PUMA在吉西他滨诱导胰腺癌细胞凋亡过程中的作用

目的 研究吉西他滨体外对人胰腺癌AsPC-1细胞生长的作用机制.方法 用脂质体转染法将p53正向凋亡调控因子(PUMA)反义核酸(反义PUMA cNA)的真核表达载体pcDNA3.1-PUMAAS和空载体pcDNA3.1-导入AsPC-1细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆.将转染载体的AsPC-1阳性克隆细胞和未转染载体的AsPC-1细胞分别暴露于浓度1、5、10和15 μmol/ml的吉西他滨中作用72 h.RT-PCR和Western blotting检测不同组细胞经吉西他滨作用72 h后的PUMA表达;MTT检测细胞生长抑制,流式细胞仪(FCM)、Hoechst 33258荧光染色法和TUNEL法检测细胞凋亡.结果 吉西他滨促进AsPC-1细胞凋亡,抑制细胞生长,并有明显的剂量依赖性,在细胞凋亡的同时伴有PUMA表达的上调;当细胞转染PUMA反义核酸抑制PUMA表达后,受吉西他滨作用的细胞出现PUMA蛋白表达明显降低,同时伴有细胞凋亡的抑制及细胞的明显增殖.结论 吉西他滨促进体外AsPC-1细胞凋亡,并抑制其生长,其诱导凋亡与上调PUMA有关.     

浅蓝菌素联合吉西他滨对人胰腺癌细胞BxPC3增殖与凋亡的影响

目的 观察浅蓝菌素联合吉西他滨对胰腺癌细胞BxPC3生长抑制的协同作用,探讨其机制.方法 以10μg/ml浅蓝菌素、20μmol/L吉西他滨、10 μg/ml浅蓝菌素+20μg/L吉西他滨分别处理对数生长期的人胰腺癌BxPC3细胞48 h,以不经药物处理的细胞作为对照.应用CCK-8法检测各组细胞增殖,AnnexinV/PI双染法检测细胞早期凋亡率,RT-PCR法检测Bcl-2、Bax mRNA表达,蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bax蛋白表达.结果 对照组、浅蓝菌素组、吉西他滨组、联合处理组48 h的生长抑制率分别为0、(51.28±1.84)％、(53.59±1.62)％、(84.57 ±1.01)％;细胞早期凋亡率为(0.83±0.31)％、(31.37±1.04)％、(38.33±0.75)％、(69.43±0.83)％;BxPC3细胞Bcl-2 mRNA表达量分别为0.67±0.01、0.44±0.01、0.36±0.08、0.27 ±0.07;Bax mRNA表达量为0.14±0.01、0.31±0.02、0.32±0.03、0.91±0.06;Bcl-2 mRNA/Bax mRNA比值为4.78±0.13、1.39±0.04、1.15±0.02、0.30±0.02;Bcl-2蛋白表达量分别为1.24±0.04、0.51±0.02、0.42±0.02、0.13±0.01;Bax蛋白表达量为0.20±0.05、0.47±0.01、0.54±0.01、1.21±0.03;Bcl-2/Bax比值为6.00±0.11、1.11±0.01、0.77±0.03、0.10±0.06.各处理组与对照组,联合处理组与单药处理组的差异均有统计学意义(P值均＜0.01).结论 浅蓝菌素与吉西他滨对人胰腺癌BxPC3细胞的生长抑制具有协同作用,其机制可能通过上调Bax基因表达,下调Bcl-2基因表达,降低Bcl-2/Bax比值而促进细胞凋亡所致.     

吉西他滨联合卡培他滨与吉西他滨单药治疗晚期胰腺癌的疗效

近年来,吉西他滨(gemcitabine,GEM)已成为晚期胰腺癌的标准治疗方案,但结果仍不尽如人意.因此,寻找新的治疗方案成为研究热点.2006年7月至2009年7月,我科将收治的48例晚期胰腺癌患者分别采用吉西他滨加卡培他滨(CAP)(GEMCAP方案)和吉西他滨单药治疗(GEM方案),观察其临床疗效.     

吉西他滨联合希罗达治疗胰腺癌临床观察

采用吉西他滨(GEM)联合希罗达治疗晚期胰腺癌患者30例,希罗达1 250 mg/m2口服,第1～14天,休息7 d后重复治疗;GEM 1 000 mg/m2静滴, 第1、8天;至少接受2个周期化疗后进行临床评价.结果近期客观有效率26.67% ,疼痛缓解率、生活状态改善率均为53.33% ,体质量改善率40.00%.主要不良反应为骨髓抑制、外周神经毒性及胃肠道反应.认为GEM联合希罗达治疗晚期胰腺癌近期疗效较高,毒性较低,能显著提高患者的生存质量.     

吉西他滨联合卡培他滨一线治疗晚期胰腺癌的Meta分析

目的:通过Meta分析,探讨吉西他滨(GEM)与卡培他滨(CAP)联合化疗方案(GEMCAP)一线治疗晚期胰腺癌的地位和价值.方法:通过MEDLINE、EMBASE、ASCO、ECCO等数据库及论文集检索国内外已发表和未发表的相关文献.选择治疗组为GEMCAP方案化疗,对照组为GEM单药化疗的晚期胰腺癌随机对照试验(randomized controlled trial,RCT).由2位评价者分别按上述检索策略收集资料,按纳入标准筛选文献,主要对总生存率、其次是客观缓解率和毒副反应进行Meta分析.结果:从316篇文献中筛选出符合纳入标准的3个RCT,涉及932例患者.GEMCAP联合化疗与GEM单药化疗相比,联合化疗组半年生存率提高7%(RD=0.07,95%CI 0.01-0.13,P= 0.03),客观缓解率提高6%(RD=0.06,95% CI 0.02-0.10,P=0.004);3/4度毒手足综合征增加2%(RD=0.02,95%CI 0.00-0.04,P=0.02),其他毒副反应两组差别无统计学意义.结论:GEMCAP方案治疗晚期胰腺癌,可以改善患者的半年生存率,没有明显增加毒副反应.现有的证据支持GEMCAP方案用于晚期胰腺癌的一线治疗,值得进一步的临床试验.     

吉西他滨对人胰腺癌细胞系BXPC-3的放射增敏作用及其机制探讨

目的探讨吉西他滨对人胰腺癌细胞系BXPC-3的细胞毒性作用和放射增敏作用及其相关机制。方法用不同浓度吉西他滨处理BXPC-3细胞（加药组）、0.04μg/ml吉西他滨作用24 h后用不同剂量X线照射（药物＋照射组）,另设单纯照射组。采用MTT法测定吉西他滨对BXPC-3细胞生长的药物敏感性,采用MTT法检测吉西他滨10%细胞抑制浓度（IC10）,以IC10作为研究放射增敏效应的浓度进行放射增敏试验;集落形成法观察吉西他滨的放射增敏作用;流式细胞术分析细胞周期及凋亡变化;免疫细胞化学染色观察Bcl-2,Bax蛋白表达变化。结果随吉西他滨浓度增加,细胞毒性更显著,吉西他滨对人胰腺癌细胞系BXPC-3的IC10为0.04μg/ml。单纯照射组平均致死剂量、外推数均高于药物＋照射组。流式细胞仪检测结果提示,与空白组比较,加药组细胞S期比例增高,细胞Bax表达增加,Bcl-2表达下降。结论吉西他滨对人胰腺癌细胞系BXPC-3有明显的细胞毒性作用和一定的放射增敏作用,其机制可能与吉西他滨引起S期阻滞和调节凋亡相关基因的表达有关。     

吉西他滨对人胰腺癌SW1990和BxPC3细胞株Notch信号通路的诱导作用

目的 观察吉西他滨对人胰腺癌细胞(SW1990和BxPC3)Notch信号通路活性的影响,探讨其与胰腺癌对吉西他滨化疗耐药的关系.方法 不同浓度吉西他滨处理人胰腺癌SW1990和BxPC3细胞株48 h,实时定量PCR检测Notch信号通路受体Notch1、2、3、4,配体Jagged1、2和下游靶基因Hes1 mRNA的表达,Western blotting测定细胞Hes1蛋白表达.结果 2μmol/L吉西他滨作用胰腺癌细胞株48 h,SW1990细胞的Notch1、2、3、Jagged1、2和Hes1 mRNA表达量分别为8.26±0.48、39.12±4.87、0.84±0.06、105.8±17.92、6.59±0.32和17.30±2.96,均较未处理细胞的1.02±0.15、15.25±1.28、0.12±0.02、32.66±1.98、1.88±0.29和5.02±0.64明显升高(P<0.05或P<0.01);BxPC3细胞上述各项表达量分别为7.87±0.59、109.4±10.98、0.74±0.19、62.73±13.50、2.09±0.16和15.38±1.06,也均较未处理细胞的1.14±0.43、58.96±2.63、0.10±0.02、16.95±3.79、0.98±0.02和2.04±0.16,明显升高(P<0.05或P<0.01).1、2 μmol/L吉西他滨作用胰腺癌细胞株48 h,SW1990细胞Hes1蛋白表达量分别为0.30±0.03、0.42±0.03;BxPC3细胞分别为0.33±0.02、0.45±0.03,均较未处理细胞显著增高(0.13±0.01、F=33.71;0.09±0.02、F=38.54,P值均<0.01).结论 吉西他滨可明显激活SW1990和BxPC3细胞的Notch信号通路,这可能是胰腺癌细胞获得化疗耐受性的机制之一.     

吉西他滨对Beclinl基因沉默的人胰腺癌MiaPaCa-2细胞的周期及凋亡的影响

目的 探讨吉西他滨对Beclinl基因沉默的人胰腺癌MiaPaCa-2细胞周期及凋亡的影响.方法 构建靶向Beclinl的siRNA,插入表达质粒,转染MiaPaCa-2细胞.采用RT-PCR法和蛋白质印迹法检测细胞Beclinl mRNA及蛋白的表达,应用吉西他滨处理Beclinl基因沉默的MiaPaCa-2细胞,应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡状况.结果 成功获得Beclin1基因沉默的MiaPaCa-2细胞,转染后细胞的Beclin1 mRNA表达量从对照组的1.0下降到0.295;S、G2期细胞数减少,而G1期细胞增多;细胞凋亡未受影响.应用吉西他滨处理后,Beclin1基因沉默的MiaPaCa-2细胞的S期细胞数进一步减少,而G1、G2期细胞增多,细胞凋亡被抑制.结论 Beclinl表达沉默使人胰腺癌细胞系MiaPaCa-2细胞周期发生改变,并影响吉西他滨对细胞周期及凋亡的作用.     

高强度聚焦超声联合吉西他滨治疗不可切除胰腺癌的临床疗效

目的探讨高强度聚焦超声（HIFU）联合吉西他滨治疗不可切除胰腺癌的疗效和安全性。方法将48例在我院确诊为不可切除胰腺癌患者随机分为HIFU联合吉西他滨组和单纯吉西他滨化疗组。观察治疗后临床受益率、近期有效率、生存率和不良反应。结果联合治疗组和单纯吉西他滨治疗组相比临床受益率（CBR）（83．3％VS30．0％,P〈0．05）、中位生存期（MST）（10．4个月VS6．4个月,P〈0．05）、6和12个月生存率（73．8％,35．2％VS52．3％,17．3％,P〈0．05）差异均具有统计学意义。而疾病控制率（DCR）（82．1％VS60．O％,P〉0．05）和不良反应率两组差异无统计学意义。结论HIFU是一种安全,无创,疗效确切地治疗胰腺癌的方法。HIFU联合吉西他滨化疗治疗不可切除胰腺癌不良反应无明显增加,且能有效地提高CBR和DCR,延长生存期。     

吉西他滨白蛋白纳米粒的制备及其对胰腺癌细胞的毒性研究

目的 制备具有药物缓释作用的吉西他滨白蛋白纳米粒,探讨其体外对胰腺癌细胞的毒性作用,为提高胰腺癌介入化疗的疗效提供新型制剂药物.方法 以吉西他滨和白蛋白为原料,通过去溶剂一交联方法 制备吉西他滨白蛋白纳米粒,采用高效液相色谱技术测定吉西他滨药物浓度,MTT法检测吉西他滨纳米粒对胰腺癌细胞株PANC1的细胞毒性.结果 吉西他滨纳米粒的粒径为(156.2±2.2)nm,Zeta电位为(-20.4±1.41)mV,载药量为10.8%,药物释药时间为3 h;0.01～50μg/ml的吉西他滨白蛋白纳米粒对PANC1细胞抑制率为31%～44%,与同浓度吉西他滨对PANC1细胞抑制率26%～47%几乎等同.结论 吉西他滨白蛋白纳米粒制剂具有明显的药物缓释作用,将有助于胰腺癌介入化疗疗效的改进.     

沙利度胺对人胰腺癌细胞细胞动力学和VEGF表达的影响

背景：研究显示沙利度胺及其类似物具有免疫调节、抗血管生成、抗炎等多方面的作用,其对多发性骨髓瘤和一些实体瘤的抗肿瘤作用与其免疫调节活性以及抗血管生成、抗增殖和促凋亡特性有关。目的：观察沙利度胺对人胰腺癌细胞细胞动力学和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,探讨其用于胰腺癌临床辅助治疗的可能性。方法：以沙利度胺干预人胰腺癌细胞株Patu-898848h,MTT实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,RT—PCR检测VEGFmRNA表达。结果：经不同浓度沙利度胺干预的Patu-8988细胞,生长抑制率、G0／G1期细胞比例和细胞凋亡率均显著高于溶剂对照组（P〈0．05）,VEGF异构体VEGF121、VEGF165mRNA表达显著低于溶剂对照组（P〈0．05）。结论：沙利度胺能从多方面对胰腺癌生长产生抑制作用,包括直接抑制癌细胞增殖、诱导细胞周期G0／G1期阻滞和早期凋亡,以及通过抑制VEGF转录而抑制肿瘤血管发生。     

曲古霉素A对人胃癌细胞的抑制作用及其机制探讨

背景：组蛋白去乙酰基酶抑制剂（HDACi）是一类新型抗肿瘤药物。曲古霉素A（TSA）是目前研究最为广泛的HDACi之一,已发现其对多种肿瘤细胞具有明显抑制作用,但关于TSA对胃癌作用的研究尚少。目的：观察TSA对人胃癌细胞增殖、凋亡、细胞周期以及相关基因表达的影响,探讨其抑制人胃癌细胞的可能作用机制。方法：以不同浓度TSA（0—1μmol／L）处理人胃癌细胞株AGS和HGC-27。CCK-8实验检测细胞增殖抑制情况,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,realtimeRT-PCR和蛋白质印迹法检测细胞凋亡、细胞周期相关基因mRNA和蛋白水平的表达。结果：TSA能剂量依赖性地抑制AGS、HGC-27细胞增殖（P=0．000）,对两者的半数致死浓度分别约为0．25μmol／L和0．5μmol／L。TSA能诱导AGS、HGC-27细胞发生G0／G1期和G2／M期阻滞,以G0／G11期阻滞更为明显。TSA对AGS细胞的诱导凋亡作用强于HGC-27细胞（P〈0．05）。TSA尚能上调p21、p53、BaxmRNA和蛋白表达,下调Bel-2、CDK2、cyelinD1mRNA和蛋白表达,作用均呈时间依赖性（P〈0．05）。结论：TSA抑制人胃癌细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用可能是通过调节细胞凋亡、细胞周期相关分子、激活多种肿瘤相关信号通路实现的。     

薏苡仁提取液对人胰腺癌细胞凋亡和超微结构的影响

背景:薏苡仁提取液目前已广泛应用于临床抗肿瘤治疗,但至今尚未见其单独应用于胰腺癌的报道.目的:观察薏苡仁提取液对人胰腺癌细胞凋亡和超微结构的影响,以探索胰腺癌治疗的新途径.方法:以不同浓度薏苡仁提取液处理人胰腺癌细胞系PaTu-8988后,分别通过光镜观察、Hoechst 33258荧光染色、末端脱氧核苷酸转移酶原位标记(TUNEL法)和流式细胞术检测细胞凋亡,应用透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果:经10μl/ml和20μl/ml薏苡仁提取液作用72 h后,PaTu-8988细胞的增殖能力明显下降,其作用呈剂量依赖性;光镜观察显示凋亡细胞变圆、体积缩小,Hoechst 33258荧光强染,TUNEL标记阳性.20μl/ml薏苡仁提取液作用24、48和72 h后,流式细胞仪DNA直方图上出现亚二倍体凋亡峰,细胞凋亡率呈时间依赖性,分别为7.1%±.6%、113%±0.3%和15.1%±2.9%,显著高于对照组的2.4%±1.1%(P<0.01).透射电镜观察显示,凋亡早期主要是线粒体结构的改变,后期则出现典型的凋亡征象,如核固缩、染色质凝集靠近核膜和凋亡小体形成.结论:薏苡仁提取液可诱导人胰腺癌细胞凋亡,其作用呈剂量和时间依赖性,线粒体可能在早期细胞凋亡中起重要作用.     

吲哚美辛与埃罗替尼对胰腺癌细胞生长的协同抑制作用

背景：目前胰腺癌药物化疗疗效不佳。既往研究提示环氧合酶（COX）-2和表皮生长因子受体（EGFR）信号途径均参与了胰腺癌的发生、发展，COX-2抑制剂和EGFR抑制剂联用对胰腺癌的生长可能具有协同抑制作用。目的：观察COX-2抑制剂吲哚美辛与EGFR酪氨酸激酶抑制剂埃罗替尼对胰腺癌细胞生长的协同抑制作用。方法：以甲基噻唑基四唑（MTT）比色法检测胰腺癌细胞株BxPC-3的增殖情况，以流式细胞分析和原位末端标记（TUNEL）法观察用药前后细胞凋亡和细胞周期的变化，以逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）观察用药前后细胞中COX-2、EGFR以及凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Bcl-xL、Bak mRNA表达的变化。结果：BxPC-3细胞中可观察到COX-2和EGFRmRNA表达．吲哚美辛和埃罗替尼单用均可下调COX-2和EGFRmRNA的表达，两者联用时下调作用更明显。吲哚美辛和埃罗替尼单用均可抑制BxPC-3细胞增殖，促进细胞凋亡，诱导细胞周期阻滞于G0／G1期，减少抗凋亡基因Bcl-2、Bcl-xL的表达，轻微上调促凋亡基因Bax的表达，两者联用对细胞生长的抑制作用增强。结论：吲哚美辛和埃罗替尼均可抑制COX-2和EGFR的表达，下调Bcl-2／Bax比值，两者联用对胰腺癌细胞生长具有协同抑制作用。     

真核翻译延长因子1A2对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长和血管形成作用的研究

人类真核翻译延伸因子1A2（EEF1A2）是一种管家基因，可能作为一种新的潜在癌基因。参与肿瘤的发生、发展。目的：探讨EEFIA2对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长和血管形成的作用。方法：以聚合酶链反应（PCR）扩增目的基因片段，应用基因重组技术构建Ad5／F35。EEF1A2重组腺病毒载体。15只裸鼠建立人胰腺癌移植瘤模型．随机分为对照组、绿色荧光蛋白（GFP）组和EEF1A2组，分别注射PBS0．1ml、Ad5／F35-GFP0．1ml（1×10^8PFU）和Ad5／F35-EEF1A20．1ml（1×10^8 PFU）。测定各组肿瘤体积和质量，应用免疫组化方法检测各组增殖细胞核抗原（PCNA）和CD31的表达。结果：成功构建了表达EEF1A2的重组腺病毒载体。与对照组和GFP组相比，EEF1A2组裸鼠肿瘤体积和质量显著增加（P〈O．05），PCNA和CD31表达显著增高（P〈O．05）。结论：EEF1A2可显著促进人胰腺癌裸鼠移植瘤生长，细胞增殖和肿瘤血管形成可能是其重要作用机制。     

调控Pokemon-p14ARF-p53通路对人结肠癌细胞增殖和凋亡的影响

背景:研究发现转录抑制因子Pokemon是一种关键性致癌因子,在多种人类恶性肿瘤中表达异常上调,在体内、外实验中均能促进细胞的肿瘤性转化。Pokemon对抑癌基因ARF具有特异性转录抑制作用。目的:应用RNA干扰技术抑制人结肠癌细胞株HT-29的Pokemon表达,观察其表达抑制对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响并探讨其可能的分子机制。方法:根据Pokemon cDNA序列设计干扰序列,构建重组干扰质粒,经脂质体介导转染入HT-29细胞。以real time RT-PCR和蛋白质印迹法检测Pokemon、p14ARF、p53表达,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果:Pokemon siRNA能有效抑制HT-29细胞中的Pokemon mRNA和蛋白表达,mRNA相对表达量为0.29±0.04,同时p14ARF、p53 mRNA和蛋白表达明显上调,mRNA相对表达量分别为3.03±0.49和2.80±0.25。与转染无效序列siRNA的HT-29细胞相比,Pokemon表达抑制的HT-29细胞G0/G1期细胞比例增加(43.6%±2.3%对34.7%±1.9%,P<0.05),细胞凋亡增多(10.7%±1.9%对2.7%±0.4%,P<0.05)。结论:人结肠癌细胞中的Pokemon表达与p14ARF、p53表达之间存在负相关关系,抑制Pokemon可通过上调p14ARF-p53信号通路阻滞肿瘤细胞的细胞周期进程,并诱导细胞凋亡。调控Pokemon-p14ARF-p53信号通路有望作为结肠癌的治疗靶点。     

Smad4基因沉默对胰腺上皮内瘤变细胞基因表达谱影响的初步研究

抑癌基因Smad4失活可使由Kras基因突变启动的胰腺上皮内瘤变（PanIN）细胞发生恶性转化,但其具体机制尚未阐明。目的：探讨Smad4基因沉默的PanIN细胞（PanIN—S细胞）基因表达谱的变化,分析Smad4基因沉默致PanIN细胞增殖和恶性转化的可能分子机制。方法：通过RNA干扰沉默PanIN细胞的内源性Smad4基因表达以构建PanIN—S细胞．小鼠全基因表达谱芯片筛查PanIN细胞与PanIN-S细胞的基因表达谱差异．实时荧光定量RT—PCR验证基因芯片筛选出的细胞周期相关差异表达基因。结果：基因芯片共筛选出237个差异表达基因,其中148个基因在PanIN—S细胞中表达上调,89个表达下调。差异表达基因主要涉及细胞周期、增殖、凋亡、黏附、转录活性等。实时荧光定量RT．PER验证示细胞周期相关基因p27、p19、细胞周期蛋白（cyclin）D1表达在PanIN细胞与PanIN—S细胞间存在显著差异,与基因芯片筛选结果一致。结论：PanIN-S细胞p27、p19和cyclinD1基因表达发生明显改变．可能参与了PanIN—S细胞的增殖和恶性转化。     

二甲双胍对人胃癌细胞株MKN45增殖和迁徙的影响

背景:近年发现二甲双胍具有潜在抑制肿瘤的作用,但其在消化系肿瘤尤其是胃癌中的研究较少。目的:研究二甲双胍对人胃癌细胞株MKN45增殖和迁徙的影响,并初步探讨其可能机制。方法:体外培养人胃癌细胞株MKN45.予10mmol/L二甲双胍进行干预(联合或不联合5-氟尿嘧啶),以MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡、线粒体膜电位,细胞划痕实验检测迁徙速率,RT-PCR检测AMPKα1、cyclin D1、Bcl-2、Bax、MMP-2、MMP-9mRNA表达。结果:与对照组相比,二甲双胍作用后,MKN45细胞存活率显著降低,并呈浓度-时间依赖性,细胞凋亡率显著增加,线粒体膜电位显著下降,平均迁徙速率显著降低,cyclin D1、MMP-2、MMP-9mRNA表达均显著减少,Bcl-2、BaxmRNA表达显著增加但两者之比降低,AMPKα1 mRNA表达无明显差异。二甲双胍与5-氟尿嘧啶联用对MKN45细胞的存活率无明显协同作用。结论:二甲双胍能抑制人胃癌细胞株MKN45增殖、迁徙,可通过改变线粒体膜通透性促进细胞凋亡。     

15-PGDH抑制剂对人胃癌细胞生长和COX-2表达的影响

背景：15-羟基前列腺素脱氧酶（15-PGDH）是前列腺素生物降解的关键酶,对环氧合酶-2（COX-2）具有生理性拮抗作用,其表达减少和活性降低与多种恶性肿瘤的发生、发展有关。目的：观察15-PGDH选择性抑制剂Cayl0397对人胃癌细胞生长、凋亡和COX-2表达的影响,探讨15．PGDH与COX-2在胃癌中的可能关系以及15-PGDH的抗肿瘤机制。方法：以不同浓度Cay10397干预人胃癌细胞株MKN-28,MTr实验和流式细胞分析检测细胞生长和凋亡情况;RT—PCR和蛋白质印迹法检测凋亡相关基因survivin、bax、bcl—xLmRNA表达以及15-PGDH、COX-2mRNA和蛋白表达。结果：Cayl0397在浓度大于2．5μmol／L、作用时间超过48h的条件下能促进MKN-28细胞增殖（P〈0．05）,但其对MKN-28细胞凋亡无明显影响。经5—20μmol／LCayl0397作用72h的MKN-28细胞,survivin、bcl-xLmRNA表达显著升高（P〈0．05）,baxmRNA以及15-PGDHmRNA和蛋白表达显著降低（P〈0．05）,COX-2mRNA和蛋白表达无明显变化。结论：抑制15-PGDH表达可促进人胃癌细胞增殖,但对COX-2表达无明显影响。15-PGDH可能通过下调抗凋亡基因survivin、bcl-xL表达、上调促凋亡基因bax表达而诱导人胃癌细胞凋亡。     

量子点-RGD探针对人胰腺癌细胞株SW1990靶向标记的研究

胰腺癌是一种发病隐匿、进展迅猛且预后极差的恶性肿瘤,5年生存率极低。目前靶向治疗已成为肿瘤研究的热点,量子点-RGD作为荧光探针已用于胰腺癌的靶向标记研究。目的：研究量子点-RGD荧光探针对人胰腺癌细胞株SW1990的靶向标记情况以及生物相容性。方法：常规培养胰腺癌SW1990细胞,量子点-RGD探针行靶向标记。以荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察10nmol／L量子点-RGD探针对胰腺癌SW1990细胞的标记情况,MTT法检测不同浓度（0、10、15、20、40、70nmol／L）量子点-RGD探针分别培养12h、24h和48h后对胰腺癌SW1990细胞活力的影响。结果：在紫外光激发下,荧光显微镜和激光共聚焦显微镜示10nmol／L量子点一RGD探针能有效对胰腺癌SW1990细胞进行靶向标记。与空白对照组相比,量子点-RGD探针浓度低于20nmoL／L时对胰腺癌SW1990细胞活力无影响。结论：量子点．RGD探针能有效对胰腺癌SW1990细胞进行靶向标记,且具有优良的光学特性和生物相容性,有助于胰腺癌治疗的靶向研究。