新型茛菪烷类化合物对豚鼠回肠肌M受体动力学研究

目的探讨定向合成新型莨菪烷类化合物对豚鼠回肠肌M受体动力学的作用。方法采用豚鼠离体回肠纵肌累积剂量-效应曲线法,求得pD2(解离常数负对数)及Emax(最大效应)值,以乙酰胆碱(ACh)为标准品,比较其亲和力和内在活性。结果MAC-6、MAC-7、MAC-8、MAC-18和MAC-19化合物与豚鼠肠纵肌M受体具有不同程度的亲和力(pD2＝6．59～8．77),引起豚鼠肠纵肌收缩最大效应为ACh的29％～57％,选择性M受体拮抗药阿托品能阻断其作用;相反,MAC-16能显著抑制由ACh引起豚鼠肠纵肌收缩,呈竞争性拮抗作用,其pA2为7．72。结论　定向合成莨菪烷类化合物具有明显的M受体激动或阻断作用,并显示明显的构效关系特征。     

茛菪烷衍生物的合成及其活性研究

目的 设计、合成并筛选具有胆碱能活性,且对M1受体有选择性的莨菪烷衍生物.方法 以3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷为原料,通过酰化反应制备3α-烃氧基乙酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷类衍生物,通过核磁共振及质谱鉴定所合成的化合物.运用豚鼠离体回肠纵肌M受体动力学实验方法以及人源M1,M2受体亚型基因转染的CHO细胞系放射配基受体结合法,对合成的化合物进行活性筛选.结果 制备了6个新的3α-烃氧基乙酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷a～f.化合物d,e对M受体有良好的亲和力及内在活性,并对M1受体具有亚型选择性.结论 化合物d,e为具有M1受体亚型选择性的胆碱能活性化合物.     

莨菪烷类化合物的合成及其对M_3受体的拮抗活性

目的设计、合成系列莨菪烷类衍生物,测试其对M3受体的拮抗活性,并进行构效研究。方法分别以3α-羟基莨菪烷(D0)、3α-羟基-6β-乙酰氧基莨菪烷(T0)为起始物,通过酰化反应合成3α-酰氧基莨菪烷(D类)和3α-酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷(T类)。以碘甲烷对D类化合物作进一步烷基化改造,合成N-甲基-3α-酰氧基莨菪烷碘季铵盐(S类)。选取大鼠气管平滑肌(其收缩效应主要由M3受体介导)为测试样本,通过离体组织功能实验,评价合成物对M3受体的拮抗活性。结果制备6个新莨菪烷类化合物,其对M3受体都有明显的拮抗作用。S1对M3受体的拮抗参数pA2值最大,而T2的pA2值最小。结论对莨菪烷母核上的N原子作甲基化改造使化合物的拮抗活性增强,6β位的乙酰氧基使化合物的拮抗活性降低。     

包甲素合成类似物的过筛试验

本文采用豚鼠离体纵长肌累积剂量-效应曲线法,求解离常数(KD)及最大效应(Emax)值,以氨甲酰胆碱为标准药,对14个莨菪烷类化合物进行比较,结果表明:6β-乙酰氧基去甲莨菪烷,3α-对甲苯甲酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷及3α,6β-二乙酰氧基莨菪烷三化合物有明显的M受体激动作用。其构-效关系提示:6β-乙酰氧基是M激动作用的关健结构,N位上的CH_3能削弱这一作用。     

舟山眼镜蛇毒蕈碱样多肽的分离及其对M胆碱受体的激动效应

目的 从舟山眼镜蛇Naja atra蛇毒中分离毒蕈碱样多肽,探讨其与M胆碱受体的关系.方法 应用分子筛凝胶Sephadex G-50、Sephadex G-100、离子交换凝胶CM-Sepharose F.F.分离纯化目的组分;SDS-PAGE鉴定目的蛋白的纯度并测定其相对分子质量;放射受体分析法测定该物质与大鼠脑组织M胆碱受体的亲和力;选用离体豚鼠回肠纵行肌观察其对M胆碱受体的效应.结果 从舟山眼镜蛇蛇毒中获得一种与大鼠脑组织M胆碱受体具有高亲和力的多肽(Ki为10.12 nmol/L),其相对分子质量约14 kD.该多肽可引起离体豚鼠回肠纵行肌收缩,此效应可被阿托品阻断.结论 舟山眼镜蛇蛇毒中获得与M胆碱受体具有高亲和力的多肽,该多肽对M胆碱受体具有激动效应.     

回肠环肌和纵肌收缩反应的对比观察

在豚鼠和家兔分离与未分离的环肌和纵肌标本上,对比观察它们对电刺激和化学刺激反应的区别,分析参与活动的受体。主要结果①在分离和未分离纵肌之间未见明显的区别,对两种刺激均发生收缩反应;而分离和未分离环肌则有明显的区别,前者对两种刺激均不反应,后者都发生收缩,提示环肌的收缩有赖纵肌-肌间神经丛的存在。②在豚鼠回肠纵肌上含M受体和α_1受体,环肌上除M受体外,尚有N受体,未见α受体;兔的纵肌上以M和α_2受体为主,在环肌上未见此两类受体。     

莨菪类药物的抗组胺受体作用

本文实验证明莨菪类药物可使豚鼠回肠的组胺累加量效曲线平行右移,最大反应不降低,用Scnild作图斜率与-1相差甚大,以剂量比率大小排列其作用强度为:阿托品山莨菪碱东莨菪碱异丙基阿托品樟柳碱;利用交叉保护实验观察到莨菪类药物可提高酚(艹卡)明处理后的残存敏感性;剂量比率实验提示阿托品的抗组胺受体作用性质与苯海拉明相似;家兔H_1受体调节的升压作用亦可被阿托品所阻断。而莨菪类药物对H_2受体调节的大鼠子宫抑制作用基本上无影响。由此可认为:莨菪类药物具有非单纯性竞争性H_1受体阻断作用,这种选择性抗H_1受体作用可能与此类药物抗休克作用有关。     

白芍总甙对豚鼠结肠平滑肌M受体作用的研究

目的：探讨白芍总甙对离体豚鼠结肠平滑肌的作用方式及结肠平滑肌M受体在调节结肠运动中的作用。方法：制备豚鼠结肠纵肌和横肌肌条，观察不同剂量白芍总甙及工具药对离体结肠肌收缩活性的效应，结果：白芍总甙使豚鼠结肠离体平滑肌收缩积分和时间显著性增加。且收缩效应的改变具有剂量依赖性。白芍总甙的这种作用能被阿托品抑制。结论：白芍总甙可通过延长结肠收缩时间，增强结肠收缩幅度而调节结肠运动，结肠平滑肌M受体是白芍总甙作用途径之一。     

银杏叶提取物对结肠运动的影响机制

目的探讨银杏叶提取物(EGb)对豚鼠离体结肠运动的影响及其机制.方法制备豚鼠离体结肠肠段标本,通过灌流给药的方法观察不同浓度EGb、银杏黄酮等对离体结肠收缩活动的影响.结果 EGb (0.5～50.0 mg/L)可对结肠自主活动产生抑制和兴奋两种不同的影响,其中以抑制作用为主.EGb也可部分拮抗由ACh、5-HT引起的结肠运动的增强效应;并协同血管活性肠肽(VIP)、无钙Kreb液灌流引起的抑制作用;对γ-氨基丁酸、肾上腺素引起的结肠运动抑制效应无显著影响;用M受体阻断剂阿托品预处理可部分阻断EGb对结肠自主活动的影响.银杏黄酮(0.01～0.1 mg/L)可使豚鼠离体结肠运动抑制,且表现一定的剂量依赖性.结论 EGb对豚鼠结肠运动的影响可能是通过影响5-HT、ACh、VIP等肠神经系统递质的释放,经M受体介导以及对平滑肌的直接作用等多种途径实现的.银杏黄酮可能是EGb发挥抑制作用的有效部位.     

M2受体对人支气管平滑肌功能性拮抗的影响

目的研究选择性M2受体阻断剂(MET)对人支气管平滑肌功能性拮抗的影响和M2受体在功能性拮抗中的作用.方法将自手术病人所得的离体支气管段随机分若干组(n=8),用电生理的方法测得不同浓度乙酰胆碱(ACh,1、10、100μmol/L)对人离体支气管平滑肌的收缩作用和对β受体激动剂异丙肾上腺素药理效应的功能性拮抗.相同方法和条件下,用选择性M2受体阻断剂MET(0.1～1.0μmol/L)或/和选择性和选择性M3受体阻断剂4-DAMP mustard(30 nmol/L)预处理人离体支气管后,观察实验结果.结果不同剂量ACh使得异丙肾上腺素量-效曲线右移.ACh 100μmol/L时,异丙肾上腺素效能强度下降33倍(-logEC50=-1.49±0.16),Emax下降30%.MET阻断上述胆碱能功能拮抗现象,对组织胺引起的没有作用.另外,在人离体支气管平滑肌M3受体被4-DAMP mustard(30 nmol/L)完全乙酰化的情况下,MET同样阻断ACh对异丙肾上腺素效应的功能拮抗作用.结论M2受体的激活可间接引起人支气管平滑肌的收缩,降低β受体效应,产生胆碱能功能性拮抗现象.