携带Panton-Valentine杀白细胞素基因金黄色葡萄球菌所致感染类型研究

目的 研究携带Panton-Valentine杀白细胞素（Panton-Valentine leukocidin，PVL）基因金黄色葡萄球菌所致感染类型。方法利用多重PCR检测金黄色葡萄球菌临床分离株的PVL基因，应用多位点基因序列分型（multilocus sequence typing，MLST）技术对PVL基因阳性的菌株进行序列分型，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）的SCCmec基因分型采用多重PCR。结果 26株携带PVL基因的金黄色葡萄球菌有13株为ST88，5株为ST239，5株为ST398，ST25、ST30和ST59各1株。20株为医院获得株，主要引起肺部感染和术后伤口化脓性感染；6株为社区感染株，主要引起软组织化脓性感染。7株MSSA全部为ST88，主要引起化脓性感染。而19株MRSA分布在6种ST型中，主要有ST88-SCCmecⅢA、ST239-SCCmecⅢ、ST398．SCCmecⅣ和ST398-SCCmecⅢ。26株菌株分布于14个病区，在产科发生过携带PVL基因的ST88．SCCmecⅢA．MRSA克隆株的播散。结论 本院分离的携带PVL基因的金黄色葡萄球菌的序列型主要为ST88、ST239和ST398，既可造成医院感染也可造成社区感染且可能引起克隆株的播散。     

金黄色葡萄球菌杀白细胞素及基因的研究进展

Pan ton-va len tine杀白细胞素(pan ton-va len tine leuko-c id in,PVL)是由金黄色葡萄球菌产生的细胞外毒素,是主要的致病因子之一,PVL、γ-溶血素和其他杀白细胞素均属于syner-gohym enotrop ic毒素家族。V an de le ld于1894年首先发现,1932年Pan ton and V a len tine将其从溶血素中分离出来,他们首先认为PVL与皮肤、软组织的化脓性感染有关,尽管当时耐甲氧西林金黄色葡萄球还没有受到重视。近年来,美国疾病控制中心报告,由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位,仅次于大肠杆菌,已引起临床上的高度重视,但国内对此菌的致病因子尤其…     

国内杀白细胞素阳性金黄色葡萄球菌感染的研究现状

金黄色葡萄球菌是临床引起感染性疾病最常见的病原菌之一,它的致病性与其携带的多种毒素因子有关。携带毒素因子的金黄色葡萄球菌毒力更强,与感染后疾病的严重程度呈正相关,产毒素菌株所造成的感染重、病程长,加大治疗难度和护理难度,同时增加了患者的痛苦和经济负担。杀白细胞素（PVL）是金黄色葡萄球菌产生的一种重要外毒素,     

杀白细胞素基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性分析

目的 了解杀白细胞素(PVL)基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药情况,指导临床合理用药.方法 对临床收集的47株PVL基因阳性MRSA采用PCR法检测PVL基因,采用纸片扩散法进行药敏试验,并对结果 进行分析.结果 47株MRSA的PVL基因检出率为46.8%,PVL基因阳性、阴性MRSA对β-内酰胺类抗菌剂均100.0%耐药,PVL基因阳性MRSA对氨基糖苷类、利福平、四环素、红霉素、环丙沙星、亚胺硫霉素等抗菌剂全部耐药,对盐酸克林霉素的耐药率为95.5%;PVL基因阴性MRSA对上述抗菌剂的耐药性虽比PVL基因阳性MRSA轻,但耐药率也在88.0%以上,2组间耐药性比较,差异有统计学意义(P＜0.05).对复方新诺明敏感率在90.0%以上,未发现对万古霉素耐药株.结论 PVL基因阳性MRSA在临床检出率已较高,耐药性严重并呈多重耐药特征,增加了临床抗感染治疗的难度.     

杀白细胞素pvl基因阴性MRSA对抗菌药物的耐药性研究

目的研究杀白细胞素（PVL）pvl基因阴性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）对多种抗菌药物的耐药性。方法采用头孢西丁纸片扩散法检测MRSA;用聚合酶链反应（PCR）检测m ecA基因及pvl基因;采用琼脂稀释法测定金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度（M IC）并检测pvl基因阴性MRSA对12种抗菌药物的耐药性。结果 71株金黄色葡萄球菌中检测出33株pvl基因阴性MRSA,检出率为46.4%（33/71）;对青霉素类抗菌药物的耐药率为100.0%;对其他类抗菌药物呈多重耐药并以ECLOTGMP为主要耐药模式,占66.7%（22/33）;未发现对达托霉素、替考拉宁和万古霉素耐药的菌株。结论医院感染中以pvl基因阴性MRSA为主,并呈现多重耐药;pvl基因阴性MRSA主要耐药模式为对红霉素、环丙沙星、克林霉素、苯唑西林、四环素、庆大霉素、复方磺胺甲口恶唑和青霉素耐药,是主要流行株,要谨慎使用以上8种抗菌药物。     

产P-V杀白细胞素金黄色葡萄球菌肺炎诊断与治疗

产Panton-Valentine杀白细胞素(Panton-Valentine Leukocidin,PVL)金黄色葡萄球菌近年来在全球范围广泛流行,并引起严重感染性疾病.PVL与一种以健康年轾人为主要感染人群的高发病率、高病死率坏死性肺炎密切相关,日渐受到广泛关注.本文就PVL的生物学特性、致病性,PVL相关的坏死性肺炎的诊断与治疗等作一综述.     

Nogo-66多克隆抗体的制备和鉴定

目的 制备抗中枢神经系统（CNS）突起再生抑制因子Nogo胞外段Nogo-66的多克隆抗体，以进行Nogo分子检测和功能研究。方法 采用原核系统表达来源于大鼠的GST-Nogo-66融合蛋白，经纯化后免疫新西兰兔制备多克隆抗体，采用免疫印迹、免疫组织化学和细胞培养技术对该抗体的特异性及生物学活性进行鉴定。结果 获得了高效价的1：10000兔抗大鼠Nogo-66多克隆抗体，该抗体能够识别原核表达的Nogo分子，大鼠脊髓切片的免疫组织化学结果显示，Nogo分子在神经元和少突胶质细胞中有广泛表达；并能阻断Nogo分子对PC12细胞突起生长的抑制作用，具有一定的生物学活性。结论 制备了能识别天然Nogo分子，并具有良好生物学活性的抗Nogo-66多克隆抗体，为检测Nogo分子和进一步研究其功能提供了有力的工具。     

白念珠菌CDRl和CDR2多克隆抗体制备及鉴定

目的：制备特异性白念珠菌外排泵（CaCDRl和CaCDR2）的多克隆抗体,为研究CaCDRl和CaCDR2在介导白念珠菌耐药中的作用奠定基础。方法：利用Pfam网络预测程序和Blastn、Blastx程序设计引物．采用PCR法获得白念珠菌SC5314基因组上486bp长度的CDRl和CDR2目的基因,并将其克隆入pET-28a（＋）质粒,构建重组表达质粒后,转化人大肠埃希菌BL21宿主菌内,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导下表达6xHis融合蛋白;经镍柱纯化蛋白后,免疫新西兰兔,制备兔抗多克隆抗体。用ELISA及蛋白印迹法检测该抗体的效价和特异性。结果：ELISA法检测所制备抗体的效价最终定为1：12800,工作浓度定为1：800;蛋白印迹法检测结果显示,抗体能与CaCDRl及CaCDR2蛋白特异性结合。结论：成功获得具有较高效价和良好特异性的CaCDRl、CaCDR2多克隆抗体．可用于白念珠菌CaCDRl、CaCDR2蛋白水平的鉴定。     

无标签NT-proBNP重组蛋白的获得及多克隆抗体的制备

摘要：目的：通过原核表达,获得不带标签的NT-proBNP重组蛋白,并用其免疫新西兰大白兔,制备兔抗NT-proBNP抗体。 方法：从重组菌pET-32a(+)-NT-proBNP提取重组质粒,通过PCR扩增出目的DNA片段,插入pCold TF载体,转化入大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达融合蛋白。经镍柱亲和纯化、HRV 3C蛋白酶酶切、镍柱亲和纯化,制备不带标签的纯蛋白质,并用临床商品化试剂盒验证其抗原性。用该蛋白质免疫新西兰大白兔制备抗体,western blot鉴定其特异性。 结果：成功获得高纯度的不带标签的NT-proBNP蛋白,该蛋白质能被商品化的试剂盒识别。用该蛋白质免疫新西兰大白兔成功制备出高效价高特异的抗体。 结论：成功制备高纯度的无标签NT-proBNP蛋白及其多克隆抗体,为NT-proBNP在临床上的广泛应用奠定了基础。     

金黄色葡萄球菌感染现状分析

目的：了解金黄色葡萄球菌的临床分布情况及其对常用抗菌药物的耐药情况,指导临床合理选用抗菌药物提供依据,并分析MRSA感染的高危因素,预防其爆发流行,为临床防治提供依据。方法：对我院2009年1月-2013年1月期间临床各标本中分离的260株葡萄球菌进行鉴定,头孢西丁纸片扩散法进行MRSA检测,并用K—B法对常用的22种抗茵药物进行药敏鉴定。对MRSA暴露因素进行卡方检验,并对关联因素进行非条件logistic多元回归分析筛选出MRSA感染的高危因素。结果：金黄色葡萄球菌主要来源于痰液、浓汁、血液及其导管。感染部位主要集中于呼吸道、皮肤软组织、手术部位及其泌尿道等。科室主要分布于ICU科、神经外科、普外科、骨科及其烧伤科等。260株金黄色葡萄球菌中有184株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）,其分离率为70．77％,MRSA对多种抗菌药物耐药率〉80．0％,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）76株,除对青霉素、红霉素、克林霉素外的大多数抗菌药物敏感。患者年龄、住院时间、基础疾病、使用抗生素、侵袭性操作、接受手术六个因素与MRSA感染有关联,并且基础疾病、使用抗生素、侵袭性操为其危险因素。结论：金黄色葡萄球菌感染严重,尤其是MRSA,呈现逐年升高趋势,并且其耐药率严重。基础疾病、使用抗生素、侵袭性操为其危险因素。     

医院感染金黄色葡萄球菌的临床分布与药敏结果分析

目的探讨分析金黄色葡萄球菌(SAU)的临床分布特点及药敏情况,为临床合理使用抗菌药物提供科学依据。方法采用VITEK-2细菌鉴定及药敏系统,对2011年1月至2014年4月该院临床科室送检的分泌物、痰液、血液等各类标本中分离出的SAU进行鉴定和药敏试验。其结果采用WHONET5.5和SPSS17.0软件进行数据处理及统计分析。结果共分离出SAU 315株,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)64株,检出率为20.3%。315株SAU的临床标本类型分布中,以分泌物最多,占53.7%,其次为痰液占15.2%。临床科室分布中,以骨科、皮肤科最多,分别占26.0%,其次为肾病科占14.0%。除红霉素、万古霉素、替加环素及利奈唑胺外,MRSA对抗菌药物的耐药率均高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),比较差异有统计学意义(P<0.05)。未发现耐万古霉素、替加环素和利奈唑胺的菌株,其敏感率均为100%。结论 SAU耐药现状严重,应及时了解SAU感染的分布特征,加强其耐药性监测,规范临床用药,有效控制其感染与扩散。     

147株金黄色葡萄球菌耐药现状分析

目的 研究金黄色葡萄球菌(SAU)临床分离株的耐药性,为合理使用抗菌药物提供依据.方法 采用VITEK 2 Compact型全自动微生物分析系统进行菌株鉴定和药敏试验,统计分析147株SAU的标本分布及耐药率.结果 分泌物标本SAU检出率最高;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离率达40.1%(59/147).SAU对多种抗菌药物具有不同程度的耐药性,对呋喃妥因、利奈唑胺、奎努普汀/达福普汀、替加环素、万古霉素敏感率为100.0%.结论 SAU临床分离株耐药现状严重,MRSA的耐药情况更为严重,临床微生物实验室应加强MRSA监测工作.     

168株金黄色葡萄球菌的临床分布与耐药分析

目的 了解该院金黄色葡萄球菌的临床分布特点及耐药情况,指导临床合理用药,减少耐药菌株的产生.方法 对临床送检的合格标本进行细菌培养,采用VITEK-2 Compact全自动微生物分析系统进行鉴定和药物敏感试验.结果 从各类标本中分离出金黄色葡萄球菌168株,其中耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）59株,检出率为35.1%（59/168）,分离的金黄色葡萄球菌标本主要来源于分泌物51.2%（86/168）、痰液22.0%（37/168）、全血5.4%（9/168）、置管液5.4%（9/168）.MRSA分布的科室以神经科（30.5%）、普外泌尿科（22.0%）、骨科（15.2%）、心胸外科（8.5%）、呼吸科（8.5%）多见.对MRSA和非耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MSSA）耐药率为0的抗菌药物有万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁、奎努普汀/达福普汀、呋喃妥因,青霉素、复方磺胺甲噁唑对MRSA的耐药率分别为100%、6.8%,对MSSA的耐药率分别为91.7%、12.8%,其余9种抗菌药物对MRSA的耐药率均高于MSSA.结论 加强耐药菌株的监测,规范临床用药,有利于控制感染.     

MRSA和MSSA氨基糖苷类药物耐药性和耐药基因检测

目的比较耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(M RSA)和甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(M SSA)对氨基糖苷类药物耐药性和耐药基因携带的不同。方法运用K-B法和PCR方法分别对16株M RSA和24株M SSA 4种氨基糖苷药物(丁胺卡那霉素、奈替米星、庆大霉素、妥布霉素)耐药性和氨基糖苷类耐药基因进行检测。结果M RSA与M SSA对氨基糖苷类药物耐药率分别为93.8%,62.5%,100%,100%和0.0%,0.0%,29.2%,33.3%,三种氨基糖苷类药物耐药基因aac(6')/aph(2')、aph(3')III、an t(4',4')携带率分别为68.8%,62.5%,6.3%和29.2%,8.3%,0.0%。结论M RSA较M SSA对氨基糖苷类药物有着更高的耐药性和耐药基因携带率。M RSA较M SSA对氨基糖苷类药物存在着更为复杂的耐药机制。     

Association of methicillin resistance with mortality of hospital-acquired Staphylococcus aureus bacteremia

ObjectiveMethicillin-resistant (MR) Staphylococcus aureus bacteremia (SAB) is associated with higher mortality rates than methicillin-susceptible (MS) SAB. This study assessed potential predictors of mortality and evaluated the association of methicillin resistance with mortality in patients with SAB.MethodsWe conducted a retrospective cohort study in patients with hospital-acquired SAB, from 2009 to 2018. Clinical features of patients with MR-SAB were compared with those of patients with MS-SAB and predictors of 30-day mortality were determined using Cox regression analysis.ResultsAmong 162 patients, 56.8% had MR-SAB. Overall 30-day mortality was 19.1%; MR-SAB had higher mortality (25.0%) than MS-SAB (11.4%). Univariate analysis highlighted long-term hospitalization, prior antibiotics use, and delayed initiation of appropriate antibiotics as risk factors. Cox regression analysis showed that respiratory tract source, Pitt bacteremia score, Charlson comorbidity index, and appropriate antibiotic therapy within 24 hours were independently and significantly associated with 30-day mortality outcome.ConclusionsMethicillin resistance was not an independent risk factor for mortality in patients with SAB. Early, appropriate antibiotic treatment is an important prognostic factor.     

某教学医院近5年金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性分析

目的探讨该院近5年金黄色葡萄球菌(SA)的临床分离情况、科室和标本分布特点及其对抗菌药物的耐药性,为临床合理使用抗菌药物和减少耐药菌株提供依据。方法回顾性分析该院2014-2018年住院及门诊患者送检标本分离到的SA数据,采用WHONET 5.6和SPSS 17.0等软件对SA和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的科室分布、标本来源及耐药性等进行统计分析。结果该院5年内共分离到4453株SA,其中MRSA有1637株(占36.76%)。SA和MRSA检出率最多的科室是烧伤科(占19.96%和39.58%),其次是儿科(占17.25%和9.90%);SA和MRSA标本来源以伤口分泌物为主(占32.27%和43.62%),其次是痰液(占31.46%和23.46%)。SA和MRSA对青霉素G的耐药率均在94.1%以上,MRSA对苯唑西林的耐药率在97.1%以上,对替加环素和呋喃妥因的耐药率低,未检出对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的菌株。结论该院SA和MRSA检出率较高,应定期监测其临床分布和耐药性,强化临床合理使用抗菌药物管理,做好院内感染防控措施。     

74株溶血葡萄球菌重新鉴定的结果分析

目的 调查近年来临床标本中溶血葡萄球菌迅速增多,而金黄色葡萄球菌显著减少的原因。方法 使用生物化学和分子生物学的方法对临床分离的74株溶血葡萄球菌重新进行鉴定。结果 74株溶血葡萄球菌经传代培养后,有6株的血浆凝固酶、甘露糖和甘露醇等试验由阴性转变为阳性iPCR检测后,有15株细菌显示金黄色葡萄球菌种特异性基因（nuc和coa）阳性。结论 临床标本中葡萄球菌菌种构成比的变迁与部分细菌生化反应改变而导致的菌种鉴定错误有关,使用某些作用于细胞壁的抗生索可能是其原因之一。     

医院感染金黄色葡萄球菌的耐药性与临床分布

目的调查该院2009~2013年间金黄色葡萄球菌(SA)的耐药性与临床分布,为临床用药提供指导。方法对SA的耐药性和标本来源进行回顾性调查分析,使用ATB细菌鉴定仪及配套细菌鉴定条进行菌株鉴定,采用K-B法执行药敏试验。结果共分离到562株SA,主要来自分泌物、痰液和脓液,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)218株,占总数的38.79%。SA对青霉素的耐药率最高,其次是红霉素和克林霉素。所有菌株均对万古霉素、阿米卡星、呋喃妥因和利奈唑胺敏感。MRSA对青霉素、红霉素、复方磺胺甲噁唑、克林霉素、庆大霉素、头孢西丁、四环素和利福平的耐药率高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),二者的耐药性差异具有统计学意义(P0.05)。结论该院SA和MRSA分离率有逐年下降的趋势,但耐药状况仍然严重,万古霉素依然是临床治疗的首选药物。因此,加强SA耐药性监测,避免抗菌药物的滥用,是预防SA感染的有效措施。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因型及其与耐药性的关系

目的：了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）基因型及其与耐药性的关系，为MRSA感染的治疗选药及分子流行病学研究提供实验依据。方法：用聚合酶链反应（PCR）方法扩增MRSA mec基因高变区（HVR），据扩增片段大小差异进行基因分型，结合5种抗菌药物的MIC值，分析基因型与耐药性的关系。结果：86株MRSA被分为A、B、C、D4种基因型，以A（52．3％）、D（39．5％）型多见，B、C型少见，但后2型耐药性更高，各型菌均对万古霉素敏感。结论：治疗MRSA感染以选万古霉素，或联合阿米卡星、利福平为宜，HVR基因分型可作为MRSA感染分子流行病学研究的新手段。