TNF-α介导的11-β羟类固醇脱氢酶1表达和活性变化对3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性的影响

目的：观察肿瘤坏死因子α（TNF-α）介导的11-β羟类固醇脱氢酶1（11-β HSD-1）表达和活性变化对3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性的影响。方法:以TNF-α以及TNF-α分别与阿司匹林、2’-hydroxyflavanone和RU486联合作用3T3-L1脂肪细胞，然后检测细胞11-β HSD-1 mRNA表达和活性以及胰岛素刺激的葡萄糖摄取能力。 结果:TNF-α增加3T3-L1脂肪细胞11-β HSD-1 mRNA表达和活性，同时降低细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取。阿司匹林减轻了TNF-α对11-β HSD-1 mRNA表达和活性的上调作用，并减轻TNF-α对胰岛素刺激的葡萄糖摄取的抑制作用；11-β HSD-1活性特异抑制剂2’-hydroxyflavanone和皮质醇受体拮抗剂RU486也可减轻TNF-α对胰岛素刺激的葡萄糖摄取的抑制作用。结论:TNF-α可通过提高3T3-L1脂肪细胞11-β HSD-1的表达和活性而降低细胞对胰岛素的敏感性。     

妊娠过程中的胰岛素抵抗

胰岛素抵抗（insulin resistance IR）是指胰岛素分泌量在正常水平,刺激靶细胞摄取和利用葡萄糖的生理效应显著减弱,或是靶细胞摄取和利用葡萄糖的生理效应正常进行时,需要超常量的胰岛素：即胰岛素敏感细胞对胰岛素介导的葡萄糖摄取及处置的抵抗.妊娠是一种特殊而复杂的生理过程,为适应胎儿生长发育的需要,母体各系统都发生了相应变化,器官负荷加大,代谢显著增加.     

18^FDG PET显像在霍奇金淋巴瘤分期中的价值

恶性淋巴瘤为一组异质性疾病．因其不同病理组织学类型、肿瘤生物学行为使临床表现有很大差异．但大多有全身播散的趋势、淋巴瘤的正确分期决定治疗方案的选择．传统的显像技术如CT、超声等通过检测病变大小、形态及密度的改变而作出诊断．葡萄糖代谢率的增加是恶性肿瘤细胞最显著的生物化学改变特征之一．     

地塞米松通过下调PC12大鼠嗜铬细胞瘤细胞葡萄糖的摄取诱导细胞凋亡

目的观察地塞米松(DEX)诱导PC12大鼠嗜铬瘤细胞凋亡及对葡萄糖摄取的影响。方法体外培养的PC12细胞随机分为正常对照组、10μmol/L DEX组、100μmol/L DEX组。MTT法测细胞存活率,DAPI荧光染色、线粒体膜通透性转换孔(mPTP)、capase-3、caspase-9活性测定细胞凋亡。葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测葡萄糖的摄取率,Western blot法检测葡萄糖转运子3(GLUT-3)的表达。结果与正常对照组比较,DEX作用PC12细胞48 h,DEX组细胞活力下降、引起细胞凋亡;DEX组葡萄糖的摄取下降,GLUT-3蛋白水平下降(P0.05)。结论 DEX可以诱导PC12细胞凋亡,其机制可能与DEX引起细胞GLUT-3蛋白表达水平下降引起葡萄糖摄取下降有关。     

在体心肌缺血与胰岛素对犬心肌细胞GLUT移位和葡萄糖摄取的相加作用

目的：观察在体犬心肌缺血时输入胰岛素能否对GLUT1和GLUT4移位和葡萄糖摄取有相加作用。方法：用自动分析仪测定生理代谢参数,用多普勒测定心肌收缩功能,用免疫法检测GLUT。结果：生理条件下胰岛素使心肌细胞膜GLUT4增加2倍,GLUT1增加1.5倍,同时心肌葡萄糖摄取增加3倍。急性心肌缺血时输入胰岛素,使缺血区冠状动-静脉葡萄糖浓度相差近4倍,缺血区细胞膜GLUT1和GLUT4明显增加。结论：胰岛素引起GLUT1和GLUT4移位,使心肌葡萄糖摄取增加。心肌缺血+胰岛素对心肌GLUT1和GLUT4移位和葡萄糖摄取有相加作用。提示在心肌缺血时,应用胰岛素有助于增加心肌葡萄糖的摄取和利用。     

恶性组织细胞增生症的细胞来源

用免疫组化、分子生物学方法分析经临床和病理形态学诊断的恶性组织细胞增生症（恶组）的细胞来源、发现大部分病例的肿瘤细胞表达组织细胞特征，少数病例的肿瘤细胞表达Ｂ细胞或Ｔ细胞特征。恶组的确诊需结合免疫组化和分子生物学方法     

胰岛素促进犬在体心肌细胞葡萄糖转运子4基因表达

目的 探索胰岛素促进心肌细胞葡萄糖摄取增强的机制。方法 采用Northern法分析心肌LGUT4mRNA和免疫法分析心肌GLUT4多肽。结果 胰岛素刺激心肌GLUT4mRNA和GLUT4多肽表达增加1-1.2倍,同时伴随心肌葡萄糖摄取增多。结论 胰岛素能刺激GLUT4mRNA和GLUT4多肽表达,使GLUT4数增加,进而促进心采购员葡萄糖摄取增多,胰岛素刺激心肌细胞GLUT4表达,可能是心肌增加葡萄糖摄取的重要分子学机制之一。     

恶性肿瘤细胞对小鼠2-细胞胚胎体外发育的影响

目的： 探讨生命早期形式与恶性肿瘤细胞在相同微环境下的早期胚胎发育情况和肿瘤细胞的生物学行为。方法： 建立小鼠2-细胞胚胎-恶性肿瘤细胞(HepG2,SKOV3,HNE1,Hepa1-6,B16,CHO)体外共培养模型，观察小鼠胚胎的发育状况和恶性肿瘤细胞的生物学行为。结果： 处于不同种属源性和胚层来源恶性肿瘤微环境的小鼠胚胎4-细胞形成率，桑葚胚形成率和囊胚形成率及其形成的囊胚细胞数目与对照组比较无显著差异（P>0.05）。小鼠的2-细胞胚胎能在人源性和鼠源性不同胚层来源的恶性肿瘤细胞体外培养环境中按一定的时间顺序发生卵裂、卵裂球紧密化、分化、囊胚腔形成，而肿瘤细胞的形态、增殖及核分裂相与对照组比较没有明显差异。结论： 在共培养环境中，恶性肿瘤细胞对小鼠2-细胞胚胎的发育时程没有阻滞和破坏作用，且与恶性肿瘤细胞的种属和胚层来源无关。小鼠早期胚胎能在不同种属和胚层的恶性肿瘤环境中按正常体外培养发育时程发育，这可能与早期胚胎发育的自我组织、高适应性和肿瘤细胞分泌的某些因子有关。     

甲鱼油对胰岛素抵抗细胞模型胰岛素敏感性和葡萄糖代谢的影响

采用高浓度胰岛素诱导建立胰岛素抵抗(IR)HepG2细胞模型,评价甲鱼油对IR细胞模型胰岛素敏感性和葡萄糖代谢的影响.利用甲鱼油处理IR细胞模型,通过葡萄糖氧化酶及3H-D-葡萄糖参入实验分别检测其葡萄糖消耗和3H-D-葡萄糖参入率.结果表明,HepG2细胞模型的葡萄糖参入率在各种浓度的胰岛素刺激下均低于对照细胞(P＜0.05),并且HepG2细胞模型与对照细胞的3H-D-葡萄糖参入率随着胰岛素浓度的升高而升高,但前者升高的幅度低于后者.MTT(甲基噻唑基四唑)结果显示甲鱼油均具有促进对照细胞和IR细胞模型增殖作用.与对照组细胞相比,采用不同浓度胰岛素诱导的模型细胞经甲鱼油处理后其葡萄糖摄取和消耗显著增加(P＜0.05).甲鱼油明显增加该IR细胞模型的葡萄糖消耗和3H-D-葡萄糖参入率,提高IR细胞模型的胰岛素敏感性,改善其糖代谢.     

胰岛素增强缺血心肌葡萄糖转运子1基因表达的实验研究

目的:探讨胰岛素刺激低血流缺血心肌增加葡萄糖摄取的机制。方法:采用Northern法分析缺血心肌葡萄糖转运子-1(GLUT1)mRNA和免疫法分析心肌葡萄糖转运子1(GLUT1)多肽水平。结果:胰岛素使局部低血流缺血心肌GLUT1 mRNA和GLUT1多肽表达明显增加。同时伴随缺血心肌葡萄糖摄取明显增多。结论:胰岛素能增强缺血心肌GLUT1 mRNA和GLUT1多肽表达,使GLUT1数增加,进而促进心肌葡萄糖摄取增多,胰岛素增强低血流缺血刺激的心肌GLUT1表达。     

胰岛素促进狗缺血心肌葡萄糖转运子1移位和葡萄糖摄取

观察胰岛素能否刺激缺血心肌葡萄糖转运子 1(GLUT1)移位和葡萄糖摄取。利用自动分析仪测定生理代谢参数 ,应用免疫印迹和免疫荧光法检测GLUT1。胰岛素使缺血心肌细胞质膜GLUT1明显增加 (从 5 2 %± 4%～ 6 7%± 6 % ,P <0 0 5 )。细胞器膜GLUT1则相应减少 ,同时伴随葡萄糖摄取量明显增加 ,是单纯缺血心肌葡萄糖摄取量的 2倍。胰岛素刺激引起GLUT1移位 ,使缺血心肌葡萄糖摄取增加。提示心肌缺血时 ,应用胰岛素有助于增加心肌葡萄糖的摄取和利用     

肿瘤坏死因子α对3T3-L1细胞葡萄糖摄取和IRS-1信号通路的影响

目的：观察TNF-α作用于3T3-L1细胞对胰岛素介导的葡萄糖摄取和IRS-1相关信号通路的影响。方法：TNF-α分别作用于3T3-L1细胞6小时和24小时后用胰岛素刺激，观察细胞葡萄糖摄取，IRS-1酪氨酸、丝氨酸307磷酸化水平以及PKB磷酸化水平。同时观察那巴霉素对TNF-α作用的影响。结果：TNF-α明显抑制胰岛素刺激的葡萄糖摄取、IRS-1酪氮酸及PKB磷酸化，这些作用可被那巴霉索逆转。TNF-α作用6小时对IRS-1蛋白无影响但导致丝氨酸307磷酸化，作用24小时则降低IRS-1蛋白水平，那巴霉素拮抗TNF-α导致IRS-1减少但对丝氮酸磷酸化无作用。结论：TNF-α导致的脂肪细胞胰岛素抵抗与IRS-1酪氮酸磷酸化水平下降密切相关，Rapamycin可以逆转TNF-α的作用。     

己糖激酶Ⅱ与Warburg效应

肿瘤细胞在氧气充足的情况下通过葡萄糖的无氧氧化代谢方式为细胞提供能量的现象称为Warburg效应。己糖激酶是细胞糖酵解中的第一个限速酶,其中己糖激酶-Ⅱ与肿瘤细胞的糖酵解代谢、细胞增殖和凋亡等功能有着更为密切的联系。在肿瘤细胞中,基因水平的改变,信号通路的影响,促使己糖激酶高表达和活性增加,保证了肿瘤细胞糖酵解的快速进行。己糖激酶可通过与线粒体外膜结合促进糖酵解、抑制细胞凋亡和调节细胞自噬影响肿瘤细胞的功能。己糖激酶有望成为肿瘤治疗中的重要靶点。     

SM22α调节GLUT4转位的机制及其在增殖性血管疾病中的意义

目的:葡萄糖转运体4(GLUT4)在球囊损伤血管新生内膜中高表达,而其转位过程依赖于肌动蛋白(actin)细胞骨架的调节。平滑肌蛋白22α(smooth muscle protein 22α,SM22α)是一种actin细胞骨架相关蛋白,其在增殖性血管疾病中表达下调。本研究观察了SM22α是否参与血管损伤或者PDGF刺激诱导的GLUT4表达和转位活性升高。方法:用PDGF-BB刺激血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC),观察GLUT4膜转位和细胞骨架的变化;用荧光葡萄糖2-NBDG检测葡萄糖摄取;用特异性si RNA敲低内源性SM22α表达;Brd U实验检测细胞增殖;高效液相色谱法检测组织葡萄糖含量。结果:PDGFBB诱导VSMCs GLUT4转位和葡萄糖摄取依赖于皮层F-actin聚合,而敲低SM22α促进这一过程。损伤新生内膜处GLUT4表达显著增加,PDGF-BB刺激促进细胞GLUT4表达和葡萄糖消耗,抑制GLUT4活性则显著降低细胞增殖活性。相对于WT组,SM22α-/-小鼠颈总动脉2-NBDG摄取显著增加,结扎后28 d新生内膜明显增厚,损伤动脉组织GLTU4转位和葡萄糖含量均明显升高。结论:PDGF-BB诱导的GLUT4转位和糖摄取参与VSMCs增殖。缺失SM22α可诱导皮层细胞骨架聚合,增强PDGF-BB诱导的GLUT4膜转位和糖摄取及代谢活性。SM22α是一种新的增殖相关糖代谢调节因子。     

18F-FDGPET/CT在卵巢癌中的应用研究

卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤之一,其发病率位于宫颈癌和子宫内膜癌之后,而死亡率一直居于女性生殖器恶性肿瘤的首位。18F-FDGPET/CT可以提供细胞摄取葡萄糖的功能信息及形态学特征,在卵巢肿瘤的定位及定性中有重要作用,有助于早期进行初步诊断、判断复发及转移和全面分期。本文对PET/CT在卵巢癌的诊断、分期、预后预测等方面作一综述,旨在评估PET/CT在卵巢癌的作用。     

大黄素抗肿瘤作用及相关机制

大黄素(emodin)分子式C15H10O5,化学名为:1,3,8-三羟基-6-甲基蒽醌。临床上用作抗菌、抗肿瘤以及治疗便秘等。文献报道大黄素能够抑制肿瘤细胞增生、诱导凋亡、防止肿瘤细胞向远处转移,而且还能有效地抑制肿瘤细胞摄取葡萄糖,导致细胞膜相关功能的改变,最终导致细胞死亡。其抗肿瘤机制的研究受到众多学者的重视,本综述旨在综述最新的研究报道,重点放在大黄素作用的分子机制上。1体外研究1.1抑制肿瘤细胞的生长和增殖大量的研究表明,大黄素可以抑制多种肿瘤细胞的生长与增殖,研究发现大黄素的C1和C3位点是抗肿瘤的重要功能位置[1]。而大黄…     

神经酰胺糖基化与肿瘤的多药耐药性

神经酰胺为细胞神经鞘脂类代谢的主要分子,是介导细胞凋亡的第二信使.细胞神经酰胺糖基化能力的提高作为一种新的多药耐药机制受到人们的关注.神经酰胺与葡萄糖神经酰胺在细胞内的相互转化影响肿瘤细胞对化疗药的敏感性,抑制神经酰胺糖基化,提高细胞内神经酰胺的蓄积,可以诱导多药耐药细胞凋亡.神经酰胺与葡萄糖神经酰胺在细胞内的相互转化影响肿瘤细胞对化疗药的敏感性,抑制神经酰胺糖基化为逆转肿瘤细胞耐药性的新思路.     

肿瘤血管生成拟态研究进展

1999年,Maniotis等描述了一种存在于高侵袭性葡萄膜黑色素瘤中的血液流通管道,即血管生成拟态（vasculogenic mimicry）。血管生成拟态的特点是：管道内壁没有血管内皮细胞、血液可在这无内皮细胞管道中流动、肿瘤细胞在管壁外表面排列、周围没有明显的炎性细胞浸润和坏死。血管生成拟态形成过程中大致有三个中心环节：高度恶性肿瘤细胞自身变形、肿瘤细胞及细胞外基质的重塑、血管生成拟态与宿主血管相连通使肿瘤获得血液供应。[第一段]     

母体急性淋巴细胞白血病胎盘转移的电镜观察

目的　探讨胎盘防止母体 胎儿恶性肿瘤转移的屏障作用。方法　利用透射电镜研究 2例急性淋巴细胞白血病患者胎盘转移的超微结构。结果　在胎盘绒毛表面纤维蛋白沉积物中可见肿瘤细胞、溶解的细胞及细胞碎片。纤维蛋白沉积处及其附近常见合胞体脱落 ,并可见肿瘤细胞粘附于绒毛滋养层基底膜上。合胞体内有些肿瘤细胞基本保持完整的形态 ,有些则出现变性或坏死现象。结论　胎盘能杀伤和分解转移的肿瘤细胞 ,进而防止母体 -胎儿恶性肿瘤转移。     

小鼠骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型的建立和验证

目的:建立稳定可重复的骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型,促进胰岛素抵抗病理机制的探索及药物的研发与筛选。方法:采用小鼠骨骼肌成肌细胞C2C12为研究对象,分别以正常分化液及含40和60 mmol/L葡萄糖的分化液诱导分化,每天用相差显微镜观察不同浓度葡萄糖处理对细胞汇聚、融合和形成多核肌管的影响;分别在分化1、3、5和7 d后应用2-NBDG法检测不同处理对细胞基础糖摄取和胰岛素刺激糖摄取的影响;在分化5 d和7 d后应用Western blot法检测不同干预对葡萄糖转运子4(glucose transporter 4,GLUT4)蛋白表达的影响;分化5 d后应用免疫荧光组化法检测不同干预对GLUT4蛋白分布的影响。结果:形态学结果显示,经60 mmol/L葡萄糖(高糖)处理3 d后明显抑制C2C12细胞的生长分化;葡萄糖摄取结果表明高糖处理5 d和7 d后均明显抑制C2C12的基础糖摄取和胰岛素刺激的糖摄取(P0.01),且处理5 d后胰岛素刺激的糖摄取与基础糖摄取的差异无统计学显著性(P0.05); Western blot检测结果表明高糖处理5 d和7 d后,胰岛素刺激的GLUT4表达与基础GLUT4表达的差异无统计学显著性(P0.05),而对照组差异显著(P0.05);免疫荧光组化检测结果表明高糖处理5 d后明显减少C2C12细胞胞膜上GLUT4蛋白分布水平(P0.01)。40 mmol/L葡萄糖处理也在一定程度上发挥作用,但效果不如60 mmol/L葡萄糖明显和稳定。结论:通过高糖刺激可成功构建较为稳定的小鼠骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型,以60 mmol/L葡萄糖刺激5 d效果最好,通过形态学观察并检测基础和胰岛素刺激的葡萄糖摄取能力和GLUT4蛋白表达与分布能较好地评价骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗水平。