UPLC-MS/MS法分析人参、红参、西洋参中人参皂苷成分差异性研究

目的 检测人参、红参、西洋参及其各部位中10种人参皂苷化合物的含量并分析评价其质量状况。方法 采用Waters ACQUITY HPLC BEH C18柱（2.1 mm×100 mm,1.7μm）,以含0.1%甲酸溶液和乙腈-四氢呋喃（95∶5）为流动相,梯度洗脱分离,流速为0.3 mL·min-1,电喷雾正离子源（ESI+）,多反应监测（MRM）模式。结果 10种人参皂苷化合物的回归曲线在各自浓度范围内线性良好,相关系数均大于0.995。平均回收率为87.7%～111.2%,RSD为1.9%～4.8%,检出限范围为0.005～0.01μg·mL-1,定量限为0.017～0.03μg·mL-1。结论 该法操作简便,分析速度快,灵敏度高,准确度好,适用于人参、红参、西洋参及其各部位中的多种人参皂苷化合物含量测定。同时发现,人参、红参、西洋参的须根、芦头等非药用部位含有的人参皂苷化合物总量较高,应充分利用,避免中药资源的浪费。     

UHPLC-Q-TOF-MS/MS分析浙贝母不同部位化学成分

目的 建立UHPLC-Q-TOF-MS/MS方法分析浙贝母不同部位（花、叶、茎和鳞茎）化学成分,探讨浙贝母中不同部位化学成分的差异。方法 浙贝母样品提取后,以水（含有25 mmol·L^-1的醋酸铵及25 mmol·L^-1的氨水）-乙腈为流动相,经UPLC BEH Amide色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）梯度洗脱分离,在电喷雾离子源正离子模式下进行分析,通过二级串联质谱分析,对采集的图谱进行峰匹配、峰对齐、滤噪处理等进行特征峰提取;用主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析进行数据分析。结果 共鉴定出113个化学成分。主成分分析结果显示浙贝母花、鳞茎、茎、叶明显分为4类,表明不同部位之间化学成分差异显著;正交偏最小二乘法-判别分析结果显示浙贝母花和茎、鳞茎、叶之间差异化合物分别为16,19,12个。其中,异戊烯基腺嘌呤核苷、脯氨酰天冬氨酸、反玉米素、乙胺嗪在浙贝母花中含量较高。结论 本研究建立了一种快速、准确、可靠的浙贝母不同部位的鉴别方法,为浙贝母资源的综合开发利用提供了科学依据。     

HPLC-MS/MS法测定10批参须中人参皂苷Rg_1、Re和Rb_1的含量

目的建立同时检测参须中人参皂苷Rg1、Re和Rb1含量的HPLC-MS/MS方法,测定10批参须中人参皂苷Rg1、Re和Rb1的含量。方法采用液质联用(HPLC-MS/MS)法,色谱柱为SHIMADZU VP-ODS(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱(0~3 min,60%乙腈;3~5 min,90%乙腈),流速0.5 m L·min-1,柱温40℃。质谱条件:正离子检测模式,用于定量分析的离子对分别为:人参皂苷Rg1 m/z 823.3→643.6,人参皂苷Re m/z 969.7→789.6和人参皂苷Rb1 m/z1131.5→365.3。结果人参皂苷Rg1在0.43~27.6μg·m L~(-1)与峰面积线性关系良好,r=0.9950,平均回收率为94.0%(RSD=1.5%);人参皂苷Re在0.46~29.6μg·m L~(-1)与峰面积线性关系良好,r=0.9990,平均回收率为95.3%(RSD=1.1%);人参皂苷Rb1在0.41~26.4μg·m L~(-1)与峰面积线性关系良好,r=0.9980,平均回收率为93.4%(RSD=1.2%)。结论该方法简便、准确、快速,可用于参须中人参皂苷Rg1、Re和Rb1的含量检测。     

人参须根中皂苷类成分提取工艺的研究

目的:研究人参须根中皂苷类成分的最佳提取工艺。方法:比较了乙醇回流提取法和超声波提取法提取人参皂苷的差异。在此实验基础上,通过单因素实验和正交实验,筛选出超声波法从人参须根中提取皂苷类成分的最优提取工艺。结果:人参须根中皂苷类成分的最优提取条件为50%乙醇,提取2次,每次40min,提取温度40℃,料液比为1:20。结论:该提取方法操作简单,有效成分的提取率高。     

不同地域人参药材中人参皂苷的比较研究（英文）

人参皂苷是人参(Panax ginseng Meyer (P. ginseng))中独特的生物活性成分,其组成受到地理区域的影响。在中国东北地区,人参药材生长于多种环境中,对人参皂苷的形成起到重要影响。本研究针对不同种植区栽培人参的成分差异开展研究。采用超高效液相色谱结合三重四极杆串联飞行时间质谱法对人参皂苷进行表征,并采用多变量统计分析来确定不同种植区人参药材的成分差异。从不同的人参中共鉴定了359种人参皂苷,其中包括35种潜在的新成分。在非道地产区及道地产区的人参药材中分别鉴定出283种和312种人参皂苷类成分。该实验结果丰富了人参化合物库,为人参药材的进一步研究提供了参考依据。     

RP—HPLC法测定鲜人参中丙二酰基人参皂苷的含量

目的:建立人参中丙二酰基人参皂苷含量的测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,以μ-Bondapak C-18(300mm×3.9 mm,5 μm)柱为分析柱,乙腈-0.05 mol·L~(-1)磷酸二氢钾溶液(25:75)为流动相,柱温:35℃,检测波长:203 nm,流速:1 mL·min~(-1),以外标法检测。结果:丙二酰基人参皂苷 Rb_1、Rb_2、Rc 分别在0.02～1.19 mg·mL~(-1)(r=0.9998)、0.02～0.99 mg·mL~(-1)(r=0.9997)、0.01～0.83 mg·mL~(-1)(r=0.9996)浓度范围内呈良好的线性关系。平均回收率(n=3)分别为103.0%(RSD=1.3%)和98.5%(RSD=1.0%)、102.4%(RSD=1.2%)和98.1%(RSD=0.6%)、102.1%(RSD=2.8%)和100.1%(RSD=1.0%)。结论:本法简便、准确、灵敏。     

LC-MS/MS分析人参茎叶提取液中人参皂苷Rg1、Re降解产物

目的研究人参茎叶提取液中人参皂苷Rg1、Re加热后所产生的降解产物,并分析产物的结构。方法采用液相色谱/离子阱质谱联用仪对降解产物进行分析,并推测其结构,HPLC的条件为Agilent Extend-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱70 min,检测波长203 nm,流速0.4 mL·min^-1,柱温30℃;质谱条件为正离子检测方式,毛细管电压3 000 V,喷雾器15 psi,干燥器流速12.0 L·min^-1,干燥器温度350℃,扫描范围100~1 000 m/z;碎裂器范围4 500~1 500 V。结果质谱图中有多种化合物,推测人参皂苷Rg1、Re在人参茎叶提取液的pH值环境下进行加热,会发生脱糖、脱羟基、环合等反应,生成多种降解产物。结论人参皂苷水溶液在人参茎叶提取液pH环境下加热的时间与温度对人参皂苷的降解非常敏感,说明此方法适用于人参皂苷类化合物的降解与分析。     

人参皂苷类成分的化学分析

目的:建立测定人参样品中3个主要活性成分人参皂苷Rg1、Re和Rb1含量的方法,并分析不同部位及不同生长年限的人参样品中皂苷类成分的差异。方法:应用RP-HPLC法检测83批样品的主要化学成分,并应用系统聚类分析法对收集的样品皂苷类成分信息进行分析。Alltech 100A氨基柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.2％磷酸(83:17),流速1.0mL·min-1,柱温35℃,检测波长203 nm。结果:人参须根与主根、芦头和全须生晒参明显聚为两类,但主根与芦头和全须生晒参划分的界限不明显。2-6年生人参须根聚为-类,3-6年生人参主根聚为一类。首次应用模糊聚类分析法对人参样品质量进行了计算机快速鉴别分类。结论:本法重现性好,灵敏度高,能够较科学、客观、综合地评价人参药材的质量。     

芪苈强心胶囊中人参皂苷类成分在大鼠体内药动学研究

目的建立高效液相色谱–串联质谱(HPLC-MS/MS)法考察芪苈强心胶囊中人参皂苷类成分(人参皂苷Rb_1、Rb_2、Rg_1、Rg_3、Rc、Rd、Re、Rf、F_2)在大鼠体内的药动学特征。方法 SD大鼠ig 1.3 g/kg芪苈强心胶囊混悬液,于给药后0.083、0.167、0.333、0.667、1、1.5、2、3、4、6、8、12、24 h经目内眦静脉丛取血,样品处理后,采用HPLC-MS/MS法测定血浆中人参皂苷Rb_1、Rb_2、Rg_1、Rg_3、Rc、Rd、Re、Rf、F_2的血药浓度。通过DAS 3.0软件拟合计算药动学参数。结果大鼠ig芪苈强心胶囊后,血浆中人参皂苷Rb_2的药动学参数t_(max)为1.5 h,其余人参皂苷类成分的t_(max)均在0.67 h;AUC_(0-∞)排序依次为人参皂苷Rb_1人参皂苷Rc人参皂苷Rg_1人参皂苷Re人参皂苷Rb_2人参皂苷Rd人参皂苷Rf人参皂苷Rg_3人参皂苷F_2;t_(1/2)的排序依次为人参皂苷Rb_2人参皂苷Rb_1人参皂苷Rg_1人参皂苷Re人参皂苷F_2人参皂苷Rf人参皂苷Rd人参皂苷Rg_3人参皂苷Rc。结论该检测方法专属性强,重复性好,可用于芪苈强心胶囊中人参皂苷类成分的药动学研究。     

不同产地细辛有效成分与毒性成分的比较研究

目的 比较不同产地细辛有效成分与毒性成分的含量。方法 以6个产地（凤城、通化、安图、本溪、敦化及哈尔滨）细辛为实验材料,采用比色法测定马兜铃总酸、L-酪氨酸含量,采用HPLC测定马兜铃酸A和细辛脂素含量,采用GC-MS测定挥发油种类和含量。结果 细辛中马兜铃总酸、马兜铃酸A、细辛脂素、L-酪氨酸含量最高的产地分别是本溪、凤城、哈尔滨及凤城,而这4种成分含量最低的产地分别是哈尔滨、安图、安图及通化。各产地细辛挥发油中共含有73种化合物,其中黄樟脑、甲基丁香酚、肉豆蔻醚及榄香素含量较高。各产地细辛中黄樟脑的含量从高到低依次为通化、凤城、本溪、安图、敦化及哈尔滨;甲基丁香酚的含量从高到低为依次为凤城、通化、本溪、安图、敦化及哈尔滨;肉豆蔻醚含量从高到低依次为敦化、安图、凤城、通化、本溪与哈尔滨;榄香素含量从高到低为：凤城、通化、安图、本溪、敦化和哈尔滨。结论 各产地细辛中马兜铃总酸、马兜铃酸A、细辛脂素、L-酪氨酸含量差异显著（P〈0.05）。     

人参出苗期几种水解酶的活力变化

目的研究五年生人参几种水解酶在出苗期的活力变化。方法采用中性磷酸缓冲溶液提取粗酶液。应用紫外分光光度法分别测定淀粉酶（AMY）、酯酶（Est）、酸性磷酸酯酶（ACP）、碱性磷酸酯酶（ALP）和植酸酶的活力。结果人参根部Est、ACP和ALP活力都是先增加后下降再增加;幼苗Est活力在出苗期前7 d增加较快之后无明显变化,ACP活力在出苗期第10天出现一个峰值,ALP活力始终保持上升趋势;人参根部AMY和植酸酶活力变化趋势相似,在出苗期第4至13天活力迅速增加,之后下降;而在幼苗中两种酶的变化趋势完全相反。结论在出苗期,人参5种水解酶活力变化曲线有所差异,这可作为人参出苗期幼苗形态不同阶段的生理指标。     

不同产地、不同年限人参中淀粉酶、酯酶、酸性磷酸酯酶的活力比较

目的对不同产地、不同生长年限人参进行淀粉酶（AMY）、酯酶（Est）和酸性磷酸酯酶（ACP）活力比较。方法用中性缓冲溶液提取总蛋白,应用3,5-二硝基水杨酸比色法测定AMY活力;乙酸-α-萘酯比色法测定Est活力;对硝基酚比色法测定ACP活力。结果不同产地人参AMY、Est、ACP活力均存在很大差异。取不同产地、相同生长年限酶活力平均值进行不同年限的酶活力比较,可知4年与5年生人参3种水解酶活力均无明显差异。结论 AMY、Est、ACP活力可以作为评价人参质量的内在指标之一。     

基于近红外光谱技术的红参多指标成分快速分析

目的 利用近红外光谱（near infrared spectroscopy,NIR）技术对红参药材中的水分、人参皂苷和糖类成分进行快速分析,实现红参药材质量的快速评价。方法 用62批红参样品作为校正集,分别建立水分、人参皂苷和糖类成分的定量模型,对模型进行系统的优化,并用另外38批样品作为验证集对建立的模型进行验证和评价。结果 所建的模型对红参水分含量、人参皂苷Rg₁和Re总含量、人参皂苷Rb₁含量及麦芽糖和蔗糖总含量均有较好的预测能力,预测相对偏差均<15%,所建NIR快速检测方法的精密度和重复性结果均较好。结论 该方法可以对红参药材的关键质控指标进行快速检测,结果可靠,是对传统分析方法的有效补充,可以有效地指导后道工序的生产,从而避免因药材质量不合格而造成不必要的浪费。     

HPLC-ABTS-DAD-Q-TOF/MS在线检测大黄抗氧化活性成分

目的：建立大黄特征化学成分和抗氧化活性相关联的二维指纹图谱，研究大黄抗氧化活性物质。方法：利用高效液相多检测器联用的抗氧化活性成分在线检测体系，对大黄中化学成分进行检测，共鉴定出大黄中化学成分15种；其中8种具有抗氧化活性；然后采用清除效率为指标对各活性成分的抗氧化活性进行评价。结果：结果发现化合物葡萄糖紫丁香酸、腺嘌呤、没食子酸、儿茶素或表儿茶素、双花母草素、2-O-桂皮酰-没食子酰葡萄糖等具有较强的清除ABTS^·+的活性，而蒽醌类成分对ABTS^·+的清除作用较弱。结论：采用HPLC-ABTS-DAD-Q-TOF/MS对大黄中的抗氧化活性成分进行快速分析鉴定，初步阐明大黄在抗氧化环节起作用的效应物质。     

正交试验优化人参的微波灭菌工艺研究

目的 优选人参药材微波灭菌工艺.方法 以灭菌率为指标,采用正交试验对药材粒度、灭菌时间、灭菌功率进行考察,并考察微波灭菌对人参皂苷的影响.结果 筛选出最佳微波灭菌工艺:灭菌时间240 s、人参药材粒度为细粉(10目)、灭菌功率6 000 W.结论 优选的工艺灭菌效率高,简便可行.     

HPLC-DAD测定虎杖中八种成分含量及指纹图谱研究

目的利用HPLC-DAD对不同产地的虎杖药材进行分析,建立药材鉴别和质量控制方法。方法采用YMC C18(4.6mm×250 mm,5μm)柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸水;梯度洗脱,检测波长为280 nm;流速为1.0 mL.min 1;柱温为25℃。对5批虎杖药材进行分析,测定了8种成分的含量,并建立虎杖药材的指纹图谱。结果 8种成分的含量测定方法有良好的精密度、重现性、稳定性。建立的指纹图谱各批次药材均有17个共有峰,相似度范围为0.915～0.973。结论综合指标成分定量测定及化学指纹图谱分析方法能较全面地表征不同产地虎杖的内在成分差异,可为虎杖质量控制提供参考。     

活血止痛制剂中三七的专属性鉴别方法研究

目的：建立活血止痛散和活血止痛胶囊中三七的专属性鉴别方法,并采用高分离度快速液相色谱-三重串联四极杆质谱（RRLC-QQQ/MS）对结果加以验证。方法：采用高效薄层色谱法研究三七与其混伪品人参、红参、三七茎叶的特征条带。以高效硅胶G薄层板为固定相,二氯甲烷-无水乙醇-水（70：45：6.5）展开,10%硫酸乙醇溶液显色,105℃加热至条带清晰。分别置紫外光灯（365 nm）和日光下检视。RRLC-QQQ/MS分析采用Agilent Rapid Resolution HT SB-C18（2.1 mm×100 mm,1.8 μm）色谱柱,以5 mmol·L^-1醋酸铵溶液-乙腈为流动相梯度洗脱。离子化模式为ESI-,碎裂电压100 V。结果：三七可检出三七皂苷R1,未检出人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rf。人参和红参可检出人参皂苷Rb₃和人参皂苷Rf,未检出三七皂苷R1。三七茎叶可检出人参皂苷Rb₃,未检出三七皂苷R1或人参皂苷Rg₁。以三七对照药材、三七皂苷R1（应检出）和人参皂苷Rb₃（不得检出）为对照,可实现活血止痛制剂中三七的专属性鉴别和人参（红参）或三七茎叶的非法掺杂投料检查。6个厂家的93批样品均未发现人参、红参或三七茎叶冒充三七非法投料。RRLC-QQQ/MS与高效薄层分析结果一致。结论：该方法简便、快速、灵敏、准确,可为含三七中成药的质量控制提供参考。     

基于液相色谱-串联质谱法研究男宝胶囊中人参投料掺伪

目的：采用液质联用法测定男宝胶囊中拟人参皂苷F11和人参皂苷Rf的含量，其中拟人参皂苷F11是西洋参的特征成分，人参皂苷Rf是人参的特征成分，探究该制剂人参投料的概况，建立人参掺伪检测方法。方法：采用高效液相串联三重四级杆质谱仪，色谱柱为Agilent Poroshell 120 SB C18（2.1 mm × 100 mm，2.7 μm），以乙腈-水为流动相，梯度洗脱，流速0.35 mL·min-1，柱温40℃，进样量5 μL，利用电喷雾离子源（ESI）、负离子采集模式、多反应检测模式（MRM）进行含量测定。通过模拟掺伪制备不同比例的西洋参阳性样品，从而制定合理的检测限度。结果：拟人参皂苷 F11和人参皂苷Rf在线性范围内关系均良好（r ≥ 0.998 9），平均回收率分别为90.35%（RSD 2.34%）和94.96%（RSD 3.50%），检测限分别为0.035 μg·g-1和0.028 μg·g-1。72批次男宝胶囊样品有1批次未检出拟人参皂苷F11，其余71批次含量范围为0.072 ~ 43.260 μg·g-1，人参皂苷Rf 5批次未检出，67批次含量范围为1.070 ~ 34.788 μg·g-1。22批次样品拟人参皂苷F11含量大于拟定限度8.3 μg·g-1。结论：建立的检测方法简便、准确，可有效鉴别男宝胶囊中西洋参掺人参投料的问题，为此药的质量控制和市场监管提供参考。