Faecalibacterium prausnitzii 对人外周血单核细胞IL-10、IL-12分泌以及CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞分化的影响

背景：Faecalibacterium prausnitzi（FP）是人体肠道中常见的共生厌氧菌,与炎症性肠病的关系密切。目的：研究FP对人外周血单核细胞（PBMCs）白细胞介素（IL）-10、IL-12分泌以及CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞分化的影响。方法：将FP、长双歧杆菌、大肠杆菌、不同浓度的FP上清或不同细菌培养基分别与人PBMCs体外共培养后,采用ELISA法检测细胞培养上清液中IL-10和IL-12浓度;流式细胞术检测CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞比例。结果：与培养基相比,FP、长双歧杆菌均可刺激PBMCs分泌大量IL-10和IL-12,IL—10／IL-12比值明显增高,CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞分化明显增加,且FP的效果优于长双歧杆菌。FP上清对IL-10／IL-12比值的作用呈浓度依赖性,稀释10倍的FP上清组IL-10／IL-12比值升高最为明显,且CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞分化能力亦最为显著。结论：FP及其上清均具有抗炎作用和促进外周血CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞分化的能力,提示FP是一种潜在的益生菌。     

白细胞介素-23在炎症性肠病的表达升高并诱导促炎细胞因子分泌

目的 通过分析白细胞介素(IL)-23p19及其受体(IL-23R)在炎症性肠病(IBD)患者中的表达,研究IL-23对IBD患者外周血T细胞激活和效应应答的影响,探讨其在疾病发生过程中的免疫病理作用.方法 收集12例克罗恩病(CD)患者、25例溃疡性结肠炎(UC)患者和20名健康者外周血和肠黏膜组织活检标本,使用免疫组化染色和逆转录(RT)-PCR分析IL-23p19表达,分离外周血单个核细胞(PBMC)和肠黏膜固有层内单个核细胞(LPMC),利用流式细胞仪检测IL-23R在CD4+、CD8+T细胞和自然杀伤(NK)细胞表面表达.体外培养PBMC,使用IL-23和抗CD3单抗体外刺激,使用酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ和白细胞介素(IL)-2分泌.结果 IBD患者炎症肠黏膜组织内IL-23p19蛋白和mRNA表达水平比健康对照者显著升高(P<0.05).IL-23R在IBD患者外周血和肠黏膜固有层组织内CD4+、CD8+T细胞和NK细胞表达水平也比健康者显著升高(P<0.05).体外培养PBMC,使用IL-23刺激,发现IL-23可显著诱导IBD患者,尤其是CD患者PBMC激活,分泌高水平TNF-α、IFN-γ和IL-2(P<0.05).结论 IL-23及其受体在IBD患者炎症肠黏膜组织中表达升高,IL-23可诱导IBD患者淋巴细胞分泌高水平的炎性介质,提示IL-23参与了肠黏膜炎症损伤,阻断IL-23生物学效应可能治疗IBD.     

Faecalibacteriumprausnitzii对实验性结肠炎大鼠Foxp3＋Treg细胞的影响

Fxop3＋Treg细胞是-种免疫调节细胞,在免疫调节和维持机体免疫平衡中起重要作用。目的：研究Faecalibacterium口删nitzii（FP）对实验性结肠炎大鼠外周血和脾脏中CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg细胞的影响,从而初步探讨FP治疗溃疡性结肠炎（UC）的作用机制。方法：采用2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）灌肠制备实验性结肠炎大鼠模型．将大鼠随机分为正常对照组、结肠炎组、FP组、FP上清液组、培养基组和双歧杆菌组。观察大鼠结肠大体形态损伤、组织学变化．以流式细胞术测定外周血和脾脏中CD4＋CD25＋Foxp3＋rreg细胞比例,以ELISA法检测血浆IL-10、IL-12和TGF．B含量。结果：与正常对照组相比,结肠炎组结肠大体形态损伤明显,病理学评分显著增高（P〈O．01）;外周血和脾脏中CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg细胞比例显著降低（P〈O．05）;血浆IL．10和TGF．B含量显著降低（P〈0．05）,IL-12含量显著升高（P〈O．01）,IL-IO／IL-12比值显著降低（P〈0．01）。经FP、FP上清液和双歧杆菌治疗后,除血浆IL-10含量无明显差异外．其余指标均显著改善（P〈0．05）。结论：FP及其上清液对TNBS诱导的实验性结肠炎大鼠有显著的治疗作用．其机制可能为提高外周血和脾脏中CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg细胞比例。     

Alterations in the relative abundance of Faecalibacterium prausnitzii correlate with changes in fecal calprotectin in patients with ileal Crohn’s disease: a longitudinal study

Objectives: Crohn’s disease is characterized by a gut dysbiosis with decreased abundance of butyrate producers such as Faecalibacterium prausnitzii. Although F. prausnitzii secretes anti-inflammatory molecules, few studies have addressed the importance of F. prausnitzii in a longitudinal setting. We aimed to examine the relationship between temporal profiles of F. prausnitzii, the C. leptum group, overall butyrate production, and inflammatory activity.

Material and methods: Fecal samples (n?=?59) were collected every third month from nine patients with ileal Crohn’s disease. The abundance of F. prausnitzii and C. leptum was quantified relative to the total amount of bacteria using quantitative-PCR. To assess butyrate production of gut microbiota, gene copy numbers of the butyryl-CoA:acetate-CoA transferase (BCoAT) gene were quantified by qPCR. The inflammatory activity was defined by fecal (f)-calprotectin.

Results: No correlation between the relative abundance of F. prausnitzii, the C. leptum group, or copy numbers of the BCoAT gene, and f-calprotectin was observed in the total sample set. By analyzing alterations between consecutive samples, a negative correlation between changes in the relative abundance of F. prausnitzii and f-calprotectin was observed (R?=??0.39; p?=?.009). Changes in C. leptum (R?=??0.18, p?=?.23) and number of copies of the BCoAT gene (R?=??0.12; p?=?.42) did not correlate with f-calprotectin.

Conclusions: There was an inverse correlation between temporal changes in the relative abundance of F. prausnitzii, but not overall butyrate producing capacity, and changes in inflammatory activity in ileal Crohn’s disease. These findings indicate that F. prausnitzii may play a role in gut homeostasis, even though causality is still to be demonstrated.     

丁酸盐与炎症性肠病的研究进展

炎症性肠病(IBD)发病率逐年升高,成为消化系统常见疾病之一。目前认为肠道菌群紊乱以及细菌代谢产物改变等因素参与IBD致病过程。近年,细菌代谢产物丁酸盐因在IBD发病过程中发挥保护肠道黏膜屏障、抗炎症反应、预防IBD相关肿瘤发生等作用而备受关注。本文就丁酸盐与IBD的研究最新进展作一综述。     

Treg/Th17细胞分化失衡与炎症性肠病

炎症性肠病（IBD）的病因和发病机制尚未完全明确,初始CD4~＋T细胞分化异常在其发生、发展过程中起重要作用。初始CD4~＋T细胞可分化为调节性T细胞（Treg细胞）和Th17细胞,Treg/Th17细胞间的失衡将导致包括IBD在内的多种自身免疫病的发生。初始CD4~＋T细胞周围的细胞因子和芳香烃受体对维持该平衡起重要作用。本文就Treg细胞和Th17细胞及其与IBD的关系作一综述。     

细胞因子相关制剂在克罗恩病中的研究进展

细胞因子在克罗恩病（CD）的发病机制中起重要作用,对其合理处理能降低疾病的严重度和维持缓解。随着新的特异性细胞因子的发现以及对其在肠道黏膜免疫中作用和CD发病机制认识的加深,一些细胞因子在CD中的作用已被阐明。应用细胞因子制剂治疗CD可能提高治疗的特异性并降低毒性作用。     

普拉梭菌对实验性大鼠结肠炎防治的初步研究

目的 观察普拉梭菌(Faecalibacterium prausnitzii Fp)对2,4,6三硝基苯磺酸诱导的大鼠结肠炎的治疗效果,并初步探讨其作用机制.方法 60只Sprague-Dawley大鼠均分为健康对照组、结肠炎模型对照组、Fp预防治疗组、Fp上清液预防治疗组、Fp治疗组和Fp上清液治疗组.评估各组大鼠的疾病活动指数(DAI)、结肠组织学损伤、粪便短链脂肪酸丁酸的含量,检测外周血、脾内叉头状螺旋转录调节因子3(Foxp3)调节性T细胞(Treg)及血清促炎因子IL-17、IL-6的水平.所有数据采用单因素方差分析进行统计学处理.结果 与结肠炎模型对照组比较,Fp预防治疗组、Fp上清液预防治疗组、Fp治疗组和Fp上清液治疗组的DAI评分显著降低,结肠组织学表现明显改善,且Fp预防治疗组优于Fp治疗组,Fp上清液预防治疗组优于Fp上清液治疗组.丁酸浓度在Fp预防治疗组为(3091.08士485.50)×10-6 mol/L,Fp上清液预防治疗组为(1714.64±351.25)× 10-6 mol/L,Fp治疗组为(2064.75±295.04)×10-6 mol/L,Fp上清液治疗组为(1089.13±321.23)×106 mol/L,Fp预防治疗组与其他各组比较差异有统计学意义(F=49.796,P＜0.01).Fp上清液预防治疗组外周血Foxp3+Treg水平最高;Fp预防治疗组、Fp上清液预防治疗组脾细胞Foxp3+Treg水平明显高于其他各组.Fp预防治疗组、Fp上清液预防治疗组、Fp治疗组和Fp上清液治疗组大鼠血清IL-17、IL-6浓度较结肠炎模型对照组均明显降低.结论 Fp对炎症性肠病模型大鼠的肠道炎性反应修复有一定的促进作用.其机制可能与分泌丁酸盐,上调外周血和脾内的Foxp3+Treg水平,抑制促炎因子IL-17、IL-6分泌,重建Treg/Th17平衡来减轻局部肠道的炎性反应.     

淋巴细胞功能相关抗原-1调节Treg细胞对炎症性肠病的影响

背景:Treg细胞在炎症性肠病(IBD)中主要发挥免疫保护作用,淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)参与了Treg细胞的分化和功能发挥。目的:探讨LFA-1调节Treg细胞对IBD的影响,明确LFA-1在IBD发生中的作用。方法:将LFA-1基因缺失小鼠和相同遗传背景野生型小鼠各20只分别随机分为对照组和炎症组,炎症组以饮用4.5%DSS溶液诱导结肠炎模型。观察各组小鼠一般情况和结肠组织学表现,流式细胞术检测外周血CD4+、Treg细胞比例,real time PCR检测结肠组织Foxp3 mRNA表达,ELISA法检测血清IL-17A、TGF-β1、IL-10水平。结果:LFA-1缺失炎症组实验过程中有2只小鼠死于消化道出血,体质量下降较野生型炎症组显著。LFA-1基因缺失小鼠外周血CD4+、Treg细胞比例低于野生型小鼠,其中LFA-1缺失炎症组伴TGF-β1、IL-10分泌减少;LFA-1缺失炎症组与野生型炎症组间外周血Treg细胞比例无明显差异。野生型和LFA-1缺失炎症组血清IL-17A、TGF-β1、IL-10水平和结肠组织Foxp3 mRNA表达均高于相应对照组。结论:LFA-1参与了IBD时Treg细胞的分化和迁移。LFA-1基因缺失小鼠对DSS结肠炎的耐受性差于野生型小鼠,可能与其Treg细胞分化和相关细胞因子分泌受到影响有关。