3种巯基蛋白酶对去磷酸化牛乳β-酪蛋白和茶黄素复合膜的清除

目的：采用茶黄素（theaflavin，TF）和去磷酸化牛p一酪蛋白（dephosphorylated bovine β—casein，Dβ—CN）在芯片表面形成蛋白质／色素复合膜的模型，评估3种巯基蛋白酶（cysteine proteases，CPs），木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和无花果蛋白酶，对DB—CN／TF复合膜的清除作用。方法：在消散石英晶体微天平（quartz crystal mi—crobalance with dissipation，QcM—D）上建立D8一CN／TF复合膜，Boltzman方程评估3种CPs水解复合膜的效率，水解前后膜变化通过原子力显微镜（atomic forc emicroscopy，AFM）和接触角表征。结果：3种CPs水解复合膜的效率由大到小依次为无花果蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶（P〈0．05）。AFM图和接触角表征结果证实，CPs能够有效地清除结合在DG—CN表面的TF。结论：CPs具有在牙色渍清除中潜在的应用价值。在开发口腔保健产品中该类酶值得进一步研究。     

消散石英晶体微天平对木瓜蛋白酶水解唾液膜的动力学研究

目的：本实验以人全唾作为唾液获得性膜的体外实验模型,研究不同pH值、离子强度和温度条件下木瓜蛋白酶水解的动力学。方法：通过消散石英晶体微天平在各种条件下观察酶水解唾液膜的频率变化。结果：在各种条件下唾液膜被木瓜蛋白酶部分水解。木瓜蛋白酶与唾液蛋白质的相互作用对pH值、离子强度和温度的改变敏感。在选择和应用酶时,该特性应加以考虑。降低pH值,提高离子强度（1～5mmol／L范围内）和温度,木瓜蛋白酶的催化效率增强。结论：酶动力学显示木瓜蛋白酶水解唾液膜的过程具有pH值、离子强度和温度的依赖性特点。在牙膏、漱口水、义齿清洁剂的配方中利用木瓜蛋白酶的这一特点,有助于获得理想的抗菌复合剂。酶的最佳化尚需更进一步理解反应过程中的调节机制和多重的影响因素。     

巯基蛋白酶水解蛋白质／色素复合膜

目的：采用茶黄素（theaflavin,TF）和去磷酸化牛β-酪蛋白（dephosphorylated bovineβ-casein,Dβ-CN）在芯片表面形成蛋白质/色素复合膜的模型,评估3种巯基蛋白酶（cysteine proteases,CPs）,木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和无花果蛋白酶,对Dβ-C/TF复合膜的清除作用。方法：在消散石英晶体微天平（quartz crystal microbalance with dissipation,QCM-D）上建立Dβ-C/TF复合膜,Boltzman方程评估CPs水解复合膜的质量,水解前后膜变化通过掠角傅里叶变换红外光谱（grazing angle fourier transform infrared spectroscopy spectra,GA-FTIR）。结果：3种CPs水解复合膜的功效由大到小依次为无花果蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶（P〈0.05）。红外光谱表征结果证实,CPs能够有效地清除结合在Dβ-CN表面的TF。结论：本研究表明,CPs具有在牙色渍清除中潜在的应用价值。在开发口腔保健产品中该类酶值得进一步研究。     

3种条件下木瓜蛋白酶水解唾液膜的动力学和形态学研究

目的:研究木瓜蛋白酶对人全唾液膜水解的动力学。方法:在不同pH值、离子强度和温度条件下,分别通过消散石英晶体微天平(QCM-D)和原子力显微镜(AFM)观察酶水解唾液膜的频率和表面形态变化。结果:在各种条件下唾液膜被木瓜蛋白酶部分水解,变得薄而光滑。QCM-D和AFM测量证实,在木瓜蛋白酶水解唾液膜的过程中,pH值、离子强度和温度具有协同作用。结论:酶动力学显示木瓜蛋白酶水解唾液膜的过程具有pH值、离子强度和温度依赖性和协同作用的特点。     

pH值、温度和离子强度对色素与人类唾液相互作用的影响

利用表面等离子共振技术和吸附动力学原理,在SPR芯片表面自组装形成人全唾液蛋白质生物膜。通过改变实验条件,在不同的pH值、温度和离子强度条件下监测TF、Cur和Cy吸附于WS表面的响应强度。统计采用双因素方差分析和SNK-q检验,检验水平α=0.05。结果:伴随着pH值和温度的升高,三种色素在人类全唾液表面的响应强度降低,吸附量逐渐减少。当反应体系的离子强度位于5.0～12.5mmol/L范围内时,吸附量与离子强度呈正相关,而当反应体系的离子强度低于5.0mmol/L或高于12.5mmol/L时,吸附量与离子强度呈负相关。结论:静电反应是色素和唾液蛋白质分子之间相互作用的主要驱动力。     

pH值、温度和离子强度对色素与人类唾液相互作用的影响

目的:通过表面等离子体共振(surface plasma resonance,SPR)技术在分子水平上原位、实时和动态考察pH值、温度和离子强度对茶黄素(theaflavin,TF)、姜黄素(curcumin,Cur)和矢车菊素(cyanidin,Cy)吸附于人全唾液(human whole saliva,WS)表面的影响。方法:利用表面等离子共振技术和吸附动力学原理,在SPR芯片表面自组装形成人全唾液蛋白质生物膜。通过改变实验条件,在不同的pH值、温度和离子强度条件下监测TF、Cur和Cy吸附于WS表面的响应强度。统计采用双因素方差分析和SNK-q检验,检验水平α=0.05。结果:伴随着pH值和温度的升高,三种色素在人类全唾液表面的响应强度降低,吸附量逐渐减少。当反应体系的离子强度位于5.0～12.5 mmol/L范围内时,吸附量与离子强度呈正相关,而当反应体系的离子强度低于5.0 mmol/L或高于12.5 mmol/L时,吸附量与离子强度呈负相关。结论:静电反应是色素和唾液蛋白质分子之间相互作用的主要驱动力。     

环境因素对口腔链球菌产生过氧化氢速率的影响

目的 观察口腔环境多种因素对口腔链球菌（Streptococcus oralis．S.oralis）H2O2产生速率的影响。方法采用微量板法测定S、oralis在不同浓度的葡萄糖、蔗糖、Ca^2＋、F^-、HFPO3^-及不同pH值条件下产生H2O2的速率。结果S．oralis在无外源性糖的条件下H2O2产生速率为每分钟7．48μmol／L；加入0．01～10mmol／L葡萄糖和蔗糖后，H2O2产生速率显著增高（P〈0．05）；不同浓度的葡萄糖、蔗糖间，S．oralis H2O2产生速率差异无统计学意义（P〉0.05）；pH〈6．0时S．oralis的H2O2产生速率显著降低（P〈0．05）；Ca^2＋、F^-和FHPO3^-对S．oralis H2O2产生速率的50％抑制浓度分别为1820．71、1．90和12．65mmol／L。结论环境因素对S．oralis H2O2产生速率有一定影响。     

3种牙科铸造金属模拟唾液浸泡后粗糙度的变化

目的：通过考察钴铬合金、镍铬合金以及纯钛在不同pH值人工唾液中浸泡后表面粗糙度的变化,研究3种常用牙科金属的耐腐蚀能力。方法：将3种金属的标准铸造试件逐级打磨抛光后。浸泡于pH值分别为7．0和5．6的人工唾液中。3个月后检测试件表面粗糙度,并用金相显微镜观察试件表面。采用SPSS11．0软件包对数据进行单因素方差分析及t检验。结果：pH=5．6的人工唾液浸泡后,3种材料表面粗糙度有显著差异,镍铬合金〉钴铬合金〉纯钛金属（P〈0．01）。pH=7．0的人工唾液浸泡后,镍铬合金表面粗糙度大于钴铬合金和纯钛（P〈0．01）,但钴铬合金和纯钛之间无统计学差异（p〉0．05）。pH=5．6人工唾液浸泡组的镍铬合金和钴铬合金表面粗糙度大于pH=7．0组的同种材料（P〈0．01）。各试验组表面粗糙度大小与显微镜观察到的材料表面腐蚀程度一致。结论：纯钛在酸性和中性环境下均有较强的耐腐蚀性,钴铬合金、镍铬合金在酸性介质中的耐腐蚀性较差。3种金属的耐腐蚀性由大到小排列为：纯钛金属〉钴铬合金〉镍铬合金。     

表面多孔涂层对氧化锆与饰面瓷界面结合强度的影响

目的：以表面抛光、喷砂为对照,研究表面多孔涂层对氧化锆与饰面瓷界面剪切结合强度的影响。方法：按照Schmitz-Schulmeyer法测量氧化锆与饰面瓷的剪切结合强度。制作氧化锆基底样本60个（IO×5×5mm）,分为三组（抛光组：耐水碳化硅砂纸逐级抛光至1200#;喷砂组：1lOμmA1203颗粒在3bars的压力下喷砂10sec,距离10mm;涂层组：质量分数为55wt％的氧化锆粉浆涂塑氧化锆表面,致密烧结）,每组20个。表面烧结饰面瓷（5×3×3mm）。每组取10个样本,5℃／55℃水域中交替循环5000次。万能材料试验机测试剪切结合强度,加载速度0．5mm／min。对测试结果进行双因素方差分析（α=0．05）。SEM观察样本断裂模式。结果：涂层组剪切结合强度与抛光组和喷砂组差异均有统计学意义（P〈0．05）;喷砂组与抛光组间差异无统计学意义（P〉0．05）;各组温度循环后剪切结合强度差异均无统计学意义（P〉0．05）。SEM观察显示,涂层组样本以饰面瓷的内聚断裂为主;抛光组和喷砂组以界面断裂为主。结论：表面多孔涂层可显著提高氧化锆与饰面瓷的剪切结合强度,并能耐受短期的人工老化,而结合强度无明显下降。     

光照模式对双固化树脂粘接剂聚合程度的影响

目的研究不同光照模式对两种双固化树脂粘接剂聚合程度的影响。方法采用间歇光照、即刻光照、延迟光照和无光照4种不同固化方式,分别制备3MRelyXUnicem和DMGPermaCem2．0双固化树脂试件．24h避光保存后使用显微硬度仪测定样本表面硬度．三点弯曲试验测量挠曲强度．差示扫描量热仪进行玻璃化转变温度测量。数据采用协方差分析进行统计。结果两种树脂粘接剂各组表面硬度和挠曲强度由高到低依次为：间歇光照模式、即刻光照模式〉延迟光照模式〉无光照模式（P〈0．05）。差示扫描量热分析未检测到明显吸热峰,不能确定玻璃化转变温度。除无光照组外．3MRelvX Unicem表面硬度均显著高于DMG PermaCem2．0（P〈0．05）;DMG PermaCem2．0挠曲强度显著高于3MRelyX Unicem（P〈0．05）。结论间歇光照模式比延迟光照模式更有利于提高双固化树脂粘接剂聚合程度：双固化树脂粘接剂在无光照情况下聚合不全;与3MRelyX Unicem相比．DMGPernlaCem2．0抗压性能较差．但韧性较好．且无光照条件下聚合程度更高。     

Affinity interactions between natural pigments and human whole saliva

Objective

The aim of the present study was to assess the null hypothesis that there are no differences of affinity between pigments and human whole saliva (WS), and the affinity is not influenced by the functional groups of pigments, temperatures, pH values, and salt concentrations.

Methods

The affinity constants of interactions between WS and theaflavin (TF)/curcumin (Cur)/cyanidin (Cy) were determined by surface plasmon resonance (SPR) and fluorescence quenching. Mass-uptake at various temperatures, pH values, and salt concentrations was also carried out.

Results

The order of affinity of the pigments binding to WS is TF > Cur > Cy. A large number of complexes and precipitations of pigments/proteins were formed through a quick, strong, and almost irreversible binding process. The mass-uptake of pigments was affected not only by the functional groups, but also by molecular weight of pigments, temperatures, pH values, and salt concentrations.

Conclusion

The complex of pigments may easily and rapidly deposit onto the WS film, and are difficult to remove from the WS surface. However, the complex of pigments can be reduced by properly regulating the physicochemical conditions, such as temperatures, pH values, and salt concentrations.     

低浓度磷酸根对碳酸羟基磷灰石溶解度的影响

目的：测定碳酸羟基磷灰石（CHA）在含低浓度磷酸根的检测溶液中的溶解度，探讨磷酸根对CHA体外溶解过程的影响。方法：采用固体滴定法检测CHA在（37．0±O．1）oC恒温下、含0．5mmol／L磷酸根的0．1mol／LKCl溶液中的溶解过程并绘制溶解度等温曲线。采用扫描电镜（SEM）、X射线衍射分析（XRD）及能谱分析（EDX）检测CHA的理化性能。结果：在KCl溶液中，CHA的溶解度高于羟基磷灰石，低于无机牛骨；在0．5mmol／L磷酸根背景溶液中，CHA的溶解度略有升高。结论：CHA的溶解不遵循经典的热动力学理论规律，其溶解度与pH值相关。低浓度磷酸根可促进CHA溶解。     

烧结温度对氧化锆/饰面瓷剪切强度的影响

目的:研究不同烧结温度对氧化锆/饰面瓷剪切强度的影响。方法:将70个氧化锆试件按饰面瓷烧结温度的不同随机分为7组。采用平行界面剪切实验测定各组的氧化锆/饰面瓷结合强度。结果:7组间氧化锆/饰面瓷剪切强度有统计学差异(P﹤0.05)。最高烧结温度860℃组及最低烧结温度800℃组,与标准组830℃组相比较剪切强度均有统计学差异(P﹤0.05)。810℃、820℃、840℃、850℃组,与标准组830℃组相比较剪切强度均无统计学差异(P﹥0.05)。结论:饰面瓷的烧结温度对氧化锆/饰面瓷的剪切强度产生影响,过高或过低的烧结温度会降低氧化锆/饰面瓷试件的剪切强度。     

3种天然色素与人唾液富组蛋白5亲和力的比较

目的：本研究旨在用3种天然酚式色素——茶黄素、姜黄素和矢车菊素猝灭人唾液富组蛋白5的内源性荧光，从而在分子机制水平研究不同色素与H5之间的亲和力差异。方法：应用荧光分光光度计检测不同色素导致H5内源性的蛋白质荧光猝灭的效果。通过获得的荧光光谱，判断3种色素对H5的荧光猝灭类型并计算相应的荧光猝灭常数。数据采用单因素方差分析及SNK—q检验统计，检验水平α=0．05。结果：TF和Cur对H5的荧光猝灭类型以静态猝灭为主，同时伴随动态猝灭，而Cy对H5猝灭类型为静态猝灭。猝灭能力表现为Cy〉TF和Cur（P〈0．05）。结论：只有Cy会导致H5蛋白质分子构象发生改变。在溶液环境中，色素与H5之间的亲和力为Cy〉TF和Cur（P〈0．05）。     

新型HA-PEC纳米复合骨修复材料的研制及细胞相容性研究

目的:制备一种新型的HA-PEC纳米复合骨组织缺损修复材料,并评价其细胞相容性。方法:将含有Ca、P离子(Ca/P的摩尔比为1.67,Ca~(2+)的终浓度为6 mmol/L)的酸性壳聚糖(chitosan,CS)溶液滴加入磷酸化壳聚糖(phosphorylated chitosan,PCS)溶液中,控制反应条件,获得由羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)和壳聚糖-磷酸化壳聚糖聚电解质复合物(polyelectrolyte complex,PEC)共同组成的HA-PEC微粒。HA-PEC复合物与成骨细胞共同培养,观察细胞黏附、生长的情况。结果:纳米级的、低结晶度的HA均匀地分布在PEC纤维中,"HA-PEC微粒"具有类骨的微孔结构,可促进成骨细胞黏附、增殖、分化。结论:"HA-PEC"纳米复合材料具有良好的生物相容性和降解性,有望成为一种有前途的新型骨组织修复材料。