疟原虫卵囊——子孢子体外培养初步研究

本文通过对约氏疟原虫约氏亚种及鸡疟原虫卵囊体外培养的研究,初步探讨了有关卵囊体外培养的条件。在修改的 M-Mc_3培养基中加入了某些氨基酸亚适当提高了培养基的渗透压,结果有一定促进作用。约氏疟原虫8天卵囊经体外培养3天后,鸡疟原虫7天卵囊体外培养4天后均形成形态成熟的子孢子。本实验还探索了污染的控制问题。结果表明在相同消毒方法处理下,斯氏按蚊与白纹伊蚊蚊胃的污染率不同,前者明显高于后者,其原因尚待进一步探讨。     

人胚血管平滑肌细胞的体外培养、冻存与复苏

目的：介绍人胚动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）体外培养和保存方法。方法：从人工流产的胎儿主动脉分离动脉中膜组织。应用组织块培养方法进行人胚VSMCs培养,并行形态学观察及免疫组化鉴定;将第4代的人胚VSMCs冻存,2周,1、2、6个月后将细胞复苏,观察复苏后人胚VSMCs的生长情况。结果：培养的人胚VSMCs经鉴定为平滑肌细胞,培养的人胚VSMCs经冻存,复苏率超过80％。结论：人胚VSMCs体外培养、冻存及复苏成功,使人胚VSMCs培养体系更加完善,为心血管疾病药物的研究及组织工程化血管提供丰富的细胞来源。     

疟原虫子孢子侵入肝细胞的机制

疟原虫生活史复杂。完成整个生活史必颓涉及无脊椎动物及脊椎动物2个宿主，而在脊椎动物体内又有红内期与红外期之分。自Shortt和Cloinham(1948)在恒河猴的肝脏中发现食蟹猴疟原虫(Plasmodium cynomolgi)的红外期裂殖体以来，人们相继先后发现啮齿类，猴及人疟原虫的子孢子进入宿主的血循环后，主要滞留于宿主的肝脏中，     

疟原虫子孢子侵入肝细胞的机制

疟原虫子孢子侵入肝细胞的机制李贵生，江静波，潘金培（中山大学生物系，广州５１０２６１；中国水产科学院南海海洋研究所）关键词疟原虫子孢子，肝细胞，宿主中图号Ｒ５３１．２０２疟原虫生活史复杂。完成整个生活史必须涉及无脊椎动物及脊椎动物２个宿主，而在脊椎动...     

HEK-293细胞复苏培养及冻存

目的通过对人胚肾293细胞的复苏培养及其冻存的研究,为进一步行干细胞标记实验奠定基础。方法复苏培养人胚肾293细胞,倒置显微镜观察人胚肾293细胞的生长状况,计算细胞贴壁率,绘制细胞生长曲线,冻存保留细胞。结果人胚肾293细胞在普通培养条件下生长良好,6h后大部分细胞已经贴壁,8h细胞已完全贴壁。结论人胚肾293细胞采用改进方法复苏培养及冻存是简便可行的,为进一步行干细胞标记实验奠定了坚实的前期基础。     

体外培养冻存的胎脑组织的实验性研究

４个月龌的人胎脑组织在无菌条件下分离，经酶消化，低温冷冻保存６个月，胎脑组织在３７℃水溶中快速复温并在体外培养，实验结果证实经冻存的人胎脑组织在体 外可以继续生长发育。因此我们得出结论，人胎脑组织可被冷冻保存且保持活性。     

液氮冻存和复苏对恶性疟原虫存活的影响

自1976年Trager和Jensen成功建立了恶性疟原虫体外连续培养方法[1]以来,该方法已广泛应用于恶性疟原虫分子生物学及免疫学的研究.恶性疟原虫的冻存与复苏,是能否成功进行体外培养的关键.国内外研究者[2]对寄生虫冻存方法的探索已持续了半个多世纪,但就如何最大限度地减少低温对寄生虫的损伤,仍未得到规律性的结论.本实验对几种恶性疟原虫冻存复苏的方法进行了探讨,以期得到提高恶性疟原虫冻存后复苏成活率的更为有效的方法,为恶性疟原虫的体外培养提供有力的支持.     

饲养细胞在建立恶性疟原虫体外培养中的作用

饲养细胞在建立恶性疟原虫体外培养中的作用江钢锋，洪佳冬（热带病研究室）关键词疟原虫；体外培养；饲养细胞中图号Ｒ３８２．３恶性疟原虫红内期体外连续培养技术是疟疾研究领域的一大突破。自从该技术创立［１］以来，国内外已相继成功地分离和建立了许多恶性疟原虫不...     

饲养细胞在建立恶性疟原虫体外培养中的作用

恶性疟原虫红内期体外连续培养技术是疟疾研究领域的一大突破。自从该技术创立以来，国内外已相继成功地分离和建立了许多恶性疟原虫不同虫株的体外培养。但是，有的研究者在试图建立新虫株的体外培养时也遇到了困难或失败了，因为从疟疾患者血中新分离的虫株最初阶段不易适应在体外的生长发育。     

疟原虫子孢子的全蚊低温保存法

三十年代末低温技术用于红内期疟原虫保种,20余年后得知一定浓度的甘油或二甲基亚砜是良好的冰冻保护剂。Strome等认为液氮可无限期地保存红内期疟原虫的感染力。我们自1973年以来的观察表明,红内期疟原虫的低温保存法确实可靠。从60年代开始,国外开始探索子孢子的低温保存法。有些疟原虫子孢子的低温保存仍须另加同种动物血清或血浆,操作繁琐,且最佳冷冻条件尚在研究中。我们自1980年10月先用鸡疟原虫初试成功后,又对食蟹猴疟原虫进行试验,建立了不加任何保护剂的     

非冻存低温下维持悬浮培养细胞

目的建立非冻存低温条件下维持悬浮培养细胞的细胞保存技术。方法常规培养悬浮生长的人白血病细胞Jurkat,分别正常培养、室温和4℃冰箱条件下保存,间隔10天进行细胞形态观察和细胞存活率分析,然后室温和4℃冰箱保存的细胞再加入新鲜培养剂转入正常培养。结果两种非冻存低温条件下细胞存活率降低,与正常培养组有显著性统计学差异（P〈0.01）,并且在细胞形态上具有相应的改变,10天后存活率分别为81%和79%,没有差异（P〉0.05）,20天后室温条件下细胞仍然保持81%存活率,与前10天没有差异（P〉0.05）,并在转入正常培养条件下恢复生长繁殖。结论非冻存低温条件下可以短期维持悬浮培养细胞,该方法丰富了细胞培养技术。     

疟原虫孢子增殖期体外培养及影响其发育的因素

<正> 一、疟原虫孢子增殖期体外培养研究概况随着人们对疟原虫的生物学、生理、生化及疟疾防治的基础理论与实际应用等问题研究的逐步深入,疟原虫孢子增殖期,即蚊期体外培养的研究也逐渐被重视。迄今这方面的工作,只限于对某些动物疟原虫,经过分段培养获得了初步成果。包括从配子体发育到成熟动合子阶段:吸入阳性鸟血后2～3小时的蚊胃,经培养发育到早期卵囊(4日龄);以     

人胚神经干细胞的体外分离培养和长期冻存

目的建立从脑组织中分离人胚神经干细胞的方法和体外长期培养的稳定体系，为细胞治疗提供基础。方法采用机械酶学法从胎脑中获得神经干细胞，这些细胞在合成纤维细胞生长因子和上皮细胞生长因子的无血清培养基中生长，血清刺激诱导分化，程序冷冻法保存细胞。结果这些细胞可在体外持续增殖，并被诱导分化成神经元和神经胶质细胞，可以长期冷冻保存。结论人胚神经干细胞分离培养体系和冻存方法的成功建立为神经损伤、退行性疾病以及其他疾病的细胞治疗提供了潜在的细胞资源。     

苦艾对伯氏疟原虫的抗疟实验研究

目的观察苦艾对感染伯氏疟原虫小鼠的疗效。方法按“四天抑制法”的d0感染，d0～d3给药，每天1次，d4涂薄血膜检查，并计算每天存活率及d4减虫率。结果不同浓度苦艾组疟鼠累积生存率与对照组比较，0、30g／ml组与0．45g／ml组差异有统计学意义（P〈0．05）；苦艾（0．30g／ml和0．45g／ml）组的d4减虫率与对照组相比差异有显著性；苦艾（0．15g／ml）组的d4减虫率与对照组相比差异无显著性。结论苦艾（0．30g／ml与0．45g／ml）能较好抑制伯氏疟原虫的生长，对小鼠的存活状况有改善作用。     

鼠疟原虫(Plasmodium yoelii yoelii)早期孢子增殖的体外培养

<正> 制备疟疾疫苗,进行疟疾有效免疫,以达到控制疟疾感染和流行,是当今防疟中期待解决的课题。体外培养疟原虫,做为疟疾抗原的来源,被认为系最好途径。许多学者设想在体外建立疟原虫孢子增殖期培养系统,试图获得由配子体发育成有免疫原性的子孢子,用以制备子孢子疫苗。为此,国内外对猴疟、鸟疟和鼠疟等动物疟原虫进行了许多研究。     

恶性疟原虫在体外培养中完整的肝期发育

<正> 在人体内疟原虫的发育期中,人们对肝内的裂殖体增殖了解的最少。因此,用体外培养的方法进行肝期的繁殖是很有吸引力的。培养物操作方便,并且是免疫学研究和各种作用于肝期的抗寄生虫药研究的基础。本文作者应用这种方法在间日疟原虫的研究中获得成功后,又完成了恶性疟原虫的肝期发育。首先,由活检取到的人体肝细胞以每35mm培养器接种5×10~5作单层培养,在按种子孢子之前需在改良的最小基础培养基(MEM)中保持24～48小时。用体外培养     

蚊媒唾腺疟原虫子孢子的ELISA检测方法

蚊媒唾腺疟原虫子孢子的ＥＬＩＳＡ检测方法寄生虫学教研室徐大为王峰关键词蚊唾腺；疟原虫子孢子；ＥＬＩＳＡ检测子孢子率即雌性按蚊唾腺中子孢子的感染率，是描述一个地区疟疾流行病学的一个重要参数，被用于有效媒介判定及媒介防治措施的评价等方面。媒介按蚊自然种群...     

体外培养恶性疟原虫的实验报告

<正>疟原虫属真球虫目(Eucoccidiida)、疟原虫科(Plasmodidae)、疟原虫属(Plasmodium),是疟疾(malaria)的病原体疟原虫通过被感染的蚊虫叮咬传播疟疾。这种传染病每年夺去大约100万人的性命,导致4亿人感染。     

间日疟原虫的体外培养研究进展

间日疟原虫的研究由于体外培养技术的缺乏而进展迟缓。而体外连续性培养体系的建立由于间日疟原虫的本身特性及对侵入红细胞的特异性选择而受阻。近几年，研究用源自血色病患者血液和脐带血中的网织红细胞短期体外培养，可使间日疟原虫在体外生存达到一个月左右。目前，使用实验室源自脐带血造血干细胞分化的红系细胞能够不断的提供网织红细胞以及源于正常人肝组织的肝细胞株HC-04的新建立，完成了间日疟原虫体外连续性培养的目的。这里，我们着重介绍间日疟原虫的体外连续性培养技术。