辣椒素对乌拉坦诱导的小鼠肺癌的影响

[目的]观察辣椒素对乌拉坦诱导小鼠肺癌模型的影响。[方法]乌拉坦腹腔注射建立小鼠肺癌模型,通过小鼠的肿瘤体积,脏器指数等考察辣椒素对肺癌小鼠的影响。HE染色法观察肺病理变化。[结果]与模型组比较,辣椒素能使瘤体积增大,肺脏器指数升高,血液中TF、LY含量偏高,而WBC含量偏低(P<0.05)。HE染色结果显示,辣椒素组小鼠肺组织出现了明显的炎症浸润现象,细胞核密集;模型组与辣椒素组相比,细胞核密集区相对较少。[结论]辣椒素对乌拉坦诱导所形成的小鼠肺癌具有促进作用。     

新加麻黄附子细辛汤对小鼠Lewis原位肺癌的治疗作用

[目的]观察新加麻黄附子细辛汤对小鼠Lewis原位肺癌是否有治疗作用。[方法]Lewis肺癌细胞滴气管建立小鼠Lewis原位肺癌模型,次日用新加麻黄附子细辛汤(麻黄∶细辛∶附子∶半夏=1∶2∶2∶5)灌胃开始治疗,观察各组小鼠的生存状态、肿瘤数目及致瘤率;HE染色法观察肺病理变化。[结果]用Lewis肺癌细胞滴气管建立的Lewis原位肺癌模型8周后致瘤率为91%,肿瘤数目平均为17±3.05;新加麻黄附子细辛汤在相同时间内致瘤率为69%,肿瘤数目平均为12±1.53。HE染色结果表明:正常组小鼠肺部切片未见癌细胞;模型组小鼠肺组织间聚集有片状核大深染的肿瘤细胞,出现明显癌变,细胞核与细胞质比例失常,细胞核密集,空洞逐渐变小;新加麻黄附子细辛汤组细胞核密集区相对较少。与模型组比较,新加麻黄附子细辛汤组体质量明显上升,摄水食量增加,自主活动增多,精神状态良好。[结论]新加麻黄附子细辛汤能够延长Lewis原位肺癌模型小鼠的生存时间,对小鼠Lewis原位肺癌具有治疗作用。     

脂多糖对乌拉坦诱导小鼠肺癌的促进作用

[目的]观察脂多糖(LPS)对乌拉坦诱导小鼠肺癌是否有促进作用。[方法]乌拉坦(600 mg/kg)腹腔注射建立肺癌小鼠模型,LPS组尾静脉注射,实验期间观察小鼠体质量、饮食、自主活动变化,实验结束时处死小鼠,测定小鼠血清中脂氧素A4含量和血液中白细胞数,解剖观察小鼠肺荷瘤数。[结果]与模型组相比,LPS组小鼠肺癌形成时间缩短,脂氧素A4含量和白细胞数都较高(P<0.05),小鼠肺荷瘤数较多且瘤体较大,小鼠体质量、饮食、自主活动变化差异无统计学意义。[结论]LPS对乌拉坦诱导小鼠肺癌有促进作用,其联合造模是快速建立小鼠肺癌模型的一种好方法。     

新加大黄附子汤对小鼠原位移植肝癌的治疗作用

[目的]观察新加大黄附子汤对小鼠原位移植肝癌是否具有治疗效果。[方法]建立小鼠原位移植肝癌模型,造模小鼠随机分组,次日用新加大黄附子汤灌胃开始治疗,观察小鼠的生存状态,用药40 d后测量小鼠肝脏的质量,计算肿瘤的体积,检测血清CEA肿瘤标志物,HE染色检测小鼠肝脏病理变化。[结果]模型组小鼠原位移植肝癌的致瘤率为95%,小鼠自主活动、体温都偏低,40 d存活率只有45%,肿瘤体积较大;新加大黄附子汤治疗的小鼠致瘤率为75%,小鼠的自主活动、体温都高于模型组,40 d存活率达到70%,肝脏肿瘤体积明显小于模型组(P<0.05);CEA肿瘤标志物检测发现给药组含量明显低于模型组(P<0.05)。[结论]新加大黄附子汤对小鼠原位移植肝癌具有治疗作用。     

下瘀血汤抑制胰腺巨噬细胞浸润改善肝纤维化的机制研究

目的:评价下瘀血汤对四氯化碳(CCl_4)诱导的肝纤维化模型小鼠肝脏和胰腺病变的改善作用,并探讨其相关机制。方法:24只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组和下瘀血汤组,每组8只。模型组和下瘀血汤组小鼠腹腔注射10%CCl_4诱导肝纤维化模型,正常组小鼠给予等体积橄榄油,每周3次,连续6周。造模第4周起,下瘀血汤组小鼠灌胃给予0.467 8 g/kg下瘀血汤药液,正常组和模型组小鼠给予等体积蒸馏水,每日1次,连续3周。药物干预期间,每周称量各组小鼠体质量。末次给药后,腹主动脉采血,分离肝、脾、胰腺组织并称重,计算肝脏指数和脾脏指数;试剂盒检测血清ALT、AST水平,HE染色和天狼星红染色后光镜下观察肝脏和胰腺组织病理形态学变化;免疫荧光检测肝组织α-SMA蛋白表达,免疫组化检测胰腺组织CD68、MCP-1及α-SMA蛋白表达。结果:①与正常组相比,模型组小鼠体质量明显降低(P0.01),肝脏指数、脾脏指数显著增大(P0.01),血清ALT、AST水平显著升高(P0.05,P0.01);与模型组相比,下瘀血汤组小鼠体质量显著升高,肝脏指数、脾脏指数及血清ALT、AST水平显著降低(P0.01)。②病理学观察显示,模型组小鼠肝组织可见明显肝细胞肿胀、小叶中心性出血及灶状坏死,并伴有炎症细胞浸润,纤维组织大量增生,增生的胶原纤维分割肝小叶形成较粗大的间隔;胰腺小叶间隙增大,腺泡肿胀,腺管区有较多炎症细胞浸润。下瘀血汤组小鼠肝组织胶原纤维间隔较窄、排列疏松,肝细胞变性、坏死及肝和胰腺组织炎症细胞浸润明显减轻。③与正常组相比,模型组肝组织α-SMA表达明显增多,胰腺组织CD68、MCP-1及α-SMA阳性表达显著升高(P0.01);下瘀血汤干预3周后,肝组织α-SMA表达明显减少,胰腺组织CD68、MCP-1及α-SMA阳性表达显著降低(P0.01)。结论:肝纤维化可引起胰腺巨噬细胞浸润和星状细胞激活;下瘀血汤可显著减轻肝纤维化过程中胰腺巨噬细胞浸润,抑制胰腺星状细胞活化。     

温阳散纤汤对博来霉素诱导的小鼠肺间质纤维化的保护作用

目的 探讨温阳散纤汤对博来霉素诱导的小鼠肺间质纤维化的保护作用.方法 构建肺间质纤维化C57BL/6小鼠模型,并将造模成功小鼠随机分为模型组,温阳散纤汤低、中、高剂量组,阳性组,另设假手术及正常对照组,每组15只小鼠.HE染色观察肺组织结构变化.结果 正常组、假手术组小鼠肺组织结构正常;模型组小鼠肺间隔增宽,肺泡结构被破坏、肺泡炎症明显,大片炎症细胞浸润;温阳散纤汤低、中、高剂量组小鼠肺间隔厚度有所改善,炎症反应减弱,肺泡结构较为完整;阳性组小鼠结构肺间隔厚度正常,肺泡结构完整度较好,炎性细胞浸润程度低.结论 温阳散纤汤对博来霉素诱导的C57BL/6小鼠肺间质纤维化有一定的改善作用.     

呼吸道合胞病毒诱发的哮喘小鼠模型的建立

[目的]探讨建立呼吸道合胞病毒诱发的哮喘小鼠模型的方法，为研究哮喘发病机理、筛选有效的治疗药物奠定基础。[方法]随机将BALB／C小鼠分成正常对照和模型组两组。用福尔马林灭活的呼吸道合胞病毒（FI-RSV）致敏、激发模型组小鼠，观察激发后小鼠的哮喘症状；分别于激发后0、24、48、72h处死动物，摘眼球取血分离血清，ELISA测定血清IgE、IL-4、IFN-γ水平；取肺组织行HE染色，观察支气管黏膜及黏膜下炎症细胞浸润及EOS的浸润情况。[结果]模型组小鼠激发即刻可见典型的哮喘症状。激发后24h肺组织炎症细胞浸润最多。模型组小鼠血清IgE、IL-4水平均低于正常对照纽；IFN-γ均高于正常对照组；模型组小鼠激发后24h血清IgE、IL-4水平最高，IFN-γ水平最低（P〈0．05或P〈0．01）。结论：FI-RSV复制BALB／C小鼠哮喘模型成功可行，且24h小鼠哮喘模型较理想。     

黄芪甲苷对乌拉坦诱导肺癌小鼠的防治作用及其机制

目的探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对乌拉坦诱导的肺癌小鼠的防治作用及其机制。方法将100只美国癌症研究所小鼠随机分为对照组、模型组、低剂量AS-Ⅳ组、中剂量AS-Ⅳ组和高剂量AS-Ⅳ组,每组20只。模型组、低剂量AS-Ⅳ组、中剂量AS-Ⅳ组和高剂量AS-Ⅳ组小鼠腹腔注射乌拉坦600 mg·kg-1,每周1次,持续10周,建立肺癌模型;对照组小鼠腹腔注射等量生理盐水。造模当天,低剂量AS-Ⅳ组、中剂量AS-Ⅳ组和高剂量AS-Ⅳ组小鼠分别给予AS-Ⅳ12.5、25.0、50.0 mg·kg-1灌胃,对照组和模型组小鼠给予等量蒸馏水灌胃,每日1次,连续19周。记录各组小鼠的体质量、自主活动次数,每2周1次。各组小鼠乙醚麻醉后脱臼处死,取肺组织,计算肺癌发生率和肺肿瘤数;苏木精-伊红染色观察各组小鼠肺组织病理学变化。采用酶联免疫吸附法检测各组小鼠血清中癌胚抗原(CEA)、癌抗原125(CA125)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应法检测各组小鼠肺组织中Wnt-1、β-连环蛋白(β-catenin)、C-myc、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1) mRNA表达水平,Western blot法检测各组小鼠肺组织中Wnt-1、β-catenin、C-myc、Cyclin D1蛋白表达水平。结果造模后第1、3周,5组小鼠体质量和自主活动次数比较差异无统计学意义(P> 0.05)。造模后第5～19周,模型组小鼠体质量显著低于对照组(P <0.05),低剂量AS-Ⅳ组、中剂量AS-Ⅳ组和高剂量AS-Ⅳ组小鼠体质量分别从第5、7、11周开始高于模型组(P <0.05)。造模后第5～19周,模型组小鼠自主活动次数显著少于对照组(P <0.05),中剂量AS-Ⅳ组和高剂量AS-Ⅳ组小鼠自主活动次数从第11周开始多于模型组(P <0.05),低剂量组小鼠自主活动次数从第13周开始高于模型组(P <0.05)。低剂量AS-Ⅳ组、中剂量AS-Ⅳ组和高剂量AS-Ⅳ组小鼠肺癌发生率和肺肿瘤数低于模型组(P <0.05),中剂量AS-Ⅳ组、高剂量AS-Ⅳ组小鼠肺癌发生率和肺肿瘤数低于低剂量AS-Ⅳ组(P <0.05),高剂量AS-Ⅳ组小鼠肺癌发生率和肺肿瘤数低于中剂量AS-Ⅳ组(P <0.05)。对照组小鼠肺组织形态正常,无增生和炎症细胞浸润;模型组小鼠肺组织被大量肿瘤细胞浸润,出现明显瘤区,失去原有肺组织形态;低剂量AS-Ⅳ组、中剂量AS-Ⅳ组和高剂量AS-Ⅳ组小鼠肺组织结构基本清晰,较少出现细胞核密集增生和炎症细胞浸润。模型组、低剂量AS-Ⅳ组、中剂量AS-Ⅳ组和高剂量AS-Ⅳ组小鼠血清中CEA和CA125水平高于对照组(P <0.05),低剂量AS-Ⅳ组、中剂量AS-Ⅳ组和高剂量AS-Ⅳ组小鼠血清中CEA和CA125水平低于模型组(P <0.05),中剂量AS-Ⅳ组、高剂量AS-Ⅳ组小鼠血清中CEA和CA125水平低于低剂量AS-Ⅳ组(P <0.05),高剂量AS-Ⅳ组小鼠血清中CEA和CA125水平低于中剂量AS-Ⅳ组(P <0.05)。模型组、低剂量AS-Ⅳ组、中剂量AS-Ⅳ组和高剂量AS-Ⅳ组小鼠肺组织中Wnt-1、β-catenin、C-myc和Cyclin D1 mRNA相对表达量高于对照组(P <0.05),低剂量AS-Ⅳ组、中剂量AS-Ⅳ组和高剂量AS-Ⅳ组小鼠肺组织中Wnt-1、β-catenin、C-myc和Cyclin D1 mRNA相对表达量低于模型组(P <0.05),中剂量AS-Ⅳ组、高剂量AS-Ⅳ组小鼠肺组织中Wnt-1、β-catenin、C-myc和Cyclin D1 mRNA相对表达量低于低剂量AS-Ⅳ组(P <0.05),高剂量AS-Ⅳ组小鼠肺组织中Wnt-1、β-catenin、C-myc和Cyclin D1 mRNA相对表达量低于中剂量AS-Ⅳ组(P <0.05)。模型组、低剂量AS-Ⅳ组、中剂量AS-Ⅳ组小鼠肺组织中Wnt-1、β-catenin、C-myc和Cyclin D1蛋白相对表达量高于对照组(P <0.05),低剂量AS-Ⅳ组、中剂量AS-Ⅳ组和高剂量AS-Ⅳ组小鼠肺组织中Wnt-1、β-catenin、C-myc和Cyclin D1蛋白相对表达量低于模型组(P <0.05),中剂量AS-Ⅳ组、高剂量AS-Ⅳ组小鼠肺组织中Wnt-1、β-catenin、C-myc和Cyclin D1蛋白相对表达量低于低剂量AS-Ⅳ组(P <0.05),高剂量AS-Ⅳ组小鼠肺组织中Wnt-1、β-catenin、C-myc和Cyclin D1蛋白相对表达量低于中剂量AS-Ⅳ组(P <0.05),高剂量AS-Ⅳ组小鼠肺组织中C-myc蛋白相对表达量高于对照组(P <0.05),高剂量AS-Ⅳ组与对照组小鼠肺组织中Wnt-1、β-catenin和Cyclin D1蛋白表达量比较差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 AS-Ⅳ可显著抑制乌拉坦诱导的小鼠肺癌发生,其作用机制可能与减少Wnt-1、β-catenin、C-myc、Cyclin D1蛋白表达及抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关。     

颗粒蛋白前体在博来霉素致肺纤维化小鼠中的表达

目的：探讨颗粒蛋白前体（PGRN）在博来霉素致肺纤维化小鼠肺组织中的表达。方法：选取C57BL/6小鼠36只,随机分为3组,博来霉素模型组向气管内灌注博来霉素（5 mg/kg）后第14、28天分批处死小鼠,生理盐水对照组注入等量的生理盐水。肺组织采用HE染色和Masson染色观察小鼠肺组织炎症和纤维化情况,以免疫组化法检测PGRN在肺组织中的分布和表达,蛋白印迹法检测PGRN在小鼠肺组织中的蛋白表达水平。结果：光镜下观察发现,生理盐水对照组小鼠肺组织结构完整,少量炎症细胞浸润;博来霉素组小鼠肺组织结构破坏,炎症细胞浸润,呈弥漫性肺纤维化改变。免疫组化检测可见博来霉素组小鼠PGRN在肺泡巨噬细胞和肺泡上皮细胞中的阳性率明显高于生理盐水对照组,肺组织中PGRN蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。结论：PGRN可能参与了博来霉素致小鼠肺纤维化的过程。     

芪仙汤对支气管哮喘小鼠肺组织FIZZ1 mRNA及蛋白表达的影响

目的:观察芪仙汤对哮喘小鼠肺组织中FIZZ1基因及蛋白表达水平的影响,探讨芪仙汤治疗哮喘的作用机制。方法:选用30只健康雌性BALB/c小鼠,采用随机数字表分为正常对照组(对照组)、支气管哮喘模型组(模型组)、芪仙汤治疗组(治疗组)。除对照组外均采用卵白蛋白(OVA)建立支气管哮喘小鼠模型。各组分别相应干预灌胃2周。从小鼠的一般情况、肺组织病理形态学(HE染色病理切片)指标评价支气管哮喘小鼠模型;采用RT-PCR检测肺组织FIZZ1基因mRNA表达水平,Western blot和免疫组化法检测肺组织FIZZ1蛋白表达水平。结果:HE染色结果显示,模型组小鼠肺组织较正常组嗜酸性粒细胞等炎症细胞浸润明显,气道壁及支气管平滑肌增厚明显;治疗组哮喘病理改变明显改善。RT-PCR、Western blotting、免疫组化结果均显示模型组FIZZ1表达水平显著高于对照组,治疗组小鼠肺组织中FIZZ1表达水平明显低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:芪仙汤可能是通过下调小鼠肺组织FIZZ1表达起到治疗支气管哮喘的作用。