促红细胞生成素预防人脐静脉内皮细胞凋亡的作用

目的 建立氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡模型,探讨促红细胞生成素(EPO)对ox-LDL诱导HUVECs凋亡的影响.方法 取体外培养3～6代的HUVECs用于实验.实验分为两组:一组细胞予以不同浓度(6.25、50、100 kU/L)重组人促红细胞生成素(rhEPO)预处理24 h,再加入100 mg/L ox-LDL孵育48 h;另一组细胞加入反式或顺式LOX-1 mRNA预处理24 h,再加入 100 mg/L 的ox-LDL孵育12 h.采用存活率、凋亡率和Bcl-2/Bax比值评价细胞凋亡情况.结果 与ox-LDL组比较,随rhEPO浓度的递增,细胞存活率增高,细胞凋亡率降低,凋亡蛋白Bcl-2/Bax比值增高(P均<0.05),呈剂量依赖性.反式LOX-1 mRNA(0.5 μmol/L)预处理组凋亡蛋白Bcl-2/Bax比值较ox-LDL组明显增高(P<0.05);顺式LOX-1 mRNA(0.5 μmol/L)预处理组Bcl-2/Bax比值与ox-LDL组则无明显差异.结论 ox-LDL可以诱导HUVECs凋亡,并且通过LOX-1 mRNA来调节,rhEPO可增高Bcl-2/Bax比值,抑制ox-LDL诱导的HUVECs凋亡.     

血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1基因变异与冠心病

冠心病的发病机制涉及多因素和复杂的分子机制，而动脉粥样硬化是冠心病的病理基础。研究表明，氧化低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein，OX-LDL）的特异性受体——血凝素样ox-LDL受体1（lectin-likeoxi-dized low density lipoprotein receptor-1，LOX-1）可通过损伤血管内皮，促进炎症反应，加速细胞凋亡和泡沫细胞形成等机制促进动脉粥样硬化的发展，进而导致冠心病的发生、发展。LOX-1的基因变异可影响LOX-1的表达，而LOX-1的异常表达可影响冠心病的发生、发展。     

不同剂量瑞舒伐他汀对氧化修饰低密度脂蛋白诱导单核-巨噬细胞的肝X受体及小凹蛋白1表达的影响

目的 研究不同剂量瑞舒伐他汀对氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的人单核巨噬细胞肝X受体及小凹蛋白1表达的影响.方法 实验分6组：空白对照组、ox-LDL对照组、不同剂量（0.01μmol/L,0.1μmol/L,1.0μmol/L,5.0 μmol/L）瑞舒伐他汀组,RT-PCR法测定各组肝X受体及小凹蛋白1mRNA的表达.结果 空白对照组与ox-LDL对照组肝X受体mRNA的表达分别为1.00±0.02与0.26±0.02,两组比较差异有统计学意义（t=56.392,P＜0.001）;小凹蛋白1mRNA分别为1.00±0.04与0.27±0.01,两组比较差异有统计学意义（t=31.278,P＜0.001）.ox-LDL对照组及不同剂量瑞舒伐他汀组间肝X受体及小凹蛋白1mRNA表达比较,差异均有统计学意义（F值分别为72.154、66.007,P均＜0.001）,随瑞舒伐他汀剂量的增加,肝X受体及小凹蛋白1mRNA表达呈上升趋势,两两比较差异均有统计学意义（P均＜0.05）.结论 瑞舒伐他汀可上调单核-巨噬细胞肝X受体mRNA、小凹蛋白1mRNA的表达,且呈剂量依赖性.     

基于ox-LDL/LOX-1信号通路探讨脂质代谢紊乱促进肺癌进展中的机制

目的 基于氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）/人凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)信号通路探讨脂质代谢紊乱促进肺癌进展的机制。方法 收集81个已鉴定的具有成对相邻非癌组织（离肿瘤至少5 cm）的肺腺癌组织,使用免疫组织化学检测LOX-1表达。肺腺癌细胞系（A549、H1299细胞）中过表达LOX-1。用Transwell测定细胞侵袭能力。用不同浓度oxLDL处理细胞,并检测细胞中LOX-1表达情况。结果 在包含原发性人肺癌和匹配的邻近非癌组织中,肿瘤中LOX-1染色比非癌组织样品明显增强（中值H分数99.4 vs.16.2,P <0.001）。高LOX-1表达与低生存显著相关（P <0.001）。与无淋巴结转移的患者相比,发生淋巴结转移患者的癌组织具有更高的LOX-1水平（中值H分数83.2 vs.121.1,P <0.01）。LOX-1过表达显著促进肺癌细胞的侵袭转移细胞数（P <0.01）。此外,LOX-1是ox-LDL诱导的肺癌细胞转移所必需的功能靶点。伊他替尼抑制LOX-1过表达的A549在体外的转移能力。结论 LOX-1的表达随着oxLDL水平...     

阿托伐他汀钙调节人脐静脉内皮细胞E-选择素和细胞间黏附分子1表达的浓度依赖性

目的：观察具有调脂作用的阿托伐他汀钙在不同浓度下对肿瘤坏死因子诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞表达E-选择素和细胞间黏附分子1的影响。 方法：①实验于2002-05／2003-12在大连医科大学附属第二医院实验室完成。将健康婴儿脐带进行无菌处理，用D-Hank’s液冲洗脐静脉，1g/L胶原酶消化、离心，置于37℃、体积分数0．05 CO2培养箱中培养，选择第2,3代细胞作为实验用。②用肿瘤坏死因子40μg／L、不同浓度（0．005～10μmol／L）的阿托伐他汀钙与体外培养的人脐静脉内皮细胞共同孵育24h后，提取细胞的总RNA，采用半定量反转录聚合酶链反应在mRNA水平进行分析。③用曲线图表示E-选择素和细胞间黏附分子1表达在不同浓度阿托伐他汀钙影响下的变化趋势。 结果：①在mRNA水平，阿托伐他汀钙对肿瘤坏死因子诱导的人脐静脉内皮细胞所表达的E-选择素与细胞黏附分子1均具有浓度依赖性。②阿托伐他汀钙对肿瘤坏死因子诱导人脐静脉内皮细胞表达E-选择素mRNA呈促进作用，即阿托伐他汀钙在0～10μmol／L的浓度区间内，随着其浓度由0，0．005,0．01μmol／L渐升至10μmol／L，E-选择素mRNA的表达呈逐渐升高的趋势。③阿托伐他汀钙对肿瘤坏死因子诱导人脐静脉内皮细胞表达细胞间黏附分子1的影响呈双向性，具有浓度差异性。即随着阿托伐他汀钙浓度由0,0．005,0．01μmol／L升至0．05μmol／L，细胞间黏附分子1 mRNA表达呈逐渐下降趋势，而在高浓度（0．05-10μmol／L）区间，随着阿托伐他汀钙浓度0．05，0．1μmol／L渐升至10μmol／L，细胞间黏附分子1 mRNA的量呈逐渐升高的趋势。 结论：在基因水平，阿托伐他汀钙对肿瘤坏死因子诱导血管内皮细胞黏附分子的表达有着确切的调节作用，且存在着浓度依赖性，并在不同的浓度区间，对不同的黏附分子作用不同。     

心肌梗死微环境中氧化低密度脂蛋白对树突状细胞诱导炎症反应的影响

目的：体外模拟高脂血症小鼠心肌梗死（myocardial infarction, MI）和肾素-血管紧张素系统（RAS）被激活的内环境,研究氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）能否在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的基础上进一步诱导树突状细胞（dendritic cells, DCs）的成熟、迁移和炎症反应,并探讨可能参与其中的信号通路。方法：诱导C57BL/6J小鼠骨髓细胞分化成DCs,然后加入坏死心肌细胞上清,分别给予AngⅡ和ox-LDL+AngⅡ干预48 h。流式细胞仪检测DCs的成熟标志物（CD83）和协同共刺激分子（CD86）的表达,用qPCR、ELISA方法测定炎性因子的表达。Western 印迹法检测核因子κB（NF-κB）和IκB磷酸化程度,以及血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）和Toll样受体（TLR）4信号通路的表达。结果：ox-LDL能够在AngⅡ基础上进一步诱导CD83和CD86的表达,增强炎性因子和趋化因子的表达,增强NF-κB和IκB磷酸化程度（P<0.05）。ox-LDL能够在AngⅡ基础上进一步上调LOX-1的表达,同时激活了TLR4-MyD88-NF-κB通路（P<0.05）。结论：ox-LDL可能在AngⅡ的基础上进一步诱导DCs免疫成熟、迁移和炎症反应;LOX-1-TLR4-MyD88-NF-κB信号通路可能参与DCs成熟,以及DCs在高脂血症合并心肌梗死发生和发展中引起炎症反应的过程。     

70例急性脑梗死患者血清OX—LDL及S—100B蛋白检测分析

目的讨论急性脑梗死患者血清OX-LDL、S-100B蛋白的表达规律及临床意义。方法用ELISA法检测70例急性脑梗死患者发病24h内及40例正常时照组血清OX-LDL、S-100B蛋白含量。结果急性脑梗死患者血清0X—LDL、S-100B蛋白含量均显著高于正常对照组（P〈0．01）,它们分别为（615．9±197．6）μg／L、（0．884±0．594）μg／L;正常对照组为（158．6±68．4）μg／L、（0．065±0．02）μg／L。急性脑梗死患者血清OX-LDL、S-100B蛋白含量呈正相关（r=0．536,P〈0．01）,且含量高低与病情严重程度有密切关系。结论血清OX-LDL、S-100B蛋白的含量可作为急性脑梗死病情监测的指标。     

三七总皂苷对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞血管细胞黏附分子1表达的影响

背景：氧化低密度脂蛋白能诱导血管内皮细胞活化和黏附分子表达,在动脉粥样硬化形成早期起重要作用。三七总皂苷在心血管系统方面具有保护血管内皮细胞、显著改善动脉粥样硬化病变程度的药理作用。目的：验证三七总皂苷对氧化型低密度脂蛋白损伤内皮细胞后血管细胞黏附分子1的表达及与人单核细胞黏附的影响。设计、时间及地点：体外实验,分组对照,于2007—03／2008—05在北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室完成。材料：原代人脐静脉内皮细胞为美国CascadeBiologics公司产品;三七总皂苷（血塞通冻干粉针）为黑龙江珍宝岛制药有限公司产品,成分为三七总皂苷,批号：20040207。方法：以培养原代人脐静脉内皮细胞作为靶细胞,用氧化型低密度脂蛋白造成人脐静脉内皮细胞损伤模型。将培养的人脐静脉内皮细胞分为5组：氧化型低密度脂蛋白组（100mg／L）、氧化型低密度脂蛋白＋三七总皂苷组（终浓度分别为200,100,50mg／L）、正常对照组。主要观察指标：光镜下观察细胞形态变化,四甲基偶氮唑盐法检测细胞活性;采用蛋白定量法检测人脐静脉内皮细胞与单核细胞的黏附率;用流式细胞仪测定人脐静脉内皮细胞的血管细胞黏附分子1的蛋白表达。结果：氧化型低密度脂蛋白作用人脐静脉内皮细胞后12,24．h时,人脐静脉内皮细胞损伤明显,细胞活性显著降低,人单核细胞与人脐静脉内皮细胞的黏附率显著升高,人脐静脉内皮细胞的血管细胞黏附分子1的蛋白表达水平也均明显升高,_均明显高于正常对照组（P〈0．05,P〈0．01）,而三七总皂苷能使氧化型低密度脂蛋白损伤的人脐静脉内皮细胞形态趋于正常,活性增强,并明显降低人单核细胞与人脐静脉内皮细胞的黏附率,以及显著降低血管细胞黏附分子1的蛋白的表达水平,与氧化型低密度脂蛋白组相比均有显著性差异（P〈0．05,P〈001）,这种作用随着剂量的增加而增强。结论：三七总皂苷能通过下调血管细胞黏附分子1的表达抑制单核一血管内皮细胞黏附,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用,这可能是其治疗动脉硬化闭塞症的机制之一。     

阿司匹林对慢性心力衰竭患者凝血状态的干预作用

目的：了解慢性心力衰竭患者体内凝血状态的变化，并观察短期使用小剂量阿司匹林对其凝血状态的干预作用。方法：选择2004-01／2005-07安徽医科大学第一附属医院收治的60例慢性心力衰竭患者（心功能Ⅱ～Ⅳ级），随机分为标准抗心力衰竭组30例及阿司匹林组30例。标准抗心力衰竭组接受标准抗心衰治疗，包括血管紧张素转化酶抑制剂单用或加用利尿剂，合用地高辛0．125～0．25mg／d，心功能Ⅱ～Ⅲ级患者加用β-受体阻滞剂；阿司匹林组在标准抗心衰治疗基础上，加阿司匹林75～100mg／d。在进入试验第1天和治疗2周后采集血标本，分别测定血浆P-选择素、血浆血管性假性血友病因子、D-二聚体水平。以30例同期健康体检者为正常对照组。结果：90例受试者全部进入结果分析。①慢性心力衰竭患者血P-选择素、血管性假性血友病因子和D-二聚体水平明显高于正常对照组[（21．17&;#177;4．05），（16．78&;#177;3．26）g／L；（175．63&;#177;28．16）％，（125．78&;#177;24．95）％；（0．86&;#177;0．24），（0．51&;#177;0．15）mg／L，P均〈0．05]。②标准抗心力衰竭组治疗后P-选择素、血管性假性血友病因子和D-二聚体水平较治疗前均下降[（18.02&;#177;2.65），（21.45&;#177;3.97）g/L；（156.23&;#177;20．13）%，（175．23&;#177;25．6）%；（0．62&;#177;0．19），（0．87&;#177;0．21）mg／L；P均〈0．05]。③阿司匹林组治疗后P-选择素、血管性假性血友病因子和D-二聚体水平较治疗前也显著下降[（16．39&;#177;3．05），（20．87&;#177;4．06）g／L；（149．21&;#177;23．56）％，（176．01&;#177;28．12）％；（0．56&;#177;0．20）mg／L，（0．84&;#177;0．19）mg／L；P均〈0．05]。④标准抗心力衰竭组和阿司匹林组患者治疗前血P-选择素、血管性假性血友病因子和D-二聚体水平差异无显著性（P〉0．05）；治疗后阿司匹林组组各指标均低于标准抗心力衰竭组，但无统计学意义（P〉0．05）。结论：慢性心力衰竭患者体内存在高凝状态，有血栓形成的倾向，短期使用小剂量阿司匹林对心衰的凝血状态影响小，慢性心力衰竭患者阿司匹林使用的剂量及疗程有待于进一步研究。     

氧化低密度脂蛋白刺激内皮细胞程序性死亡配体-1的表达

目的:研究氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞的负性共刺激分子程序性死亡因子配体-1(PD-L1)袁达的影响,探讨动脉粥样硬化发病的免疫机制.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,并分别与不同浓度(10、50、100 mg/L)ox-LDL温育24 h,以PBS作阴性对照,采用逆转录聚合酶链反应、流式细胞技术分别检测人脐静脉内皮细胞PD-L1的mRNA及蛋白表达水平.结果:随着ox-LDL浓度的增加,人脐静脉内皮细胞的PD-L1表达逐步升高,低浓度(10 mg/L)OX-LDL与对照组比较差异无统计学意义,中浓度(50 mg/L)及高浓度(100 mg/L)ox-LDL组较对照组PD-L1表达显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:公认有致慢性炎症作用的ox-LDL刺激人脐静脉内皮细胞炎症反应时,上调负性共刺激分子PD-L1的表达,这种负反馈调节可能是抑制动脉粥样硬化的一种免疫机制.     

低密度、氧化低密度脂蛋白对内皮细胞分泌内皮素的影响

目的 观察低密度脂蛋白（LDL）、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）对内皮细胞分泌内皮素（ET）的影响，以及后者在体外是否对前者具有氧化修饰作用.方法 采用不同浓度的LDL、ox-LDL及LDL＋ox-LDL与脐静脉内皮细胞株ECV-304进行孵育，24 h后分别收集细胞和上清液，采用放免分析法测定ET含量.结果 LDL、ox-LDL均能促进内皮细胞合成、分泌ET，但ox-LDL的作用更显著，而LDL＋ox-LDL组上清ET浓度大于两者单独作用之和.结论 LDL、ox-LDL均能促进内皮细胞合成、分泌ET，但后者的作用更为明显，且在体外对LDL具有氧化修饰作用。     

儿童肾病综合征患者血清视黄醇结合蛋白4水平与氧化低密度脂蛋白的关系研究

目的探讨儿童肾病综合征(NS)患者血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平的变化及其与氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)的关系。方法分别检测118例NS患儿和45名健康体检儿童(正常对照组)血清RBP4水平,同时测定其血清ox-LDL、白蛋白(Alb)、血脂[包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及非高密度脂蛋白胆固醇(non HDL-C)]及肾功能指标[尿素(Urea)、肌酐(Cr)],并做统计学分析。结果 NS组血清RBP4水平为(55.88±27.36)mg/L,明显高于正常对照组[(30.61±8.68)mg/L](P0.01),且血清RBP4与ox-LDL、TC、TG、LDL-C、non HDL-C及Urea呈明显正相关[相关系数(r)分别为0.30、0.35、0.25、0.29、0.32、0.26,P均0.01];进一步多元回归分析显示,NS组TC(β=0.62,P0.01)、Urea(β=0.26,P0.01)和ox-LDL(β=0.20,P0.05)水平共同影响了48.4%的RBP4的变化,且RBP4也是NS患儿ox-LDL水平的决定因素之一。结论 NS患儿血清RBP4水平明显升高。升高的RBP4与ox-LDL的增加有一定的关联,可能促进了NS的发生、发展。     

尼莫地平对氧化低密度脂蛋白诱导人血管内皮细胞凋亡的影响

目的研究尼莫地平对不同浓度氧化低密度脂蛋白诱导的人血管内皮细胞凋亡的影响。方法在人脐静脉内皮细胞株ECV304培养基中加入不同浓度氧化低密度脂蛋白和尼莫地平（1.2μg/ml）,作用6-24 h。透射电镜观察内皮细胞ECV304的凋亡情况;流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率;用激光共聚焦显微镜检测钙离子浓度。结果不同浓度氧化低密度脂蛋白能明显诱导培养的内皮细胞发生凋亡,尼莫地平可显著降低氧化低密度脂蛋白诱导的内皮细胞凋亡率（P〈0.01）。结论尼莫地平对氧化低密度脂蛋白诱导的人血管内皮细胞凋亡具有保护作用。     

胰岛素样生长因子Ⅰ抑制氧化型低密度脂蛋白诱导内皮细胞凋亡的体外试验

目的：胰岛素样生长因子Ⅰ作为重要的促细胞生长因子之一，其对内皮细胞凋亡影响的报道不多。实验拟验证和探讨胰岛素样生长因子Ⅰ对氧化型低密度脂蛋白诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的抑制作用及可能机制。 方法：实验于2006—12／2007—07在华中科技大学同济医学院协和医院心血管疾病研究所完成。①实验材料及分组处理：取人新鲜脐带（产妇或家属签署知情同意书）分离培养人脐静脉内皮细胞，分为：胰岛素样生长因子Ⅰ组（1×10^-9mmol／L）、氧化型低密度脂蛋白（200mg／L）＋胰岛素样生长因子Ⅰ组（1×10^-9mmol／L）、氧化型低密度脂蛋白（200mg／L）组、正常对照组。分别在细胞培养24h后加入。②实验评估：采用四甲基偶氮唑盐法测定细胞活力；DAPI细胞核荧光染色法观察细胞凋亡的形态学变化及细胞凋亡率的测定；并进行内皮细胞caspase-3活性的检测。 结果：①氧化型低密度脂蛋白可明显抑制人脐静脉内皮细胞增殖，胰岛素样生长因子Ⅰ与氧化型低密度脂蛋白共同加入后，细胞增殖率明显上升（P〈0．05）。②氧化型低密度脂蛋白可诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡，而加入胰岛素样生长因子I刺激后细胞凋亡率降低（P〈0．05）。③caspase-3活性检测表明与对照组相比，氧化型低密度脂蛋白能明显上调caspase-3的表达，而胰岛素样生长因子Ⅰ＋氧化型低密度脂蛋白组caspase-3活性则降低（P〈0．05）。 结论：胰岛素样生长因子Ⅰ对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡具有抑制作用，可能与其下调caspase-3蛋白表达有关。     

缬沙坦对人脐动脉平滑肌细胞MMP-9、TIMP-1表达的影响——附106份检测报告

目的：探讨缬沙坦对人脐动脉平滑肌细胞基质金属蛋白酶-9（matrix metal—loproteinase,MMP-9）、组织型金属蛋白酶抑制物-1（tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP-1）表达的影响。方法：对人脐动脉平滑肌细胞进行原代培养,根据平滑肌原代细胞的培养方式分为氧化低密度脂蛋白（oxidized low—density lipoprotein,ox-LDL）培养组（ox-LDL组）、AngⅡ加ox-LDL培养组（AngⅡ组）、AngⅡ加ox-LDL加缬沙坦培养组（缬沙坦组）、普通培养基培养组（对照组）,应用ELISA法及逆转录PCR法分别检测4组上清液中的MMP-9、TIMP—1含量,以及细胞内MMP-9、TIMP-1 mRNA的相对表达量,并应用统计学方法进行比较。结果：AngⅡ组上清液中的MMP-9含量均明显高于其他3组（均为P〈0．01）。ox-LDL组与AngⅡ组上清液中TIMP-1的含量均明显低于对照组（均为P〈0．01）,缬沙坦组与对照组上清液中TIMP-1的含量比较差异无统计学意义（P〉0．05）。另外,AngⅡ组细胞内MMP-9 mRNA的相对表达量均明显高于其他3组（均为P〈0．01）,其TIMP-1 mRNA的相对表达量均明显低于对照组、ox-LDL组及缬沙坦组（均为P〈0．01）,缬沙坦组细胞内TIMP-1 mRNA的相对表达量明显低于对照组（P〈0．05）,但与ox-LDL组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：AngⅡ可增加人脐动脉平滑肌细胞MMP-9的表达而降低TIMP-1的表达,缬沙坦可以抑制AngⅡ的这种作用。     

偏头痛患者血浆内皮素和氧化低密度脂蛋白水平的研究

目的探讨发作期偏头痛患者血浆内皮素（endothelin,ET）、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）的水平。方法测定30例偏头痛发作期患者（偏头痛组）与30例健康对照者（对照组）血浆ET和ox-LDL的水平。结果偏头痛组血浆ET[（68.19±12.25）ng/L）]水平高于对照组[（58.61±9.18）ng/L]（P〈0.01）,偏头痛组血浆ox-LDL[（13.25±3.15）mg/L]水平高于对照组[（10.06±3.61）mg/L]（P〈0.01）。结论偏头痛发作期患者存在血管舒缩功能障碍和抗氧化体系失衡,易发生脂质过氧化反应,可能是其容易发生心脑血管动脉粥样硬化的原因之一。     

Ox-LDL-induced LOX-1 expression in vascular smooth muscle cells: role of reactive oxygen species

Oxidized low density lipoprotein (ox-LDL) and lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1 (LOX-1) have been implicated in the development of atherosclerosis. This study was designed to investigate the expression regulation of LOX-1 by ox-LDL and the potential underlying mechanisms in cultured rat vascular smooth muscle cells (VSMCs). VSMCs were treated with ox-LDL, and the expressions of LOX-1 mRNA and proteins were determined by RT-PCR and western blotting, respectively. The intracellular reactive oxygen species (ROS) production was monitored by flow cytometry with fluorescence probe, DCFH(2) -DA. The effect of several inhibitors including aspirin, NDGA, allopurinol, apocynin, and rotenone on ox-LDL-induced ROS formation and LOX-1 expression was also investigated. The roles of NF-κB p65 and JNK were explored. Ox-LDL significantly induced LOX-1 expression at both mRNA and protein levels in a dose-dependent and time-dependent manner. Aspirin, NDGA, and preconditioned apocynin suppressed ox-LDL-induced intracellular ROS production and LOX-1 expression, while allopurinol and rotenone failed to do so. Vitamin C and N-acetyl-l-cysteine demonstrated similar effect. Furthermore, both NF-κB p65 expression and phosphorylated JNK (p-JNK) to JNK expression ratio were elevated after ox-LDL treatment. In addition, the NF-κB inhibitor PDTC and JNK inhibitor SP600125 pretreatment partly abolished ox-LDL-induced LOX-1 expression. These findings suggested that ROS mediated ox-LDL-induced LOX-1 expression in VSMCs through NF-κB and JNK signaling pathways.     

Kruppel样因子6基因对巨噬细胞中胆固醇蓄积的影响

背景：研究表明,Kruppel样因子6与巨噬细胞极化密切相关。但是,关于Kruppel样因子6在巨噬泡沫细胞形成中的作用尚不清楚。目的：观察Kruppel样因子6过表达对氧化低密度脂蛋白刺激下的小鼠巨噬细胞（RAW264.7）胆固醇蓄积及对ATP结合盒转运蛋白A1表达的影响。方法：取Raw264.7巨噬细胞株分别转染慢病毒空载体和重组载体p CDH-KLF6,作为对照组和Kruppel样因子6组,另取稳定感染慢病毒空载体的Raw264.7巨噬细胞株和稳定感染重组载体p CDH-KLF6的Raw264.7巨噬细胞株均加入50 mg/L氧化低密度脂蛋白共孵育48 h后,得到氧化低密度脂蛋白组和Kruppel样因子6＋氧化低密度脂蛋白组。结果与结论：与对照组相比,氧化低密度脂蛋白组巨噬细胞内总胆固醇和胆固醇酯表达水平显著增加（P〈0.05）。与氧化低密度脂蛋白组巨噬细胞相比,Kruppel样因子6＋氧化低密度脂蛋白组细胞内总胆固醇和胆固醇酯表达水平明显下降,胆固醇酯/总胆固醇明显降低（P〈0.05）。而未加入氧化低密度脂蛋白处理的2组细胞内脂质表达水平少,且对照组与Kruppel样因子6组相比,细胞内脂质表达水平差异无显著性意义。提示Kruppel样因子6可能通过促进ATP结合盒转运蛋白A1的表达,抑制氧化低密度脂蛋白诱导的RAW264.7巨噬细胞胆固醇蓄积。