西酞普兰对戊四氮点燃癫痫大鼠行为学及海马5-HT能递质系统影响的在体微透析研究

为研究5-羟色胺(5-HT)能神经递质在癫痫形成过程中的变化及西酞普兰(CTP)对其的影响,本研究用CTP(1mg/kg.d灌胃)预干预1周后,对戊四氮(PTZ,30mg/kg.d,腹腔注射)点燃癫痫过程中的行为学及在不同时间点对大鼠海马进行微透析取样,经高效液相电化学检测技术在活体观察了30只自由活动大鼠5-HT及其代谢产物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)水平和5-HT转化率(5-HIAA/5-HT)的动态变化。结果显示:PTZ注射后在CTP组发作潜伏期延长,发作程度轻和点燃时间延长,发作死亡率降低。点燃早期,CTP组大鼠的海马5-HT水平升高,5-HT转化率降低,与对照组和PTZ组比较,有显著性差异(P<0.05);点燃晚期CTP组和PTZ组与对照组比较5-HT水平和5-HT转化率均显著降低(P<0.05)。本研究结果提示PTZ点燃过程中,早期CTP升高脑内5-HT水平,可能直接抑制了引起爆发放电的动作电位,而抑制发作;晚期脑内5-HT神经元丢失和受体减少,功能减退,而导致CTP的作用减退。     

经皮三叉神经电刺激减轻戊四氮诱导的大鼠癫痫发作并抑制海马内IL-1β和TNF-α的表达

 目的:探讨经皮三叉神经电刺激预处理对戊四氮（PTZ）诱发的急性癫痫大鼠的行为学及海马致痫细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法:动物随机分为对照组、致痫组（PTZ组）和经皮三叉神经电刺激组,分别给予7 d、14 d和28 d的假刺激和三叉神经电刺激预处理后,腹腔注射PTZ 建立急性癫痫动物模型,观察给药后大鼠癫痫行为学表现,并分别用免疫组织化学方法及ELISA方法对海马IL-1β、TNF-α进行检测。结果:经皮三叉神经电刺激可以明显减轻大鼠的痫性发作级别,减少癫痫发作持续的时间（P<0.05）, 且海马细胞因子IL-1β及TNF-α的表达明显少于PTZ组（P<0.05或P<0.01）。结论:经皮三叉神经电刺激预处理在PTZ 急性点燃癫痫大鼠模型中不仅具有抗惊厥作用, 还可以减少海马致痫细胞因子IL-1β及TNF-α的表达,可能为癫痫的防治带来新的策略。       

戊四氮点燃癫痫大鼠学习记忆功能及海马神经元钙调素依赖性蛋白酶Ⅱ表达的变化

目的 观察戊四氮（PTZ）点燃癫痫对大鼠学习记忆功能的影响及海马神经元钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）表达的变化。方法 腹腔内连续注射PTZ制备点燃癫痫大鼠模型,用Morris水迷宫评测大鼠学习和记忆功能,用免疫组织化学技术观察海马神经元α-CaMKⅡ的表达。结果 与对照组大鼠比较,在Morris水迷宫试验中,PTZ组寻找平台的逃避潜伏期显著延长（P<0.05）,游泳距离显著增加（P<0.05）,穿越平台的次数及在平台象限的游泳距离的百分率显著减少（P<0.05）,搜索策略变差,同时伴有海马CA1、CA3区α-CaMKⅡ表达明显减少（P<0.05）。结论 PTZ点燃癫痫大鼠学习和记忆功能受损可能与海马CA1、CA3区α-CaMKⅡ表达减少有关。     

尼莫地平对癫痫太鼠海马P75NTR和P513蛋白表达的影响

目的：探讨尼莫地平（NM）对戊四氮（PTZ）点燃癫痫持续状态（SE）大鼠海马P75NTR和P53蛋白表达的影响,以期为临床应用尼莫地平治疗癫痫提供充分的理论依据。方法：动物分为正常对照组,PTZ组和NM组,模型诱导成功后,观察大鼠行为学改变,并取脑常规HE染色,并用免疫组化方法分别检测各组大鼠海马神经元凋亡相关基因P75NTR和P53的表达。结果：PTZ组大鼠有典型的SE发作,其海马P75NTR和P53表达较对照组明显增加（P〈0．05）,与PTZ组比较,NM组大鼠海马P75NTR和P53表达均减少（P〈0．05）。结论：NM有神经保护作用,其机理可能与抑制癫痫大鼠海马凋亡相关基因的发生有关。     

低浓度神经生长因子对癫痫大鼠空间学习记忆能力的影响及机制研究

目的:探讨低浓度神经生长因子(NGF)对戊四氮(PTZ)点燃癫痫大鼠空间学习记忆能力的影响及其可能机制。方法:将SD雄性大鼠随机分为对照组、癫痫模型组和NGF组。采用PTZ慢性点燃SD大鼠癫痫模型,并对模型组大鼠腹腔注射低浓度NGF,大体观察各组大鼠癫痫行为学;应用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力,应用Western Blotting检测各组大鼠海马转录因子CREB、磷酸化的CREB(p-CREB)和突触后蛋白PSD95的表达变化。结果:模型组和NGF组大鼠出现典型癫痫发作的行为学改变,后者经NGF干预后未出现明显改善。模型组大鼠空间学习记忆能力受损,逃避潜伏期延长,目标象限停留时间较短(P<0.05),p-CREB和PSD95表达水平较对照组和NGF组降低(P<0.05);NGF组大鼠空间学习记忆能力改善,其逃避潜伏期变短,目标象限停留时间明显延长,p-CREB和PSD95表达水平接近对照组。结论:PTZ点燃癫痫大鼠的空间学习记忆能力受损;NGF可以通过提高p-CREB和PSD95的表达水平改善癫痫大鼠的空间学习记忆能力。     

白藜芦醇对戊四氮慢性点燃大鼠行为及脑电图的影响

目的：探讨白藜芦醇（resveratrol,RV）对戊四氮（pentylenetetrazole,PTZ）慢性点燃大鼠行为及脑电图（EEG）的影响。方法：将60只Wistar大鼠随机分为空白对照组（A组）、PTZ致癎组（B组）、RV干预组（C组）,每组20只。B组和C组通过腹腔注射PTZ建立慢性癫癎动物模型,观察大鼠行为、脑电图及海马组织学变化情况。结果：腹腔注射RV可明显抑制大鼠的癎样放电,延长发作潜伏期、缩短发作时间,与PTZ致痂组相比重型发作率降低（P〈0．05）;同时在病理学上还能减轻海马神经元的损伤程度。结论：RV可明显抑制PTZ诱导的大鼠癫癎发作,对致癎海马神经元有一定的保护作用。     

地塞米松对海人酸致（癇）大鼠脑P-糖蛋白表达的影响

目的：探讨地塞米松对海人酸致痫大鼠脑P-糖蛋白（P-gp）表达的影响.方法：将SD大鼠随机分为假手术组（Sham组,n=8）、癫痫组（EP组,n=12）、地塞米松干预癫痫组（DEX组,n=12）.后两组采用海马注射海人酸方法制作癫痫模型,DEX组癫痫造模前30 min给予腹腔注射地塞米松0.4 mg/kg.分别记录各组大鼠达到Ⅲ级和Ⅴ级发作时所需的时间（潜伏期）,初次至第6次≥Ⅳ级发作的间隔时间作为评价癫痫发作严重程度的指标;大鼠术后24 h处死,使用HE染色和免疫组织化学方法,比较各组海马CA3区、齿状回、杏仁核复合体区P-gp表达及脑损伤情况.结果：①Sham 组未见癫痫发作;DEX组与EP组达到Ⅲ级发作的潜伏期分别为（87.92±45.80）min和（67.50±22.91）min,达到Ⅴ级发作的潜伏期分别为（103.33±51.27 ）min和（75.60±22.10）min,差异均无统计学意义（P〉0.05）;与EP组相比,DEX组样发作严重程度降低（P=0.004）;②与EP组相比,DEX组于所观察的脑区损伤均减轻,以海马CA3区和杏仁核复合体区较为显著;③与Sham组比较,EP组各观察脑区P-gp表达均明显升高（P〈0.01）;与EP组相比,DEX组海马CA3区和杏仁核复合体区P-gp表达显著减少（P〈0.05）,而在齿状回表达量差异无统计学意义（P=0.078）.结论：地塞米松可降低海人酸致痫大鼠发作严重程度和脑损伤,抑制P-gp表达上调,其中以海马CA3区和杏仁核区较为显著.     

耐抗癫痫药大鼠模型脑内P-糖蛋白的表达

目的：通过耐丙戊酸钠（VPA）、耐卡马西平（CBZ）大鼠惊厥模型探讨癫痫耐药机制。方法：采用大鼠腹腔注射戊四氮（PTz）21d的点燃方法,建立大鼠惊厥模型。在此基础上分别以CBZ及VPA灌胃14d,建立耐CBZ及耐VPA大鼠惊厥模型。实验分4组：正常对照组、惊厥对照组、耐CBZ组及耐VPA组,每组8只鼠。以惊厥潜伏期和Racine行为学分级作为评定药效指标。采用免疫组化法检测大鼠脑内P-糖蛋白（Pgp）的表达变化;统计分析各组大鼠脑内Pgp表达量,探索癫痫大鼠的耐药机制。结果：①24只大鼠在连续腹腔注射PTZ21d达点燃标准,成功建立惊厥模型;②取16只惊厥大鼠分两组各灌胃CBZ及VPA14d后,两组大鼠惊厥潜伏期（5．84士2．94和6．23土2．57min）较惊厥对照组的惊厥潜伏期（3．32±1．83min）显著延长（P〈0．01）,提示耐CBZ及耐VPA模型制备成功;③惊厥对照组PgP的表达（12．40±10．35）比正常对照组（1．62±0．85）增高,差异有统计学意义（P〈0．01）;耐CBZ组（38．67±17．28）及耐VPA组大鼠的PgP的表达（42．33±15．54）较惊厥对照组（12．40±10．35）增高,差异有显著意义（P〈0．01）;而耐CBZ组与耐VPA组之间PgP的差别则无统计学意义（P〉O．05）。结论：①大鼠腹腔注射PTz21d,建立惊厥模型,再进一步分别灌胃CBZ及VPA14d,成功建立耐CBZ及耐VPA模型;②CBZ和VPA可显著诱导Pgp的表达,而长期惊厥发作对其表达也可能有一定的诱导Pgp表达的作用。     

卡马西平增加癫痫模型大鼠脑内P-糖蛋白的表达

目的探讨癫痫发作与抗癫痫药物卡马西平(CBZ)对多药耐药基因编码的P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法给雌性SD大鼠侧脑室注射海人酸(KA)或PBS,成模后再口服CBZ。成模或给药后3、5、7、14、21和28d灌杀大鼠取脑,用免疫组化和双标免疫染色对脑中P-gp进行半定量及定位分析。尼氏染色观察海马神经元的变化。结果模型大鼠脑电图及行为变化与人类癫痫相似,CBZ对癫痫发作没有作用。癫痫发作后第5天脑P-gp表达水平增加,7d时最高,21d后恢复到正常水平。阳性产物主要位于海马的毛细血管内皮细胞,也见于皮层的毛细血管及神经元。CBZ对正常大鼠P-gp的表达没有影响。CBZ KA组动物海马P-gp的表达与KA组动物相似,但7d时其表达明显增强。结论癫痫发作可诱导P-gp的表达;卡马西平在癫痫发作中也参与了P-gp的高表达。     

宽叶缬草提取物对戊四氮诱导慢性癫癎大鼠行为及脑电的影响

目的:探讨宽叶缬草提取物(VOL)对戊四氮(PTZ)致癫大鼠模型的脑电和行为变化的影响.方法:用PTZ 37.5mg/kg腹腔注射Wistar大鼠28天建立慢性癫癎模型,同时胃管分组给予VOL 500 mg/kg、1 000 mg/kg、1 500 mg/kg,每天三次,观察大鼠行为及脑电变化.结果:PTZ致癫癎大鼠在28天时87%为重度发作,脑电发作潜伏期及癎波密度分别为4.01±1.70 min,145.75±19.84个/min ,应用三种不同剂量的VOL治疗三周后大鼠癫癎发作程度明显减轻,脑电发作潜伏期延长,分别为7.36±2.18 min、9.42±2.05 min、11.19±1.95 min,癎波密度减少与PTZ模型对照组比较,P<0.05;且高剂量组更明显.结论:VOL能有效对抗PTZ的点燃作用,且有剂量依赖性,在第3周时才开始显效.     

丹参对急性痫性痉挛大鼠模型的影响

目的观察丹参对急性痫性痉挛模型大鼠行为学、脑电图和脑内胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）表达的影响,观察丹参的抗痫效果。方法将24只大鼠随机分为戊四氮（PTZ）致痫组、丹参干预组和正常对照组,戊四氮致痫组大鼠腹腔注射戊四氮（75 mg/kg）;丹参干预组先给大鼠腹腔注射丹参注射液（10 ml/kg）,30 min后再腹腔注射戊四氮;正常对照组大鼠腹腔注射等量的生理盐水。大鼠注射戊四氮后,观察其行为学改变,描记脑电图。各组大鼠于戊四氮注射24 h和72 h后处死,取含有海马的脑组织行GFAP免疫组织化学染色,光镜观察、照相,并用图像分析系统对各组大鼠海马结构内GFAP阳性细胞进行计数和平均灰度值测定。结果 （1）行为学改变：丹参干预组大鼠痫性发作等级和发作时间明显小于戊四氮致痫组（P〈0.05）。（2）脑电图显示,两组在发作期无明显的脑电图改变;在发作后恢复期,丹参组与PTZ组相比,脑电图出现棘波的频率低（1次/5s vs 8次/5s）,波幅低。（3）免疫组织化学结果显示：①24 h组：与正常组大鼠相比,PTZ组海马内GFAP表达量增多,以齿状回和CA3区最为明显。GFAP阳性细胞突起增多、增粗、分支增多,细胞着色加深。丹参治疗组GFAP表达较注射PTZ组增多,阳性细胞数量增加,突起数目增多,长度增长,细胞着色更深。②72 h组：PTZ组和丹参组与正常组相比,GFAP的表达无明显差异。结论丹参可以明显降低急性痫性痉挛模型大鼠的发作等级和发作时间,癫痫发生后24 h海马内GFAP表达增多对机体可能有保护作用;丹参可能是通过促进GFAP表达增高来发挥治疗作用。     

Carnosine, a precursor of histidine, ameliorates pentylenetetrazole-induced kindled seizures in rat

Carnosine (beta-alanyl-l-histidine) has been characterized as a putative neurotransmitter. However, so far, understanding of the role of carnosine in the brain is very limited. The objective of this study was to examine the effects of carnosine on the development of pentylenetetrazol (PTZ) kindling seizures and protection against the PTZ kindled seizures in rats. Chemical kindling was elicited by repeated intraperitoneal injection of PTZ (35 mg/kg) once every 48 h until the occurrence of Stage 4-5 seizures, and the seizure activity of kindling was recorded for 30 min. In an acute PTZ challenge study, 60 mg/kg PTZ was used to induce kindled seizure. Injection of carnosine (200, 500 mg/kg, i.p.) significantly decreased seizure stage, and prolonged the latencies for myoclonic jerks, in a dose- and time-dependent manner. In the seizure development process, 500 mg/kg carnosine also significantly delayed the onset of PTZ kindled seizures. In addition, carnosine significantly reversed decreased histamine levels induced by PTZ kindled seizure in the hippocampus. These results indicate that carnosine can protect against PTZ-induced seizures in both the development of kindling and the challenge process in rats. The results suggest that carnosine might be an endogenous anticonvulsant factor in the brain and can be used as a new antiepileptic drug in future.     

醒脑静对戊四氮致癎大鼠行为学及脑电图的影响

目的：探讨中成药醒脑静（XingNaoJing,XNJ）对戊四氮慢性点燃癫癎大鼠行为学及脑电图的影响。方法：将健康雄性SD大鼠50只随机分成5组（每组10只）：正常对照组、单纯模型组、制模并药物干预的醒脑静组、苯巴比妥组及中西药合用（醒脑静＋苯巴比妥）组,观察分析醒脑静对戊四氮点燃癫癎大鼠首次出现发作时间、各阶段发作级别、发作潜伏期及持续时间和脑电图的影响。结果：醒脑静组首次出现癫癎发作时间较模型组延迟（P〈0．01）,发作级别降低（P〈0．05,P（0．01）,发作潜伏期明显延长（P（0．01）,发作持续时间明显缩短（P〈0．01）,癫癎发作波频率和波幅降低。醒脑静组与苯巴比妥组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。中西药合用组各指标与醒脑静单用组或苯巴比妥单用组比较差异均有统计学意义（P（0．05）。结论：醒脑静具有抑制戊四氮诱发癫癎的作用,与抗癫癎西药合用抗癫癎作用更强。     

视频脑电图监测在抗癫痫药物治疗停药中的指导价值

目的：探讨视频脑电图（V—EEG）监测在癫痫患者停药过程中的应用价值。方法：选择我院经停药后3年以上无癫痫发作的患者139例进行24hV—EEG监测观察其脑电图变化与临床症状之间的关系,并随访4-5年。结果：本组139例患者中接受单药治疗97例,两种药物联合治疗20例,3种药物联合治疗22例,治疗中均无临床癫痫发作。V—EEG监测发现有痫样放电39例（28．1％）。在此39例痼样放电患者中,活动性痫样发作史〈6个月8例、7～12个月9例、〉12个月22例。癫痫样放电出现时间：清醒期6例（15．4％）,睡眠期30例（76．9％）,清醒期与睡眠期均有痫样放电3例（7．7％）,睡眠期痢样放电发生率明显高于清醒期,差异有统计学意义（P〈0．05）。所有患者在随后的3～4年随访期中,39例脑电图异常者继续口服抗癫痫药物,停药后9例复发,复发率为23．1％;100例脑电图正常者,49例病人坚持继续服药,停药后2例复发,复发率为4．1％;另51例患者逐渐减停抗癫痫药,停药后8例复发,复发率为10．0％,明显低于脑电图异常者（P〈0．05）。结论：VEEG的监测结果可以用来指导3年无发作癫痫患者是否适合停药,可作为评价药物疗效及选择停药时机的重要依据。     

Naloxone improves impairment of spatial performance induced by pentylenetetrazol kindling in rats

The role of endogenous opioid peptides in impairment of spatial performance due to epileptogenesis was examined. Animals were kindled by repeated injections of pentylenetetrazol (PTZ) (40 mg/kg, i.p.) in the presence or absence of the opioid receptor antagonist naloxone. Naloxone in different doses (1, 5 and 10 mg/kg, i.p.) was applied 30 min before each PTZ injection. Behavioral testing was assessed 24 h and 10 days after the last injection in separate groups of animals using Morris water maze. Our results showed that PTZ-induced kindling produced a significant impairment of spatial learning and memory as compared with controls and this effect was not due to the aftereffect of repeated seizures. Naloxone pretreatment in the course of kindling had no effect on seizures development, however it caused an improvement of spatial learning and memory performance in kindled rats. It is likely that the long-lasting changes in neuronal responsiveness associated with kindling led to a defect in the processing of spatial information. These data suggest that endogenous opioid peptides released in the hippocampus during kindling are at least in part responsible for impairment of spatial performance in kindled animals.     

不同浓度的α-细辛醚对KA癫痫大鼠脑电图的影响

目的：探讨不同浓度的α-细辛醚（α-Asarone）对侧脑室注射红藻氨酸（Kainicacid,KA）癫痫大鼠脑电图（EEG）的影响。方法：将50只雄性SD大鼠随机分为2组,分别为正常对照组（n=10）和癫痫模型组（n=40）。模型组再随机分为4组,每组10只,分别为单纯癫痫模型组（即KA组）,α-细辛醚低浓度（6mg／kg）组,中浓度（12mg／kg）组和高浓度（24mg／kg）组。α-细辛醚组在术前30rain经腹腔注射给药,术后立即应用数字化EEG仪进行连续描记30min。观察各组大鼠EEG痫性丛状放电波发生频率、波幅变化和每一丛状放电波中峰电位数目（numberofspikesineachburst,NSEB）的变化。结果：正常对照组大鼠EEG未描记到痢性丛状放电波,KA组大鼠EEG可观察到明显的痢性丛状波发放,其发放频率、波幅变化和NSEB值均较α-细辛醚中、高浓度组高（P〈O．05）;低浓度旷细辛醚组癫痫大鼠丛状波发放频率与KA组相比差异有显著意义（P〈O．05）,但其波幅和NSEB值变化不明显（P〉0．05）。在各α-细辛醚浓度组间,低浓度组在丛状波发放频率、波幅和NSEB方面与中、高浓度组相比存在差异（P〈o．05）;中、高浓度组间差异不明显（P〉O．05）。结论：α-细辛醚可减少KA癫痫大鼠脑电图的痼样放电。     

尼莫地平对杏仁核点燃鼠模型脑内谷氨酸及海马细胞单位放电的影响

目的：观察尼莫地平对杏仁核电点燃癫癎鼠模型脑内谷氨酸（glutamate,Glu）表达及海马单位细胞放电（unit cell discharge,UCD）的影响。方法：选择健康雄性Wistar大鼠30只制作动物模型,造模成功后随机分为单纯对照组、癫癎模型组和尼莫地平组,各组10只大鼠,均进行海马UCD的记录,然后分别取脑组织,采用免疫组化的方法检测大鼠脑内Glu的表达并进行方差检验分析。结果：①癫癎模型组Glu灰度值在杏仁核、海马、颞叶分别为（92．5582±13．9345）、（94．0579±12．8117）和（100．5922±16．1048）,与对照组的相应值（113,1562±36．7147）、（124．4130±29．6738）和（126．5704±35.8527）比较有明显降低（注：灰度值越高Glu的表达越少;灰度值越低Glu的表达越多）（P〈0．05）;尼莫地平组中,Glu灰度值与模型组的比较无明显差异（P〉0．05）,②海马UCD频率癫癎模型组（164．55±74．708）较单纯对照组（70．925±44．125）明显增快,尼莫地平组（82．175±35．046）与模型组比较,海马UCD频率明显降低。差异有显著意义（P〈0．05）。结论：尼莫地平不能抑制Glu的表达,但可抑制海马UCD频率。     

癫痫大鼠海马谷氨酰胺合成酶的变化

目的观察戊四氮点燃慢性癫痫模型海马星形胶质细胞谷氨酰胺合成酶的变化,探讨谷氨酰胺合成酶在癫痫发生中的作用。方法通过免疫组织化学染色法和酶活性测定法,研究海马内谷氨酰胺合成酶表达细胞差异以及酶活性改变。结果慢性癫痫大鼠海马星形胶质细胞被激活,细胞体积增大,突起粗大,谷氨酰胺合成酶的表达阳性,但较正常组明显减少,而GFAP表达增高;慢性癫痫大鼠海马谷氨酰胺合成酶的活性明显降低。结论谷氨酰胺合成酶缺乏可能是癫痫发生的一个分子基础。