HIV-1感染者CD73~+CD8~+ T细胞减少与T细胞异常活化的相关性研究

目的探讨HIV-1感染者外周血CD8~+T细胞上CD73的表达特点及其与T细胞异常活化和疾病进展的关系。方法研究入选65例HIV-1感染者和27例健康对照。通过流式细胞术检测研究对象外周血CD73~+CD8~+T细胞的频率和绝对计数,并将患者CD73~+CD8~+T细胞绝对计数和频率与其CD4~+T细胞计数、HIV-1载量以及CD38~+CD8~+T细胞频率进行相关性分析。结果与健康对照相比,HIV-1感染者外周血CD73~+CD8~+T细胞绝对计数和频率均明显降低(P均0.05);HIV-1感染者外周血CD73~+CD8~+T细胞绝对计数和频率与CD4~+T细胞计数呈正相关(r=0.555,P=0.001;r=0.342,P=0.005),与CD38~+CD8~+T细胞频率呈负相关(r=-0.384,P=0.002;r=-0.387,P=0.001);HIV-1感染者CD73~+CD8~+T细胞的绝对计数与HIV-1载量呈弱负相关(r=-0.261,P=0.035)。结论 HIV-1感染者外周血CD73~+CD8~+T细胞的减少不但与患者T细胞的活化程度呈显著负相关,而且与AIDS疾病进展相关。     

HAART对HIV-1感染者CD_4~+CD25~+FoxP3~+调节性T细胞构成比活化和稳态的影响

目的观察高效抗反转录病毒治疗(HAART),对艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)感染者外周血CD+4CD25+FoxP3+调节性T细胞(Treg)的构成比、活化和更替水平的影响。方法对入组的17例慢性HIV-1感染病人进行6个月HAART治疗,收集治疗前及治疗6个月后病人外周血,检测外周血调节性T细胞的构成比及CD38、人白细胞抗原(HLA)-DR等活化标志,同时检测调节性T细胞增殖标志Ki-67和凋亡标志Caspase-3。结果 HAART完全应答者外周血中的Treg构成比、CD38和HLA-DR的表达、Ki-67和Caspase-3的表达均较无应答者有显著降低。结论 HAART能够抑制调节性T细胞活化和更替,这有助于进一步了解HAART的免疫学机制。     

HIV-1急性期感染者肠道归巢CD4~+T淋巴细胞的变化特点

目的分析Ⅰ型艾滋病病毒(HIV-1)急性期感染者肠道归巢CD4~+T淋巴细胞(简称CD4细胞)的变化特点及在HIV-1致病机制中的作用。方法共纳入26例HIV-1急性期感染者、31例HIV-1慢性期感染者和20例健康对照者。采用流式细胞仪检测三组样本的肠道归巢CD4细胞的比例和数量,并分析HIV-1急性期感染者肠道归巢CD4细胞与CD4细胞之间的相关性。结果与健康对照者相比,HIV-1急性期感染者肠道归巢CD4细胞的比例(平均值13.5%vs 11.0%,P0.05)和数量(平均值88.1vs 61.9,P0.01)均显著减少。HIV-1慢性期感染者肠道归巢CD4细胞的比例(平均值11.0%vs 8.1%,P0.01)和数量(平均值61.9vs 11.9,P0.000 1)均显著低于HIV-1急性期感染者。HIV-1急性期感染者肠道归巢CD4细胞的数量与外周血CD4细胞(r=0.53,P=0.006)和CD4/CD8细胞比例(r=0.51,P=0.009)呈显著正相关,与血浆中HIV-1病毒载量(r=-0.70,P=0.000 6)和机体T细胞免疫活化水平(r=-0.57,P=0.003)呈显著负相关。结论肠道归巢CD4细胞的丢失可能在HIV-1急性期感染的致病机制中起作用。     

IL-21对HIV-1感染者外周血CD19~+IgD~+CD38~(hi)B细胞及IL-10表达水平的影响

目的探讨白细胞介素-21(IL-21)/信号传导与转录激活因子3(STAT3)信号通路对1型艾滋病病毒(HIV-1)感染者外周血中调节B细胞(Breg)和IL-10表达水平的影响及与HIV-1感染疾病进展的关系。方法 CD40L单独或联合IL-21刺激联合抗反转录病毒治疗(cART)前后的HIV感染者及健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)20 min或120 h,用流式细胞术(FCM)检测CD19~+IgD~+CD38~(hi)B细胞的比例变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定培养上清中IL-21及IL-10水平,并用蛋白印迹试验(WB)结合FCM检测B细胞中STAT3的磷酸化水平。结果本次研究纳入的健康对照(HC)、未经治疗的HIV-1感染者及cART48周的HIV-1感染者各15例。相对于健康对照组,HIV-1感染者CD4~+T淋巴细胞数量显著降低(P0.000 1),cART后显著升高(P=0.035 7);HIV-1感染者血浆中病毒载量为(5.025±0.952 6)Lg10拷贝/mL,cART后其病毒载量被有效抑制;HIV-1感染者Breg的比例(P=0.003 6)及IL-10水平(P=0.003)显著上调,且cART前后HIV-1感染者的IL-10水平与IL-21均呈正相关[(r=0.582 3,P=0.022 5),(r=0.578 9,P=0.023 7)];IL-21联合CD40L刺激能诱导HIV-1感染者STAT3磷酸化(P=0.003 9),进而上调其CD19~+IgD~+CD38~(hi)B细胞的比例(P=0.034 8)及IL-10的表达水平(P=0.015 3)。结论 HIV-1感染导致CD19~+IgD~+CD38~(hi)B细胞比例及IL-10表达水平均上调,且上调的IL-10水平与IL-21水平呈正相关。IL-21可能通过STAT3信号通路调控HIV-1感染者Breg细胞的分化及IL-10的分泌。     

CD1d~(hi)CD5~+CD19~+B细胞在HIV-1感染者外周血中的表达

目的研究艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者外周血中调节性B细胞(Breg)与T淋巴细胞数量、病毒载量及白介素-10(IL-10)的表达水平,分析其相关性并探讨Breg在HIV发病机制中的作用。方法选择30例未经抗病毒治疗的HIV-1感染者,分离外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞术(FCM)检测CD1dhi CD5+CD19+B细胞的比例、CD+4T淋巴细胞(简称CD4细胞)数量、CD+8T淋巴细胞(简称CD8细胞)数量,用酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定其PBMC培养液上清中IL-10的表达水平,经反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测病毒载量,与同期选择的健康对照组比较。结果与健康对照组相比,HIV-1感染者的CD1dhi CD5+CD19+B细胞的比例均明显升高(P0.0001),其培养液上清中IL-10的表达水平也显著升高(P=0.0005)。另外,HIV-1感染者PBMC中的CD1dhi CD5+CD19+B细胞的比例与CD4细胞数量(r=-0.6084,P=0.0004)及CD4细胞/CD8细胞的比值(r=-0.8715,P0.0001)均呈显著负相关性,与血浆中病毒载量的水平(r=0.6825,P0.0001)及IL-10的水平均呈正相关性(r=0.7656,P0.0001),而与CD8细胞数量未见相关性(r=0.1183,P=0.5334)。结论CD1dhi CD5+CD19+B细胞比例与其相关细胞因子IL-10表达水平的上调可能参与HIV的发病机制。     

HIV-1感染者血浆丙酮酸对CD8+ T细胞功能的影响及临床意义

目的?探讨HIV-1感染者血浆丙酮酸对CD8+ T细胞功能的影响与疾病进展的关系。方法?入组11例健康对照（healthy controls, HCs）与55例接受长期抗逆转录病毒治疗的HIV-1感染者。通过液相色谱质谱联用法检测HCs与HIV-1感染者血浆丙酮酸水平，比较丙酮酸不同浓度组在HIV-1病毒库数量、CD8+ T细胞亚群比例、CD8+ T细胞功能间的差异。结果?与HCs（中位数416.71 ng/ml）相比HIV-1感染者（中位数539.16 ng/ml）血浆丙酮酸水平显著升高（P=0.0189）。与血浆低丙酮酸浓度组（低浓度组）相比，高丙酮酸浓度组（高浓度组）HIV-1细胞相关未剪接核糖核酸（HIV-1 cell associated un-spliced ribonucleic acid, HIV-1 CA RNA）、HIV-1 CA RNA/HIV-1 DNA的比值均显著升高；CD8+ T中央记忆T细胞（central memory T cells, TCM）比例显著升高；CD8+ T细胞表达TNF-α、IL-2、IFN-γ、CCL5的比例均降低，而表达CCL4的比例升高。血浆丙酮酸水平与CD8+ T细胞表达TNF-α（r=-0.3584，P=0.0106）、IL-2（r=-0.4975，P=0.0002）、IFN-γ（r=-0.4101，P=0.0031）、CCL5（r=-0.5655，P＜0.0001）的比例呈负相关，与CCL4（r=0.4711，P=0.0014）的比例呈正相关。结论 长期抗病毒治疗的HIV-1感染者血浆丙酮酸水平升高，且丙酮酸水平与HIV-1病毒库的活跃程度以及CD8+ T细胞功能紊乱相关。     

CXCR5~+CD8~+ T细胞在HIV感染中的免疫特征及其与疾病进展关系的研究

目的探讨HIV感染者外周血CXCR5~+CD8~+T细胞的频率、功能变化及其与病情进展的相关性。方法收集40例HIV感染者和15例健康对照者,采用流式细胞分析术检测其外周血CXCR5~+CD8~+T细胞频率及IFN-γ和IL-10表达,并分析其与血浆HIV载量和外周血CD4~+T细胞计数的相关性。结果与健康对照组相比,HIV感染组外周血CXCR5~+CD8~+T细胞频率上调(P0.05),且与外周血CD4~+T细胞计数呈弱正相关(r=0.349,P=0.027),与血浆HIV载量呈弱负相关(r=-0.377,P=0.040);HIV感染者外周血CXCR5~+CD8~+T细胞IFN-γ表达与血浆HIV载量呈负相关(r=-0.514,P=0.002);而CXCR5~+CD8~+T细胞IL-10的表达在HIV感染者中明显上调(P0.05),与外周血CD4~+T细胞计数呈弱负相关(r=-0.317,P=0.046),与血浆HIV载量呈正相关(r=0.670,P=0.002)。结论 HIV感染者外周血CXCR5~+CD8~+T细胞频率功能变化与疾病进展密切相关。     

AIDS患者高效抗逆转录病毒联合治疗后外周血CD+8 CD+38T细胞与病毒载量同步变化

目的了解艾滋病(AIDS)患者高效抗逆转录病毒联合治疗(HAART)前后外周血CD+38抗原在CD+8T淋巴细胞上的表达情况.方法应用流式细胞仪采用双色荧光抗体检测技术检测CD+8 CD+38 T细胞;用罗式核酸扩增荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测血浆病毒载量(VL).结果 HAART后2周内CD+8 CD+38 T细胞数与VL开始同步下降,12周后83%AIDS患者的VL降至＜500拷贝/ml,同时CD+8 CD+38 T细胞计数与治疗前相比非常明显地降低(P＜0.001).而且63%的AIDS患者在血浆VL低于检测水平时,其CD+8 CD+38 T细胞数仍继续下降(与VL开始达到检测水平以下时相比,P＜0.001).结论 AIDS患者在HAART开始后,CD+8 CD+38 T细胞数与VL快速下降,在24周左右降至正常水平;并且CD+8 CD+38 T细胞数在VL达到检测不到时仍继续下降,提示在血浆VL低于检测水平时,CD+8 CD+38 T细胞数能够作为判断病毒是否复制的标记.     

HAART对HIV感染者NK细胞FcγRII表达及疾病进展的影响

目的研究艾滋病病毒(HIV)感染者外周血中自然杀伤细胞(NK cells)亚群的比例,各亚群细胞对CD32A/CD32B/CD57的表达水平,高效抗反转录病毒治疗(HAART)与疾病进展的相关性。方法对未经治疗的慢性HIV感染者35例和进展期患者23例,分析NK细胞各亚群的比例,各亚群细胞对CD32A/CD32B/CD57的表达水平,CD4+T淋巴细胞(简称CD4细胞)、CD8+T淋巴细胞(简称CD8细胞)计数及CD4/CD8比值,并对以上各因素进行相关性分析。以上患者中选14例慢性HIV感染者、10例进展期患者进行HAART治疗(替诺福韦+拉米夫定+依非韦伦)6个月,分析治疗对以上因素的影响。结果机体感染HIV后,CD56dimNK细胞的比例下降,CD56neg NK细胞的比例升高(P0.0005);CD57+CD56dimNK细胞、CD57+CD56neg NK细胞的比例下降(P0.05),CD32B+CD56dim NK细胞、CD32B+CD56neg NK细胞的比例升高(P0.05)。CD56dimNK细胞比例与CD4/CD8比值正相关(P=0.0176,r2=0.0813),CD56neg NK细胞比例与CD4/CD8比值呈负相关(P=0.0293,r2=0.0689)。经过治疗的慢性HIV患者的CD56bright NK细胞的比例降低(P0.05),所有患者的CD4细胞计数及CD4/CD8比值升高(P0.01)。结论 HIV通过抑制NK细胞成熟增加抑制型受体表达,改变NK细胞亚群比例来抑制NK细胞功能。有效的HAART治疗可以恢复HIV患者CD4细胞计数及CD4/CD8比值,促进免疫重建,降低死亡概率。     

抗病毒治疗对HIV-1感染者调节B细胞和记忆B细胞免疫平衡的影响

目的探讨抗反转录病毒治疗(ART)前后,艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者外周血中调节B细胞(Breg)和记忆B细胞(Bmem)的平衡,以及白介素-10(IL-10)表达水平与HIV-1感染疾病进展的关系。方法选择30例未治疗的HIV-1感染者,于ART治疗前和治疗12周,分离外周血单个核细胞(PBMC),用流式细胞术(FCM)检测CD19+CD24hi CD38hi B细胞、CD19+CD24hi CD38loB细胞的及CD19+IL-10+B细胞比例的变化;用酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定培养上清中IL-10水平,与健康对照组比较。结果相对于健康对照组,感染HIV-1后,CD19+CD24hi CD38hi B细胞的比例(P=0.0001)、Breg/Bmem比值(P0.0001)及上清中IL-10水平(P=0.0028)均升高,而CD19+CD24hi CD38loB细胞的比例(P=0.0005)显著降低,差异具有统计学意义。ART开展12周后,CD19+CD24hi CD38hi B细胞的比例(P=0.0069)、Breg/Bmem比值(P=0.0012)及上清中IL-10水平(P=0.041)均显著降低,且上清中IL-10水平与Breg(R2=0.1347,P=0.0039)的比例呈正相关性,而与Bmem细胞的比例呈显著负相关(R2=0.1705,P=-0.001)。结论 HIV-1感染改变了CD19+CD24hi CD38hi B细胞的比例、其相关细胞因子IL-10的表达水平,并破坏了Breg/Bmem平衡;经过ART治疗后,CD19+CD24hi CD38hi B细胞的比例与其相关细胞因子IL-10的表达水平及Breg/Bmem平衡可以得到逐渐恢复。