微小RNA与多发性骨髓瘤

微小RNA(microRNA,miRNA)是一类对基因具有调控功能的内源性非编码小分子RNA,通过与靶mRNA完全或不完全互补配对,引起mRNA降解或翻译抑制,从而对基因转录后水平进行调控。研究表明,miRNA对细胞增殖、代谢、凋亡、分化等细胞发育的生理和病理过程有重要调控作用,其失调有助于肿瘤的形成。本文就miRNA的生物学特征、功能作用及与多发性骨髓瘤的发生发展、染色体核型异常及药物耐药等方面的研究进展作一综述。     

多发性骨髓瘤非编码RNA的研究进展

非编码RNA(ncRNA)是一类很少或不能合成蛋白质的RNA,包括微小RNA(miRNA)和长链非编码RNA(lncRNA)等RNA。miRNA分子是短的非编码RNA,在实体肿瘤和造血系统恶性肿瘤中有异常表达,在基因表达的转录后调节中起重要的作用。lncRNA在哺乳动物包括人类中,已被证明在癌组织中异常表达并参与致癌或肿瘤抑制的过程。文章就ncRNA在多发性骨髓瘤(MM)中的生物学功能和作为潜在作用靶点的治疗价值作一综述。     

长链非编码RNA在肿瘤发生及发展中的作用机制

长链非编码RNA(lncRNA)是一类转录本长度＞200个核苷酸的非编码RNA(ncRNA),其在肿瘤的发生、发展中发挥重要作用.IncRNA具有多种生物学功能,可以通过诱饵分子、支架分子和向导分子等形式,在表观遗传学水平、转录水平及转录后水平,调控蛋白质编码基因的表达.lncRNA与肿瘤细胞生长和凋亡、侵袭和转移等生物学行为密切相关.进一步阐明IncRNA在肿瘤发生、发展过程中的作用机制,有望为研究者开发肿瘤诊断和治疗的新方法提供思路.笔者拟就lncRNA调控基因表达的作用机制,及其在肿瘤诊断及治疗中的作用进行综述.     

长链非编码RNA在肝癌中的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类转录本长度超过200个核苷酸、少有或无蛋白质编码功能的RNA分子。lncRNA在表观遗传学水平、转录水平和转录后水平调控基因表达,广泛参与机体的生理和病理过程;并与物种进化、胚胎发育、代谢调节以及肿瘤发生、发展密切相关。本文对lncRNA在肝癌中的最新研究进展作一综述,以期为肝癌临床诊断与治疗提供新的思路。     

miRNAs在红系造血过程中的作用

microRNAs(miRNAs)是一类普遍存在的长度约为19-25个核苷酸的小RNA,通过与靶基因mRNA 3'端非编码区结合在转录后水平抑制靶基因的表达.从而参与调控个体发育、细胞凋亡、增殖及分化等生命活动.近来研究发现miRNA可以和其他红系转录因子相互作用,调节红细胞的生成.     

长链非编码竞争性内源RNA在胃癌中的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)是一类长度大于200个核苷酸并且能够在转录及转录后水平调节蛋白编码基因表达的非编码RNA,参与大量病理、生理过程。长链非编码RNA含有microRNA(miRNA)反应元件,可以和miRNA相互结合,影响目的基因的表达,此类lncRNA称为竞争性内源RNA(ceRNA),这种ceRNA参与胃癌的致病过程,为胃癌的致病机制提供了新的思路,通过阻断lncRNA与其相应位点的结合,也为胃癌的治疗提供新的靶点。     

多发性骨髓瘤基于表观遗传学的生物学作用

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是以骨髓中克隆性浆细胞异常增生并分泌大量单克隆免疫球蛋白或其片段(M蛋白),从而导致相关器官或组织损伤为特征的恶性肿瘤。MM生物学的复杂性基于错乱的肿瘤途径,除了细胞遗传学异常的核心作用外,表观遗传学畸变也被证明参与了MM发生发展。MM表观遗传学信息主要集中在DNA甲基化、组蛋白修饰及非编码RNA等过程,并产生异常信号途径而调控MM细胞周期和凋亡。本文对MM的发生发展、临床诊断及治疗的表观遗传学研究进展作一综述。     

B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1对多发性骨髓瘤中浆细胞分化和存活调控作用的研究进展

多发性骨髓瘤(MM)是一类浆细胞恶性克隆性疾病.近年其发病率呈逐年上升趋势,且迄今尚无治愈方法.从浆细胞分化和存活的调控机制入手,探索MM治疗的新靶点和新策略是一可行的治疗手段.B淋巴细胞诱导成熟蛋白(Blimp)-1是调控浆细胞分化和存活的关键转录因子,但对其在MM中作用的研究迄今尚少.相关研究结果显示,骨髓瘤细胞高表达Blimp-1,RNA干扰沉默Blimp-1表达,可使浆细胞分化消失并伴各型免疫球蛋白(Ig)合成障碍,从而抑制骨髓瘤细胞增殖并诱导其凋亡.笔者拟就Blimp-1调控浆细胞分化和存活在MM中的作用的研究进展进行综述.     

微小RNA:一类新的调控性非编码RNA

微小RNA(miRNA)是一种长度约为18~25nt的非编码RNA。在线虫、拟南芥、果蝇、人类等动植物细胞中已发现了近400个miRNA,这些miRNA可在转录后水平或翻译水平调节基因表达。miRNA可在无脊椎动物的发育、神经分化、细胞增殖、凋亡和脂肪代谢过程中发挥调节作用。由于与siRNA的相关性及相似的功能,miRNA已引起人们的广泛关注。     

长链非编码RNA(LncRNA)HOTAIR研究进展

长链非编码RNA (LncRNA)是一类转录本长度超过200nt的RNA分子,它们并不编码蛋白,而是以RNA的形式在多种层面上(表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等)调控基因的表达水平[1].LncRNA通过各种分子机制起不同的生物学作用,包括具有反式基因调节作用的同源异型框基因反义基因间RNA(HOTAIR),遗传印记(如H19的过表达在乳腺癌细胞增殖中起重要作用[2]),Xist作用于X染色体使其失活[3]和Nron调节细胞核功能[4].LncRNA在参与细胞的增殖过程,调控基因表达,稳定细胞形态中起到核心作用,在不同的癌症中,LncRNA的异常表达起到致癌或抑癌的作用,与染色质结合形成新的复合物,可以使特定的基因沉默[5].越来越多的LncRNA被证明在细胞水平和分子遗传学水平具有相应的功能,包括剂量补偿效应、参与基因组印记过程、组蛋白修饰、染色质重构、细胞分化、细胞结构的完善、细胞周期的调控、细胞内物质的运输、干细胞的程序再编以及热休克反应,作为微小RNA(miRNA)的前体等[6].LncRNA的这些作用已引起人们的广泛关注,其中既有顺式调控作用[7],又有反式调控作用的HOTAIR在癌症中异常表达,已成为癌症方面非编码RNA研究的一个新的热点.     

竞争性内源性RNA在急性髓系白血病中的研究进展

急性髓系白血病 (acute myeloid leukemia, AML) 是多种因素引起的造血系统恶性疾病,具有很高的复发率及死亡率。非编码 RNA在 AML的发生发展过程中发挥着重要作用。竞争性内源性 RNA(competing endogenous RNA, ceRNA)观点指出,不同的非编码 RNA可通过作用于相同的 miRNA反应元件 (MRE)从而调控基因的表达。目前越来越多的研究表明,非编码 RNA作为 ceRNA在调控 AML的增殖、凋亡、侵袭和耐药等生物学过程中发挥关键作用。该文主要对 ceRNA在 AML生物学过程中的调控作用,以及治疗和预后中的临床意义作一综述。     

氟达拉滨诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡及其基因表达分析

目的 探讨氟达拉滨诱导多发性骨髓瘤(MM)细胞凋亡及其分子机制.方法 用MTT法检测氟达拉滨对MM细胞的生长抑制作用;用流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法分析凋亡蛋白表达;采用细胞凋亡基因芯片技术检测并分析对照组与氟达拉滨处理组间的基因表达差异.结果 氟达拉滨显著抑制RPMI8226和KM3细胞生长,呈时间和剂量依赖性.24 h半数生长抑制值(IC50)分别为2.13μg/ml和0.36 μg/ml.流式细胞术分析显示,氟达拉滨作用24 h后MM细胞凋亡呈剂量依赖性,同时伴有caspase-3和PRAP激活,具有典型的细胞凋亡生物学特征.在97个凋亡相关基因中,筛选出25个差异表达基因.氟达拉滨处理组与对照组比较,表达上调的基因有13个,主要涉及Bcl-2家族促凋亡基因、肿瘤坏死因子及其受体超家族基因,以及胱天蛋白酶募集结构域家族.表达下调的基因有12个,主要涉及Bcl-2家族抗凋亡基因、肿瘤坏死因子超家族及其受体相关因子基因,以及凋亡抑制蛋白家族.结论 氟达拉滨显著抑制MM细胞生长,诱导细胞凋亡;其作用机制涉及多个凋亡相关基因表达改变.     

激活Notch信号抑制多发性骨髓瘤细胞凋亡

摘要多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)细胞的增殖及凋亡受骨髓造血微环境的调节。Notch信号是骨髓中细胞与细胞之间通讯的主要信号通路之一，它对多发性骨髓瘤细胞的调节作用目前并不清楚。本研究旨在阐明Notch信号对多发性骨髓瘤细胞凋亡的调节作用。利用RT-PCR分析多发性骨髓瘤细胞Notch信号分子的表达和采用逆转录病毒介导的基因转移方法将Notch-1胞内区(Intracellular domain of Notch，ICN)转入多发性骨髓瘤细胞株，以建立激活)Notch信号的多发性骨髓瘤细胞系；采用台盼蓝拒染和TUNEL方法测定骨髓瘤细胞的死亡。结果表明：RT-PCR检测显示多发性骨髓瘤细胞表达、Notch-1及相关分子。逆转录病毒可以介导外源Notch-ICN在骨髓瘤细胞中表达，激活Notch-1信号可以抑制二甲基鞘氨醇(N，N-dimethylspingosine，DMS)诱导的多发性骨髓瘤细胞的凋亡。结论：：Notch信号对多发性骨髓瘤细胞凋亡有抑制作用，这可能为多发性骨髓瘤的治疗提供新的靶点．     

MicroRNAs as lung cancer biomarkers and key players in lung carcinogenesis

Lung cancer is the leading cause of cancer deaths worldwide and few genetic markers enable to evaluate lung cancer risk. MicroRNAs (miRNAs) are small non-coding RNAs that regulate gene expression during various cell processes such as apoptosis, differentiation and development. In these last years, many works confirm a role for miRNAs in the initiation and progression of lung cancer. miRNA profiling has the potential to classify tumors with high accuracy and predict outcome. Here, we describe the roles of miRNA in lung carcinogenesis and the possibility to use them as biological markers for diagnostic, prognostic and predictive purposes.     

VEGF反义RNA促骨髓瘤细胞凋亡及抑制内皮细胞形成血管作用的体外研究

本研究探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）反义RNA对人多发性骨髓瘤细胞系U266增殖、凋亡及内皮细胞ECV304体外血管形成的影响和以VEGF反义RNA进行多发性骨髓瘤（MM）基因治疗的可行性。将VEGF121反向克隆入真核表达质粒pIRES2-EGFP构建重组质粒AS-VEGF，酶切、测序鉴定。用此真核表达重组质粒转染人骨髓瘤细胞系U266，G418筛选获得阳性克隆。RT-PCR、Westernblot法分别检测阳性克隆中VEGFmRNA和蛋白的表达；利用MTT法、流式细胞术检测转染细胞增殖、凋亡的变化；利用基质胶中内皮细胞ECV304的网络形成检测血管形成。结果表明：获得了携带反义VEGF基因的真核表达重组质粒AS-VEGF；VEGF121反义RNA部分阻断了U266细胞中VEGF的表达，转染重组质粒的U266细胞VEGFmRNA和蛋白表达都较对照组细胞有明显减少，细胞的增殖受到抑制，凋亡增加。转染重组质粒的细胞培养上清在基质胶中作用ECV304细胞后的血管形成较对照组亦有明显减少。结论：VEGF反义RNA可以下调VEGF表达，从而抑制骨髓瘤细胞系U266增殖，增加其凋亡并抑制血管形成。     

多发性骨髓瘤中BAFF-R表达及其对细胞存活影响的研究

目的 研究多发性骨髓瘤（MM）中B淋巴细胞刺激因子受体（BAFF-R）基因、蛋白表达水平;并进一步研究BAFFR对MM细胞生长存活的影响.方法 应用RT-PCR,ELISA,Western Blot等技术检测BAFF-R在MM细胞中的表达;WST-1,TUNEL凋亡实验,Western Blot检测BAFF-R对MM细胞增殖、凋亡的影响.结果 BAFF-R mRNA和蛋白表达于MM细胞中;与对照组相比,BAFF-R阻断性抗体（1,5,15 μg/ml）可抑制KM3细胞增殖,t值分别为79.78,72.21,76.88;P值均为0.000,即BAFF-R促进KM3细胞增殖;同时,BAFF-R阻断性抗体组（15 μg/ml）细胞凋亡明显高于对照IgG组;BAFF-R阻断性抗体组抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低18％,促凋亡蛋白Bax表达增加43％,说明BAFF-R能够抑制MM细胞凋亡.结论 BAFF-R对MM细胞生长存活有一定影响,BAFF-R对多发性骨髓瘤的发生发展发挥一定作用.