肝炎冲剂抗鸭乙肝病毒作用的实验研究

目的:研究肝炎冲剂对鸭乙型肝炎的抗病毒作用.方法:选1日龄北京雏鸭,人工感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)后随机分为5组:肝炎冲剂低、中、高3个剂量组,生理盐水灌胃空白对照组和无环鸟苷(ACV)治疗组.每组6只,各组雏鸭均灌胃14 d.观察不同剂量肝炎冲剂抗DHBV的作用效果.结果:肝炎冲剂不同剂量组对DHBV均有一定的抑制作用,且其抗DHBV作用较为持久,停药后无反跳.结论:肝炎冲剂有抗鸭乙型肝炎病毒作用.     

股蓝参冲剂增强人体高原适应能力血流动力学及流变学研究

股蓝参冲剂是以绞股蓝为主药研制而成的复方制剂.在海拔3658m对驾车进藏的汽车兵服用股蓝参冲剂后的心血管功能进行了无创伤性测定,结果服药组(n=30)较空白组(n=40)的心血管功能具有明显改善,每搏输出量、左心泵力、血管顺度、血容量等增加,心率、外周阻力、肺动脉阻力和血液粘度降低(P<0.05).结果表明股蓝参冲剂具有增强人体高原适应能力的作用.     

股兰参冲剂抗缺氧和抗疲劳的实验研究

股蓝参冲剂是以葫芦科植物绞股蓝为主,配合丹参等药制成的复方制剂,经药理实验表明:(1)股蓝参冲剂3个剂量组及连续灌胃3天以上小鼠耐缺氧时间均显著延长,与对照组比较相差非常显著(P<0.01);(2)小鼠连续给药7天,爬杆和游泳时间与对照组比较相差非常显著(P<0.01),表明股蓝参冲剂能显著增加小鼠抗疲劳能力;(3)股蓝参冲剂给药7天,对脑垂体后叶素诱发的急性心肌缺血动物,中、高剂量组一期缺血阳性率依次是40％和20％,与对照组比较相差非常显著(P<0.01),高剂量组阻断二期缺血的发生,具有明显抗心肌缺血作用。     

股蓝参冲剂对维持急进高原人体循环系统稳态作用的研究

本文在海拔3658米用 XXG—EⅡ型心血管功能诊断仪对70名沿青藏线进藏的汽车兵进行无创性测定。通过对进藏前后各参数的分析比较,结果表明,进入高原的空白对照组(n=40)的每搏输出量、脉率、外周阻力、肺动脉阻力、血管顺度和血容量等参数发生明显变化(P<0.05);而进入高原的服药组(n=30)的各项心血管功能参数与进藏服药前比较无显著性变化(P>0.05).本文认为股蓝参冲剂有维持循环系统稳态的作用,是预防急性高原反应和高原肺水肿,提高人体高原适应能力和体力的有效药物之一。     

芹灵冲剂的急性和长期毒性实验研究

目的：观察芹灵冲剂对动物的急性、长期毒性及中毒靶器官,为临床安全用药提供依据。方法：急性毒性实验用小鼠以口服和腹腔给药,分别测定ＬＤ５０ 和ＭＤＴ,并推算出相当临床人用量的倍数。长期毒性实验用大白鼠,设３０ｇ·ｋｇ－１ 、１０ｇ·ｋｇ－１ 两个剂量组和生理盐水对照组,连续灌服９０ｄ,观察动物的饮食、体重。于实验第４５ｄ、９０ｄ 和停药后２８ｄ,分别各处死１／３动物,取血测定血常规及其生化指标,并取出主要脏器作组织病理学检查。结果：芹灵冲剂的口服ＬＤ５０ 未能测出,ＭＴＤ为１００ｇ·ｋｇ－１ ,相当于人临床用量的２００ 倍。注射剂腹腔注射ＬＤ５０ 为１９．７３ｇ·ｋｇ－１ 。芹灵冲剂慢性毒性实验,大鼠连续灌服９０ｄ,小剂量１０ｇ·ｋｇ－１ 和大剂量３０ｇ·ｋｇ－１ 组动物饮食、体重正常,血液及生化指标均未见异常,主要脏器组织学观察未见病理改变。结论：芹灵冲剂口服用药,连续服用较安全     

高效液相色谱法测定退烧冲剂中黄芩苷的含量

目的：测定退烧冲剂中黄芩苷的含量。方法：采用ＨＰＬＣ法,Ｃ１８ 柱,流动相醋酸缓冲液（ｐＨ４．５）－ 甲醇（１∶１）,检测波长２５４ｎｍ 。结果：黄芩苷在０．５～１０ｍｇ·Ｌ－１ 浓度范围内线性关系良好,ｒ ＝ ０．９９９８,平均回收率９８．６％ , ＲＳＤ 为１．５９％ 。结论：所建立的含量测定方法简便、准确,可作为该产品的质量控制方法。     

乙型肝炎病毒序列准种个体化特征的研究

以乙型肝炎病毒（HBV）多聚酶（P）逆转录酶（RT）区及表面抗原（HBsAg)主蛋白、e抗原（HBeAg)氨基酸序列异质性来探讨HBV准种群在感染个体中的变异特点。应用多聚酶链反应（PCR）方法自8例慢性HBV患者血清中扩增靶基因，克隆入T载体，随机挑选27株克隆测序，将获得基因的推断氨基酸序列进行比较后发现：病毒结构／非结构蛋白氨基酸序列存在广泛的变异现象，替换突变表现出一定的个体特异性，其结果是导致HBV在特定的患者体内可能存在特征性的变异。本研究提示HBV在患者体内的蛋白序列多样性是乙型肝炎慢性化的一个重要原因。     

乙型肝炎病毒逆转录酶区基因序列准种与变异研究

以乙型肝炎病毒（HBV）多聚酶（P）和逆转录酶（RT）区及表面抗原主蛋白（HBsAg)序列异质性来探讨HBV准种群状态。用多聚酶链反应（PCR）方法,自3例慢性HBV患者血清中扩增靶基因,克隆入T载体。随机挑选13株克隆测序,发现2株克隆出现大段缺失,另11株序列之间总差异率为5．1％;RT和HBsAg氨基酸序列差异率分别为4．9％和7．5％;并发现缺失突变、终止突变等多种突变类型。结果提示,HBV慢性患者体内有HBV准种群,并存在缺陷型HBV病毒。     

治疗型HBV DNA疫苗在小鼠组织中的分布和长期毒性研究

为研究治疗型HBV DNA疫苗使用的安全性，观察质粒在小鼠组织中的分布和其长期毒性，采取给小鼠肌注—电转染治疗型HBV DNA疫苗10μg和50μg后，用PCR法检测外源基因在小鼠组织的分布和存留时间；另用小鼠肌注—电转染治疗型HBV DNA疫苗30、60和120μg，每周2次，连续4周，共8次，于末次给药后48h，各组活杀1／2，留下1／2继续观察4周，进行血液学、血生化、病理组织学及抗核抗体检查。结果单次肌注—电转染疫苗后，质粒DNA主要分布于注射部位肌肉组织，可存留8周，其他组织也有散在低水平分布，但持续时间较短；未发现动物有异常表现，血液学、血生化和病理组织学检查未见异常；未观察到抗核抗体的产生和自身免疫病理损害。上述结果表明，治疗型HBV DNA疫苗安全性良好。     

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3与乙型肝炎病毒 X蛋白协同反式激活作用的研究

构建丙型肝炎病毒（HCV）非结构蛋白3（NS3）的重组表达质粒pcDNA3.1(－）-NS3和表达乙型肝炎病毒（HBV）X蛋白的重组质粒pcDNA3.1(－）-X，分别瞬时转染肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞，用免疫印记（Western blotting)方法鉴定病毒基因的表达。两个表达质粒分别及同时与报告质粒pCAT 3-promoter共转染HepG2细胞，检测报告基因氯霉素乙酰转移酶（CAT）的表达水平，酶的活性反映了表达的肝炎病毒蛋白对SV40病毒早期启动子功能的影响。结果显示，两个重组表达载体pcDNA3.1(－）-NS3及pcDNA3.1（－）-X在HepG2细胞均以瞬时表达相应的肝炎病毒蛋白；单独共转染实验中pcDNA3.1(－）-NS3.1(－）-X组的CAT的表达分别是对照的3．6倍和4．4倍，两种质粒共同转染时酶的表达是对照的8．5倍；表达质粒对CAT酶表达的激活作用呈剂量依赖性。研究表明，HepG2细胞中表达的HCV NS3蛋白和HBV X蛋白均具有反式激活SV40早期启动子的功能，并且两种蛋白的反式激活功能具有协同特性。本实验有助于解释HCV、HBV感染，尤其是共同感染的致病（癌）机制。     

乙型肝炎病毒基因组准种与变异特点的研究

探讨乙型肝炎病毒（HBV）基因组异质性及其生物学意义。以已知HBV基因序列为依据，设计特异性多聚酶链反应（PCR）引物，自2例慢性HBV感染患者外周血血清中扩增HBV基因组序列，克隆入pGEM Teasy质粒，随机挑选克隆进行DNA测序并加以比较。测序结果发现，来源不同的5株HBV全基因组核苷酸序列的一致率为93．6％，不同克隆的4个开放读码框架长度有明显区别，氨基酸序列中存有移框、缺失、替换等多种变异类型。说明来源于同一患者的HBV基因组序列之间存在有较明显的变异现象，在患者体内构成了准种群。     

重叠甲型肝炎病毒感染对慢性乙型肝炎影响的对比研究

应用ELISA法对126例CHB患者检测血清抗－HAV－IgM，同时应用肝穿刺活检、荧光定量PCR及免疫组化技术对重叠与未重叠HAV感染者进行了临床与病理学对比。具有可比性的重叠与未重叠感染者8例、16例1年后做第2次肝穿活检；HBeAg阴性重叠感染者9例做HAV感染急性期、 恢复期血清HBeAg定性、HBV－DNA含量对比。结果发现重叠HAV感染者22例。重叠感染者较未重叠感染者ALT、TBIL增高、PTA降低，但A／G、γ－EP无显著差别；血清HBeAg、肝组织HBcAg阳性率及血清、肝组织HBV－DNA含量低；肝组织炎症活动度重，但纤维化程度无明显差别。重叠与未重叠感染者1年前肝脏病变无显著差别，1年后仍无显著差别。HAV感染恢复期血清HBeAg阳性率、HBV－DNA含量高于急性期。提示重叠HAV感染加重CHB肝脏炎症活动度， 但并不加重纤维化程度及加速进展；抑制HBV复制，但并不持久。     

慢性乙型肝炎肝组织Fas抗原表达及与HBV抗原的关系

用免疫组织化学技术检测了５２例慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）肝组织内的Ｆａｓ抗原、ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ。结果表明，４８例Ｆａｓ抗原阳性表达（９２．３％），主要在肝细胞浆内，其表达程度与肝组织活动性炎症分度密切相关，提示Ｆａｓ抗原介导的细胞凋亡在肝细胞损伤中起一定作用；肝细胞Ｆａｓ抗原的表达程度与ＨＢｓＡｇ相关而与ＨＢｃＡｇ不相关。