脑细胞生长肽对豚鼠耳蜗毛细胞内酸性磷酸酶的影响

目的：观察脑细胞生长肽（Cerebrai cell growth peptide,CCGP)对庆大霉素（Gentamicin,GM)引起的耳中毒豚鼠耳蜗毛细胞内酸性磷酸酶（Acid phosphatase,ACP)的影响。方法：分别用脑干听觉诱发电位（Brainstem auditory evoked potential,BAEP)和组织化学方法检测动物听阈的变化和耳蜗毛细胞溶酶体的变化。结果：CCGP能降低GM引起的BAEP反应阈的上升幅度，能保护耳蜗毛细胞溶酶体的完整性，减轻了毛细胞的损伤。结论：CCGP能降低GM的耳毒性。保护耳蜗毛细胞溶酶体的完整性，降低溶酶体水解酶逸出引起的毛细胞自溶性损伤，可能是CCGP防治GM耳毒性的机制之一。     

庆大霉素对豚鼠耳蜗琥珀酸脱氢酶的影响

目的观察庆大霉素（ＧＥ）对耳蜗毛细胞琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）的影响。方法用组织化学染色方法,观察ＧＥ引起的豚鼠耳蜗毛细胞ＳＤＨ的变化。结果正常豚鼠耳蜗内毛细胞的ＳＤＨ呈深蓝色染色,显示毛细胞排列形式;ＧＥ耳中毒豚鼠耳蜗毛细胞内的ＳＤＨ显示变淡,甚至消失,毛细胞破坏显著。结论实验结果表明,ＧＥ引起的耳蜗毛细胞的损坏与线粒体呼吸酶活性变化有关,可能由于呼吸酶活性降低,导致细胞供能障碍,最终引起毛细胞的坏死     

电针对庆大霉素耳中毒豚鼠耳蜗内琥珀酸脱氢酶的影响

目的　观察电针对豚鼠庆大霉素 (gentamicin ,GE)耳中毒引起的耳蜗琥珀酸脱氢酶 (succinatede hydrogenase ,SDH)变化的影响。方法　将动物随机分成 3组 :GE组动物肌肉注射GE80mg·kg-1 d-1,连续注射 2 0天 :针刺组肌肉注射GE同GE组 ,每天电针双侧听宫、翳风、肾俞穴 1次 ,持续刺激 15min ;对照组动物不做任何处理。以脑干听觉诱发电位 (BAEP)、SDH组织化学检测为观察指标。结果　对照组BAEP和SDH两项指标无明显变化 ;GE组BAEP反应阈明显升高 ,SDH显色变淡或消失 ,毛细胞受损显著 ;针刺组BAEP反应阈升高幅度和SDH变化及毛细胞损害程度均明显低于GE组。结论　针刺组能减轻GE耳毒性 ,对SDH有保护作用     

豚鼠卡那霉素耳中毒耳蜗内琥珀酸脱氢酶活性变化

采用组织化学方法，以琥珀酸脱氢酶为指标，结合耳蜗功能检查，对卡那霉素耳中毒的豚鼠耳蜗结构、功能及代谢变化进行了观察。研究结果表明：在卡那霉素耳中毒的过程中，其听觉损伤与糖代谢的酶活性变化有关，毛细胞的变性、坏死以及损伤后的恢复与线粒体的能量代谢活跃程度相一致。毛细胞的葡萄糖有氧氧化受抑制是氨基糖甙类抗生素中毒的机制之一。     

盐酸山莨菪碱对噪声暴露后耳蜗琥珀酸脱氢酶活性的影响

目的：观测豚鼠在噪声暴露后不同时间内盐酸山莨菪碱（６５４－２０防治组和损伤组的耳蜗琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）活性变化,探讨噪声暴露后ＳＤＨ活性的变化趋势以及６５４－２在噪声暴露中对ＳＤＨ活性的影响。方法：把豚鼠分成对照组、损伤组与６５４－２防治组,在噪声暴露后不同时期,用Ｎａｃｈｌａｓ四唑氮盐法及图象分析仪显示并测算ＳＤＨ活性。结果：在噪声暴露后第３天,各组酶活性损伤最重。各组耳蜗ＳＤＨ活性第１、２回     

豚鼠急性化脓性中耳炎对耳蜗的毛细胞琥珀酸脱氢酶活性的影响

本文应用肺炎链球菌诱发豚鼠急性化脓性中耳炎,观察急性化脓性中耳炎对耳蜗毛细胞琥珀酸脱氢酶活性的影响。与对照组相比,实验组动物耳蜗底回毛细胞琥珀酸脱氢酶活性明显降低。表明急性化脓性中耳炎时,底回毛细胞有氧代谢功能首先受到影响。     

琥珀酸脱氢酶检测方法的改进

琥珀酸脱氢酶检测方法的改进闫丽华，李月玲刘冬娟（中国医科大学附属口腔医院解剖组胚教研室沈阳１１０００１）（沈阳基础医学院第二电镜室沈阳１１０００１）关键词琥珀酸脱氢酶，骨组织作为标志酶在组化反应中常用琥珀酸脱氢酶来反映三羧酸循环的情况。在研究骨质和骨...     

豚鼠面神经失神经支配后口轮匝肌琥珀酸脱氢酶、乙酰胆碱酯酶酶活性观察

目的：观察豚鼠面神经失神经支配后口轮匝肌有氧代谢能力、神经递质传递及运动终板变化。方法：应用光学显微镜及计算机图像分析技术观察面神经损伤后口轮匝肌琥珀酸脱氢酶（SDH）和乙酰胆碱酯酶（AchE）的变化。结果：面神经失神经支配后口肌SDH和AchE酶活性减弱,其 损伤程度:断组＞压榨30秒组＞压榨15秒组。结论：面神经损伤后口肌SDH和AchE酶活性减弱,面神经损伤越重口肌损伤越重。     

大鼠心肌细胞琥珀酸脱氢酶和三磷酸腺苷酶的增龄变化

目的　探讨大鼠心肌细胞琥珀酸脱氢酶 (SDH)和三磷酸腺苷酶 (ATPase)的增龄变化规律。方法　健康雄性大鼠 3 0只 ,分为幼年组 (2 0～ 2 5日龄 )、青年组 (3～ 5月龄 )和老年组 (13～ 15月龄 )。常规冰冻切片 ,Chayen法显示SDH ,图像分析仪测量平均光密度 (MOD) ;Mg2 + -ATPase显示ATPase ,进行半定量分析。结果　青年组SDH的MOD显著高于幼年组(P <0 .0 1)和老年组 (P <0 .0 5 ) ,老年组高于幼年组 (P <0 .0 5 ) ;青年组ATPase的活性最强 ,老年组次之 ,幼年组最低。结论　从幼年到青年是酶活性迅速增强期 ,后SDH和ATPase的活性逐渐下降 ;心不同部位ATPase的活性、分布存在差异     

Death mode-dependent reduction in succinate dehydrogenase activity in hair cells of aging rat cochleae

Background Our previous studies have shown that both apoptosis and necrosis are involved in hair cell （HC） pathogenesis in aging cochleae. To better understand the biological mechanisms responsible for the regulation of HC death, we examined the activity of succinate dehydregenase （SDH）, a mitochondrial bioenergetic enzyme, in the HCs of aging cochleae. Methods The auditory brainstem response thresholds elicited by tone bursts at 4, 10 and 20 kHz were measured in both young （2-3 months） and aging （22-23 months） Wistar rats. SDH activity was evaluated with a colorimetric assay using nitroblue tetrazolium monosodium salt. The SDH-labeled organs of Corti were double stained with propidium iodide, a DNA intercalating fluorescent probe for illustration of HC nuclei. All the specimens were examined with fluorescence microscopy and confocal microscopy. Results Aging rats exhibited a significant elevation of ABR thresholds with threshold shifts being 34 dB at 20 kHz, 28 dB at 10 kHz, and 25 dB at 4 kHz. Consistent with the reduction in the cochlear function, aging cochleae exhibited the reduction of SDH staining intensity in the apical and the basal ends of the cochleae, where a large number of apoptotic, necrotic, and missing HCs were evident. The reduction in SDH staining appeared in a cell-death-mode dependent fashion. Specifically, SDH labeling remained in apoptotic HCs. In contrast, SDH staining was markedly reduced or absent in necrotic HCs. Conclusions In the aging cochlea, SDH activity is preserved in HCs undergoing apoptosis, but is substantially reduced in necrosis. These results sUggest that mitochondrial energetic function is involved in the regulation of cell death pathways in the pathogenesis of aging cochleae.     

乙基西梭霉素的耳毒性观察

７６只健康豚鼠用于观察乙基西梭霉素（Ｎｅｔｉｌｍｉｃｉｎ，ＮＭ）对耳蜗的毒性作用。动物分２组，第１组５４只豚鼠作急性试验，测定１次肌注乙基西梭霉素后在血液和内耳外淋巴中的药物动力学参数。另１组２２只豚鼠等分成２亚组，分别连续肌肉注射ＮＭ１５Ｏｍｇ／ｋｇ和庆大霉素（ＧＭ）１２５ｍｇ／ｋｇ１４ｄ，观察它们的耳蜗动作电位（ＣＡＰ）阈值和耳蜗病理的改变。结果显示：两种药物在外淋巴中的药物动力学改变十分相似，而ＮＭ的耳毒性明显低于ＧＭ。提示ＮＭ的轻微耳毒性作用在于其本身药物的特点而非进入外淋巴的量较ＧＭ少，展现了ＮＭ良好的应用前景。     

针刺防治GE对豚鼠内耳损害的实验研究

目的 观察针刺对庆大霉素（ＧＥ）耳中毒豚鼠的防治作用。方法 用脑干听觉诱发电位（ＢＡＥＰ）和组织化学方法,检测动物耳聋程度及听神经功能的变化和耳蜗毛细胞酶活性的改变。结果 电针能降低ＧＥ引起的ＢＡＥＰ反应阈的上升幅度,降低ＢＡＥＰ波峰潜伏期及波间期的延长;能保护毛细胞线粒体呼吸酶的活性,维持毛细胞溶酶体的完整性。结论 针刺能降低ＧＥ的耳毒性。保护毛细胞线粒体酶的活性,维持溶酶体的完整性,保证毛细胞     

不同程度的阻断内耳供血对耳蜗微循环和耳蜗生理功能的影响

目的：观察不同程度的阻断豚鼠内耳供血对耳蜗微循环和耳蜗生理功能的影响。方法：手术压迫基底动脉的分支小脑前下、后下动脉、观察耳蜗餐侧壁微循环改变,测量脑干诱发电位（ＡＢＲ）幅度变化。结果：耳蜗血流轻、中度下降时ＡＢＲ幅度无明显变化。耳蜗血流重度下降时ＡＢＲ幅度下降;耳蜗供血下降对耳蜗外侧壁血管纹毛细血管血流影响大,当其血流停止后,耳蜗生理功能依赖于螺旋韧带血管血流。结论：耳蜗供血理明显大于一般情况下     

琥珀酸半醛脱氢酶抑制剂筛选方法的建立及其在天麻成分筛选中的应用

目的建立琥珀酸半醛脱氢酶(SSADH)抑制剂类抗癫痫神经系统药物筛选模型,并运用此模型对中药天麻有效成分及其类似物进行体外活性筛选和构效关系分析。方法制备琥珀酸半醛脱氢酶(SSADH)酶系液,并以紫外分光光度法评价SSADH活力与吸光度相关性;优化酶催化反应温度、反应时间、底物NAD+浓度、底物琥珀酸半醛(SSA)浓度、缓冲液p H、底物SSADH浓度等因素对SSADH活性的影响,建立SSADH酶系活性筛选方法;采用文献已有报道的对羟基苯甲醛(HBA)为阳性对照验证此方法可靠性,同时,对HBA结构类似物测定结果及作用机制进行分析。结果成功构建SSADH酶抑制剂活性筛选方法,HBA测定结果与前期文献报道抗癫痫作用一致。确定SSADH的紫外光谱(UV)活性检测体系及其检测缓冲液配置组成,其反应条件为37℃,温孵30 min,酶活力相关吸光度在340 nm处测量。HBA和香草醛(Va)对GABA-T的构效关系一致,—OH及苯环上的—CHO为SSADH酶抑制作用必须药效团。结论该模型可应用于SSADH酶抑制剂的高通量筛选,也为研究中药中SSADH酶抑制剂类活性成分的筛选及其作用机制研究提供参考。