SHR及SHR伴糖尿病大鼠肾皮质RAS研究

目的观察白发性高血压人鼠(SHR)及伴有糖尿病大鼠(SHR－DM)肾皮质血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)mRNA和血管紧张素转换酶(ACE)mRNA的表达,以及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对肾小球系膜细胞增殖的直接作用。方法　采用反转录－多聚合链式反应、细胞培养和3H－胸嘧啶核苷掺入技术。结果　1．SHR肾皮质AT1mRNA和ACEmRNA明显高于WKY(WistarKyoto)(P<0．05)。2．SHR－DM的AT1mRNA和ACEmRNA与WKY接近,而较SHR明显降低(P<0．01)。3．SHR血浆AngⅡ浓度和ACE活性明显低于WKY,SHR－DM与SHR比较血浆AngⅡ存在异常增高。4．AngⅡ对SHR肾小球系膜细胞具有明显刺激增殖的作用,并且呈剂量依赖关系。结论SHR肾皮质局部肾素血管紧张素系统存在过度兴奋状态,AngⅡ有直接参与肾小球结构改变、促进肾小球受损的作用。     

依那普利对SHR肾皮质RAS系统mRNA表达的影响

目的通过对自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠(WKY)肾皮质中ACE和AT1mRNA表达水平的检测,以及分别用转换酶抑制剂(ACEI)--依那普利干预治疗后检测肾皮质中ACE和AT1mRNA表达水平的变化,探讨局部RAS组分在SHR发病机制中所起的作用,以及ACEI对局部RAS的影响.方法用RT-PCR方法,分别对服用依那普利SHR和对照组各6例,以及11例服药WKY组和9例对照组的肾皮质中ACE和AT1mRNA表达水平进行检测.同时对各组大鼠外周血中的ACE和AngⅡ进行生化检测.结果发现SHR服药组肾皮质中ACEmRNA表达明显低于对照组(P<0.05),AT1mRNA表达在SHR服药组和对照组无显著差别.在未服药对照组中SHR肾皮质ACE和AT1mRNA表达均明显高于WKY组(两组P<0.05).同时发现各组大鼠外周血ACE和AngⅡ生化数值与组织中相应mRNA表达水平无相关性(P>0.05).结论组织中RAS组分可能与SHR发病有关,ACEI可影响局部RAS的作用,而外周血ACE和AT1水平均不能反映这种变化.从而进一步阐明局部RAS在原发性高血压发病中的作用.     

牛磺酸对肾性高血压大鼠心肌肥厚及组织局部RAS的影响

目的探讨牛磺酸对肾血管性高血压大鼠心肌肥厚及组织局部肾素-血管紧张素系统(RA S)的影响。方法采用两肾一夹型肾血管性高血压大鼠模型。所有大鼠被随机分为3组(每组20只):假手术对照组,高血压对照组和牛磺酸治疗组,于术后第5周开始给予牛磺酸50m g.kg-1.d-1。采用标准尾套法间接检测清醒大鼠血压。给药8周后,处死大鼠,分离左室心肌,检测左室重/体重比、心肌的血管紧张素Ⅱ含量(放射免疫法检测)和血管紧张素转换酶活性(分光光度计法检测)。结果与假手术组大鼠相比,未给药2K1C高血压大鼠血压明显升高,左室重/体重比增大,心肌的血管紧张素Ⅱ含量增加和血管紧张素转换酶活性均增高。应用牛磺酸治疗则明显抑制了肾动脉狭窄术后大鼠血压的升高,降低了2K1C高血压大鼠左室重/体重比、心肌的血管紧张素Ⅱ含量和血管紧张素转换酶活性。结论长疗程牛磺酸治疗可抑制肾性高血压大鼠心肌肥厚的发生,其机制可能与抑制心肌组织局部血管紧张素Ⅱ生成有关。     

SHR,WKY大鼠心,肾及胸主动脉ACE,ACE2表达的差异与高血压的关系

目的观察SHR,WKY大鼠心,肾,胸主动脉及体外培养的VSMCs中的ACE,ACE2表达的差异,探讨ACE与ACE2在自发性高血压大鼠高血压形成的机制。方法选取6个月的雄性自发性高血压大鼠SHR(Spontanous Hypertensive Rat,SHR)及与之配对的正常大鼠WKY。尾袖法测定大鼠血压,断头取血,称量全心与左心重量,计算心体比与左室重指数。免疫组化法检测肾脏ACE,ACE2的表达。放免法测定血浆中AII水平。RT-PCR法比较SHR与WKY大鼠心,肾,胸主动及体外培养VSMC细胞ACE、ACE2 mRNA的表达水平。结果(1)6月龄SHR大鼠血压显著高于WKY(196.42±18.90,116.35±14.48,P<0.05),而WKY大鼠心体比及左室指数明显低于SHR(2.84±0.28,3.79±0.41,P<0.05;2.17±0.18,2.95±0.28,P<0.05),SHR大鼠血浆中AII水平明显增高(1675.35±305.16,694.38±112.56,P<0.05)。(2)肾脏ACE2免疫染色SHR明显低WKY(0.054±0.013,0.205±0.043,P<0.05)。与WKY相比,SHR心,肾,胸主动脉ACE2 mRNA表达水平分别减少49.84%4、0.67%3、6.17%,,而ACEmRNA表达水平分别增加33.66%、29.83%、42.16%。在体外培养的胸主动脉平滑肌细胞(thorax aorta vascularsmooth mulscle cell,TAVSMC)SHR大鼠ACE mRNA表达水平明显高于WKY,ACE2 mRNA的表达水平显著降低。结论(1)ACE与ACE2表达失调可能是高血压形成的重要原因。(2)ACE与ACE2表达差异可能大鼠遗传背景有关。     

AngⅡ受体拮抗剂对SHR肾小球系膜细胞增殖作用

目的观察血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1受体）拮抗剂Losartan（芦沙坦）对自发性高血压大鼠（SHR）肾小球系膜细胞增殖的作用。方法采用细胞培养和3H-胸腺嘧啶核苷（3H－TdR）掺入技术。结果1．SHR系膜细胞血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）组的3H－TdR掺入率高于对照组;2．SHR系膜细胞AngⅡ＋Losar－tan组的3H－TdR掺入率低于AngⅡ组;3．AngⅡ对SHR肾小球系膜细胞增殖的刺激作用和Losartan的抑制作用均呈剂量依赖关系;4．AngⅡ对正常血压大鼠系膜细胞的3H－TdR无影响。结论Losartan能逆转AugⅡ对SHR肾小球系膜细胞的增殖作用,从细胞水平体现其肾脏保护作用。     

厄贝沙坦对自发性高血压大鼠的降压作用及肾脏RAS基因表达分析

目的 探讨厄贝沙坦对自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用及其对肾脏肾素-血管紧张素系统(RAS)相关基因表达的影响.方法 将SHR大鼠随机分为模型组[15 mg/(kg·d),饮用水]、厄贝沙坦组[15 mg/(kg·d),厄贝沙坦],每组6只;另设6只Wistar大鼠为正常对照组[15 mg/(kg·d),饮用水],...     

抑制NF-kB对大鼠肾小球系膜细胞血管紧张素Ⅱ 1型 受体表达的影响

 【目的】 研究抑制NF-kB活性对SD大鼠系膜细胞血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达的影响。【方法】 分离SD大鼠系膜细胞分为下列3组:正常葡萄糖培养组(5.6 mmol/L D-葡萄糖),高葡萄糖培养组(25 mmol/L),吡咯烷二硫氨基甲酸酯(pyrrolidinedithiocarbamate, PDTC) + 高葡萄糖培养组。以电泳迁移率变动分析法(electrophoretic mobility shift assay, EMSA)检测NF-。资B 活性,RT-PCR方法检测血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测血管紧张素Ⅱ1型受体蛋白表达,放射免疫分析法检测培养液血管紧张素Ⅱ水平。 【结果】 NF-kB活性在高葡萄糖培养组(20 ± 7)显著高于正常葡萄糖培养组(8 ± 4,P < 0.01)与PDTC + 高葡萄糖培养组(8 ± 3,P < 0.01),正常葡萄糖培养组与PDTC + 高葡萄糖培养组比较无显著性差异(P > 0.1)。血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达,在高葡萄糖培养组(0.60 ± 0.26)与正常葡萄糖培养组(0.50 ± 0.22)及PDTC + 高葡萄糖培养组(0.45 ± 0.23)均无显著性差异;血管紧张素Ⅱ1型受体蛋白质表达,在高葡萄糖培养组(0.54 ± 0.22)与正常葡萄糖培养组(0.37 ± 0.14)及PDTC + 高葡萄糖培养组(0.40 ± 0.13)均无显著性差异。培养液血管紧张素Ⅱ水平在高葡萄糖培养组(9.8 ± 2.1)显著高于正常葡萄糖培养组(7.5 ± 1.5,P < 0.05),PDTC + 高葡萄糖培养组(7.8 ± 1.7,P > 0.05)与正常葡萄糖培养组比较差异无显著性意义。【结论】 高葡萄糖可激活SD大鼠系膜细胞NF-kB,伴随血管紧张素Ⅱ产生增加,但是不影响血管紧张素Ⅱ1型受体表达;抑制NF-kB活性似乎可降低血管紧张素Ⅱ产生但不影响血管紧张素Ⅱ1型受体表达。     

低压缺氧对原发性高血压大鼠血压的影响

目的 观察低压缺氧对原发性高血压(EH)大鼠血压的影响.方法 将12周龄EH大鼠随机分为常氧组和低压缺氧组,低压缺氧分别模拟海拔4 000 m和6 000 m;于实验第4、8周末测量血压,尾静脉取血检测血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)mRNA和血管紧张素转换酶2(ACE2)蛋白和mRNA的表达.结果 低压缺氧能明显升高EH大鼠的血压,全血AT1 mRNA、ACE2蛋白和mRNA表达显著增高(P＜0.05).结论 低压缺氧能升高EH大鼠的血压,其机制可能与AT1、ACE2的表达增高有关.     

感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠心、肾AT1R的表达

目的对感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠的心肌、肾脏组织中的血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)在mRNA和受体水平的表达进行检测,探讨AT1R与盐敏感性高血压的关系。方法用乳鼠皮下注射辣椒辣素法建立模型。哺乳期后,大鼠被随机分成4组:对照+正常盐饮食组(CON-NS);对照+高盐饮食组(CON-HS);辣椒辣素+正常盐饮食组(CAP-NS);辣椒辣素+高盐饮食组(CAP-HS)。至7周龄(分组饲养后第4周)处死大鼠,免疫组织化学方法和反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)分别检测大鼠心肌和肾脏AT1R蛋白,以及AT1 R mRNA的表达。结果①Wistar大鼠在给予不同程度的感觉神经损伤和饲料干预后,各组大鼠尾部收缩压均有明显增加,最终CAP-HS组的尾收缩压显著高于其他三组(P<0.01)。②免疫组织化学结果显示,CAP-HS组组织有显著的AT1R蛋白表达(P<0.01);CON-HS组肾脏、心肌组织中AT1R蛋白表达高于CON-NS组(P<0.05)。③RT-PCR检测基因表达,与对照组CON-NS相比,实验组CAP-HS的AT1R mRNA表达显著升高(P<0.01);CON-HS组肾脏、心肌组织中AT1 R mRNA表达有显著性(P<0.05)。结论感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠心、肾AT1R表达升高,AT1R表达水平的差异可能与盐敏感性高血压的形成有关。     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾组织血管紧张素Ⅱ及其1型受体mRNA表达的影响

目的研究氯沙坦对实验性糖尿病大鼠肾组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1型受体mRNA表达的影响。方法纯种雄性Wistar大鼠分为3组,A组(n=11)为正常对照组,B组(n=11)为糖尿病为干预组,C组(n=9)为糖尿病大鼠氯沙坦干预组。以链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型。饲养18周后取出肾脏检测AngⅡ水平、AngⅡ1型受体mRNA表达,收集24h尿测定尿白蛋白排泄及肌酐并心脏内取血检测血AngⅡ及肌酐。AngⅡ1型受体mRNA表达采用RT-PCR,以-actin作为内对照。尿白蛋白排泄采用大鼠白蛋白特异的酶免疫分析试剂盒。结果血、肾组织AngⅡ在A、B、C三组间无显著性差异。肾组织AngⅡ1型受体mRNA表达在B组大鼠(0.62±0.17)显著低于A组(1.13±0.82,P<0.01)及C组(1.13±0.62,P<0.01)。尿白蛋白排泄在B组大鼠(2.18±1.98mg/d)显著高于A组(0.41±0.47mg/d,P<0.01)及C组(0.65±0.89mg/d,P<0.01)。结论氯沙坦处理能升高糖尿病大鼠肾组织的AngⅡ1型受体mRNA表达,但不改变血液及肾组织AngⅡ水平。     

IgA肾病肾功能损害患者肾素-血管紧张素系统基因多态性研究

目的 探讨IgA肾病肾功能损害患者肾素-血管紧张素系统(RAS)的3个主要基因,即血管紧张素Ⅱ 1型受体(AT1R)基因A1166C、血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE )基因插入/缺失(I/D)和血管紧张素原(AGT)基因M235T的多态性.方法 选取2010年6月-2012年7月右江民族医学院附属医院和百色市人民医院确诊的IgA肾病患者68例为肾病组,根据肾小球滤过率分为肾功能损害组4例和无肾功能损害组64例;选取2012年7月在右江民族医学院附属医院体检的与肾病组患者性别构成、年龄匹配的健康人70例为对照组.采用直接聚合酶链反应和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测ACE基因I/D、AT1R基因A1166C和AGT基因M235T的基因型.结果肾病组与对照组ACE基因I/D基因型分布比较,差异有统计学意义(P＜0.05);两组AT1R基因A1166C、AGT基因M235T基因型分布比较,差异无统计学意义(P＞0.05).肾功能损害组与无肾功能损害组ACE基因I/D基因型分布比较,差异有统计学意义(P＜0.05);两组AT1R基因A1166C和AGT基因M235T基因型分布比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ACE基因I/D多态性与IgA肾病的发生、出现肾功能损害有关,DD基因和D等位基因是IgA肾病患者发生肾功能损害的易感因素.     

番茄红素对糖尿病大鼠肾脏RAS系统的调节作用

目的 研究番茄红素对糖尿病大鼠肾脏肾素-血管紧张素系统(RAS)的调节作用及其机制。 方法 选用12周龄的雄性瘦型及肥胖型Zucker大鼠(2型糖尿病大鼠模型)各16只,随机分为瘦大鼠+溶剂组,肥胖大鼠+溶剂组,瘦大鼠+番茄红素组及肥胖大鼠+番茄红素组。分别给予溶剂(蒸馏水)或番茄红素[40mg/(kg·d)]口服喂养6周。代谢笼分析各组大鼠24h尿液;ELISA测定各组大鼠血清氧化应激(MDA,GSH)水平变化;放射免疫法检测各组大鼠肾脏组织肾素(Renin)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量;分别采用qRT-PCR及 Western blot法检测各组大鼠肾脏组织AT₁受体mRNA及蛋白的表达水平。 结果 与瘦大鼠相比,校正体重因素后,肥胖糖尿病大鼠24h基础尿钠排泄显著降低(P<0.05),同时其体内氧化应激水平明显增高,即MDA活性水平显著升高,而GSH活性水平显著降低(P<0.05)。肥胖糖尿病大鼠肾脏Renin及AngⅡ水平也较瘦大鼠明显升高(P<0.05)。此外,肾脏AT₁受体的mRNA及蛋白表达水平在肥胖糖尿病大鼠肾脏也显著高于瘦大鼠(P<0.05)。通过给予番茄红素处理6周后,可明显改善肥胖糖尿病大鼠上述指标的变化,降低肾脏Renin、AngⅡ水平及肾脏AT₁受体的表达(P<0.05),而番茄红素对瘦大鼠无相应作用。 结论 番茄红素通过降低氧化应激水平,下调肥胖糖尿病大鼠肾脏RAS系统活性,从而促进血压的降低。     

三黄降糖方对糖尿病大鼠心肌血管紧张素及相关因子的影响

目的探讨三黄降糖方对糖尿病大鼠心肌肾素—血管紧张素系统 (RAS)的影响。方法腹腔注射链脲菌素 (STZ)造成大鼠糖尿病模型 ,于造模后 2周起分别灌胃三黄降糖方 ( 5 0g/kg)和达美康 ( 2 0mg/kg) ,连续 8周 ,检测心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素转换酶(ACE)和醛固酮 (ALD) ,以逆转录—聚合酶链式反应 (RT—PCR)检测心肌血管紧张素 1型受体 (AT1R)mRNA表达。结果与正常对照组比较 ,模型组心肌AngⅡ含量增加(P <0 .0 1 ) ,ACE活性升高 (P <0 .0 1 ) ,ALD含量增加 (P <0 .0 5 ) ,心肌AT1RmRNA表达增加 (P <0 .0 5 )。三黄降糖方和达美康可使心肌AngⅡ含量、ACE活性和AT1RmRNA表达量均下降 ,三黄降糖方还可使心肌ALD含量降低。结论在糖尿病病程 1 0周 ,可引起心脏局部RAS激活 ,其改变与糖尿病心肌病变的发生有关 ;三黄降糖方和达美康均可抑制心脏局部RAS激活 ,提示其对抗糖尿病心肌病变的作用与此有关     

糖尿病肾病患者合并非糖尿病肾病的临床特征分析

目的 通过回顾性分析,为临床上在缺乏病理资料时更准确地判断糖尿病肾病患者是否合并非糖尿病肾病提供依据,从而为此类患者的诊断与治疗提供指导.方法 回顾性分析2000年2月～2014年2月我院糖尿病肾病患者怀疑合并非糖尿病肾病并接受肾活检的患者共108例.根据肾活检病理资料,将所有患者分为单纯糖尿病肾病组,糖尿病肾病合并非糖尿病肾病组和非糖尿病肾病组.通过分析临床参数预测糖尿病肾病的可靠性.结果 糖尿病视网膜病变对于糖尿病肾病的敏感性为57.5％,特异性为88.9％;血尿对于非糖尿病肾病的敏感性为71.2％,特异性为90.6％.和有糖尿病肾病患者相比,非糖尿病肾病患者糖尿病病史明显更短.结论 临床资料能较准确提示糖尿病肾病患者合并有非糖尿病肾病,积极筛查此类患者并进行肾活检,尽早明确诊断,有助于更好地指导治疗,从而改善患者预后.     

2型糖尿病大鼠模型的肾脏和动脉血管并发症

目的制备发病过程类似人类2型糖尿病的动物模型,并观察其肾脏和主动脉的病变特点。方法8周龄SD大鼠高脂、高糖饮食一个月后给予小剂量STZ腹腔注射建立2型糖尿病模型,于成模后4周及8周观察血管功能指标和肾脏功能指标,并对肾脏和血管的病理改变进行观察。结果模型组于成模后4周及8周出现高血糖、高血脂、胰岛素抵抗、肾功能改变和血管功能改变。肾脏光镜下见肾小球内皮及系膜细胞增生;肾小管水肿,管腔内有大量蛋白管型和细胞管型;肾盂区有大量淋巴细胞浸润。动脉血管电镜下见内皮细胞局部损伤严重;内皮细胞与内弹力板连接处空隙增加等。结论用高脂高糖饮食加小剂量STZ腹腔注射可成功制备2型糖尿病大鼠模型,成模后4周及8周后观察肾脏及大血管相继出现病变,是2型糖尿病血管病变研究的理想模型。     

糖尿病大鼠肾内小动脉早期动脉粥样硬化的实验研究

目的:探讨糖尿病大鼠大血管发生动脉粥样硬化(AS)时,肾内小动脉上有无MCP-1、ICAM-1等早期促AS形成的细胞因子的表达。方法:建立链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠模型加高脂、高糖饲养,12周时处死大鼠,HE染色行大鼠主动脉、肾组织病理组织形态检查,免疫组化方法检测MCP-1、ICAM-1表达。结果:DM组血脂、血肌酐及尿蛋白较对照组明显增高。DM大鼠主动脉出现明显动脉粥样硬化改变,同时肾内小动脉上出现MCP-1、ICAM-1的表达,且与血肌酐、尿蛋白水平呈正相关。结论:糖尿病大鼠主动脉发生AS时,肾内小动脉上已有MCP-1、ICAM-1等早期促AS形成的细胞因子的表达,可能参与了糖尿病肾病的发生、发展。     

胰腺局部肾素-血管紧张素系统的生理作用

全身肾素-血管紧张素系统(RAS)在调节血压及水、电解质平衡方面起重要作用。而最近发现多种组织、器官中存在局部独立的RAS,在局部自分泌、旁分泌等生理功能方面起不同程度的作用。目前发现在胰腺组织内,包括胰腺腺泡、导管、胰岛、上皮细胞以及星形细胞中存在局部RAS,在生理和包括低氧、胰腺炎、胰岛移植、糖尿病等病理刺激条件下,其表达发生相应改变。RAS在胰腺内、外分泌功能中起重要作用:调节局部血流、导管细胞分泌碳酸氢钠、腺泡细胞分泌消化酶、胰岛β细胞合成及释放胰岛素、δ细胞分泌生长抑素、胰腺细胞增殖和分化。此外,还可能介导氧化应激诱导的细胞炎症、凋亡和纤维化。通过上述影响,胰腺局部RAS在胰腺炎、糖尿病、囊性纤维化及胰腺肿瘤的形成中可能起一定的作用,本文就胰腺局部RAS的生理功能及临床意义进行综述。     

肾移植术后糖尿病形成的危险因素

目的探讨肾移植后糖尿病(post-transplantation diabetes mellitus,PTDM)发生的危险因素。方法回顾性分析自2003年1月至2006年10月在首都医科大学附属北京同仁医院移植中心101例同种异体尸体肾移植术后病人资料,将其分为PTDM组和非PTDM组,比较2组间年龄、性别、糖尿病家族史、术前体质量指数(BMI)、服用免疫抑制剂(环孢霉素A,CsA;普乐可复,FK506)情况等方面的差异。结果1)PTDM的发生率为11.9%;2)2组患者的平均年龄、糖尿病家族史及术前BMI差异有统计学意义,PTDM组患者的年龄和术前BMI均较非PTDM组偏大,且有明显的糖尿病家族史;3)2组患者性别分布、服用CsA与FK506的患者比例差异均无统计学意义。结论患者糖尿病家族史、较大的年龄及术前较高的BMI是导致PTDM发生的危险因素;性别与PTDM发生无关;与服用CsA的患者相比,服用FK506并不增加PTDM的发生。