苦参碱对C57BL/6J小鼠Lewis肺癌VEGF表达的影响

目的 研究苦参碱对小鼠Lewis肺癌的作用,并探讨其作用机制.方法 建立小鼠Lewis肺癌模型,将实验小鼠分为生理盐水组、不同剂量苦参碱组、环磷酰胺组,计算原发瘤抑制率及微血管密度;采用RT-PCR和Western blot法检测原发瘤组织VEGF mRNA和蛋白表达.结果 应用苦参碱各剂量组,小鼠原发瘤抑制率、微血管...     

茯苓多糖对Lewis肺癌小鼠自发肺转移的抑制作用及其机制研究

目的 研究茯苓多糖对Lewis肺癌小鼠自发肺转移的影响,并探讨其作用机制。方法 C57BL/6小鼠右腋皮下接种Lewis肺癌细胞,分为茯苓多糖高（0.50 mg/只）、低（0.33 mg/只）剂量组,顺铂组（顺铂0.04 mg/只）,模型组（生理盐水）,接种瘤细胞后第2天开始尾iv给药,隔天一次。观察小鼠一般状态,造模后第7天开始,隔天测量肿瘤体积。造模后21 d取肺,计数肺表面转移灶个数,HE染色检测肺微小转移灶个数,检测外周血白细胞数量及脾质量、脾指数。结果 茯苓多糖高、低剂量对实体瘤无明显抑制,茯苓多糖高剂量可减少肺表面转移灶个数,增加白细胞CD11bmRNA表达,不影响外周血白细胞数、脾质量及脾指数,一般状况较好;茯苓多糖低剂量对肺表面转移灶个数、外周血白细胞数、脾质量及脾指数无明显影响,可增加白细胞CD11b、CD18mRNA表达,一般状况较好。结论 茯苓多糖对Lewis肺癌小鼠实体瘤无明显抑制作用,但能够抑制其自发肺转移,对外周血白细胞数量、脾质量及脾指数无明显影响,可增加外周血白细胞CD11b、CD18mRNA表达,活化外周血白细胞可能是茯苓多糖抑制肿瘤转移的机制之一。     

绿茶对 Lewis 肺癌细胞攻击 C57/BL6J 小鼠胸腺细胞及其亚群影响的保护效果

绿茶对Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞攻击Ｃ５７／ＢＬ６Ｊ小鼠胸腺细胞及其亚群影响的保护效果葛桂秀朱茂祥杨陟华龚诒芬韩驰１陈君石１（北京放射医学研究所，北京１００８５０；１中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所，北京１０００５０）Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞（２×１０５／０...     

鲨鱼软骨提取物对C_(57)BL/6J小鼠B_(16)黑色素瘤肺转移的影响

目的：评价鲨鱼软骨提取物（SCAE）对C57BL／6J小鼠B16黑色素瘤肺转移的影响。方法：小鼠经尾静脉接种B16黑色素瘤细胞悬液（5×104／每鼠）后d21，观察SCAE低、中、高剂量及环磷酰胺、生理盐水对照组小鼠肺部转移瘤生长情况。结果：SCAE及环磷酰胺对C57BL／6J小鼠经血道B16黑色素瘤肺转移均有明显的抑制作用，其肺校重及肺转移灶数均低于对照组，但后者主要免疫器官胸腺呈现明显萎缩，而SCAE各剂量组无此毒副作用。     

维生素A对C_(57)BL小鼠黑色素瘤肺转移的影响及其机理研究

本研究从免疫学角度观察了维生素A(V-A)对肺泡巨噬细胞(Mφ)功能的影响和体内抗肿瘤血道肺转移的作用。实验结果显示,V-A处理后小鼠肺泡Mφ细胞毒活性及其细胞表面补体C_3b受体功能均有所增强,小鼠肿瘤血道肺转移减少,且两者之间有较好的相关性。     

转移相关基因蛋白CD44v6和nm23-H1在宫颈病变中的表达及意义

目的探讨CD44v6和nm23-H1与宫颈癌的早期发生、发展及淋巴结转移的关系。方法应用间接免疫荧光染色法和流式细胞技术检测102例宫颈组织中CD44v6和nm23-H1蛋白的表达。结果CD44v6在宫颈癌组、宫颈上皮内瘤样病变（CIN）组及正常宫颈组的表达依次增高（P〈0．05）。nm23-H1在宫颈癌组与CIN组的表达接近（P〉0．05）,但高于正常组（P〈0．05）。CD44v6在CINⅡ、Ⅲ级表达接近（P〉0．05）,但高于CINI级（P〈0．01）。nm23-HI在CIN各级表达接近（P〉0．05）。CD44v6随宫颈癌期别表迭增高（P〈0．01）,盆腔淋巴结转移的宫颈癌组CD44v6表达高于无转移者（P〈0．01）。nm23-H1表达与CD44v6结果相反。结论CD44v6、nm23-HI与宫颈癌的早期发生、发展及淋巴结转移均有相关性。     

复方银杏叶制剂对酒精性肝损伤的防护作用及机制

目的观察银杏叶制剂(CGB)对酒精性肝损伤的防护作用。方法白酒-玉米油混悬液ig给予大鼠造肝损伤模型,连续10周,造模同时分别ig给予银杏叶提取物(GBE)0.8 g·kg-1,CGB 2.4,0.8和0.4 g·kg-1或联苯双酯0.15 g·kg-1。取血测定各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及肝匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)。并观察肝组织病理及肝细胞线粒体超微结构变化。采用"cocktail"探针药物法测定大鼠ig给予CGB前后血浆中相应的CYP2E1和CYP3A4酶探针氯唑沙宗和氨苯砜的血药浓度,并计算药代动力学参数。通过药代动力学参数的变化,评价CGB对CYP2E1和CYP3A4酶活性的影响。结果连续ig给予乙醇后,大鼠血清转氨酶显著高于正常对照组(P<0.01),与模型组比较,CGB 0.8和2.4 g·kg-1组ALT和AST显著降低(P<0.05);CGB 0.8和2.4 g·kg-1组肝匀浆MDA显著降低、GSH和SOD明显升高(P<0.05)。ig给予CGB前,模型组大鼠氯唑沙宗和氨苯砜的AUC0-24,cmax均较正常对照组显著降低(P<0.05);CGB可使正常大鼠血浆氯唑沙宗和氨苯砜AUC0-24下降(P<0.05),使模型组大鼠血浆氯唑沙宗和氨苯砜的AUC0-24和cmax显著升高(P<0.05)。结论 CGB对酒精性肝损伤有防护作用,其机制与氧化应激干预相关。     

探讨VEGF和nm23-H1在非小细胞肺癌组织中的表达与淋巴结转移的关系

目的：探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）和肿瘤转移抑制基因（nm23‐H1）与非小细胞肺癌（NSCLC）淋巴结转移的关系。方法采用免疫组织化学染色法,检测40例非小细胞肺癌原发灶的石蜡切片标本中VEGF和nm23‐H1基因的蛋白表达,分析其与非小细胞肺癌淋巴结转移之间的关系。结果40例非小细胞肺癌组织中的VEGF和nm23‐H1阳性表达率分别为65％（26／40）和65％（26／40）;VEGF和nm23‐H1与淋巴结转移有相关性（P＜0．05）;VEGF和nm23‐H1与病理类型、细胞分化程度及临床分期无相关（P＞0．05）。结论 VEGF、nm23‐H1在非小细胞肺癌组织中的表达与淋巴结转移密切相关,检测VEGF、nm23‐H1的表达将有助于判断非小细胞肺癌的转移潜能及预后。     

Lewis肺癌小鼠Th1/Th2免疫应答状态的观察

目的研究Lewis肺癌小鼠Th1/Th2免疫应答状态及其意义。方法C57BL/6小鼠16只按随机数字法分为肺癌模型组(A组)与正常对照组(B组),每组8只。A组采用Lewis肺癌单细胞悬液接种于C57BL/6小鼠右腋部皮下建立肺癌模型;B组则正常饲养未予处理。两组实验动物于实验末取血,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中Th1细胞因子IFN-γ、Th2细胞因子IL-4浓度,并进行组间相关比较。结果A组小鼠血清中Th1相关细胞因子IFN-浓度明显低于B组小鼠,A组小鼠Th2相关细胞因子IL-4浓度明显高于B组小鼠,差异均有统计学意义(P<0.05);而FN-γ/IL-4比值A组小鼠相应低于B组小鼠,差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论Lewis肺癌小鼠Th1/Th2免疫应答状态呈现明显Th1向Th2漂移,使肺癌细胞逃避机体免疫监视,并削弱机体的细胞免疫功能,这应是肿瘤发生发展的主要原因之一。     

The effect of Ginkgo biloba extracts on the pharmacokinetics and pharmacodynamics of cilostazol and its active metabolites in healthy Korean subjects

AIMS

The primary objective of this study was to evaluate the effects of Ginkgo biloba extracts (GBE) on the pharmacokinetics of cilostazol and its metabolites. The secondary objective was to assess the effect of GBE on the pharmacodynamics of cilostazol.

METHODS

A randomized, double-blind, two-way crossover study was conducted with 34 healthy Korean subjects. All subjects were given an oral dose of cilostazol (100 mg) plus GBE (80 mg) or cilostazol (100 mg) plus placebo twice daily for 7 days. Plasma concentrations of cilostazol and its active metabolites (3,4-dehydrocilostazol and 4′-trans-hydroxycilostazol) were measured using liquid chromatography–tandem mass spectroscopy on day 7 for pharmacokinetic assessment. The adenosine diphosphate-induced platelet aggregation and bleeding time were measured at baseline and on day 7 for pharmacodynamic assessment.

RESULTS

The geometric mean ratios of area under the concentration–time curve for dosing interval for cilostazol plus GBE vs. cilostazol plus placebo were 0.96 (90% confidence interval, 0.89–1.03; P = 0.20) for cilostazol, 0.96 (90% confidence interval, 0.90–1.02; P = 0.30) for 3,4-dehydrocilostazol and 0.98 (90% confidence interval, 0.93–1.03; P = 0.47) for 4′-trans-hydroxycilostazol. The change of aggregation after administration of cilostazol plus GBE seemed to be 1.31 times higher compared with cilostazol plus placebo, without statistical significance (P = 0.20). There were no significant changes in bleeding times and adverse drug reactions between the treatments.

CONCLUSIONS

Co-administration of GBE showed no statistically significant effects on the pharmacokinetics of cilostazol in healthy subjects. A large cohort study with long-term follow-up may be needed to evaluate the possible pharmacodynamic interaction between cilostazol and GBE, given that there was a remarkable, but not statistically significant, increase in inhibition of platelet aggregation.     

双氢青蒿素对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长的影响

目的：探讨双氢青蒿素对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑瘤效应及其作用机制。方法：50只C57BL/6J小鼠皮下接种3LL细胞（2×10^6）,随机分为5组,分别为生理盐水组,阳性对照顺铂组,双氢青蒿素高、中、低剂量组（150、100、50mg/kg）,检测各组小鼠的体重变化和抑瘤率,应用流式细胞术进行瘤细胞的DNA倍体分析。结果：双氢青蒿素中、高剂量组体重无生理盐水组增加明显,其抑瘤率分别为53.50%及59.24%;流式细胞术检测双氢青蒿素能诱导肿瘤细胞凋亡,并能影响肿瘤的细胞周期,G0/G期及G2/M期细胞数大量减少,细胞被阻滞在S1期。结论：口服双氢青蒿素对Lewis小鼠肺癌有明显的抑制作用,可促进肿瘤细胞凋亡。     

厄洛替尼通过下调CD44表达抑制非小细胞肺癌转移的机制研究

目的 探讨表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)下调黏附分子CD44表达抑制非小细胞肺癌转移的机制.方法 采用MTT法检测厄洛替尼对HCC827细胞株的增殖抑制效应及计算药物作用48 h的IC50;采用Transwell和划痕实验检测3组[control、EGF(50 ng/ml)刺激组、厄洛替尼(0.323 μmol/L)处理组]细胞侵袭迁移能力的变化;采用流式细胞术及Western blot方法分别从细胞及蛋白水平检测3组[control、EGF(50 ng/ml)刺激组、厄洛替尼(0.323 μmol/L)处理组]细胞CD44表达水平变化.结果 MTT结果显示,随着药物浓度升高,厄洛替尼对细胞的增殖抑制率也逐渐增大,差异有统计学意义(P＜ 0.05);IC50为0.323 μmol/L.Transwell及划痕实验结果显示,厄洛替尼阻断EGFR信号通路后可降低细胞的侵袭迁移能力(P＜0.05).流式细胞术及Western blot检测三组细胞CD44表达水平变化结果显示:当使用EGF刺激细胞后,CD44表达明显上调,而使用厄洛替尼阻断EGFR信号通路后CD44表达则被明显下调(P＜0.05).结果提示,厄洛替尼抑制肿瘤转移可能与改变CD44表达有关.结论 使用厄洛替尼阻断EGFR信号通路后,可间接下调与肿瘤转移密切相关的黏附分子CD44的表达,进而发挥抑制肿瘤转移的作用.     

海参皂苷Echinoside A和ds-Echinoside A抑制小鼠Lewis肺癌生长和转移作用

目的探讨海参皂苷Echinoside A(EA)和ds-Echinoside A(DSEA)对小鼠肿瘤生长和自发肺转移的抑制作用及机制。方法建立C57BL/6J小鼠Lewis肺癌自发性肺转移模型,连续腹腔注射给药21 d,剥离原位肿瘤和双侧肺,分别称瘤重和计数肺表面转移灶结节数;采用RT-PCR法检测肿瘤组织中半胱氨酸蛋白水解酶3(Cysteine-requiring Aspartate Protease,Caspase 3)、基质金属蛋白酶-2/9(matrix metalloproteinase-2/9,MMP-2/9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1/2(tissue inhibitor of metalloproteinase-1/2,TIMP-1/2)、乙酰肝素酶(heparanase,HPA)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA的表达。结果 EA和DSEA均能抑制Lewis肺癌小鼠移植瘤的生长,并显著抑制减少肺表面转移灶结节数。EA和DSEA可以显著提高荷瘤小鼠肿瘤组织中Caspase 3和TIMP-1/2mRNA的表达,降低MMP-2/9、HPA和VEGF mR-NA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论 EA和DSEA能显著抑制小鼠Lewis肺癌生长和自发性肺转移,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡,调节细胞外基质(extracellular matrix,ECM)降解相关基因的表达、抑制VEGF的释放,从而抑制肿瘤细胞的转移和血管新生有关。     

ABCG2基因在非小细胞肺癌细胞耐药中的作用和机制探究

目的:分析ABCG2基因在多耐药非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)细胞的表达变化及其可能参与的机制。方法:选择肺癌细胞A549及耐药A549进行细胞培养,分别给予顺铂及依托泊苷化疗药物治疗;取耐药A549细胞分为空白组(不处理)、对照组(给予siRNA对照)及siRNA-ABCG2组(给予siRNA-ABCG2)。采用CCK8法检测各组细胞的药物抑制率,采用Western blot法检测3组细胞中ABCG2蛋白表达情况。结果:2组细胞药物抑制率变化呈剂量依赖性,同剂量中耐药A549组药物抑制率明显低于A549组。耐药A549组细胞ABCG2蛋白表达水平明显高于A549组。3组细胞药物抑制率呈剂量依赖性,其中同剂量的siRNA-ABCG2组药物抑制率明显高于空白组及对照组。siRNA-ABCG2组细胞ABCG2、p-AKT、p-mTOR蛋白表达水平明显低于空白组及对照组,分别使用p-AKT、p-mTOR的激活剂后,可显著降低干扰ABCG2基因后导致的顺铂和依托泊苷抑制率的增加。结论:ABCG2通过调控PI3K/AKT信号通路在耐药A549的耐药性中发挥重要作用,沉默ABCG2基因可改善耐药A549细胞的耐药性,提示ABCG2可作为改善NSCLC细胞对顺铂及依托泊苷化疗药物的耐药性的潜在靶点。