外周血中白蛋白mRNA作为肝癌微小转移标志物的进一步研究

目的　检测不同肝脏疾病患者的外周血中白蛋mRNA(ALBmRNA) ,探讨外周血中ALBmRNA作为肝癌微小转移标志物的特异性。方法　分离原发性肝癌患者以及肝硬化、急慢性肝炎、肝转移癌、肝脏良性肿瘤患者和健康志愿者的外周血单个核细胞 ,提取单个核细胞的总RNA ,进行RT PCR ,将RT PCR产物再进行Southern杂交。结果　原发性肝癌患者组外周血中ALBmRNA的检出率为 44 .8% ,对照组检出率为 2 9.2 % ,两者之间的差异无统计学意义 (P≥ 0 .0 5 )。结论　作为肝癌微小转移的检测标志物ALBmRNA的特异性不高     

结直肠癌组织中ECM1基因水平的测定及临床意义

目的:探讨细胞外基质蛋白1基因在结直肠癌中的表达及其意义.方法:基于TaqMan-MGB荧光探针技术,建立实时荧光定量RT-PCR方法,检测正常结直肠黏膜组织(n=46),结直肠腺瘤(n=18),结直肠癌(淋巴结未转移)(n=25)和结直肠癌(淋巴结转移)(n=21)中ECM1基因的表达.结果:正常黏膜,腺瘤组织,结直肠癌(淋巴结未转移)组织和结直肠癌(淋巴结转移)组织中ECM1基因的表达均值分别为(9.81±3.16)×10~8拷贝/g RNA,(10.1±3.65)×10~8拷贝/g RNA,(6.89±2.96)×10~9拷贝/g RNA,(5.01±2.22)×10~(10)拷贝/g RNA.正常黏膜和腺瘤组织组间无明显差异(P>0.05);结直肠癌(淋巴结未转移)组明显高于正常黏膜和腺瘤组织组P<0.01);结直肠癌(淋巴结转移)组明显高于其他三组(P<0.01).结论:ECM1基因在结直肠癌中表达升高,并且与结直肠癌的转移相关.     

外周血液CEAmRNA基因表达与食管癌微转移关系的研究

目的探讨靶基因CEAmRNA在食管癌患者外周血中的表达及与肿瘤微转移的关系.方法应用巢式-反转录聚合酶链反应(Nested-RT-PCR)检测50例无远处转移、10例有远处转移的食管癌患者,10例食管良性病变和10例健康成人外周血中癌胚抗原CEAmRNA基因的表达.结果食管癌良性病变者和健康成人的外周血中均未检测出CEAmRNA阳性细胞.50例无远处转移、10例有远处转移的食管癌患者外周血中CEAmRNA阳性率分别为30.2%(16/50)、80.0%(8/10),P＜0.01;食管癌Ⅳ期与Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ期者阳性率比较差异有显著性(P均＜0.01),而其他各期之间阳性率比较差异无显著性(P＞0.05);不同程度病理分化者间阳性率比较差异无显著性(P＞0.05).结论食管癌患者临床早期已有癌细胞微转移.应用Nested-RT-PCR检测外周血中CEAmRNA靶基因有助于早期诊断.     

外周血有核细胞中t-PA mRNA的表达与血栓性疾病的相关性研究

目的探讨血栓性疾病与组织型纤溶酶原激活物(t-PA)mRNA表达的关系。方法用逆转录-PCR(RT-PCR)法检测外周血有核细胞中t-PA mRNA的表达,发色底物法测定血浆t-PA的活性。结果血栓形成组及血栓前状态组外周血有核细胞中t-PA mRNA的表达均明显增强,同正常对照组比较有显著性差异(P<0.01),两组人群血浆中t-PA的活性也都明显降低,同正常对照组比较有显著性差异(P<0.01)。外周血有核细胞中t-PA mRNA的表达与血栓前状态密切相关。结论外周血有核细胞中t-PA mRNA的表达与血栓形成及血栓前状态密切相关,有可能作为血栓前状态的早期辅助监测指标。     

狼疮肾炎患者外周血单核细胞载脂蛋白EmRNA表达及意义

目的研究外周血单核细胞载脂蛋白E（apoE）mRNA表达，初步探讨apoE在狼疮肾炎（LN）中的作用和意义。方法系统性红斑狼疮（SLE）患者19例，其中LN患者13例：LN-Ⅳ型（弥漫性LN）8例、LN-Ⅱ型（系膜增生性LN）5例，非LN的SLE患者组6例，健康对照组8名。通过密度梯度离心法分离外周血单核细胞，反转录-聚合酶链反应检测单核细胞apoEmRNA表达量。结果LN-Ⅳ型组apoEmRNA表达量明显高于LN-Ⅱ型组（脚．006）和其他两组（均为P=O．000）。与正常对照组和非LN的SLE组比较，LN-Ⅱ型组表达也上调，P值分别为0．018和0．031，正常对照组和非LN的SLE组之间差异无统计学意义，P=O．276。19例患者apoEmRNA表达量与外周血总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）水平之间无直线相关关系，P值分别为0．697，0．647。LN-Ⅳ型组、LN-Ⅱ型组、非LN的SLE组血清总胆固醇水平无差异，P=0．764，3组TG差异也无统计学意义，P=0．525。LN-Ⅳ型组肾脏病变活动指数高于LN-Ⅱ型组，P=0．006。结论LN患者单核细胞apoE表达水平可能与体内免疫反应和活动性炎症病变有关。     

结直肠癌患者外周血中癌胚抗原-mRNA的表达及其临床意义

目的：肿瘤复发转移仍是威胁患者生存的重要原因，及早检出外周血中的循环肿瘤细胞并进行有效的综合治疗有着重要的临床意义。检测结“直肠癌患者外周血中癌胚抗原（CEA）－mRNA的表达及血清CEA蛋白的含量，并分析其临床价值。方法：35例有明确临床肿瘤病灶存在的结直肠癌患者、9例根治术后患者和37例健康志愿者，分别以逆转录PCR（RT－PCR）检测其外周血中CEA－mRNA的表达，时间分辨荧光方法测定其血清CEA蛋白的含量。结果：35例结直肠癌患者CEA－mRNA阳性率为45．7％，而健康对照组阳性率为2．7％，两者比较差异有显著性（P＜0．05）；9例术后患者CEA－mRNA仅2例阳性；CEA－mRNA阳性表达率与肿瘤分期相关，与肿瘤细胞分化程度并不相关。CEA－mRNA阳性组血清CEA蛋白阳性率（72．2％）显著高于CEA－mRNA阴性组（42．3％）。结论：外周血细胞中CEA－mRNA的表达与肿瘤分期相关，有可能作为结直肠癌微转换的一个监测指标。长期的随访有助于评价其临床价值。     

肺癌患者外周血癌胚抗原、细胞角蛋白19mRNA表达水平与肿瘤分期、近期疗效及预后的关系

目的探讨肺癌患者治疗前后外周血癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19（CK19）mRNA的表达水平及其与肿瘤分期、近期疗效、预后的关系。方法应用TaqMan定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测78例肺癌患者（鳞癌28例、腺癌40例、小细胞肺癌9例、大细胞肺癌1例）治疗前后、30例肺部良性疾病患者及30名健康对照者外周血癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19（CK19）mRNA的水平；同时采用酶联免疫吸附法测定肺癌患者治疗前血清CEA和细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）水平。患者随访2年。结果肺癌患者外周血CEA、CK19mRNA阳性率分别为69．2％（54／78）、62．8％（49／78），显著高于肺部良性疾病患者及健康对照者，三者差异有统计学意义（χ^2值分别为37．65、41．54；27．41、30．84，P均〈0．01）。鳞癌组CK19mRNA阳性率最高，腺癌组CEAmRNA阳性率最高。不同分期肿瘤患者间CEA、CK19mRNA阳性率差异无统计学意义（χ^2值分别为3．63、3．81，P〉0．05）。肺癌患者外周血CEA、CK19mRNA的阳性率显著高于CEA、CYFRA21-1蛋白水平；手术后CEA、CK19mRNA阳性率显著下降；化疗后阳性率下降不明显。化疗前CEAmRNA阳性患者的中位生存期明显低于阴性患者（分别为8．5、11．7个月），化疗前CK19mRNA阳性患者的中位生存期明显低于阴性患者（分别为8．9、12．3个月）；术前CEAmRNA阳性患者肿瘤复发或转移率（29．4％）高于术前阴性患者（7．7％），术前CK19mRNA阳性患者肿瘤复发或转移率（18．8％）高于术前阴性患者（7．1％）。结论检测肿瘤患者外周血CEA、CK19mRNA水平对于预测肿瘤细胞微转移有一定的临床意义，有助于评估手术疗效及预测预后。CEA、CK19mRNA表达水平与肿瘤分期无关。CEA、CK19基因检测的敏感性优于蛋白水平的检测，有助于肺癌的辅助诊断。     

荧光定量PCR检测CK20在直肠癌外周血中表达的意义

目的:分析外周血中CK20基因产物的表达与直肠癌Dukes分期和组织学分型的关系,探讨用FQ-PCR检测CK20来预测直肠癌微转移以及判断患者预后的价值.方法:采集47例直肠癌患者外周血标本、10例良性肠道病患者及10例健康志愿者外周血标本.用FQ-PCR检测外周血CK20的表达情况.结果:10例良性肠道病患者及10例健康志愿者外周血中均检测不到CK20的表达,与直肠癌组有明显差异(72.34%,34/47)(χ2=37.434,P<0.01).47例直肠癌患者外周血中CK20的表达量与Dukes分期呈正相关(r=0.680,P<0.01).结论:直肠癌外周血中CK20的表达量与肿瘤分期有关,并且分期越晚CK20的表达量越多,用CK20FQ-PCR检测癌转移较常规病理组织学敏感,对直肠癌患者病情的判定、疗效评价及恢复情况具有重要临床意义.