达,细胞核内亦有少量表达。Western blot结果显示与空白组比较,模型组Pink-1,Parkin表达增加(P0.01),p62表达降低(P0.01);与模型组比较,杞菊组与补青颗粒中剂量组Pink-1,Parkin表达增加(P0.01),p62表达降低(P0.01);与杞菊组比较,补青颗粒中剂量组Pink-1,Parkin表达增加(P0.01,P0.05),p62表达降低(P0.01)。结论:补青颗粒对高糖诱导的HLE细胞线粒体自噬相关蛋白的表达有显著影响,线粒体自噬的改变可能是补青颗粒改善白内障发病的机制之一。     

芪术颗粒对肝纤维化模型大鼠肝脏细胞自噬的影响

目的 观察芪术颗粒对四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）诱导大鼠肝纤维化模型自噬的影响。方法 将40只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、复方鳖甲软肝片组、芪术颗粒组,除正常对照组外其余各组均腹腔注射CCl4建立肝纤维化模型,按照组别对应处理。4周后取肝组织,Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）及自噬相关基因3（autophagy-related gene 3,Atg3）、自噬相关基因Beclin1介导的蛋白表达,Real-time PCR检测Atg3、Beclin1基因表达,电镜下观察自噬情况。结果 与正常对照组比较,模型对照组大鼠肝α-SMA蛋白显著增多（P<0.01）;与模型对照组比较,复方鳖甲软肝片组、芪术颗粒组肝α-SMA蛋白显著减少（P<0.05）;与正常对照组比较,模型对照组大鼠肝Atg3蛋白表达显著增加（P<0.01）,Atg3基因表达增加,Beclin1蛋白及基因表达增加,自噬溶酶体和自噬体数量增多;与模型对照组比较,芪术颗粒组、复方鳖甲软肝片...     

β-谷甾醇对帕金森病模型大鼠脑氧化应激损伤及Nrf2/HO-1蛋白通路的影响

目的 探讨β-谷甾醇对帕金森病模型按照随机数字表法大鼠脑氧化应激损伤的保护作用及对Nrf2通路蛋白表达的影响。方法 将40只2月龄SPF级SD雄性大鼠采用随机数字表法分为正常组、造模组、治疗组和美多芭组,每组10只。模型组、美多芭组及治疗组采用鱼藤酮葵花油乳液颈背部注射建立帕金森病大鼠模型。造模成功后,治疗组以60 mg/（kg·d）β-谷甾醇、美多芭组以5 mg/（kg·d）美多芭混悬液、正常组和模型组采用生理盐水分别灌胃,均为每天1次,连续14 d。采用超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）检测试剂盒检测4组大鼠血清SOD、MDA含量,免疫组化检测4组大鼠脑黑质中黑质酪氨酸羟化酶（TH）、核转录因子E2相关因子2(Nrf2)阳性细胞数;Western blot检测4组大鼠脑组织中Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)、蛋白醌氧化还原酶-1(NQO-1)蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组SOD含量降低、MDA含量升高,脑黑质TH、Nrf2阳性细胞数减少,脑组织中Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白表达降低（P<0.05）。与模型组比较,治疗组和美多芭组SOD含量升高、M...     

中医药调控线粒体自噬相关信号通路防治心力衰竭的研究进展

<正>心力衰竭(heart failure,HF)简称“心衰”,是心脏功能发生障碍导致心室泵血功能受损引起的循环障碍症候群。心衰是心血管疾病发展的终末阶段和主要死因。据估计,全球死于心血管疾病的人数将从2002年的1 670万人增加到2030年的2 330万人,心血管疾病将成为全球的首要死亡原因^[1]。     

中医药对帕金森病时自噬的影响及机制探讨

自噬是维持细胞稳态,应答各种应激的必要代谢过程,自噬功能缺陷参与了帕金森病(Parkinson's Disease,PD)的发病过程,自噬激活可以作为PD的治疗靶点.诸多学者研究发现:自噬与中医气虚痰瘀肝主疏泄阴阳自合等理论有密切相关性,中药通过对细胞自噬水平发挥双向调节作用,从而保护神经细胞,可能是其治疗...     

电针通过调节AMPK/mTOR/ULK1信号通路对衰老小鼠肝脏自噬与氧化应激的影响

目的:观察电针对衰老小鼠体力及肝脏AMP活化的蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、unc-51样自噬激活激酶1(ULK1)、Atg5、Atg7、Atg13和Beclin1表达的影响,探索其通过激活AMPK/mTOR/ULK1通路延缓衰老的机制.方法:将30周龄雄性SAMP8小鼠随机分为模型组、雷帕...     

肉桂醛通过PINK1/Parkin信号通路介导的线粒体自噬促进糖尿病大鼠创面愈合机制

目的 采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射链尿佐菌素（STZ）及手术制备全层皮肤缺损的方法制备糖尿病大鼠创面模型,观察肉桂醛对糖尿病大鼠创面愈合情况的影响,并基于PTEN诱导假定激酶（PINK）1/帕金森病蛋白（Parkin）信号通路介导的线粒体自噬探讨肉桂醛对糖尿病大鼠创面的治疗机制。方法 48只雄性SD大鼠随机分为空白组12只,糖尿病组36只,糖尿病组随机分为模型组、肉桂醛组和贝复新组,每组12只,空白组与模型组创面常规消毒后予生理盐水,肉桂醛组创面局部外敷含4 μmol·L^-1肉桂醛的聚乙二醇400（PEG 400）凝胶,贝复新组创面外敷贝复新凝胶,每日换药1次。观察各组创面愈合率,取干预后7、14 d大鼠创面组织,苏木素-伊红（HE）染色观察局部组织病理变化,免疫组化（IHC）检测白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、血管内皮生长因子（VEGF）、胶原纤维的表达情况,免疫荧光（IF）、实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测PINK1、Parkin、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）蛋白和mRNA的表达情况。结果 腹腔注射STZ后,与空白组比较,糖尿病组大鼠随机血糖值显著升高（P<0.01）,均高于16.7 mmol·L^-1,且在造模后一段时间持续保持高血糖状态。与空白组比较,模型组大鼠创面肉芽组织生长、愈合情况较差,创面愈合率显著降低（P<0.01）;干预后7 d,空白组创面已有鳞状上皮覆盖,与空白组比较,模型组大鼠创面仅创缘少量结痂,创面中大量炎细胞浸润,组织IL-6、TNF-α蛋白表达水平显著上升（P<0.01）,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ蛋白表达及mRNA水平显著降低（P<0.01）;干预后14 d,空白组创面肉芽组织成熟,愈合良好,与空白组比较,模型组创面炎细胞浸润和红细胞渗出尚未完全消退,组织VEGF、胶原纤维蛋白表达水平显著降低（P<0.01）,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ蛋白表达及mRNA水平显著升高（P<0.01）。与模型组比较,肉桂醛组和贝复新组大鼠创面愈合情况较好,创面愈合率显著升高（P<0.01）,干预后7 d组织IL-6、TNF-α蛋白表达水平显著降低（P<0.01）,PINK1、Parkin及LC3Ⅱ蛋白表达及mRNA水平显著升高（P<0.01）,干预后14 d组织VEGF、胶原纤维蛋白表达水平显著上升（P<0.01）,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ蛋白表达及mRNA水平显著降低（P<0.01）。结论 肉桂醛能促进糖尿病创面愈合,上调创面愈合率,降低炎症因子IL-6、TNF-α的水平,增加VEGF、胶原纤维蛋白的水平,其机制可能是通过调节PINK1/Parkin信号通路表达,激活线粒体自噬,抑制炎症反应,增加血管新生和胶原合成,从而达到促进糖尿病大鼠创面愈合的目的。     

脾气虚大鼠胃黏膜细胞线粒体自噬相关蛋白表达的研究＊

目的 通过检测PTEN诱导激酶1（PTEN-induced putative kinase protein 1，PINK1）-Parkin通路及自噬相关蛋白表达，探讨脾气虚胃黏膜细胞线粒体损伤的可能机制。方法 16只雄性SD大鼠随机分为正常组和脾气虚证模型组（模型组），每组8只；透射电镜观察胃黏膜细胞线粒体形态，JC-1法测量其膜电位（ΔΨm）；比色法测定其ATP含量和呼吸链复合物（respiratory chain complex，RCC）I-IV活性；Western blot法检测其RCCV、PINK1、Parkin、微管相关蛋白1轻链3（microtubule-associated protein light chain 3，LC3）-I和II及p62等表达。结果 与正常组比较，模型组胃黏膜细胞的线粒体嵴减少，ΔΨm和ATP水平下降，RCCI和IV活性降低，RCCV、PINK1、Parkin和LC3-II表达下降，但LC3-I和p62表达上升。结论 脾气虚胃黏膜细胞线粒体结构和功能损伤与PINK1-Parkin通路抑制所导致的线粒体自噬水平低下有关。     

首乌丸对卵巢早衰模型大鼠SIRT1/PGC-1α/Cytochrome C通路的影响

目的 探讨首乌丸是否通过调控线粒体介导的细胞凋亡通路抑制卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)进展。方法 60只SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、首乌丸4周组、首乌丸6周组、首乌丸预防组、补佳乐组。腹腔注射去氧乙烯基环己烯(deoxyvinylcyclohexene, VCD)建立POF大鼠模型,予相应药物灌胃治疗后,采用Elisa法检测各组大鼠血清性激素水平,HE染色观察卵巢组织结构变化,电镜观察卵巢超微结构变化,荧光标记TUNEL法检测卵巢细胞凋亡水平,荧光定量PCR及Western blot检测大鼠卵巢组织中沉默信息调节因子2相关酶1(silent mating type information regulation 2 homolog 1, SIRT1)、过氧化物酶增殖活化受体γ辅助活化因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator1α,PGC-1α)、抑凋亡因子B淋巴细胞瘤-2(bcell lymphoma-2,Bcl-2)、促凋亡因子细胞色素C(cytochrome...