片剂和注射液中甲硝唑的荧光法测定

目的建立甲硝唑的荧光分析法。方法采用铁-冰醋酸还原体系,将甲硝唑还原后,在激发波长354nm,发射波长426nm处测定其荧光强度。结果甲硝唑浓度在1.0×10-6m ol.L-1~9.0×10-4m ol.L-1范围内与其荧光强度呈良好的线性关系,相对标准偏差(RSD)为1.05%,检出限1.75×1-0 7m ol.L-1。结论本法用于片剂、注射液中甲硝唑含量的测定,结果令人满意。     

Al-桑色素二元络合物的荧光光度法测定银杏叶中的黄酮含量

在 Tris-HCl缓冲液中 ,桑色素和 Al3+形成二元荧光络合物 ,在激发波长和发射波长分别为 3 65 nm和 499nm时测定该二元络合物的发射荧光强度。发射荧光强度和桑色素的浓度在 4.0× 10 - 8mol.L- 1～ 4.0× 10 - 7mol.L- 1的范围内成线性关系。线性方程 Y=4.5 65 89+ 4.81919× 10 7X(mol.L- 1 ) ,相关系数 r=0 .9994。该方法准确 ,灵敏度高 ,并且成功的运用于测定银杏叶中总黄酮的含量 ,回收率为 10 8.2 4%和 10 8.77%。     

荧光法测定制剂中利血平含量

本文介绍一种快速、灵敏的荧光法用作利血平原料和其制剂的常规分析。本法是利用三羧酸六胺合高钴(HCTC)作氧化剂,在醋酸溶液中氧化利血平,产生黄绿色荧光物质而建立的一种分析方法。其最大发射波长在420nm处,利血平浓度在0.01～0.24μg/ml范围内与荧光强度呈线性。仪器:Aminco-Bowman J 4-8960型紫外荧光分光光度计,激发、发射狭缝5nm,强度三级,激发、发射波长分别为370、420nm。试剂:5×10~(-3)MHCTC标准液的制备:HCTC3g加水1000ml(以碳酸氢钠饱和)     

荧光光度法测定血清中卵磷脂的含量

目的:建立测定卵磷脂(PC)含量的荧光光度法。方法:以多西环素(DC)-铕(Eu3+)为荧光探针,在pH7.1条件下,扫描不同浓度的PC与DC-Eu3+的荧光光谱,优化测定PC含量的最佳试验条件。结果:主要试验条件最佳值为DC浓度3.0×10-6mol.L-1,Eu3+浓度1.0×10-5mol.L-1,PC检测浓度线性范围为4.0×10-7～2.4×10-5mol.L-1,检测限为3.1×10-7mol.L-1。结论:该方法能成功地应用于实际样品的含量测定。     

环丙沙星荧光特性的研究

目的:建立荧光测定环丙沙星含量的方法,对几种金属离子(Fe~(3+),Cu~(2+),Zn~(2+))与环丙沙星的络合反应及其对荧光特性的影响作初步的研究。方法:用日立荧光分光光度计测定,测量波长λ_(ex)=277 nm,λ_(em)=450nm。测定时的最佳pH为2.2。结果:环丙沙星浓度在0.1～0.8mg·L~(-1)范围内与荧光强度呈线性关系,相关系数为0.9999,检测限为4.5×10~(-3) mg·L~(-1)。结论:该法方便、快速,可用于直接测定环丙沙星含量,或用于微量分析。     

抗凝药物华法林的荧光光谱测定方法研究

目的:基于华法林钠的荧光光谱特性,以水-乙醇混合溶剂为介质,研究建立了一种测定华法林钠的荧光光谱分析方法。方法:水-乙醇的最适宜配比为3:7,该体系的最大激发波长(λ_(ex))和发射波长(λ_(em))分别为308 nm 和386 nm,测定系列标准溶液在测定波长下的荧光强度,并计算样品中华法林钠的含量。结果:在所选的最佳试验条件下,华法林钠浓度在0.3～7.1μg·mL~(-1)范围内与荧光强度具有良好的线性关系,检出限为0.1μg·mL~(-1),回收率为96.7%～104.9%。结论:本方法可应用于药物华法林钠含量的测定。     

比色法测定丁胺卡那霉素、卡那霉素、新霉素和妥布拉霉素

本法是基于五氰亚硝酰铁酸二钠(diso—dium pentacyanonitrosylferrate与脂肪族伯胺和仲胺的Rimini反应,可用以测定丁胺卡那霉素、卡那霉素、新霉素和妥布拉霉素;但对该四个抗生素没有分辨能力。该四种抗生素的浓度与反应后在540nm时的吸收峰值符合Beer定律:其适当浓度分别为2.8×10~(-4)～1.7×10~(-3)mol/L、2.6×10~(-4)～2.0×10~(-3)mol/L、1.7×10~(-4)～1.9×10~(-3)mol/L和2.5×10~(-4)～1.6×10~(-3)mol/L。     

叶酸的光化学行为及其应用

目的：研究叶酸的光化学行为并提出测定叶酸的光化学荧光分析方法。方法：叶酸在六次甲基四胺-盐酸介质中,经365 nm紫外光照射后,发生光化学反应,产物的荧光强度(λ_ex 280 nm,λ_em 443 nm)较叶酸本身的增大了25倍。根据光化学反应产物的荧光强度测定叶酸的含量。结果：叶酸的浓度在1.0×10^-5～1.0×10^-7 mol.L^-1范围内,荧光强度与浓度呈良好的线性关系,检出限为1.5×10-9 mol.L^-1,相对标准偏差为1.6%。结论：本方法适用于片剂中叶酸的测定。     

盐酸万乃洛韦人血浆浓度的HPLC-荧光法测定及其药物动力学

建立了盐酸万乃洛韦 (1)体内活性代谢物阿昔洛韦 (2 )浓度的蛋白沉淀 -荧光检测 HPL C法。采用 Genesis C1 8柱 (10 0× 3mm ,3μm ) ,流动相为 0 .1m ol/ L磷酸 (0 .6 m l/ m in,恒流速 )和乙腈 (0 .0 0 5～ 0 .1m l/ m in,变速 ) ;柱温35°C;荧光激发波长 2 85 nm,发射波长 370 nm。最低检测浓度 10 ng/ ml,最低定量浓度 (L OQ) 2 0 ng/ m l,2 0～ 15 0 0ng/ m l浓度范围线性良好。 8名志愿者口服 30 0 m g 1片后 ,t1 /2 为 3.19± 0 .36 h,AUC为 95 73.37± 16 40 .0 9h· ng· m l- 1 ,Cmax为 2 5 87.0 4± 710 .16 ng/ ml,Tmax为 1.2 5± 0 .46 h     

荧光分光光度法测定大山楂丸中黄酮类化合物的含量

设定荧光激发/发射波长为281/352 nm,激发和发射光狭缝宽度为5 nm,在300~500 nm波长范围内测定荧光光谱。对酸度、表面活性剂、温度、反应时间及铝离子浓度等影响因素进行考察,优化试验条件。结果：在盐酸酸性介质中、无表面活性剂、常温下、反应时间30 min、铝离子浓度为2×10-4mol/L时,体系的荧光强度最大且稳定。当槲皮素的浓度范围在0.2×10-5~1.5×10-5mol/L之间时,荧光强度（F）和槲皮素浓度（c）呈良好的线性关系;检测限为2.4×10-8mol/L。3批大山楂丸中总黄酮的平均含量分别为24.56、27.85、25.13 mg/g,与《中国药典》方法测定结果基本一致。结论：本方法操作简便、快速、准确,可用于测定大山楂丸中总黄酮的含量。     

Nafion修饰玻碳电极阳极溶出伏安法测定盐酸异丙嗪

用Nafion膜玻碳电极阳极溶出伏安法测定盐酸异丙嗪。在4.0×10~(-8)～5.0×10~(-5)mol/L和8×10~(-5)～1×10~(-3)mol/L范围内,盐酸异丙嗪的浓度与氧化电流的峰高呈良好的线性关系。对原料试样和片剂进行了测定,均获得满意结果。     

荧光分析法测定喜树果药材中的喜树碱

研究了喜树果药材、喜树碱和10-羟基喜树碱的三维荧光图谱和薄层荧光色谱,建立了测定喜树果药材中喜树碱含量的荧光分析方法。在三维荧光图谱中,喜树碱呈现3个荧光峰,激发波长λex分别为215、255和365 nm,发射波长λem均为430 nm;10-羟基喜树碱呈现4个荧光峰,λex分别为220、265、325和375 nm,λem均为555 nm。喜树碱的荧光比10-羟基喜树碱的荧光强。三维荧光图谱对照和薄层荧光色谱分析表明,喜树果药材中的荧光成分主要是喜树碱,10-羟基喜树碱和其他共存组分对喜树碱的荧光基本无干扰。在pH 3.0～6.7条件下,喜树果提取液有稳定的强荧光。以甲醇为溶剂制备喜树果药材提取液,用水适当稀释后于365/430 nm(λex/λem)波长下测定喜树碱的含量。在0.00235～0.235μg.mL 1内,荧光强度与喜树碱浓度之间呈线性关系,回归方程为IF=9+30 844 c,相关系数r=0.999(n=9)。将本法用于喜树果样品中喜树碱含量的测定,结果为0.127%,加标回收率为102%。用薄层荧光扫描法验证了本法的可靠性。结果表明,本法可用于喜树果药材的质量检验。     

HPLC-FLD法测定豚鼠肺组织中酯型和盐型羟基喜树碱的含量

目的建立豚鼠肺组织样品中羟基喜树碱酯型(C-HCPT)和盐型(0-HCPT)HPLC-FLD含量测定方法。方法以5 mg·kg~(-1)剂量给豚鼠雾化吸入羟基喜树碱注射液,于不同时间点取肺组织,样品处理后,分别测定酯型和总酯含量,减量法得到盐型的含量。色谱柱为Lichrospher C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),C_(18)预柱(10mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈:0.01 mol·L~(-1)缓冲液(0.075 mol·L~(-1)醋酸胺,冰醋酸调pH至6.4)=32:68(V:V);流速为0.9 mL·min~(-1);激发波长为363 nm,发射波长为550 nm,柱温:30℃。结果豚鼠雾化吸入羟基喜树碱注射液(5 mg·kg~(-1))后,0、5、10、20 min时豚鼠肺组织中的酯型浓度分别为(8.8±s0.8)、(4.5±2.0)、(2±3)、(1±4)μg·L~(-1);盐型浓度分别(4.6±1.4)、(6.8±0.9)、(3.0±2.7)、(1±5)μg·L~(-1)。结论本法简便,专属性好,定量可靠,可满足羟基喜树碱不同构型定量研究的需要。     

建立稳定表达人有机阴离子转运体OAT1细胞的活性检测方法及抑制剂的筛选

摘 要 目的：建立稳定表达人有机阴离子转运体OAT1的细胞（hOAT1）中6-羧基荧光素浓度测定的荧光分析方法,并用于hOAT1细胞活性的测定及其抑制剂的筛选。方法：采用荧光分光光度法,检测波长为激发波长485 nm,发射波长520 nm,BCA法检测样品蛋白浓度。以6-羧基荧光素的荧光强度对蛋白浓度的比值作为衡量转运体OAT1活性的指标。结果：在hOAT1细胞中,6-羧基荧光素检测浓度的线性范围为0.08～3.2 μmol·L－1（r ＝ 0.999 1）,低、中、高浓度6-羧基荧光素溶液测定的日内RSD分别为6.08%、 2.66%、0.86%,日间RSD分别为7.83%、3.73%、0.72%,绝对回收率分别为（111.35 ± 9.8）%、（86.61 ± 3.89）%、（100.15 ± 1.10）%。抑制剂筛选结果显示 1 mmol·L－1缬沙坦、奥美沙坦、厄贝沙坦、替米沙坦、辛伐他汀、瑞舒伐他汀对hOAT1抑制率分别为103.45%、110.34%、93.41%、90.33%、79.84%、95.22%。结论：本方法简单易行,可用于hOAT1细胞活性测定,缬沙坦、奥美沙坦、厄贝沙坦、替米沙坦、辛伐他汀、瑞舒伐他汀对hOAT1存在抑制作用。     

流动注射化学发光法测定头孢类β—内酰胺抗生素

目的:确定以Ce(Ⅳ)直接氧化化学发光法分析测定头抱类β-内酰胺抗生素的新方法。方法:由于β-内酰胺抗生素水解一般都生成含有巯基(-SH)的化合物,用Ce(Ⅳ)直接氧化含巯基(-SH)的化合物能产生弱发光,且Rh6G能大大增强此弱发光,由此建立了测定头孢拉定等5种头抱类β-内酰胺类抗生素的FIA-CL分析法。结果:在选定的最佳条件下,经测试5个头孢类抗生素浓度在1.0×10~(-8)～1.5×10~(-5)g·mL~(-1)范围内与化学发光强度呈良好的线性关系。对5.0×10~(-6)g·mL~(-1)的头孢试样进行11次平行测定,得到RSD对头孢拉定、头孢呋辛钠、头孢噻肟钠、头孢曲松钠、头孢哌酮钠分别为2.2％,2.5％,2.7％,2.8％,2.8％。其检出限(3σ)对5个头孢类抗生素顺次分别为3.0×10~(-8),3.5×10~(-8),3.8×10~(-8),3.9×10~(-8),4.0×10~(-8),4.0×10~(-8)g·mL~(-1)。结论:本方法快捷、简便且具有较高的灵敏度,本法用于头孢合成样品的分析,结果满意。     

香烟烟雾溶液作用下大鼠淋巴细胞的氧化应激反应

目的　以细胞内活性氧自由基 (ROS)水平、DNA损伤、脂质过氧化物 (LPO)水平以及超氧化物歧化酶 (SOD)活力为指标 ,研究细胞在香烟烟雾溶液作用下产生的氧化应激反应。方法　以PBS作吸收液 ,用大包氏管收集香烟主流烟雾 ,将香烟烟雾溶液 (CSS)分别以 0、1× 10 - 3、2× 10 - 3、4× 10 - 3、8× 10 - 3、12× 10 - 3、16× 10 - 3支 ml的浓度作用于大鼠淋巴细胞。用 2′ ,7′ 二乙酰二氯荧光素 (DCFH DA)测定细胞内ROS水平 ,用彗星试验检测细胞DNA损伤 ,同时检测细胞内SOD活力和LPO水平。结果　 2× 10 - 3支 ml以上剂量组二氯荧光素 (DCF)荧光强度、彗星尾长以及LPO水平均显著高于对照组 ,且随剂量增加而增加。 16× 10 - 3支 ml组SOD活力显著低于对照组。与对照组相比 ,1× 10 - 3支 ml组LPO水平显著降低、SOD活力则显著增高。结论　CSS达到一定剂量时使细胞内ROS水平增高 ,引起细胞DNA损伤和脂质过氧化 ,高剂量时SOD活力降低 ,而低剂量时能够诱导SOD活力     

荧光光谱法研究葛根素与牛血清白蛋白的相互作用

目的:研究葛根素(puerarin,PR)与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)的相互结合反应。方法:以 BSA 为荧光剂,PR 为荧光猝灭剂,在激发波长225 nm、发射波长340 nm 下测定荧光强度;分别测相同浓度的 BSA 和 PR 的荧光发射光谱和紫外吸收光谱。结果:随着 PR 浓度的增加,BSA 的荧光强度有规律地降低且呈良好的线性关系。结论:PR 与 BSA 的相互作用为静态猝灭过程。结合常数 K_R=1.37×10~6L·mol~(-1),供体(BSA)与受体(PR)间距离 r=3.44 nm,能量转移效率 E=0.670。根据热力学参数推测了 PR 与 BSA 的作用力类型。     

利血平——潜在的避孕药

新近的研究表明利血平有成为人类生育控制药物的可能性。用4.1×10~(-5)M浓度的利血平溶液进行体外试验,显示完全抑制精子活动能力的结果。将4.1×10~(-3)M利血平溶液0.2毫升灌入交配后第一天的仓鼠子宫,能有效地阻止受精卵着床。Chan等进行了利血平对人精子生育能力影响的体外试验,他们收集有生育能力的男性精子,并用2×10~(-6)、2×10~(-7)、2×10~(-8)、2×10~(-9)和2×10~(-10)M等不同浓度的利血平溶液处理温育5小时,然后放入仓鼠卵子,结果精子穿入仓     

荧光光谱法测定硫酸庆大霉素注射液的含量

本文报告了以乙酰丙酮、甲醛为荧光衍生试剂，建立了测定硫酸庆大霉素注射液含量的荧光光谱法。激发波长４２２ｎｍ，荧光波长４８２ｎｍ。硫酸庆大霉素浓度在０～６ＩＵ／ｍｌ范围内与荧光强度成线性关系（ｒ＝０．９９９７），平均回收率为１０１．１～１０２．０％，ＲＳＤ在１．５％以下。本法操作简便、灵敏，试剂价廉易得，适用于硫酸庆大霉素注射液的含量测定。     

毛细管电泳-激光诱导荧光分离检测手性5-(2-氨基丙基)-2-甲氧基苯磺酰胺对映体

目的建立毛细管电泳——激光诱导荧光法分离测定(R/S)-5-(2-氨基丙基)-2-甲氧基苯磺酰胺对映体。方法用异硫氰酸荧光素衍生(R/S)-5-(2-氨基丙基)-2-甲氧基苯磺酰胺,衍生产物在70mmol/L的硼砂(pH=9.5)缓冲液中用毛细管电泳分离,激光诱导荧光方法测定。结果(R/S)-5-(2-氨基丙基)-2-甲氧基苯磺酰胺对映体得到了基线分离,线性范围均为8.20×10-8～9.02×10-7mol/L。结论本方法简单,精密度高,灵敏度高,可为盐酸坦索罗辛的质量控制提供方法。