原发性肝癌患者外周血淋巴细胞亚群的变化

机体的免疫功能状态与肿瘤的发生和发展密切相关,原发性肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)患者在荷瘤状态下机体的免疫功能发生紊乱.本文采用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)分析160例HCC患者外周血淋巴细胞亚群、NK细胞和HLA-DR含量,探讨HCC术前机体细胞免疫功能状态与病情发展的关系.     

肺癌患者手术前后细胞免疫功能的动态研究

目的　探讨原发性肺癌患者手术前后外周血T细胞亚群和NK细胞的动态变化规律 ,并分析相关的因素。方法　应用免疫荧光法检测 60例肺癌患者、15例肺良性肿瘤患者和 15例正常健康者外周静脉血T细胞亚群和NK细胞活性 ;肺癌组还进行了术后第 2、7、14和 2 8天外周血T细胞亚群和NK细胞的活性测定。结果　 1.除CD8+ 外 ,肺癌组术前各项检测指标与肺良性肿瘤组和正常组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。 2 .肺癌组术后第 2天 ,CD3 + 、CD4+ 、CD4+ /CD8+ 和NK细胞较术前显著性降低 ,而CD8+ 显著性升高 (P<0 .0 1) ;术后第 7～ 14天 ,各项指标基本上恢复到术前水平 (P >0 .0 5 ) ;术后第 2 8天 ,CD3 + 、CD4+ 、CD4+ /CD8+ 和NK细胞均较术前显著性增加 ,而CD8+ 显著性减少 (P <0 .0 5 )。 3 .术前ⅢA期和ⅢB期与ⅠB期比较 ,术前淋巴结转移N2 组与N0 组比较 ,各项指标均有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;术后第 2 8天根治性切除组和姑息性切除组与剖胸探查组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;术后第 14天输血组与未输血组相比较 ,T细胞亚群有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　肺癌患者的细胞免疫功能低于肺良性肿瘤患者和正常人 ;肺癌患者术后的免疫状态呈现先降后升的变化 ;TNM分期和淋巴结转移与术前细胞免疫功能有相关     

原发性肝癌的免疫状态与预后的相关性分析

目的 :探讨原发性肝细胞癌 (hepato cellularcarcinoma ,HCC )的细胞免疫学状态及其与预后的相关性。方法 :应用流式细胞仪和ELISA方法测定 3 5例HCC患者和 2 0位正常献血员的CD 3 、CD 4、CD 8、CD 4/CD 8、NK细胞和AFP。结果 :1)HCC患者CD 3 、CD 4、CD 4/CD 8、NK细胞活性明显低于正常人 ,P <0 0 1,CD 8高于正常人 ,P <0 0 5 ;2 ) 3 5例中伴有门静脉癌栓或肝内转移者 10例 ,T细胞亚群及NK细胞活性明显低于不伴有门静脉癌栓者 2 5例 ,P <0 0 5 ;3 )机体的细胞免疫学状态与AFP无明显相关性。结论 :HCC患者的细胞免疫功能处于抑制状态 ,且与肿瘤细胞的侵袭活性有关。     

原发性肝癌患者手术前后外周血T细胞亚群变化分析

目的探讨原发性肝癌患者手术前后外周血Ｔ细胞亚群变化。方法利用抗人Ｔ细胞单克隆抗体ＯＫＴ系统进行检测。结果原发性肝癌术前组、术后组Ｔ３值明显低于正常对照组（Ｐ＜０．０５）；术前、术后组Ｔ４值和Ｔ４／Ｔ８比值显著低于术后组（Ｐ＜０．０１）；术前组Ｔ４值和Ｔ４／Ｔ８比值显著低于术后组（Ｐ＜０．０１）；术前组Ｔ３值与术后组无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论肝癌患者手术前后外周血Ｔ淋巴细胞亚群的变化能反应患者术前术后的机体细胞免疫状态     

肝细胞肝癌患者外周血CD8+T淋巴细胞凋亡相关机制探讨

目的:探讨肝细胞肝癌患者外周血CD8+T淋巴细胞（CTL细胞）凋亡的相关机制及临床意义。方法:收集30例健康体检者及60例不同临床分期肝细胞肝癌患者外周血,应用流式细胞仪检测分析 CTL细胞相对百分比、凋亡情况及CTL细胞表面Fas(CD95)表达情况。结果:肝细胞肝癌患者外周血CTL细胞相对百分比含量高于健康体检者［（26.4%±9.2%） vs （19.7%±4.7%）,P＜0.05］。肝细胞肝癌患者外周血 AnnexinV+CTL细胞凋亡率高于健康体检者［（25.3%±6.5%) vs (12.1%±6.5%),P＜0.05］。肝细胞肝癌患者Fas+CTL细胞含量高于健康体检者［（62.2%±18.5%) vs (42.6%±16.5%),P＜0.05］。Fas表达与CTL细胞的凋亡呈正相关。不同TNM分期患者CTL细胞凋亡能力不同,随着病情程度恶化,细胞凋亡水平增加［（27.7%±5.9%） vs （20.6%±5.1%）,P＜0.001］。结论:肝细胞肝癌患者外周血中CTL细胞的百分比增加,提示在肿瘤的发生发展过程中机体存在抗肿瘤免疫效应,但是基于Fas/FasL途径的CTL细胞凋亡比例增加,可能是肿瘤细胞免疫逃逸的重要机制。     

乳腺癌患者免疫指标检测及其临床意义

目的:分析乳腺癌及乳腺良性疾病患者机体免疫指标的特点及临床意义。方法:应用流式细胞术对30例乳腺癌患者、45例乳腺良性疾病患者外周血T细胞亚群及NK细胞进行检测。结果:乳腺癌患者CD3 、CD4 细胞百分比显著低于乳腺良性疾病组(P<0.05);CD8 细胞百分比以及CD4 /CD8 比值在乳腺癌组和乳腺良性疾病组之间无显著差异(P>0.05);乳腺癌患者NK细胞百分比显著高于乳腺良性疾病组(P<0.05);乳腺癌腋淋巴结转移组CD3 细胞百分比及CD4 /CD8 比值明显低于腋淋巴结无转移组(P<0.05),而NK细胞百分比显著高于腋淋巴结无转移组(P<0.05)。结论:乳腺癌患者存在细胞免疫功能紊乱,检测外周血T淋巴细胞亚群表达可能对评估患者的细胞免疫功能及疾病的预后具有一定意义。     

肝癌细胞通过Fas/FasL途径触发T淋巴细胞凋亡的双重阻断研究

目的通过阻断Fas/FasL介导的T细胞凋亡,建立快速制备大量激活的肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的方法。方法选择FasL表达阳性的肝癌标本,分离肝癌细胞和肿瘤浸润淋巴细胞(TIL),然后在体外将两者混合,并在CD28单抗共刺激下,激活制备特异性CTL。应用可溶性Fas受体阻断肝癌细胞通过Fas/FasL途径触发激活T细胞凋亡,与对照组比较用流式细胞仪和DNA ladder Test同时检测阻断凋亡作用,通过3H掺入法和51Cr释放法了解T细胞增殖力及杀伤活性。结果流式细胞术仪检测未阻断组较阻断组和未阻断对照组凋亡率明显升高,未阻断组凋亡率达47．82％±0．13％,对照组静息性T淋巴细胞组为3．76%±0．25％,阻断组为8．22％±0．26％(P<0．01),DNA ladder显示未阻断组T淋巴细胞出现明显梯状条带,阻断组为阴性。51Cr释放法表明阻断后T淋巴细胞杀伤活性增加,较未阻断组及未阻断对照组差异有显著性(P<0．01)。3H掺入法检测证实可溶性Fas受体阻断激活T细胞凋亡后,细胞增殖明显升高,较未阻断组差异有显著性(P<0．01)。结论体外实验可获得大量激活T细胞,并可杀伤肿瘤细胞。     

NK/T细胞浸润对肺鳞癌患者生存与预后的影响

背景与目的:机体组织中自然杀伤细胞和细胞毒T淋巴细胞是构成机体细胞免疫的主导成分,对肿瘤组织必然有影响.本研究探讨NK/T细胞在肺鳞癌组织中的浸润程度及对患者生存与预后的影响.方法:将CD8作为细胞毒T淋巴细胞(CTL)的标记物,CD56作为自然杀伤细胞(NK)的特异性标记物,应用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中NK/T细胞的分布和浸润情况.结果:68例肺癌中,CTL无/轻度浸润的者39例,5年生存率为18%;显著浸润者29例,5年生存率为42%;NK细胞无/轻度浸润者46例,5年生存率为14%,显著浸润者22例,5年生存率为45%;NK/T无轻度浸润者48例,5年生存率为33%,均显著浸润的20例,5年生存率为54%.经Log-rank检验,NK/T显著浸润组5年生存率显著高于无/轻度浸润组,差异有显著性(X2=18.62,P=0.00).结论:肺鳞癌组织中NK/T细胞显著浸润组的预后和生存时间明显优于轻度浸润组.其机制与机体细胞免疫有关.     

肝癌病人化疗栓塞后联合应用s-TIL细胞后T淋巴细胞亚群的变化

目的 :观察 39例 PHC病人经化疗栓塞后联合应用经冷冻肝癌瘤苗刺激的肿瘤浸润淋巴细胞 (s-TIL )前后外周血 T淋巴细胞亚群的变化。方法 :于化疗栓塞及应用 s- TIL前、治疗后 7d、14d、2 1d分别查 T淋巴细胞亚群 ,并与对照组比较。结果 :肝癌病人经化疗栓塞后 CD 3、CD 4 、CD 8、CD 4 / CD 8比值约在 14d左右即上升 ,与对照组比较有显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论 :TACE后联合应用 s- TIL细胞具有提高机体细胞免疫功能的作用。     

维甲酸对DENA诱发肝癌大鼠的T淋巴细胞亚群与NK细胞的影响

目的：本文探讨维甲酸抑制大鼠肝癌细胞增殖对T淋巴细胞亚群和NK细胞的影响。方法：设三个实验组,分别收集30个大鼠外周血样本,然后进行免疫荧光抗体标记。应用流式细胞仪（EPICS-XL）检测T淋巴细胞亚群和NK细胞的百分率。结果：对照组与健康组比较,CD4＋细胞数明显减少,CD8＋细胞数明显增多,CD4＋/CD8＋比值下降（P〈0.01）。维甲酸组与健康组比较,CD4＋、CD8＋和CD56＋细胞数均无显著性差异（P〉0.05）。结论：维甲酸抑制大鼠肝癌细胞增殖时对机体免疫功能的改善有一定影响。     

Associations Between Infiltrating Lymphocyte Subsets and Hepatocellular Carcinoma

Aims: We aimed to analyze the phenotype of tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) and non-tumor infiltrating lymphocytes (NILs) in HCC and non-tumor tissues, and evaluate relationships between changes in these cells and the prognosis of HCC. Methods: Lymphocytes were isolated from HCC and corresponding non-tumor tissues and tested by flow cytometry. For comparison, clinical parameters were analyzed. Results: Compared with the non-tumor tissue, tumor tissue had a lower intensity of NK, NKT andCD8+T cell infiltration. TILs had higher intensity of CD4+CD25+Foxp3+regulatory T cell (Treg cells) infiltration compared with that in NILs. The prevalence of Treg cells was associated with fewer CD8 + T lymphocytes in the HCC immune microenvironment. The frequencies of NK cells and CD8+T cells in TILs of HCC patients with metastasis less than 12 months were lower than those without metastasis. However, the frequency of Treg cells was higher than those without metastasis. Conclusion: These results suggest that the frequencies of CD8+T, NK and NKT cells as well as Treg cells in the tumor tissue of HCC are significantly associated with patient survival, and could be applied as predictive indicators for HCC prognosis.     

CD3+CD56+NKT细胞及CD3-CD56+NK细胞在恶性肿瘤患者的临床意义研究

背景与目的细胞毒性淋巴细胞在抗肿瘤免疫效应中发挥着重要作用,CD3 CD56 NKT细胞作为一类新的具有细胞毒性的效应细胞,目前关于其抗肿瘤意义的探讨主要集中于血液系统恶性疾病,而在实体肿瘤中的应用和临床价值研究尚少。本研究旨在初步探讨抗肿瘤细胞CD3 CD56 NKT细胞及CD3-CD56 NK细胞在恶性肿瘤患者外周血的表达状态及其临床意义。方法采用流式细胞术分析118例恶性肿瘤患者(55例肺癌患者和63例乳腺癌患者)及46例健康对照组外周血中的T细胞亚群及CD3 CD56 NKT细胞、CD3-CD56 NK细胞表达。结果恶性肿瘤患者组CD3 CD8 T细胞、CD3 CD56 NKT细胞以及CD3-CD56 NK细胞表达率均明显高于健康对照组(P<0.01)。肺癌患者中以CD3 CD8 T细胞和CD3 CD56 NKT细胞明显增加为主;乳腺癌患者中以CD3 CD56 NKT细胞和CD3-CD56 NK细胞明显增加为主。结论CD3 CD56 NKT细胞在肺癌和乳腺癌患者的抗肿瘤效应中占据重要地位,而CD3 CD8 CTL和CD3-CD56 NK细胞在不同类型肿瘤患者中具有不同的重要性。     

乳腺癌患者外周血T淋巴细胞及NK细胞的检测及其临床意义

目的:探讨乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞活性的临床意义。方法:采用流式细胞仪测定乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的活性,以正常人作对照。结果:乳腺癌患者外周血CD3 ,CD4 ,NK细胞数量及CD4 /CD8 比值较正常对照组均明显下降(P<0.05),而CD8 细胞水平显著升高。外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞数量的改变与乳腺癌临床病理指标有关,分期越晚,CD3 细胞、CD4 细胞、CD4 /CD8 细胞比值及NK细胞数量越低,CD8 细胞水平越高;I、II期乳腺癌患者与III、IV期患者之间有显著差异(P<0.05)。结论:乳腺癌患者细胞免疫功能低下,且临床病理分期越晚,其免疫功能越低,检测T淋巴细胞亚群、NK细胞可用于乳腺癌患者的免疫监测。     

乳腺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测及意义

目的探讨乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的变化及意义.方法采用流式细胞技术检测64例乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞,采用ELISA法检测外周血中转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达水平.结果乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占T淋巴细胞的百分比为(5.1±2.9)%,高于乳腺良性肿物患者和健康志愿者(P均<0.05).乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞水平与肿物大小、TGF-β1呈正相关(r分别为0.511和0.253),与CD8+CD28+T细胞和NK细胞呈负相关(r分别为-0.243和-0.301).结论乳腺癌患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4+CD25+调节性T细胞水平较高,对乳腺癌患者具有免疫抑制作用.     

乳腺癌术后辅助化疗联合乌苯美司治疗对免疫功能及骨髓抑制的影响

目的：探讨乳腺癌术后辅助化疗联合乌苯美司治疗对患者免疫功能、骨髓抑制的影响。方法：对30例乳腺癌术后患者行化疗联合乌苯美司辅助治疗和30例单用化疗治疗的乳腺癌术后患者外周血中 T 淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞（natural killer cell,NK）进行检测。结果：治疗后化疗联合乌苯美司治疗组患者外周血中 CD3、CD4 T 淋巴细胞和 NK 细胞所占比例明显高于单用化疗（对照组）,T3与 T4比值差异均有统计学意义（P ＜0．05）。结论：乌苯美司能有效提高化疗后患者机体免疫功能,减轻化疗骨髓抑制,提高生活质量。     

Cytotoxicity Tests against Cultured Human Lung Cancer Cells With Autologous Lymphocytes Activated in vitro by Mitomycin C-Treated Tumor Monolayers in the Presence of T-Cell Growth Factor

Human peripheral blood or lymph node lymphocytes, obtained frompatients with a variety of lung cancer, were incubated in vitrowith mitomycin C-treated tumor monolayers in the presence ofT-cell growth factor. The cytotoxicity of these lymphocytesfor autologous tumor cells (autologous killer activity) wasassessed by a 4-hr ⁵¹Cr-release assay. Cytotoxic activity wasobserved in 14 out of a total of 20 cases. Lymphocytes frompatients with squamous cell carcinoma, large cell carcinomaand carcinoid exhibited positive activity levels of 11.1 ±1.8, 16.3 and 23.9% respectively. Nine out of 13 patients withadenocarcinoma exhibited positive activity with a mean valueof 8.8 ± 6.8%. No lymphocyte activity against small cellcarcinoma was observed. Natural killer (NK) activity did not always correlate with autologouskiller (AK) activity. Treatment of lymphocytes with monoclonalanti-human lymphocyte antibody revealed differences in effectorcell populations concerning these two activities; AK activitywas abrogated only by treatment with anti-human Lyt 3 antibodyand complement, whereas NK activity was abrogated by anti-humanLyt 1, 2 and 3 and partially by anti-human la antibody. Theseresults indicate that AK activity is mediated exclusively byT cells, but that NK activity is mediated by several subpopulationsof lymphocytes such as T cells, null cells and others.     

浸润性T淋巴细胞及Th细胞因子在不同类型乳腺癌中的表达

目的研究浸润性T淋巴细胞和Th细胞因子在不同类型乳腺癌中表达的意义。方法利用免疫组织化学链霉亲和素生物素法（labelled streptavidin-biotin method,LSAB）方法检测61例浸润性微乳头状癌（invasive micropapillary carcinoma,IMPC）、71例浸润性导管癌（invasive ductal carcinoma,IDC）和27例髓样癌（medullary carcinoma,MC）3种乳腺癌中浸润T淋巴细胞亚群分布以及Th细胞因子的表达。T淋巴细胞组间比较采用Kruskal-Wallis Test,组内比较采用Witcoxon Signed Ranks Test;组间Th细胞因子的比较采用x^2检验。结果CD3、CD8和CD4均表达于淋巴细胞胞膜。CD3^＋T细胞在3组间差异无统计学意义（P=0．735）。CD8^＋T和CD4^＋T细胞在3组间差异均有统计学意义（P=0．000,P=0．012）。Th细胞因子主要表达于肿瘤细胞和淋巴细胞的胞质。IL-2表达在IMPC组最低（25／61,41．0％）,其次是IDC组（33／71,46．5％）,最高是MC组（20／27,74．1％）,3组间差异有统计学意义（P=0．014）;IFN-γ的表达类似于IL-2,IMPC组最低（39／61,63．9％）,其次是IDC组（57／71,80．3％）,最高是MC组（24／27,88．9％）,3组间差异有统计学意义（P=0．019）;IL-4的表达在IDC组最高（42／71,59．2％）,其次是IMPC组（19／61,31．1％）,最低是MC组（5／27,18．5％）,3组间差异有统计学意义（P=0．000）;IL-10的阳性率在IMPC组是87．8％（47／61）,在IDC组是87．3％（62／71）,在MC组是88．9％（24／27）,3组间差异无统计学意义（P〉0．050）。结论浸润性T淋巴细胞和Th细胞因子在不同类型乳腺癌中表达不同。     

肺癌患者外周血免疫细胞毒细胞的检测

 目的 探讨肺癌患者群体的免疫细胞毒细胞的功能状态。方法 应用流式细胞仪测定30例手术前肺癌患者和30例该院健康职工外周血总T淋巴细胞、自然杀伤细胞（NK）、NK样T杀伤细胞（NKT）、γδT细胞和CTL细胞。结果 γδT细胞：正常组为6.54±2.94，患者组为3.58±2.14，t = 3.730，P =0.001。CTL细胞：正常组为17.21±4.49，患者组为10.86±4.67，t =5.130，P＜0.001；其他被测细胞的百分率，经统计学分析，均无统计学意义。结论 特异性免疫杀伤细胞低下对肺癌的发生有重要影响。非特异性免疫细胞毒细胞影响有限。     

膀胱肿瘤抗原致敏的树突状细胞诱导 T 淋巴细胞抗肿瘤效应的研究

目的：研究经膀胱肿瘤抗原致敏后的树突状细胞（Dc）对T淋巴细胞的激活、增殖作用及对T24膀胱肿瘤细胞的抑癌效应。方法：分离健康供血者外周血单个核细胞及T淋巴细胞，联合应用粒／巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）及白介素-4（IL-4）从单个核细胞中培养出Dc，以人膀胱癌细胞系T24肿瘤细胞裂解物刺激Dc，检测经膀胱肿瘤抗原致敏后的DC对T淋巴细胞的细胞增殖动力学影响并用M1rr显色法测定致敏Dc诱导的T淋巴细胞对T24膀胱肿瘤细胞体外的抗肿瘤效应。结果：膀胱癌细胞裂解物致敏的Dc可诱导T淋巴细胞强烈的增殖反应，与对照组比较具有显著性差异（P〈0．01）；增殖后的T淋巴细胞对T24膀胱肿瘤细胞有明显的细胞毒作用。结论：经膀胱肿瘤抗原致敏的Dc能诱导产生显著的T淋巴细胞增殖，在体外有明显的抑癌效应。